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钙黏蛋白S100A10对人乳腺癌细胞增殖能力的影响 被引量:3
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作者 邵晶 欧海斌 +3 位作者 沈惠 江耀飞 席子尧 刘羽 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2021年第1期61-66,共6页
目的:探讨钙黏蛋白S100A10对人乳腺癌SK-BR-3、MCF-7细胞增殖能力的影响。方法:通过慢病毒感染构建稳定过表达S100A10的SK-BR-3、MCF-7细胞系,并用实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹法(Western Blot)检测过表达效率;通过细胞增殖实验、... 目的:探讨钙黏蛋白S100A10对人乳腺癌SK-BR-3、MCF-7细胞增殖能力的影响。方法:通过慢病毒感染构建稳定过表达S100A10的SK-BR-3、MCF-7细胞系,并用实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹法(Western Blot)检测过表达效率;通过细胞增殖实验、平板克隆实验检测S100A10对细胞增殖、克隆形成能力的影响;通过流式细胞术检测S100A10对细胞周期进程的影响,蛋白印迹法验证S100A10对周期相关蛋白cyclin D1和cyclin E1的表达影响;通过小鼠原位成瘤实验探究S100A10对乳腺癌肿瘤形成能力的影响(n=3)。结果:qPCR和Western Blot结果分别显示感染过表达慢病毒后S100A10在mRNA和蛋白水平的表达增多(P<0.05),稳定过表达S100A10的SK-BR-3及MCF-7细胞系构建成功;细胞增殖实验和平板克隆实验结果显示过表达S100A10可增强SK-BR-3及MCF-7细胞的增殖和克隆形成能力(P<0.05);流式细胞周期结果显示过表达S100A10后上述乳腺癌细胞系G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增多(P<0.05);Western Blot结果显示过表达S100A10后,周期相关蛋白cyclin D1和cyclin E1含量增多。小鼠原位成瘤实验结果表明过表达S100A10能显著促进乳腺癌的肿瘤形成能力(P<0.05)。结论:S100A10通过调控细胞周期增强乳腺癌SK-BR-3、MCF-7细胞的增殖能力,为后续深入探讨S100A10作为乳腺癌潜在治疗靶点的研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 S100A10 sk-br-3 MCF-7 细胞增殖 细胞周期
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NRP-1过表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3生物学行为的影响 被引量:2
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作者 张梦瑾 徐杰 +2 位作者 王红梅 杜秀平 韩正祥 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期678-684,共7页
目的通过上调乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3中NRP-1的表达,观察NRP-1对细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法构建pc DNA3.1-NRP-1表达载体,脂质体介导NRP-1表达质粒转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞,用G418筛选出稳定转染的乳腺癌... 目的通过上调乳腺癌细胞MDA-MB-231、SK-BR-3中NRP-1的表达,观察NRP-1对细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法构建pc DNA3.1-NRP-1表达载体,脂质体介导NRP-1表达质粒转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞,用G418筛选出稳定转染的乳腺癌细胞株。利用RTq PCR、Western blot法分别检测NRP-1基因mRNA及其蛋白表达;CCK-8法、AnnexinⅤ-APC/7-AAD法、Transwell小室分别检测转染细胞增殖率、凋亡率及侵袭、迁移能力。结果成功构建pc DNA3.1-NRP-1表达载体,转染MDA-MB-231、SK-BR-3细胞并筛选稳定表达系。与对照组相比,过表达组细胞的NRP-1 m RNA及蛋白表达水平明显升高(均P<0.05);NRP-1过表达组的细胞较对照组增殖率增加、凋亡率降低、侵袭及迁移能力增强(均P<0.05)。结论 NRP-1在乳腺癌发展、浸润、转移中起着一定的作用,它可促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。 展开更多
关键词 神经纤毛蛋白-1 乳腺癌 MDA-MB-231 sk-br-3
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8-氯腺苷调节RNA编辑酶ADAR1对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和迁移的影响 被引量:2
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作者 谢凤 莫小梅 +1 位作者 杨生永 李梨 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期1411-1416,共6页
目的:研究8-氯腺苷(8-chloro-adenosine,8-Cl-Ado)对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和迁移的影响,以及与RNA编辑酶1(adenosine deaminases acting on RNA 1,ADAR1)表达的相关性。方法:蛋白印迹实验检测乳腺癌组织中ADAR1的蛋白表达量以及8-Cl-Ad... 目的:研究8-氯腺苷(8-chloro-adenosine,8-Cl-Ado)对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和迁移的影响,以及与RNA编辑酶1(adenosine deaminases acting on RNA 1,ADAR1)表达的相关性。方法:蛋白印迹实验检测乳腺癌组织中ADAR1的蛋白表达量以及8-Cl-Ado(10μmol/L)处理乳腺癌SK-BR-3细胞不同时间ADAR1蛋白表达量的变化;MTT法和形态学观察检测不加药组和8-Cl-Ado(10μmol/L)加药组对SK-BR-3细胞增殖的影响;MTT法和伤口愈合实验检测SK-BR-3细胞过表达ADAR1质粒(空白对照组、空载组、ADAR1-P110组、ADAR1-P150组)对8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞增殖及迁移的影响。