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SHMT2通过上调Akt1促进人皮肤黑色素瘤细胞的迁移和侵袭
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作者 夏艳 曹远均 +1 位作者 夏苗 张妮 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第13期2328-2334,共7页
目的:研究丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)通过上调Akt1促进人皮肤黑色素瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:通过嘌呤霉素压力筛选获取稳定表达SHMT2蛋白的A-375和WM35细胞系;通过Western Blotting和细胞免疫化学检测SHMT2蛋白在A-375和WM3... 目的:研究丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)通过上调Akt1促进人皮肤黑色素瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:通过嘌呤霉素压力筛选获取稳定表达SHMT2蛋白的A-375和WM35细胞系;通过Western Blotting和细胞免疫化学检测SHMT2蛋白在A-375和WM35细胞系中的稳定表达;通过细胞划痕、Transwell小室实验检测SHMT2对A-375和WM35细胞体外划痕愈合、迁移和侵袭能力的影响;通过GEPIA在线数据库分析SHMT2与Akt1及上皮-间充质转换(EMT)相关因子Snai1、Snai2、ZEB2和vimentin在人皮肤黑色素瘤中表达的相关性;通过RT-PCR、Western Blotting检测Akt1、p-Akt1、Snai1、Snai2、ZEB2和vimentin在SHMT2稳定表达细胞系中的表达情况。结果:成功构建SHMT2稳定表达的A-375和WM35细胞系;过表达SHMT2可以促进A-375和WM35细胞的体外划痕愈合、迁移和侵袭;GEPIA在线数据库结果显示在人皮肤黑色素瘤中SHMT2表达与Akt1、Snai1、Snai2、ZEB2和vimentin表达呈正相关;过表达SHMT2可以上调Akt1和p-Akt1蛋白在人皮肤黑色素瘤细胞中的表达。结论:SHMT2通过上调Akt1表达促进A-375和WM35细胞的体外迁移和侵袭。 展开更多
关键词 shmt2 AKT1 人皮肤黑色素瘤 迁移 侵袭
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靶向SHMT2上调ESR1表达增强他莫昔芬的抗乳腺癌作用
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作者 王璐伟 秘先霞 +4 位作者 孔浩然 莫菲 王颖洁 胡金霞 秦樾 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第20期3834-3840,共7页
目的:研究乳腺癌组织中SHMT2与ESR1表达的相关性,及靶向SHMT2对他莫昔芬治疗乳腺癌效果的影响。方法:生物信息学方法分析SHMT2在乳腺癌细胞中的表达情况并应用免疫组化进行验证,分析SHMT2与ESR1表达的相关性和临床意义;选择ESR1表达阳... 目的:研究乳腺癌组织中SHMT2与ESR1表达的相关性,及靶向SHMT2对他莫昔芬治疗乳腺癌效果的影响。方法:生物信息学方法分析SHMT2在乳腺癌细胞中的表达情况并应用免疫组化进行验证,分析SHMT2与ESR1表达的相关性和临床意义;选择ESR1表达阳性细胞株MCF-7和T47D为细胞模型,应用RNAi技术敲低SHMT2或小分子化合物SHIN2抑制SHMT2活性后,qRT-PCR和Western blot检测ESR1的表达情况;平板克隆形成实验检测siRNA敲低、应用他莫昔芬处理或者siRNA与他莫昔芬联用对乳腺癌细胞增殖的影响;应用Transwell细胞迁移实验检测SHMT2靶向抑制剂SHIN2、他莫昔芬、SHIN2与他莫昔芬联用对细胞迁移的影响。结果:生物信息学分析发现SHMT2在乳腺癌组织中高表达,且在ER阳性乳腺癌中其表达增高与患者预后不良相关;敲低或抑制SHMT2活性后,ESR1表达上调,使用他莫昔芬时联合应用siRNA或SHIN2对乳腺癌细胞增殖和迁移具有更强的抑制作用。结论:在乳腺癌组织中SHMT2与ESR1的表达负相关,靶向或抑制其活性可使ESR1表达上调,并增强他莫昔芬的抗乳腺癌作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 shmt2 ESR1 他莫昔芬 增殖 迁移
