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多重PCR同时鉴别5种药用海马 被引量:11
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作者 刘富艳 袁媛 +4 位作者 金艳 秦雯 蒋超 赵玉洋 黄璐琦 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第23期4562-4568,共7页
海马是我国名贵动物药材之一,《中国药典》收载了5种海马的药用标准。随着海马资源储量的减少,市售海马基原增多,鉴别困难。该研究基于海马及其混伪品线粒体DNA序列差异设计了5对鉴别引物并构建同时鉴别三斑海马、克氏海马、管海马,刺... 海马是我国名贵动物药材之一,《中国药典》收载了5种海马的药用标准。随着海马资源储量的减少,市售海马基原增多,鉴别困难。该研究基于海马及其混伪品线粒体DNA序列差异设计了5对鉴别引物并构建同时鉴别三斑海马、克氏海马、管海马,刺海马和日本海马的多重PCR反应体系。PCR反应结束后进行凝胶电泳,管海马、日本海马、克氏海马、刺海马和三斑海马分别获得155, 222, 292, 352,458 bp的特异性鉴别条带,混伪品无条带。该研究建立的方法可以在单次PCR反应中准确鉴别所有药用海马的物种基原,为海马药材和饮片的质量控制提供了依据。 展开更多
关键词 多重PCR 分子鉴定 海马 中药材 COⅠ序列
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线粒体功能障碍及氧化应激与糖尿病视网膜病变关系的研究 被引量:9
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作者 岳嵩 胡悦东 +1 位作者 王馨鹤 陈蕾 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第12期2176-2178,共3页
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)为糖尿病的严重并发症之一,已成为致盲的主要眼疾。DR的发生发展与多种因素有关,发病机制复杂,尚不明确,早期的资料表明,其发生发展与血糖水平、糖尿病病程、环境等多种因素相关。其中线粒体... 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)为糖尿病的严重并发症之一,已成为致盲的主要眼疾。DR的发生发展与多种因素有关,发病机制复杂,尚不明确,早期的资料表明,其发生发展与血糖水平、糖尿病病程、环境等多种因素相关。其中线粒体功能障碍和氧化应激反应是导致DR发生的重要机制之一,已成为近几年的研究热点。细胞内线粒体功能障碍的后果包括因为线粒体活性氧(ROS)的产生率升高而导致的电子传递链蛋白的损伤,以及线粒体DNA(mt DNA)的损害和代谢能力的降低。明确把握高糖下线粒体的功能变化和氧化应激反应在DR发生发展过程中的作用机制,对DR的防治具有重要意义。因此本文就相关研究发展做一综述。 展开更多
关键词 线粒体功能障碍 氧化应激 糖尿病视网膜病变 海马细胞能量代谢实时测定
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不同干燥方式下海马干燥特性及其数学模型 被引量:8
3
作者 吴靖娜 陈晓婷 +3 位作者 潘南 廖登远 张锦花 刘智禹 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第12期133-142,共10页
采用热风干燥、真空干燥和冷风干燥对海马进行干燥,比较不同干燥工艺下海马的干燥特性、水分有效扩散系数以及活化能的区别,并建立海马的干燥动力学模型。获得了50℃、60℃、70℃、80℃、90℃及100℃条件下海马热风干燥特性曲线,50℃、6... 采用热风干燥、真空干燥和冷风干燥对海马进行干燥,比较不同干燥工艺下海马的干燥特性、水分有效扩散系数以及活化能的区别,并建立海马的干燥动力学模型。获得了50℃、60℃、70℃、80℃、90℃及100℃条件下海马热风干燥特性曲线,50℃、60℃、70℃、80℃及90℃条件下海马真空干燥特性曲线,20℃、30℃及40℃条件下海马冷风干燥特性曲线。以R^2、χ^2和RMSE为评价指标,选用13种典型干燥模型对海马的干燥曲线进行拟合,结果表明Page模型和Midilli模型最适合描述海马热风干燥过程;Page模型和Weibull模型可以准确描述海马真空干燥过程;Page模型、Logarithmic模型和Weibull模型可以很好的描述海马冷风干燥过程。海马热风干燥、真空干燥及冷风干燥的有效水分扩散系数D(eff)分别在1.1714×10^-10m^2/s^6.7873×10^-10m^2/s、4.9252×10^-10m^2/s^10.4920×10^-10m^2/s和2.3510×10^-10m^2/s^4.0174×10^-10m^2/s区间内,活化能分别为37.05 k J/mol、18.75 k J/mol和20.55 k J/mol。 展开更多
