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哮喘小鼠肺内及内脏感觉传入系统SH2-Bβ的表达 被引量:9
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作者 齐金萍 曹德寿 +2 位作者 刘晓湘 张国斌 方秀斌 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期195-198,共4页
目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺... 目的研究SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)的表达,探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组,每组15只.利用免疫组织化学方法测定两组小鼠肺、C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ的免疫反应变化;用免疫印迹法(Western blotting)检测肺及C7~T5节段脊髓SH2-Bβ及神经生长因子(NGF)的免疫反应变化;Metamoph图像分析系统对结果进行分析.结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7~T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01).Western blotting显示SH2-Bβ及NGF在哮喘小鼠的C7~T5节段脊髓及肺内表达明显强于对照组;正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.346±0.017和0.512±0.018,哮喘组为0.738±0.021和1.526±0.022.NGF在正常对照组脊髓及肺内的平均相对光密度值分别为0.357±0.021和0.734±0.013,哮喘组为1.445±0.015和1.265±0.018;且SH2-Bβ与NGF光密度值呈正相关(r=0.651,P<0.01).结论结果提示,SH2-Bβ在哮喘小鼠肺、C7~T5节段脊神经节及对应的脊髓后角过表达,可能是NGF参与哮喘发病的重要信号分子. 展开更多
关键词 sh2-bβ 脊神经节 脊髓 哮喘 免疫组织化学法 免疫印迹法 小鼠
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NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元SH2-Bβ表达的调节作用 被引量:10
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作者 齐金萍 王巧玲 +2 位作者 刘晓湘 曹德寿 方秀斌 《解剖科学进展》 CAS 2006年第1期23-26,i0002,共5页
目的探讨NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元(C7-T5脊神经节及相应脊髓后角)SH2-Bβ表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组、anti-NGF组,每组10只。利用免疫组织化学方法,免疫印迹法(W estern B lot)... 目的探讨NGF对哮喘小鼠肺及初级传入神经元(C7-T5脊神经节及相应脊髓后角)SH2-Bβ表达的调节作用。方法BALB/c小鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、哮喘组、anti-NGF组,每组10只。利用免疫组织化学方法,免疫印迹法(W estern B lot)测定各组SH2-Bβ的免疫反应变化;M etamoph图象分析系统对结果进行分析。结果免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7-T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值(MOD)分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01)。而Anti-NGF组小鼠SH2-Bβ免疫阳性产物MOD分别为0.252±0.015、0.158±0.012、0.251±0.024,明显低于哮喘组(P<0.01)。W estern B lot显示哮喘小鼠的C7-T5节段脊髓及肺内SH2-BβMOD与-βactin MOD的比值(0.738±0.021和1.526±0.022)明显高于对照组(0.346±0.017和0.512±0.018,P<0.01);而Anti-NGF组小鼠在肺、C7-T5节段脊髓SH2-Bβ免疫阳性产物MOD与β-actioin MOD的比值(0.436±0.011和0.682±0.015)明显低于哮喘组(P<0.01)。结论肺内、C7-T5脊神经节及对应脊髓后角神经元的SH2-Bβ可能参与NGF介导的哮喘的发病过程。 展开更多
关键词 sh2-bβ 神经生长因子 脊髓 脊神经节 哮喘小鼠
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SH2-Bβ在局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质的表达 被引量:8
3
作者 张正洪 曲鹏 +1 位作者 齐金萍 方秀斌 《解剖科学进展》 CAS 2006年第2期129-131,i0006,共4页
目的研究信号分子SH2-Bβ在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑顶叶皮质表达情况为阐明脑缺血的演变的分子机制从而为临床治疗提供理论依据。方法用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型,动物随机分为假手术组和缺血再灌注... 目的研究信号分子SH2-Bβ在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑顶叶皮质表达情况为阐明脑缺血的演变的分子机制从而为临床治疗提供理论依据。方法用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注模型,动物随机分为假手术组和缺血再灌注组,应用免疫组织化学SABC法和图像分析方法检测大鼠顶叶皮质SH2-Bβ表达情况。结果假手术组右侧顶叶皮质SH2-Bβ有很少的表达,而缺血再灌注组3 h时间点SH2-Bβ在右侧顶叶皮质的平均光密度值比假手术组明显增高,持续到24 h,到48 h时间点开始下降,到72 h已逐渐下降但仍高于假手术组(P<0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质SH2-Bβ被诱导而表达增高,SH2-Bβ可能参与NGF对缺血神经元的保护作用机制,促进神经元存活和损伤的修复。 展开更多