结果:乳腺癌癌组织中ADAR1-P110和ADAR1-P150蛋白表达量均明显高于癌旁组织(t=9.871,P=0.000;t=7.169,P=0.000);8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞48 h后ADAR1-P110和ADAR1-P150蛋白表达量均明显降低(t=-8.838,P=0.013;t=-19.866,P=0.003);8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞ADAR1-P110组和ADAR1-P150组48 h后增殖抑制率均明显低于空白组(P均为0.000);8-Cl-Ado作用SK-BR-3细胞ADAR1-P110组和ADAR1-P150组48 h后的迁移率均明显高于空白组(P均为0.000)。结论:8-Cl-Ado能明显抑制SK-BR-3细胞增殖和迁移,其作用机制可能与ADAR1的表达下调有关。 展开更多
关键词 8-氯腺苷 乳腺癌 sk-br-3 RNA编辑酶 ADAR1
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Study of the Effect of Silymarin on Viability of Breast Cancer Cell Lines
4
作者 Saieh Hajighasemlou Mohammadmorad Farajollahi +8 位作者 Mahmoud Alebouyeh Hossein Rastegar Mojgan Taghizadeh Manzari Milad Mirmoghtadaei Behjat Moayedi Maryam Ahmadzadeh Mansure Kazemi Farzad Parvizpour Safoora Gharibzadeh 《Advances in Breast Cancer Research》 2014年第3期100-105,共6页
Background: Breast cancer is the most prevalent cancer and results in 14% of cancer-related deaths among women worldwide. The aim of this study is to investigate the anticancer effects of Silymarin on two breast cance... Background: Breast cancer is the most prevalent cancer and results in 14% of cancer-related deaths among women worldwide. The aim of this study is to investigate the anticancer effects of Silymarin on two breast cancer cell lines (BT-474, SK-BR-3). Methods and Material: Two breast cancer cell lines—SK-BR-3 and BT-474—were incubated for 24 hours in standard conditions before adding 100, 200, 400, 800, 1600 μM Silymarin to each well. Alamar blue was then added to the wells after 24, 48 and 72 hours of incubation and cell viability was determined using fluorescence reader to detect the optical density. Results were analyzed using generalized estimating equations (GEE) method in STATA 12.0. Results: we demonstrated the?Silybum marianum?inhibition of two-cell lines SK-BR-3 and BT-474 growth at different concentrations after 24, 48 and 72 hours. Silymarin increased cell death in both cell lines. Conclusion: Silymarin can be combined with other anti-neoplastic agents to obtain better results. 展开更多
关键词 SILYMARIN brEAST CANCER sk-br-3 BT-474
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二十碳五烯酸对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响
5
作者 郝燕霞 张锦涛 +1 位作者 李欢 闫康麟 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2021年第6期606-612,共7页
目的探讨二十碳五烯酸(EPA)对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响。方法用EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞,检测EPA对HER2阳性乳腺癌细胞的细胞毒性作用。Annexin V/PI分析EPA诱导的细胞存活率下降是否因细胞死亡增加而发生。EPA处理后检测细胞焦... 目的探讨二十碳五烯酸(EPA)对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响。方法用EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞,检测EPA对HER2阳性乳腺癌细胞的细胞毒性作用。Annexin V/PI分析EPA诱导的细胞存活率下降是否因细胞死亡增加而发生。EPA处理后检测细胞焦亡通路中关键分子标志物的表达状态。结果EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞后,HER2阳性乳腺癌细胞AU-565,SK-BR-3,MDA-MD-435的细胞活力减少(P<0.05);但是对正常乳腺细胞MCF 10A,Hs 578Bst的细胞活力无显著影响(P>0.05)。EPA处理24 h后,AU-565,SK-BR-3,MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞均呈增加(P<0.05);MCF 10A,Hs 578Bst中膜联蛋白+/PI-细胞增加(P<0.05)。EPA处理后,在AU-565,SK-BR-3,MDA-MD-435中,NF-κB通路关键蛋白p65、IKKα/β、IκBα的磷酸化水平上升;而在MCF 10A,Hs 578Bst中,p65、IKKα/β、IκBα的磷酸化水平无显著改变。