关键词 海马 干燥动力学 数学模型 水分有效扩散系数 活化能
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海马改善斑马鱼慢性应激所致抑郁样行为和病理变化的机制 被引量:2
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作者 邓淑怡 王佳佳 +3 位作者 张永平 钟绮媚 杨志友 宋采 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期520-525,共6页
目的探究海洋中药海马对慢性不可预测温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)诱导的斑马鱼抑郁样模型的影响。方法将成年斑马鱼分为对照组、Stress组、Stress+低剂量(Stress+0.044%SH)、Stress+高剂量(Stress+0.22%SH)海马... 目的探究海洋中药海马对慢性不可预测温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)诱导的斑马鱼抑郁样模型的影响。方法将成年斑马鱼分为对照组、Stress组、Stress+低剂量(Stress+0.044%SH)、Stress+高剂量(Stress+0.22%SH)海马干预组,采用新环境水槽(novel tank test,NTT)鉴定抑郁样行为,Elisa检测皮质酮(cortisol)、白介素(interleukin,IL)-6和干扰素(interferon,IFN)-γ水平,高效液相色谱检测多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)及代谢产物含量,荧光定量PCR检测色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)-2、5-HT2A受体的mRNA表达水平。结果与对照组相比,Stress组在NTT中达到顶部的潜伏期明显延长,转移至顶部区域次数和顶部停留时间明显减少,cortisol和IL-6、IFN-γ蛋白水平明显上升,脑内DA和5-HT含量明显减少以及5-HT代谢率增加,同时5-HT2A mRNA表达上调,TPH2的mRNA表达下调;而低剂量的海马干预有效降低CUMS斑马鱼焦虑程度、减少cortisol和IL-6、IFN-γ浓度、增加单胺类神经递质水平和逆转5-HT能系统失调。结论海马可能通过抗炎和调节单胺类神经递质水平发挥抗抑郁效果。 展开更多
关键词 海马 抑郁症 慢性不可预测温和应激 斑马鱼 神经递质 炎症
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中国海域海马的物种多样性、生态特征及保护建议
5
作者 刘彩莲 张雄 +7 位作者 樊恩源 王松林 姜艳 林柏岸 房璐 李玉强 刘乐彬 刘敏 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期162-178,共17页
濒危野生动植物种国际贸易公约(CITES)于2002年将海马属(Hippocampus)所有物种列入附录II进行国际贸易监管。2021年2月,农业农村部和国家林业和草原局联合公布了调整后的《国家重点保护野生动物名录》,明确将中国海域海马属所有物种(野... 濒危野生动植物种国际贸易公约(CITES)于2002年将海马属(Hippocampus)所有物种列入附录II进行国际贸易监管。2021年2月,农业农村部和国家林业和草原局联合公布了调整后的《国家重点保护野生动物名录》,明确将中国海域海马属所有物种(野外种群)列为国家二级重点保护动物。尽管我国高度重视海马保护工作,但目前仍缺乏对各海区海马物种多样性以及重要生态学信息的汇总。本文通过文献资料整理,提供了最新的中国海域分布的16种海马名录,总结了其分布区域、栖息生境、繁殖特征等生态信息,并归纳了不同物种的濒危等级和主要威胁因素。在16种海马中,莫氏海马(H. mohnikei,又名日本海马)分布范围最为广泛,从渤海至南海均有出现。