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SHMT2通过结合并上调HAX1促进乳腺癌细胞的侵袭和迁移
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作者 陈前智 沈娜 +1 位作者 张宁 陈嫣 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第9期860-865,共6页
目的探讨SHMT2调控乳腺癌细胞侵袭和迁移的分子机制。方法生物信息分析验证SHMT2在乳腺癌组织中的作用,Transwell小室法检测乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的变化,免疫共沉淀法、敲低质粒转染、蛋白印迹实验确定蛋白调控关系。结果生物信息... 目的探讨SHMT2调控乳腺癌细胞侵袭和迁移的分子机制。方法生物信息分析验证SHMT2在乳腺癌组织中的作用,Transwell小室法检测乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的变化,免疫共沉淀法、敲低质粒转染、蛋白印迹实验确定蛋白调控关系。结果生物信息学分析显示,在浸润性乳腺癌组织中SHMT2表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.001),SHMT2高表达组的5年疾病特异性生存率和总生存率均显著低于SHMT2低表达组(均P<0.001)。Transwell小室法检测发现敲低SHMT2可显著降低MCF7细胞的侵袭(t=5.375,P=0.0058)和迁移能力(t=6.274,P=0.0033)。蛋白印迹实验发现,SHMT2能与HAX1相互结合,而敲低SHMT2可降低HAX1的蛋白水平。Transwell小室实验发现,敲低SHMT2对MCF7细胞迁移能力的抑制作用可被高表达HAX1逆转(t=6.274,P=0.0033;t=8.041,P=0.0013),而SHMT2抑制剂(SHIN1,10 nmol/L)可显著抑制SHMT2高表达对MCF7细胞迁移能力的促进作用(t=10.16,P=0.0005;t=8.741,P=0.0009)。结论SHMT2与乳腺癌不良预后密切相关,是乳腺癌细胞侵袭转移的关键因子,其作用机制可能是SHMT2通过结合并上调HAX1来增加乳腺癌细胞侵袭和迁移能力,SHMT2抑制剂对乳腺癌转移的治疗潜力,为其临床治疗提供了潜在的干预靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 shmt2 shmt2抑制剂 HAX1 侵袭 迁移
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丝氨酸羟甲基转移酶2对人皮肤黑色素瘤细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 夏艳 曹远均 +1 位作者 李俊葓 张妮 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第5期537-543,共7页
目的研究丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)对人皮肤黑色素瘤细胞增殖的影响及作用机制。方法通过GEPIA在线数据库分析人皮肤黑色素瘤中SHMT2的表达情况及其与β-catenin、c-Myc和Cyclin D1表达的相关性。通过嘌呤霉素进行压力筛选获取稳定表... 目的研究丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)对人皮肤黑色素瘤细胞增殖的影响及作用机制。方法通过GEPIA在线数据库分析人皮肤黑色素瘤中SHMT2的表达情况及其与β-catenin、c-Myc和Cyclin D1表达的相关性。通过嘌呤霉素进行压力筛选获取稳定表达SHMT2的人皮肤黑色素瘤A-375-SHMT2细胞株,采用细胞计数、CCK-8法、流式细胞术分别检测SHMT2对细胞增殖和细胞周期的影响,Western blot检测β-catenin及其下游分子Cyclin D1和c-Myc蛋白的表达。萤火虫荧光素酶报告系统实验(TOP/FOP-Flash luciferase reporter assay)检测wnt/β-catenin信号通路的活性。在稳定表达SHMT2的A-375-SHMT2细胞中使用XAV-939抑制wnt/β-catenin信号通路活性后,观察细胞增殖的变化。