此外,分子对接发现EPA可能与NF-κB通路上游蛋白NEMO的K381位点存在相互作用,最低结合能为-7.33 kcal/mol。EPA处理后,NEMO敲除的MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞显著减少(P<0.05);在NEMO敲除细胞中过表达NEMO野生型或NEMO K381R突变型,发现过表达NEMO野生型的MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞显著增加(P<0.05),表达NEMO K381R突变型的MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞显著减少(P<0.05)。EPA处理后,在AU-565,SK-BR-3,MDA-MD-435中,Pro-IL-1β和ASC的表达水平下降,而cleaved caspase1、cleaved Gasdermin D的表达水平上升,IL-1β的分泌水平上升(P<0.05),HMGB1发生了细胞质转移;而在MCF 10A,Hs 578Bst中,Pro-IL-1β、ASC、cleaved caspase1、cleaved Gasdermin D的表达水平改变无统计学意义,IL-1β的分泌水平变化无统计学意义(P>0.05),HMGB1未发生细胞质转移。结论EPA与NEMO的K381位点相互作用,激活了NF-κB通路,促进了caspase1、IL-1β和Gasdermin D的切割,增加了IL-1β的分泌水平和HMGB1的细胞质转移水平,最终诱发了HER2阳性乳腺癌细胞焦亡。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 HER2阳性乳腺癌 细胞焦亡 AU-565 sk-br-3 MDA-MD-435
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噬菌体肽库筛选与SK-BR-3细胞表面HER2特异性结合的活性短肽
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作者 汪静 高晓娟 吴秀丽 《宁夏医科大学学报》 2015年第7期731-734,封4,共5页
目的利用噬菌体展示肽库技术筛选与人乳腺癌细胞表面HER2特异性结合的活性短肽。方法以过表达HER2的人乳腺癌细胞SK-BR-3为靶细胞,Herceptin作为竞争性洗脱剂,采用竞争结合实验,经四轮亲和筛选,获得阳性噬菌体富集;通过ELISA评价与SK-... 目的利用噬菌体展示肽库技术筛选与人乳腺癌细胞表面HER2特异性结合的活性短肽。方法以过表达HER2的人乳腺癌细胞SK-BR-3为靶细胞,Herceptin作为竞争性洗脱剂,采用竞争结合实验,经四轮亲和筛选,获得阳性噬菌体富集;通过ELISA评价与SK-BR-3细胞高特异性结合的阳性噬菌体克隆;分析DNA测序结果并推导短肽序列;采用MTT法比较筛选短肽与Herceptin对SK-BR-3细胞生长的抑制率。结果随机挑选的16个克隆对SK-BR-3细胞具有特异性结合力,其中S-1阳性克隆与靶细胞特异结合活性最强,且其短肽序列对SK-BR-3细胞生长具有一定的抑制作用。结论通过噬菌体展示肽库对过表达HER2乳腺癌细胞进行筛选,获得与SK-BR-3细胞高特异性结合的活性短肽序列,为设计乳腺癌靶向药物与导向治疗提供参考数据。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 HER2 sk-br-3 亲和筛选 活性短肽
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HER-2/neu·siRNA表达载体的构建及对人乳腺癌细胞株的影响
7
作者 万光霞 林辉 刘浔阳 《广州医学院学报》 2010年第1期6-9,共4页
目的:探讨siRNA对人乳腺癌细胞株SK—BR-3的HER-2/neu基因表达的影响。方法:以HER-2/neu mRNA序列为模板设计合成2对siRNA序列,构建pGenesil-1-HER-2/neusiRNA重组质粒,转化感受态的大肠杆菌,质粒酶切、测序鉴定。转染SK—BR-3... 目的:探讨siRNA对人乳腺癌细胞株SK—BR-3的HER-2/neu基因表达的影响。方法:以HER-2/neu mRNA序列为模板设计合成2对siRNA序列,构建pGenesil-1-HER-2/neusiRNA重组质粒,转化感受态的大肠杆菌,质粒酶切、测序鉴定。转染SK—BR-3细胞48h后,提取RNA进行RT—PCR,采用方差分析(ANOVA),分析RNA干扰效应。结果:成功构建了pGenesil-1-HER-2/neu siRNA重组质粒,成功转染SK—BR-3细胞。重组质粒抑制HER-2/neu基因的表达接近54.45%(P=0.000)。结论:HER-2/neu siRNA重组质粒明显下调HER-2/neu基因在乳腺癌细胞中的表达。 展开更多
关键词 乳腺癌 skbr-3 HER-2/NEU SIRNA
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Cell microarray chip system for accurate, rapid diagnosis and target treatment of breast cancer cells SK-BR-3
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作者 Ting Wang Yu Deng +6 位作者 Guanwen Qu Yaozhong Chen Jing Shang Zhangqi Feng Jie Zheng Fengyu Yang Nongyue He 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期1043-1050,共8页
Breast cancer is one of the most common cancers in the world,survival rates of breast cancer are rising as screening and treatment improve.Many new technologies applied in the biomedical domain have been born for rapi... Breast cancer is one of the most common cancers in the world,survival rates of breast cancer are rising as screening and treatment improve.Many new technologies applied in the biomedical domain have been born for rapid diagnosis and treatment.In this work,visualization cell microarray chip with threedimensional(3 D)embedded cell scaffold for cell diagnosis and treatment was