关键词 sh2-bβ 脑缺血 神经生长因子(NGF) 大鼠
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NGF-TrkA-SH2-Bβ-Akt/PKB信号通路与哮喘 被引量:4
4
作者 刘玉丽 方秀斌 《解剖科学进展》 CAS 2007年第3期249-252,共4页
NGF-TrkA-SH2-Bβ-Akt/PKB这一信号通路参与神经细胞分化和增殖,也参与哮喘炎症反应和气道高反应。AKT/PKB是一种分子量约60kD的丝/苏氨酸激酶,有3种亚型,在许多组织中表达的量不同。AKT/PKB通过直接或间接影响3个转录因子家族(Forkhead... NGF-TrkA-SH2-Bβ-Akt/PKB这一信号通路参与神经细胞分化和增殖,也参与哮喘炎症反应和气道高反应。AKT/PKB是一种分子量约60kD的丝/苏氨酸激酶,有3种亚型,在许多组织中表达的量不同。AKT/PKB通过直接或间接影响3个转录因子家族(Forkhead、CREB、NF-κB),促使Bad,caspase-3和caspase-9磷酸化,抑制糖原合成酶激酶-3(GSK3)活性等作用。NGF与TrkA结合,通过调节SH2-Bβ及其下游蛋白Akt/PKB参与哮喘发病。 展开更多
关键词 sh2-bβ 信号通路 PKb 哮喘 CASPASE-9 caspase-3 苏氨酸激酶 神经细胞分化
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抗SH2-Bβ抗体可减轻哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性 被引量:2
5
作者 齐金萍 方秀斌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期553-555,559,共4页
目的:研究SH2-Bβ在支气管哮喘发病中的作用。方法:SH2-Bβ被阻断后,观察哮喘小鼠肺泡灌洗液中细胞数、应用酶联免疫吸附实验肺泡灌洗液、血清及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量变化。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果:同哮喘组比... 目的:研究SH2-Bβ在支气管哮喘发病中的作用。方法:SH2-Bβ被阻断后,观察哮喘小鼠肺泡灌洗液中细胞数、应用酶联免疫吸附实验肺泡灌洗液、血清及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量变化。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果:同哮喘组比,anti-SH2-Bβ组:1)气道阻力明显降低(P<0.01);2)肺泡灌洗液中细胞总数及嗜酸细胞数明显降低(P<0.01);3)血清IgE及脾细胞培养液中IgE、IL-4含量明显降低(P<0.01)。结论:SH2-Bβ参与哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的发病机制。阻断SH2-Bβ可能成为治疗过敏性哮喘的有效新方法。 展开更多
关键词 sh2-bβ 哮喘 气道炎症 气道高反应性
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地塞米松抑制哮喘小鼠SH2-Bβ蛋白表达 被引量:4
6
作者 齐金萍 王巧玲 +1 位作者 金韵 胡颖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1501-1504,共4页
目的探讨地塞米松对哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7-T5脊神经节及对应的脊髓后角)SH2-Bβ表达的抑制作用。方法用卵蛋白法制备BABL/c小鼠哮喘模型,应用免疫组织化学和免疫印迹法,观察SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入部位的表达及... 目的探讨地塞米松对哮喘小鼠肺及内脏感觉传入系统(C7-T5脊神经节及对应的脊髓后角)SH2-Bβ表达的抑制作用。方法用卵蛋白法制备BABL/c小鼠哮喘模型,应用免疫组织化学和免疫印迹法,观察SH2-Bβ在哮喘小鼠肺及内脏感觉传入部位的表达及地塞米松对其表达的影响。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果在肺组织、C7-T5段脊神经节及相应节段的脊髓后角内,哮喘组SH2-Bβ表达明显高于对照组和地塞米松组(P<0.01)。哮喘组气道阻力明显高于正常组及地塞米松组(P<0.01)。结论地塞米松抑制哮喘小鼠SH2-Bβ的表达可能是激素治疗哮喘的机制之一。 展开更多
关键词 sh2-bβ 地塞米松 脊神经节 脊髓 哮喘 小鼠
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SH2-Bβ抗体治疗肥胖哮喘模型小鼠肥胖和哮喘的机制研究 被引量:3
7
作者 金韵 李新鸣 +1 位作者 齐金萍 贾志红 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期508-511,共4页
目的探讨SH2-Bβ抗体对肥胖哮喘模型小鼠的治疗作用。方法采用8周C57BL/6小鼠(36只),随机分为正常组(标准饲料喂养)、肥胖哮喘组(高脂饲料喂养)和SH2-Bβ抗体干预组。测量各组小鼠体质量;应用免疫组织化学方法检测SH2-Bβ在各组小鼠肺... 目的探讨SH2-Bβ抗体对肥胖哮喘模型小鼠的治疗作用。方法采用8周C57BL/6小鼠(36只),随机分为正常组(标准饲料喂养)、肥胖哮喘组(高脂饲料喂养)和SH2-Bβ抗体干预组。测量各组小鼠体质量;应用免疫组织化学方法检测SH2-Bβ在各组小鼠肺内及下丘脑的表达;应用小鼠肺功能仪检测各组小鼠气道阻力变化。结果肥胖哮喘组体质量明显高于正常组和SH2-Bβ抗体干预组(P<0.05);免疫组织化学染色显示,在下丘脑,SH2-Bβ在肥胖哮喘组小鼠表达降低,明显低于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。在肺内,SH2-Bβ在肥胖哮喘组小鼠表达增高,明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05);肥胖哮喘组小鼠的气道阻力明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。结论 SH2-Bβ抗体可使肥胖哮喘模型小鼠下丘脑内SH2-Bβ表达上调,同时使肺内SH2-Bβ表达下调,降低体质量,降低肺内活化炎性细胞数量,进而降低气道阻力,使肥胖哮喘得到缓解。 展开更多