结果GEPIA在线数据库分析的结果显示,SHMT2在人皮肤黑色素瘤患者肿瘤组织中高表达(P<0.05),SHMT2表达与β-catenin、c-Myc和Cyclin D1呈正相关(P<0.05)。成功筛选获得稳定表达SHMT2的A-375-SHMT2细胞系及对照细胞系A-375-GFP。与A-375-GFP组相比,A-375-SHMT2组细胞的增殖能力更强(P<0.05),处于细胞周期G0/G1期的细胞比例降低(P<0.05),S期和G2/M期的细胞比例增高(P<0.05)。Western blot和双荧光素酶TOP/FOP实验的结果显示SHMT2增强wnt/β-catenin信号通路活性(P<0.05),并上调β-catenin、c-Myc和Cyclin D1的表达(P<0.05)。在A-375-SHMT2细胞中使用XAV-939抑制wnt信号通路后可以逆转SHMT2对细胞增殖的促进作用及对Cyclin D1和c-Myc的上调效应(P<0.05)。结论SHMT2通过激活wnt/β-catenin信号转导通路活性促进人皮肤黑色素瘤细胞的体外增殖。 展开更多
关键词 丝氨酸羟甲基转移酶2 WNT/Β-CATENIN信号通路 细胞增殖 皮肤黑色素瘤 细胞周期
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叶酸介导的一碳代谢在癌症中的研究进展 被引量:2
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作者 杨成灿 张吉发 +1 位作者 陈俊成 欧阳亮 《肿瘤预防与治疗》 2021年第10期886-894,共9页
叶酸代谢涵盖了对增殖细胞的生长和生存至关重要的过程,包括核苷酸合成、DNA甲基化和氧化还原防御。真核细胞中,它在线粒体、细胞质和细胞核中被分隔开。70多年前,人们就认识到抗叶酸药物对恶性肿瘤有一定的治疗作用。研究表明,叶酸代... 叶酸代谢涵盖了对增殖细胞的生长和生存至关重要的过程,包括核苷酸合成、DNA甲基化和氧化还原防御。真核细胞中,它在线粒体、细胞质和细胞核中被分隔开。70多年前,人们就认识到抗叶酸药物对恶性肿瘤有一定的治疗作用。研究表明,叶酸代谢的过度激活可能与肿瘤的发生及叶酸代谢酶如SHMT2、MTHFD2等有关,促使叶酸代谢逐渐成为肿瘤靶向治疗研究的热点。本文回顾了叶酸代谢的基本过程,描述了叶酸代谢关键酶在肿瘤异常生长中的多因素作用,介绍了目前关于叶酸代谢小分子抑制剂的研究进展。 展开更多
关键词 叶酸 一碳代谢 shmt2 MTHFD2 癌症
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SHMT2在肿瘤中的研究进展 被引量:3
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作者 刘璋楠 侯俊清 王慧娟 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2020年第3期224-228,共5页
肿瘤细胞的异常增殖和转移都受到细胞代谢变化的支持,其中代谢酶已经被证明是治疗肿瘤的有效靶点,丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)是连接丝氨酸/甘氨酸合成途径和一碳代谢的关键酶,与肿瘤生长和转移密切相关。本文结合相关文献对SHMT2在肿... 肿瘤细胞的异常增殖和转移都受到细胞代谢变化的支持,其中代谢酶已经被证明是治疗肿瘤的有效靶点,丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)是连接丝氨酸/甘氨酸合成途径和一碳代谢的关键酶,与肿瘤生长和转移密切相关。本文结合相关文献对SHMT2在肿瘤中的表达及作用机制进行综述。 展开更多
关键词 丝氨酸羟甲基转移酶2 肿瘤 丝氨酸 代谢
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非小细胞肺癌患者丝氨酸羟甲基转移酶表达与CpG岛异常甲基化的相关性分析
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作者 薛利利 许莲蓉 +1 位作者 于军华 宋翔 《中国药物与临床》 CAS 2020年第15期2517-2519,共3页