designed.DNA segment,targeting on breast cancer cells SK-BR-3,were modified with camptothecin and used as model drug.Cell microarray chip system successfully control the diffusion of small molecules and locally introduced the compounds into cells.3 D embedded cell scaffold in the cell array chip afforded an environment with continuous medium supplementary and help controlling the diffusion of small molecules drugs.By cell microarray chip system,SK-BR-3 was targeted screening and killing in one step.Cell microarray chip system can achieve accurate,rapid diagnosis and target treatment of breast cancer cells SK-BR-3 and have a potential to develop to be an effective and accurate drug screen method for evaluating the drug effect of the booming chemicals. 展开更多
关键词 CELL MICRO-ARRAY chip DNA SEGMENT Target sk-br-3 CAMPTOTHECIN
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siRNA抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞株VEGF基因表达的实验研究
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作者 李霞 王宏伟 +2 位作者 李伟 孙志军 秦迎 《实用医药杂志》 2010年第12期1122-1125,共4页
目的研究siRNA(small interfering,RNA)对乳腺癌细胞SK-BR-3的VEGF基因表达的抑制作用,为RNAi技术在肿瘤生物治疗中的应用提供实验基础。方法体外合成一条针对VEGF基因的siRNA,使用脂质体转染的方法导入细胞,观察转染后乳腺癌细胞SK-BR-... 目的研究siRNA(small interfering,RNA)对乳腺癌细胞SK-BR-3的VEGF基因表达的抑制作用,为RNAi技术在肿瘤生物治疗中的应用提供实验基础。方法体外合成一条针对VEGF基因的siRNA,使用脂质体转染的方法导入细胞,观察转染后乳腺癌细胞SK-BR-3的增殖变化,MTT法检测细胞存活率,RT-PCR检测转染后VEGFmRNA表达水平的变化,ELISA检测蛋白表达的下降效果。结果所设计的siRNA能有效抑制乳腺癌细胞的生长;降低了VEGFmRNA的表达;蛋白表达水平也显著降低。作为阴性对照的错义序列组siRNA则没有这种效果,不起作用。结论 siRNA可以有效抑制细胞株SK-BR-3中VEGF的表达,从而抑制细胞生长。应用RNA干扰技术可以有效抑制肿瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 SIRNA skbr-3 VEGF 基因治疗
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Retinoic acid affects basic cellular processes and SOX2 and SOX18 expression in breast carcinoma cells
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作者 ISIDORA PETROVIC MILENA MILIVOJEVIC +5 位作者 ANA ARSENIJEVIC ANDRIJANA LAZIC NATASA KOVACEVIC GRUJICIC MARIJA SCHWIRTLICH JELENA POPOVIC MILENA STEVANOVIC 《BIOCELL》 SCIE 2021年第5期1355-1367,共13页
Genetic and molecular heterogeneity,together with intrinsic and acquired resistance to therapy,represent the major obstacles to the successful treatment of different types of breast carcinoma.Increasing evidence demon... Genetic and molecular heterogeneity,together with intrinsic and acquired resistance to therapy,represent the major obstacles to the successful treatment of different types of breast carcinoma.Increasing evidence demonstrates that SOX transcription factors in breast carcinomas could act both as oncogenes and tumor suppressors and have been associated with tumor stage and grade,poor prognosis,and therapy resistance.Both SOX2 and SOX18 overexpression has been correlated with poor prognosis in breast carcinomas,and these genes are recognized as potential antitumor targets.Our aim was to evaluate the effect of retinoic acid(RA),a well-known cyto-differentiating agent,on breast carcinoma cells in vitro and to investigate the potential of RA treatment to modify the expression of SOX2 and SOX18 genes.By applying various experimental approaches,we evaluated the effect of RA on basic cellular processes in SK-BR-3 and MCF7 breast carcinoma cell lines.We have shown that RA