台湾地区、海南、广东、福建及广西沿岸海域的海马物种多样性较高。海马营底层生活,其栖息生境十分多样化,包括珊瑚礁、海草床、海藻场、红树林、碎石及砂泥质海床等。目前,海马野外种群所面临的主要威胁来自于渔业兼捕及栖息地破坏。为更好地保护海马野外种群,建议管理部门关注海马作为旗舰物种在海洋生态环境保护工作中的影响力,建立以海马及其栖息生境为主要保护目标的国家级自然保护区或采取其他有效的区域保护措施;加强海马保护公众宣传,着力解决海马兼捕问题;尽快启动全国范围的海马栖息地调查及种群数量评估工作,识别海马关键栖息地;提升贸易监管能力,规范海马利用管理,建立鉴别野生和养殖海马群体的关键技术,以期促进对我国海马野外种群的有效保护。 展开更多
关键词 海马 物种多样性 保护动物 分布 生境
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不同抗疟药物对红内期恶性疟原虫3D7线粒体呼吸的影响 被引量:3
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作者 马冀 崔钊 +4 位作者 王华晶 李硕 秦婷婷 李沧海 姜廷良 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第11期1201-1213,共13页
目的:利用Seahorse XFe96分析仪对6大类别共计13种国际一线抗疟药物作用于红内期恶性疟原虫3D7(Plasmodium falciparum 3D7)线粒体电子传递链(electron transport chain,ETC)进行评价。方法:采用三天抑制法和SYBR Green I荧光分析法对... 目的:利用Seahorse XFe96分析仪对6大类别共计13种国际一线抗疟药物作用于红内期恶性疟原虫3D7(Plasmodium falciparum 3D7)线粒体电子传递链(electron transport chain,ETC)进行评价。方法:采用三天抑制法和SYBR Green I荧光分析法对体外药物作用于P.falciparum 3D7的抗疟活性进行评价,采用磁珠分选技术对P.falciparum 3D7虫株进行分离纯化,采用Seahorse XF分析系统的线粒体耗氧率OCR值(Oxygen Consumption Rate)对P.falciparum 3D7线粒体不同时刻的生物能进行表征,进而考察不同抗疟药物对红内期恶性疟原虫线粒体有氧呼吸的影响。结果:流式检测结果显示,成功富集到虫期较为一致的滋养体期疟原虫。体外抗疟活性评价结果显示,除双胍类抗疟药物氯胍(proguanil,Pro)外,其余12种抗疟药物对P.falciparum 3D7的药效均为nmol/L级别。线粒体有氧呼吸考察的结果显示,双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)和氯喹(chloroquine,CQ)的5种浓度剂量(0.4、1、5、10、50×IC 50)对P.falciparum 3D7线粒体有氧呼吸均无明显影响。13种常用抗疟药物在5×IC 50浓度剂量下,青蒿素(artemisinin,ART)、蒿乙醚(arteether,ARE)和蒿甲醚(artemether,ARM)均能显著提高线粒体最大呼吸;奎宁(quinine,QN)和Pro仅对P.falciparum 3D7线粒体ETC的氧化磷酸化具有解偶联作用,未完全破坏线粒体ETC的功能;阿托伐醌(atovaquone,Ato)对P.falciparum 3D7线粒体有氧呼吸有明显的抑制作用,显著降低线粒体最大呼吸和质子的泄漏,完全破坏了线粒体ETC的功能;其余抗疟药物对P.falciparum 3D7线粒体有氧呼吸均无明显影响。结论:13种国际一线抗疟药物中大多数抗疟药物的靶标并非是疟原虫线粒体有氧呼吸的ETC通路。 展开更多
关键词 抗疟药物 恶性疟原虫 线粒体 有氧呼吸 seahorse XFe96
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海马活性成分提取技术研究进展 被引量:5
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作者 朱苗 谢勇 +1 位作者 卢忠英 李刚凤 《广州化工》 CAS 2015年第10期19-20,32,共3页
海马是我国名贵海洋中药材,具有调节免疫、抗病毒、抗氧化等功能,且安全无毒,具有良好的开发前景。现从化学组成及含量、生物活性、提取3个方面对海马的研究进展进行综述,探讨海马的开发前景,为海马的合理开发利用提供参考。