目的探讨非小细胞肺癌患者丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT2)与CpG岛甲基化的相关性。方法选取我院2015年5月至2018年3月期间非小细胞肺癌患者90例,病理癌组织纳入观察组,癌旁(距病灶2 cm)组织纳入对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗夹... 目的探讨非小细胞肺癌患者丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT2)与CpG岛甲基化的相关性。方法选取我院2015年5月至2018年3月期间非小细胞肺癌患者90例,病理癌组织纳入观察组,癌旁(距病灶2 cm)组织纳入对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗夹心法测定SHMT2表达水平;采用CIMP评估CPG岛甲基化率。结果癌组织SHMT2水平显著高于癌旁组织SHMT2,差异有统计学意义(P<0.01)。癌组织CpG岛甲基化率CIMP水平显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。SHMT2在Ⅰ/Ⅱ期的表达水平显著低于Ⅲ/Ⅳ期,差异有统计学意义(P<0.01)。SHMT2在N0期的表达水平显著低于N1/N2/N3期,差异有统计学意义(P<0.01)。结论非小细胞肺癌SHMT2表达高于癌旁组织;非小细胞肺癌CpG岛异常甲基化高于癌旁组织;CpG岛异常甲基化与SHMT2存在显著的相关性(P<0.01),非小细胞肺癌患者辅助去甲基化治疗可能会提高患者治疗效果。 展开更多
关键词 肺癌 非小细胞 丝氨酸羟甲基转移酶 CPG岛
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SHMT2结合并上调SQSTM1促进结肠癌细胞增殖 被引量:2
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作者 陈前智 沈娜 李雪芹 《医药导报》 CAS 北大核心 2023年第6期814-818,共5页
目的探索SHMT2调控结肠癌细胞增殖的分子机制。方法通过免疫组化染色及生物信息分析来验证SHMT2在结肠癌组织中的表达和作用,通过细胞克隆形成实验检测SHMT2对结肠癌细胞增殖能力的影响,利用免疫共沉淀法、质粒转染、蛋白印迹实验等验证... 目的探索SHMT2调控结肠癌细胞增殖的分子机制。方法通过免疫组化染色及生物信息分析来验证SHMT2在结肠癌组织中的表达和作用,通过细胞克隆形成实验检测SHMT2对结肠癌细胞增殖能力的影响,利用免疫共沉淀法、质粒转染、蛋白印迹实验等验证SHMT2在结肠癌中的作用机制。结果免疫组化染色揭示SHMT2蛋白在结肠癌肿瘤组织中显著高表达,通过生信分析发现SHMT2 mRNA水平与结肠癌的不良预后相关,在细胞实验中发现SHMT2低表达或者SHMT2抑制剂可显著抑制结肠癌细胞增殖,其作用机制可能是SHMT2通过与SQSTM1结合并上调其蛋白水平来促进结肠癌细胞增殖。结论该研究发现SHMT2-SQSTM1信号轴对结肠癌细胞增殖的关键调控作用,为结肠癌相关分子机制研究提供了新的线索和方向。 展开更多
关键词 结肠癌 丝氨酸羟甲基转移酶2(shmt2) shmt2抑制剂 SQSTM1 增殖
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南蛇藤影响胃癌细胞丝氨酸/甘氨酸代谢和增殖的作用机制研究 被引量:4
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作者 彭微 陈琳 +1 位作者 刘洁 张爱武 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期481-486,共6页
目的探讨南蛇藤茎醋酸乙酯提取物(COE)通过提高丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)琥珀酰化水平影响胃癌细胞增殖、凋亡和丝氨酸/甘氨酸代谢的作用。方法采用MTT法、TUNEL试剂盒检测COE对MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。通过免疫沉淀富集MGC-80... 目的探讨南蛇藤茎醋酸乙酯提取物(COE)通过提高丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)琥珀酰化水平影响胃癌细胞增殖、凋亡和丝氨酸/甘氨酸代谢的作用。方法采用MTT法、TUNEL试剂盒检测COE对MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。通过免疫沉淀富集MGC-803细胞中SHMT2蛋白,利用琥珀酰化泛抗体检测SHMT2琥珀酰化修饰水平。将细胞裂解液进行~1H-NMR检测,结合多元统计分析比较阴性对照组和320μg/ml COE组丝氨酸/甘氨酸含量差异。结果 MTT法结果显示,20、40、80、160、320μg/ml COE分别处理MGC-803细胞24、48、72 h后,细胞的增殖活性受到明显抑制,并呈浓度和时间依赖性。