inhibits cell growth,reduces the number of Ki-67 positive cells,and causes cell-cycle arrest.RA effect was more prominent in SK-BR-3 cell line that lacks SOX2 expression,including a higher decrease in cell viability,reduction in colony formation,and significant remodeling of cellular structure.We have shown that RA treatment led to the downregulation of SOX2 expression in MCF7 cells and to the reduction of SOX18 expression in both cell lines.By functional analysis,we showed that the anti-proliferative effect of RA in both cell lines was not based on the activity of stemness marker SOX2,pointing to a SOX2-independent mechanism of action.The ability of RA to reduce SOX2/SOX18 expression raises the possibility that these genes can be used as biomarkers to distinguish RA-responders from non-responders.Together,our study shows that the response of breast carcinoma cell lines to RA treatment may vary,highlighting that the development of RA-based therapy should consider differences in breast carcinoma subtypes. 展开更多
关键词 breast carcinoma Anti-proliferative activity Transcription factors MCF7 cell line sk-br-3 cell line
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山奈酚对乳腺癌细胞增殖及诱导凋亡的作用研究及机制 被引量:23
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作者 李鹰飞 曾世彬 +1 位作者 邱华平 黄龙 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期3679-3682,共4页
目的研究山奈酚对乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖及诱导凋亡的作用及机制。方法实验分为对照组和低、高剂量实验组,低、高剂量实验组SK-BR-3细胞以30,60μmol·L-1山萘酚处理,对照组以等体积生理盐水处理。以噻唑蓝法和Hoechst 33258染色... 目的研究山奈酚对乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖及诱导凋亡的作用及机制。方法实验分为对照组和低、高剂量实验组,低、高剂量实验组SK-BR-3细胞以30,60μmol·L-1山萘酚处理,对照组以等体积生理盐水处理。以噻唑蓝法和Hoechst 33258染色法检测细胞增殖和凋亡情况,以蛋白质印迹法检测细胞Notch1、活化的胱天蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达。结果细胞经药物干预24 h后,低、高剂量实验组增殖抑制率分别为(34.45±3.54)%,(46.21±4.37)%,48 h后分别为(42.43±2.57)%,(53.67±3.88)%,72 h后分别为(57.85±3.86)%,(69.83±5.02)%,其中高剂量实验组均高于低剂量实验组(均P<0.05)。干预72 h时,对照组及低、高剂量实验组乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡率分别为(5.26±1.32)%,(22.31±2.54)%,(36.65±3.64)%;低、高剂量实验组细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达量均高于对照组,且高剂量实验组高于低剂量实验组,与对照组比较,Notch1蛋白相对表达量降低,且高剂量实验组低于低剂量实验组(均P<0.05)。结论山奈酚可体外抑制乳腺癌SK-BR-3细胞增殖,并诱导其发生凋亡,可能与调控Notch1、Cleaved caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 sk-br-3细胞 山奈酚 增殖 凋亡
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去氢木香内酯诱导乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡的机制研究 被引量:11
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作者 马强 陈洁 +6 位作者 熊书 李国利 罗娇 杨贞妮 孙厚良 邓雪松 苗加伟 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期200-207,共8页
目的观察去氢木香内酯(Dehydrocostuslactone,Dehy)对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法体外培养乳腺癌SK-BR-3细胞,分别加入不同浓度Dehy(5、10、20、30、40、50、60、80、100μmol·L-1)作用24、48、72 h... 目的观察去氢木香内酯(Dehydrocostuslactone,Dehy)对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法体外培养乳腺癌SK-BR-3细胞,分别加入不同浓度Dehy(5、10、20、30、40、50、60、80、100μmol·L-1)作用24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。将SK-BR-3细胞分为空白对照组(0μmol·L-1)和Dehy 10、20、30μmol·L-1浓度组,干预48 h后,利用倒置显微镜观察乳腺癌SK-BR-3细胞的形态;采用流式细胞术检测细胞周期;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡的形态学变化;Western Blot法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果Dehy干预SK-BR-3细胞24、48、72 h后的IC50值分别为24.84、19.39、11.45μmol·L-1,且呈现浓度和时间依赖性。