关键词 sh2-bβ 肥胖 哮喘 小鼠
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SH2-Bβ调控JAK2/STAT3在肥胖症发病中的分子机制 被引量:3
8
作者 段朝军 李萃 +4 位作者 汤参娥 吴静 唐发清 陈主初 肖志强 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期90-91,共2页
通过分子生物学方法分析过表达瘦素受体细胞株和接头蛋白SH2-Bβ基因敲除小鼠中JanuS激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活因子3(STAT3)酪氨酸磷酸化水平,ELISA法测定SH2-Bβ基因敲除小鼠血清瘦素水平。结果显示,在离体SH2-Bβ显著... 通过分子生物学方法分析过表达瘦素受体细胞株和接头蛋白SH2-Bβ基因敲除小鼠中JanuS激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活因子3(STAT3)酪氨酸磷酸化水平,ELISA法测定SH2-Bβ基因敲除小鼠血清瘦素水平。结果显示,在离体SH2-Bβ显著增强瘦素刺激的JAK2活性和STAT3磷酸化,在SH2-Bβ敲除小鼠,瘦素刺激的JAK2活性和STAT3磷酸化水平显著降低,SH2-Bβ敲除小鼠的空腹和餐后血清瘦素水平均下降,体重增加。因此,SH2-Bβ是一内源性瘦素敏感性增强子,通过瘦素JAK2/STAT3信号通路参与体重的调节。 展开更多
关键词 sh2-bβ 肥胖症 瘦素信号通路
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Regulatory effects of nerve growth factor on SH2-B beta expression in the lung and primary afferent neurons of asthmatic mice 被引量:1
9
作者 Jinping Qi Xiubin Fang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2008年第10期1132-1135,共4页
BACKGROUND: Several studies have demonstrated that SH2-B13 is over-expressed in the lung, C7T5 spinal ganglia, and the corresponding spinal dorsal horn of asthmatic mice. SH2-Bβ expression has been shown to positive... BACKGROUND: Several studies have demonstrated that SH2-B13 is over-expressed in the lung, C7T5 spinal ganglia, and the corresponding spinal dorsal horn of asthmatic mice. SH2-Bβ expression has been shown to positively correlate with nerve growth factor (NGF) expression levels. This indicates that SH2-Bβ, in the presence of NGF, may participate in asthmatic attacks. OBJECTIVE: To observe the effects of anti-NGF on SH2-Bβ expression in primary afferent neurons (C7-T5 spinal ganglia and corresponding spinal dorsal horn) and in the lung to further investigate the regulatory effects of NGF on SH2-B/3 expression. DESIGN, TIME AND SETTING: A completely randomized block design experiment was performed at the Department of Neurobiology, China Medical University between March 2004 and July 2005. MATERIALS: Thirty-six male, BALB/c mice were included in this study. Ovalbumin solution was purchased from Sigma, USA. SH2-Bβ polyclonal antibody was provided by Santa Cruz, USA. Anti-NGF reagent was obtained from Wuhan Boster Bioengineering Co., Ltd., China. METHODS: Thirty-six mice were randomly and evenly divided into three groups: control, model, and anti-NGF. In the model group, asthma was induced by intraperitoneal injection and aerosol inhalation of ovalbumin solution. Mice in the anti-NGF group received anti-NGF through the nasal cavity 3 hours prior to aerosol