经COE作用后,细胞核固缩,胞浆浓缩,胞膜破裂,出现凋亡小体,随着COE作用浓度升高,细胞凋亡明显。320μg/ml COE组细胞琥珀酰化SHMT2蛋白表达量高于阴性对照组(0. 92±0. 10 vs. 0. 18±0. 05,P<0. 05)。阴性对照组和320μg/ml COE组细胞丝氨酸(7. 861±0. 367 vs. 2. 594±0. 037)和甘氨酸(12. 915±0. 581 vs. 4. 620±0. 382)含量差异具有统计学意义(P<0. 05)。结论 COE可通过影响胃癌细胞MGC-803丝氨酸/甘氨酸代谢,抑制其增殖,并诱导其凋亡,其可能的作用机制与上调丝氨酸代谢关键酶SHMT2的琥珀酰化水平有关。 展开更多
关键词 胃癌 南蛇藤茎醋酸乙酯提取物 丝氨酸羟甲基转移酶2 丝氨酸/甘氨酸代谢 增殖 凋亡
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燕麦生物碱A通过调控丝氨酸羟甲基转移酶2重塑丝氨酸代谢抑制结肠癌生长 被引量:2
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作者 付荣 王珏 +1 位作者 王海龙 杨鹏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期715-723,共9页
流行病学研究表明,燕麦类全谷食品可有效降低结肠癌的发病风险。丝氨酸/甘氨酸代谢途径对于维持肿瘤生长十分重要,能为肿瘤细胞核苷酸等生物大分子的合成提供底物,并保障肿瘤细胞免受氧化损伤。我们的前期研究表明,燕麦生物碱A(avenanth... 流行病学研究表明,燕麦类全谷食品可有效降低结肠癌的发病风险。丝氨酸/甘氨酸代谢途径对于维持肿瘤生长十分重要,能为肿瘤细胞核苷酸等生物大分子的合成提供底物,并保障肿瘤细胞免受氧化损伤。我们的前期研究表明,燕麦生物碱A(avenanthramide A,AVN A)具有抑制小鼠原位结肠癌生长的作用。本研究通过对氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(azoxymethane/dextran sulphate sulfate,AOM/DSS)小鼠结肠癌模型进行血液代谢组学研究,发现AVN A处理后,丝氨酸/甘氨酸代谢途径的变化最为显著(P<0.01)。丝氨酸、甘氨酸饥饿条件下,AVN A对结肠癌的杀伤效果显著增强(P<0.05),表明AVN A靶向丝氨酸代谢从而发挥抗结肠癌作用。随后,对丝氨酸代谢关键酶SHMT1、SHMT2、PHGDH、PSAT1及PSPH的mRNA及蛋白质表达水平进行检测,发现AVN A明显抑制SHMT2的表达(P<0.01或P<0.001)。过表达SHMT2后,由AVN A介导的对结肠癌细胞的生长、增殖、GSH/GSSG以及NADPH/NADP+的抑制作用均被逆转。综上所述,AVN A通过下调SHMT2的表达,阻遏丝氨酸/甘氨酸代谢途径,从而发挥抑制结肠癌进展的作用。本研究为燕麦生物碱的深度利用及结肠癌的营养干预提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 燕麦生物碱A 丝氨酸羟甲基转移酶2 丝氨酸代谢 结肠癌
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丙酮醛诱导细胞凋亡相关基因SHMT2L的生物信息学分析
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作者 曾军英 刘学伟 +2 位作者 张杰 孙志洪 谭支良 《生命科学研究》 CAS CSCD 2008年第2期131-135,共5页
基因芯片是一种高通量地同时研究多个基因表达的有力工具.在用基因芯片技术检测丙酮醛诱导人牙周膜成纤维细胞凋亡的基因表达研究中,发现一个新基因SHMT2L,其表达为显著下调,并推测该基因与细胞凋亡密切相关.利用生物信息学方法对SHMT2... 基因芯片是一种高通量地同时研究多个基因表达的有力工具.在用基因芯片技术检测丙酮醛诱导人牙周膜成纤维细胞凋亡的基因表达研究中,发现一个新基因SHMT2L,其表达为显著下调,并推测该基因与细胞凋亡密切相关.利用生物信息学方法对SHMT2L基因及其蛋白产物进行各种分析,结果发现SHMT2L基因与线粒体丝氨酸羟甲基转移酶具有较高的相似性.SHMT2L在细胞中低表达与丙酮醛造成DNA损伤所引发的细胞凋亡相关. 展开更多
关键词 丙酮醛 基因芯片 shmt2L 生物信息学
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