与空白对照组比较,Dehy 10、20、30μmol·L-1浓度组的SK-BR-3细胞数量明显减少,细胞结构松散、轮廓消失、变圆,贴壁不良;Dehy 10、20、30μmol·L-1浓度组的G2/M期细胞比例及细胞凋亡率均显著升高(P<0.05,P<0.01),呈明显的浓度依赖性;Dehy 10、20、30μmol·L-1浓度组的SK-BR-3细胞出现不同程度的细胞核浓染、固缩及碎裂等凋亡现象,且细胞核致密浓染的比例显著升高(P<0.05,P<0.01);Dehy 10、20、30μmol·L-1浓度组的Bax、Caspase-3和Cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论Dehy能够抑制乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖及诱导其凋亡,可能与其调控Bax/Bcl-2/Caspase-3凋亡信号通路来抑制乳腺癌细胞的抗凋亡能力有关。 展开更多
关键词 去氢木香内酯 人乳腺癌sk-br-3细胞 增殖 细胞周期 凋亡 机制 Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路
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柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖与凋亡的影响 被引量:10
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作者 王冰 孙涛 《河南中医》 2020年第5期735-737,共3页
目的:探讨柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖与凋亡的影响。方法:设置对照组、150 mg·L-1柴胡皂苷D组、100 mg·L-1柴胡皂苷D组、50 mg·L-1柴胡皂苷D组和25 mg·L-1柴胡皂苷D组,采用CCK-8实验方法检测柴胡皂苷D... 目的:探讨柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖与凋亡的影响。方法:设置对照组、150 mg·L-1柴胡皂苷D组、100 mg·L-1柴胡皂苷D组、50 mg·L-1柴胡皂苷D组和25 mg·L-1柴胡皂苷D组,采用CCK-8实验方法检测柴胡皂苷D对人乳腺癌SK-BR-3细胞株增殖的影响;采用流式细胞术检测柴胡皂苷D对人乳腺癌细胞株SK-BR-3的细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:柴胡皂苷D各浓度组细胞存活率分别为(85.3±4.13)%、(68.85±3.85)%、(45.28±3.25)%、(23.51±2.23)%,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。柴胡皂苷D各浓度组G1期细胞比例分别为(58.23±2.21)%、(55.51±2.34)%、(45.67±3.23)%、(33.55±4.12)%,S期细胞的比例分别为(12.67±2.32)%、(10.34±2.45)%、(8.23±3.12)%、(7.34±3.98)%,G2期细胞所占的比例分别为(29.10±2.25)%、(34.15±3.45)%、(46.10±3.01)%、(59.11±2.34)%。柴胡皂苷D各浓度组G2期细胞所占比例与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。柴胡皂苷D各浓度组细胞凋亡率分别为(9.00±1.35)%、(20.20±1.45)%、(38.50±2.50)%、(50.25±3.75)%,均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:柴胡皂苷D可明显阻滞SK-BR-3细胞株的增殖,将SK-BR-3细胞株的细胞周期阻滞于G2期,以促进该细胞的凋亡。 展开更多
关键词 柴胡皂苷D 乳腺癌 细胞增殖 细胞凋亡 sk-br-3细胞株
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海兔素对人乳腺癌SK-BR-3细胞的抑制作用及机制研究 被引量:7
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作者 马文龙 梁惠 刘颖 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1201-1205,1249,共6页
本文阐述了海兔素(Aplysin)对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨了其可能的作用机制。分别采用CCK-8法和流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测定不同剂量海兔素对SK-BR-3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并以Western blot测定SK... 本文阐述了海兔素(Aplysin)对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨了其可能的作用机制。分别采用CCK-8法和流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法测定不同剂量海兔素对SK-BR-3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并以Western blot测定SK-BR-3细胞中EGFR、Akt及ERK表达水平和磷酸化水平。结果发现,20、30、40、45、50、55、60 mg/L海兔素处理SK-BR-3细胞24 h后,细胞的生长增殖明显受到抑制,呈量效依赖性,其IC25和IC50值为分别为29.4和33.7 mg/L;IC25和IC50剂量海兔素可明显诱导细胞凋亡,并下调SK-BR-3细胞EGFR、Akt及ERK的磷酸化蛋白表达水平,但是不影响总蛋白表达水平。表明海兔素对人乳腺癌SK-BR-3细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其作用机制可能与海兔素抑制细胞中EGFR蛋白磷酸化,进而阻断下游效应分子Akt和ERK的活化有关。 展开更多
关键词 海兔素 sk-br-3细胞 CCK-8 凋亡 细胞信号通路 表皮生长因子受体 蛋白激酶B 胞外信号调节激酶 磷酸化
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木香烃内酯对乳腺癌SK-BR-3细胞周期分布及凋亡的影响 被引量:6
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作者 马强 陈洁 +3 位作者 苗加伟 熊书 庞毅 邓雪松 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第17期2073-2078,共6页