inhalation. In the control group, mice were subjected to experimental procedures similar to the model group, except that ovalbumin solution was replaced by phosphate buffered saline (PBS). MAIN OUTCOME MEASURES: SH2-Bβ expression in primary afferent neurons (C7T5 spinal ganglia and the corresponding spinal dorsal horn) and the lung was detected by immunohistochemistry and Western blot. Immunostaining intensity level of SH2-Bβ was analyzed using the MetaMorph image analysis system. RESULTS: lmmunohistochemistry results revealed that the mean intensity of SH2-Bβ expression in the C7 T5 spinal ganglia, the corresponding spinal dors 展开更多
关键词 ASTHMA nerve growth factor sh2-bβ spinal cord spinal ganglia
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SH2-B β在肥胖小鼠下丘脑和肺内表达及作用 被引量:2
10
作者 齐金萍 王效杰 +1 位作者 金韵 关宝丽 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1331-1333,共3页
目的探讨高脂饮食诱导肥胖小鼠下丘脑及肺内SH2-Bβ表达与肥胖和炎症之间关系。方法c57BL/6小鼠45只,随机分为对照组和肥胖组,对照组20只,肥胖组25只;高脂饮食制备肥胖模型。利用免疫组织化学法,测定各组小鼠肺内SH2-Bβ表达变化;wester... 目的探讨高脂饮食诱导肥胖小鼠下丘脑及肺内SH2-Bβ表达与肥胖和炎症之间关系。方法c57BL/6小鼠45只,随机分为对照组和肥胖组,对照组20只,肥胖组25只;高脂饮食制备肥胖模型。利用免疫组织化学法,测定各组小鼠肺内SH2-Bβ表达变化;western blot检测下丘脑SH2-Bβ蛋白变化;应用小鼠肺功能仪检测气道阻力变化。结果肥胖小鼠肺内可见大量炎性细胞浸入,气道上皮及炎性细胞均高表达SH2-Bβ,肥胖组小鼠肺内SH2-Bβ平均光密度值为(0.685±0.025),明显高于对照组的(0.127±0.019)(t=56.19,P<0.01),下丘脑SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值为(0.686±0.016),明显低于对照组的(2.487±0.014)(t=267.88,P<0.01);肥胖组小鼠气道阻力较对照组明显增高(P<0.01)。结论高脂饮食可使小鼠下丘脑内SH2-Bβ表达下调近而导致肥胖;肺内气道上皮和炎性细胞SH2-Bβ过表达使气道阻力增加。 展开更多
关键词 sh2-b 肥胖 气道阻力 小鼠
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SH2-B beta upregulates the expression of interleukin-1 beta in lung and visceral primary afferent neurons in asthmatic mice
11
作者 Jinping Qi Xiaojie Wang Yun Jin 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第34期2703-2707,共5页
A previous study by our research group showed that nerve growth factor is involved in the onset of asthma through regulating SH2-Bβ expression in the lung and visceral primary afferent neurons of asthmatic mice. This... A previous study by our research group showed that nerve growth factor is involved in the onset of asthma through regulating SH2-Bβ expression in the lung and visceral primary afferent neurons of asthmatic mice. This study sought to assess the expression level of interleukin-1β in primary afferent neurons in C7-T5 spinal ganglia, spinal cord and lung in asthmatic mice after blockage of SH2-Bβ. The levels of interleukin-1β protein in primary afferent neurons in the C7-T5 spinal ganglia and lung were decreased, and interleukin-1β mRNA expression also down-regulated in the spinal cord, medulla oblongata and lung tissue after blockage of SH2-Bβ. Our findings indicate that SH2-Bβ can upregulate the expression of interleukin-1β in C7-T5 spinal ganglia, spinal cord and lung of asthmatic mice. 展开更多
关键词 sh2-bβ INTERLEUKIN-1β asthma primary afferent neurons spinal ganglia afferent nerve pathway