目的:研究木香烃内酯(COS)对人乳腺癌SK-BR-3细胞周期分布及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:将人乳腺癌SK-BR-3细胞分为空白对照组和COS10、20、30、40、50μmol/L组,用MTT法检测COS对细胞增殖的影响。另将细胞分为空白对照组和COS低、... 目的:研究木香烃内酯(COS)对人乳腺癌SK-BR-3细胞周期分布及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:将人乳腺癌SK-BR-3细胞分为空白对照组和COS10、20、30、40、50μmol/L组,用MTT法检测COS对细胞增殖的影响。另将细胞分为空白对照组和COS低、中、高浓度组(10、20、30μmol/L),培养24h后,采用流式细胞仪检测细胞周期分布情况,采用Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡情况,采用Westernblot法检测抑癌因子p53、胱天蛋白酶3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)和细胞周期蛋白E(cyclinE)蛋白的表达情况。结果:与空白对照组比较,COS可显著抑制SK-BR-3细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖趋势。低、中、高浓度的COS均可诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期于G1/S期(P<0.05或P<0.01);并可显著上调p53、caspase-3、Bax、p21蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),显著下调Bcl-2、CDK2、cyclinE蛋白的表达(P<0.01)。结论:COS能抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖,并诱导细胞凋亡和周期阻滞;其作用机制可能与调控p53/Bax/Bcl-2/caspase-3凋亡信号通路有关。 展开更多
关键词 木香烃内酯 sk-br-3细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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一个新的靶向HER-2 mRNA的反义寡核苷酸,HA824,对HER-2表达的影响(英文) 被引量:5
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作者 杨栓平 宋三泰 +2 位作者 宋海峰 郑晓玲 汤仲明 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期87-92,共6页
目的 观察HA82 4 ,这种新合成的靶向HER 2mRNA的反义寡核苷酸对SK BR 3乳癌细胞株mRNA和蛋白表达的特异性作用。方法 以HA4为阳性对照 ,随机序列为随机对照检测了HA82 4对SK BR 3细胞生长的抑制作用与IC50 值 ;采用逆转录聚合酶链反应... 目的 观察HA82 4 ,这种新合成的靶向HER 2mRNA的反义寡核苷酸对SK BR 3乳癌细胞株mRNA和蛋白表达的特异性作用。方法 以HA4为阳性对照 ,随机序列为随机对照检测了HA82 4对SK BR 3细胞生长的抑制作用与IC50 值 ;采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、流式细胞技术、免疫组织化学法检测了对SK BR 3细胞mRNA与蛋白表达的影响。结果 结果表明HA82 4对SK BR 3乳癌细胞的生长有剂量依赖性的抑制作用〔IC50 (nmol·L- 1) :HA82 4 ,(47± 2 6 ) ;HA4 ,(97± 4 1) ;随机序列 ,(2 5 1± 86 )。HA82 4vsHA4 ,P <0 .0 5〕。HA82 4还显著抑制了HER 2mRNA与蛋白的表达 (免疫组化结果 :HA82 4 ,1+染色 ;HA4 ,2 +染色 ;随机序列 ,3+染色 ;流式细胞技术检测结果 ,荧光强度分别为 :HA82 4 ,338.6 ;HA4 ,35 5 .5 ;随机序列 ,5 32 .4 )。结论HA82 4对SK BR 3乳癌细胞生长的抑制作用与特异性的抑制HER 展开更多
关键词 乳腺癌 sk-br-3细胞 HA824 HER-2 反义寡核苷酸 蛋白表达 逆转录聚合酶链反应
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肿瘤坏死因子α调节乳腺癌SK-BR-3细胞中KLF4表达及其机制研究 被引量:6
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作者 刘彩云 史建红 +4 位作者 周金飒 赵明智 王冰 崔乃鹏 陈保平 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期117-120,共4页
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对乳腺癌SK-BR-3细胞中Krüppel样因子4(KLF4)表达的影响,明确KLF4在促进乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡中的作用机制。方法用不同浓度TNFα(0、1、5、10、20 ng/ml)刺激乳腺癌SK-BR-3细胞,采用Western blot... 目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对乳腺癌SK-BR-3细胞中Krüppel样因子4(KLF4)表达的影响,明确KLF4在促进乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡中的作用机制。方法用不同浓度TNFα(0、1、5、10、20 ng/ml)刺激乳腺癌SK-BR-3细胞,采用Western blot法检测KLF4表达水平;用流式细胞术和DAPI染色法分析细胞凋亡情况。结果随着刺激浓度的增高,KLF4表达水平呈剂量依赖性逐渐增多。流式细胞术和DAPI染色显示,TNFα可诱导乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡。构建p Ad-GFP和p Ad-GFPKLF4腺病毒表达载体,在乳腺癌SK-BR-3细胞中过表达GFP或GFP-KLF4,再给予TNFα刺激后,流式细胞术观察结果显示,KLF4过表达可促进乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡。结论 TNFα可诱导乳腺癌SKBR-3细胞中KLF4表达,KLF4参与了TNFα诱导的乳腺癌SK-BR-3细胞凋亡过程。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α 乳腺癌sk-br-3细胞 Krüppel样因子4 凋亡
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山慈菇含药血清对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力影响的实验研究 被引量:6
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作者 陈思 邢晓静 《云南中医中药杂志》 2020年第4期75-78,共4页
目的观察山慈菇含药血清对人乳腺SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法选用20只SD雌性大鼠,2月龄,体重(200±20)g,使用随机数字表法将大鼠随机分为实验组和空白对照组,每组10只,实验组大鼠按0.01 mL/g灌胃山慈菇浓煎剂,... 目的观察山慈菇含药血清对人乳腺SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法选用20只SD雌性大鼠,2月龄,体重(200±20)g,使用随机数字表法将大鼠随机分为实验组和空白对照组,每组10只,实验组大鼠按0.01 mL/g灌胃山慈菇浓煎剂,对照组大鼠给予等体积的生理盐水,每日灌胃1次,连续6d,末次灌胃后,腹主动脉取血,制作含药血清;同时培育人乳腺癌SK-BR-3细胞。使用MTT法检测人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖情况、荧光显微镜观察SK-BR-3凋亡情况以及划痕试验检测SK-BR-3细胞迁移情况。结果与对照组比较,实验组能够明显抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞的增殖、诱导细胞凋亡以及延缓人乳腺癌SK-BR-3细胞向划痕中央聚集。结论山慈菇含药血清能够有效抑制人乳腺癌SK-BR-3细胞活性,并加速细胞凋亡以及延缓细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 山慈菇含药血清 人乳腺癌sk-br-3细胞 细胞凋亡 细胞迁移
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联合应用重组人血管内皮抑素与紫杉醇对乳腺癌细胞株SK-BR-3诱导凋亡作用研究 被引量:5
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作者 王晓利 王晓成 +2 位作者 徐晓明 杜建文 姜浩 《河北医学》 CAS 2017年第7期1091-1094,共4页
目的:观察重组人血管内皮抑素(恩度)与紫杉醇联合用药作用于乳腺癌细胞株SK-BR-3后的生长情况及凋亡率。方法:光学显微镜下观察细胞生长状况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞SKBR-3的凋亡率,Realtime PCR法观察凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的表达。... 目的:观察重组人血管内皮抑素(恩度)与紫杉醇联合用药作用于乳腺癌细胞株SK-BR-3后的生长情况及凋亡率。方法:光学显微镜下观察细胞生长状况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞SKBR-3的凋亡率,Realtime PCR法观察凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的表达。比较不同给药方案对乳腺癌细胞SK-BR-3的诱导凋亡作用。结果:恩度1μg/m L作用48h后的细胞凋亡率为11.6%(P<0.05),Bcl-2表达下调,而Bax表达无明显改变。紫杉醇1μg/m L作用24h后的细胞凋亡率为12.4%(P<0.05),Bcl-2表达下调,而Bax表达则相对升高。紫杉醇与恩度分别先后序贯给药,凋亡率分别为16.50%和14.18%(P<0.05),且能够使Bcl-2表达下调,Bax表达升高。二者联合且同时给药后SK-BR-3细胞的凋亡率为22.74%,明显高于其他给药组(P<0.05),同时对Bcl-2表达下调明显且Bax表达升高。结论:恩度与紫杉醇均可抑制乳腺癌细胞SK-BR-3的生长,且对细胞凋亡有诱导作用。二者同时给药产生的效果最佳。 展开更多
关键词 恩度 紫杉醇 乳腺癌 sk-br-3细胞 凋亡
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他莫昔芬对乳腺癌SK-BR-3细胞侵袭能力的影响及其机制 被引量:4
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作者 李英彬 郭茜 +1 位作者 包文华 张斌 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2019年第5期368-371,共4页
目的探讨他莫昔芬(tamoxifen,TAM)对乳腺癌SK-BR-3细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法收集处于对数生长期的乳腺癌SK-BR-3细胞,利用不含血清的RPMI 1640培养基培养24 h,然后将其消化重悬,接种至6孔板中(每孔1 ml,1×105/ml),分... 目的探讨他莫昔芬(tamoxifen,TAM)对乳腺癌SK-BR-3细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法收集处于对数生长期的乳腺癌SK-BR-3细胞,利用不含血清的RPMI 1640培养基培养24 h,然后将其消化重悬,接种至6孔板中(每孔1 ml,1×105/ml),分为对照组(无血清RPMI 1640培养基)和TAM(0.5、2.5、12.5 mol/L)3组(无血清RPMI 1640培养基)。给药刺激24 h后,采用Western blot法检测各组SK-BR-3细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotein-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达水平,采用划痕实验和Transwell法检测SK-BR-3细胞的侵袭能力。结果划痕实验和Transwell实验结果显示,TAM(0.5、2.5、12.5 mol/L)3组SK-BR-3细胞的侵袭能力相对数均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且随着TAM浓度的增加SK-BR-3细胞的侵袭能力逐渐增强;Western blot检测结果表明,TAM各组SK-BR-3细胞中VEGF、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平均明显高于对照组,且随着TAM浓度的增加SK-BR-3细胞中VEGF、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平逐渐升高。结论他莫昔芬可使乳腺癌SK-BR-3细胞侵袭能力的提高,其机制与增加SK-BR-3细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9等蛋白表达有关。 展开更多
关键词 他莫昔芬 乳腺癌 sk-br-3细胞 侵袭能力
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