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经鼻应用SH2-Bβ抗体可抑制高脂饮食小鼠体质量增长
12
作者 金韵 李新鸣 +3 位作者 王效杰 臧晋 齐金萍 郭佳美 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期809-813,共5页
目的探讨经鼻应用SH2-Bβ抗体对高脂饮食小鼠体质量的影响。方法采用8周C57BL/6小鼠随机分为正常组、肥胖组和SH2-Bβ抗体(1∶50)干预组,每组12只。测量每日摄食量及每周体质量变化,应用Western blot检测SH2-Bβ在各组小鼠下丘脑和肝的... 目的探讨经鼻应用SH2-Bβ抗体对高脂饮食小鼠体质量的影响。方法采用8周C57BL/6小鼠随机分为正常组、肥胖组和SH2-Bβ抗体(1∶50)干预组,每组12只。测量每日摄食量及每周体质量变化,应用Western blot检测SH2-Bβ在各组小鼠下丘脑和肝的表达,HE染色观察肝的组织学改变。免疫组织化学染色检测肾SH2-Bβ表达,并观察其病理改变。结果肥胖组小鼠摄食量和体质量明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。Western blot检测结果显示,肥胖组小鼠SH2-Bβ蛋白在下丘脑表达下调,明显低于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05);而在肝组织表达上调,明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。肝组织HE染色结果显示,SH2-Bβ抗体干预组与肥胖组相比,肝细胞索排列整齐,肝细胞脂肪变性减轻,脂滴变小,炎性细胞减少。肾组织免疫组织化学染色结果显示,肥胖组小鼠SH2-Bβ蛋白在肾组织表达上调,明显高于SH2-Bβ抗体干预组和正常组(P<0.05)。炎性细胞浸润明显。结论经鼻应用SH2-Bβ抗体可使高脂饮食小鼠下丘脑内SH2-Bβ表达上调,降低摄食量而降低体质量;肝肾组织SH2-Bβ表达下调,使肝肾脂肪沉积减轻,进而减轻脂肪沉积所致的组织炎症或损伤。这表明SH2-Bβ经中枢通过调节进食量,在周围组织通过改变脂肪沉积量而对体质量进行调节。 展开更多
关键词 sh2-bβ 肥胖 体质量 小鼠 鼻腔给药
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SH2-Bβ抗体对哮喘小鼠肺及初级传入神经元SH2-Bβ表达的调节作用
13
作者 齐金萍 王效杰 +2 位作者 关宝丽 金韵 胡颖 《沈阳医学院学报》 2008年第3期133-136,共4页
目的:探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用。方法:用卵蛋白致敏致喘的方法制备BALB/c小鼠哮喘模型。应用免疫组织化学方法和免疫印记法(Western blot)观察SH2-Bβ在哮喘小鼠下呼吸道及内脏感觉传入部位的表达及应用SH2-Bβ抗体后SH2-Bβ水平... 目的:探讨SH2-Bβ在哮喘发病中的作用。方法:用卵蛋白致敏致喘的方法制备BALB/c小鼠哮喘模型。应用免疫组织化学方法和免疫印记法(Western blot)观察SH2-Bβ在哮喘小鼠下呼吸道及内脏感觉传入部位的表达及应用SH2-Bβ抗体后SH2-Bβ水平的变化,Metamoph图象分析系统对结果进行分析。结果:免疫组织化学结果显示哮喘小鼠肺、C7-T5节段脊神经节及对应的脊髓后角SH2-Bβ免疫阳性产物平均光密度值分别为0.806±0.023、0.766±0.018、0.547±0.014,明显高于对照组(0.243±0.018、0.131±0.011、0.215±0.029)(P<0.01)。而应用SH2-Bβ抗体组相应部位的平均光密度值分别为(0.252±0.015、0.158±0.012、0.251±0.024)明显低于哮喘组(P<0.01)。Western blot结果显示:哮喘组肺及C7-T5节段脊髓后角SH2-Bβ与β-actin MOD值的比(2.512±0.021,2.615±0.022)明显高于对照组(0.675±0.019,0.712±0.018)(P<0.01),而应用SH2-Bβ抗体组相应部位的比值(0.969±0.023,1.023±0.022)明显低于哮喘组(P<0.01)。结论:肺内、C7-T5脊神经节及对应脊髓后角神经元的SH2-Bβ参与哮喘的发病过程,anti-SH2-Bβ可下调SH2-Bβ的表达,减轻肺部炎症。 展开更多
关键词 sh2-bβ 脊髓 脊神经节 哮喘
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人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达
14
作者 邱国真 陈白虹 +5 位作者 曲戎梅 付琛颖 董文其 魏威 王文敬 王萍 《热带医学杂志》 CAS 2009年第3期249-252,共4页
目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT-PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段,并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG... 目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT-PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段,并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达带6×His标签的融合蛋白。结果PCR和酶切电泳鉴定结果显示SH2B1β基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GenBank中的人源SH2B1β序列相符,SDS-PAGE电泳结果表明获得相对分子质量约75000的目的蛋白。结论成功获取了人源脂肪细胞的SH2B1β基因,并在BL21(DE3)中高效表达目的蛋白,为下一步表达纯化SH2B1β重组蛋白及蛋白的初步功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 sh2b1β 克隆 原核表达
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