关键词 海马 成分 作用 提取 进展
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三七总皂苷对短暂性前脑缺血大鼠海马区神经元的修复作用实验研究 被引量:1
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作者 杨涛 刘勇 +4 位作者 曹兴华 梁艳山 柯雪茹 陈杰 马晓媛 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第7期803-808,共6页
目的:探讨三七总皂苷对短暂性前脑缺血大鼠海马区神经元的修复作用。方法:选择30只SD大鼠,随机分为三七总皂苷组、模型组、假手术组,每组10只。模型组、三七总皂苷组使用四血管闭塞建立短暂性前脑缺血大鼠动物模型。假手术组手术方式同... 目的:探讨三七总皂苷对短暂性前脑缺血大鼠海马区神经元的修复作用。方法:选择30只SD大鼠,随机分为三七总皂苷组、模型组、假手术组,每组10只。模型组、三七总皂苷组使用四血管闭塞建立短暂性前脑缺血大鼠动物模型。假手术组手术方式同三七总皂苷组,不做卡环夹闭、电灼永久性闭塞,仅将右侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉暴露,之后逐层缝合。三七总皂苷组造模后灌胃给予50 mg/kg三七总皂苷,每天2次,每次间隔12 h,模型组、假手术组灌胃给予等量的0.5%羟甲基纤维素钠。对比三组干预后7、14、28 d的海马神经细胞凋亡、新生神经元数量,对比三组大鼠的学习记忆能力,对比三组干预后7、14、28 d时测量大鼠脑梗死体积及含水量,对比三组DCX/NeuN染色阳性的细胞数量。结果:模型组干预后7、14、28 d的海马神经细胞凋亡明显较三七总皂苷组、假手术组高(均P<0.05);三七总皂苷组干预后7、14、28 d的海马神经细胞凋亡明显较假手术组高(均P<0.05);三七总皂苷组干预后7、14、28 d的海马新生神经元明显较模型组、假手术组高(均P<0.05);干预后7、14、28 d的模型组新生神经元明显较假手术组高(均P<0.05);三七总皂苷组中,随着干预时间延长,海马神经细胞凋亡明显降低,新生神经元明显升高(均P<0.05)。模型组大鼠的潜伏期、错误次数、第1记忆错误次数、第1天学习错误次数、第5天记忆错误次数、第5天学习错误次数明显较三七总皂苷组、假手术组高(均P<0.05),三七总皂苷组大鼠的潜伏期、错误次数、第1天记忆错误次数、第1天学习错误次数、第5天记忆错误次数、第5天学习错误次数明显较假手术组高(均P<0.05)。三七总皂苷组中,随着干预时间延长,第1天记忆错误次数、第1天学习错误次数、第5天记忆错误次数、第5天学习错误次数明显降低(均P<0.05)。模型组的脑梗死体积、 展开更多
关键词 三七总皂苷 短暂性前脑缺血 海马 神经元 修复 大鼠
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海马真空冷冻干燥特性及其动力学模型 被引量:5
9
作者 吴靖娜 陈晓婷 +3 位作者 刘智禹 廖登远 黄鹭强 陈由强 《渔业研究》 2019年第5期404-408,共5页
采用真空冷冻干燥法对海马进行干燥,并对其干燥特性和水分有效扩散系数进行研究,建立海马干燥动力学模型。根据海马真空冷冻干燥曲线可知,干燥25 h达到干燥终点,干燥过程的有效水分扩散系数为2.442 3×10^-10 m^2/s。通过比较分析8... 采用真空冷冻干燥法对海马进行干燥,并对其干燥特性和水分有效扩散系数进行研究,建立海马干燥动力学模型。根据海马真空冷冻干燥曲线可知,干燥25 h达到干燥终点,干燥过程的有效水分扩散系数为2.442 3×10^-10 m^2/s。通过比较分析8种经典数学模型的拟合情况,确定Page模型最适合用来描述海马真空冷冻干燥的过程,其决定系数R^2、卡方检验值χ^2和均方根误差RMSE分别为0.999 4、5.961 9×10^-5和2.090 0×10^-4。本结果可为海马真空冷冻干燥的生产应用提供参考。 展开更多
关键词 海马 真空冷冻干燥 干燥动力学 水分有效扩散系数
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海马抗氧化活性肽制备工艺研究 被引量:5
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作者 吴靖娜 陈晓婷 +3 位作者 苏捷 廖登远 刘智禹 陈由强 《中国农学通报》 2017年第32期127-134,共8页
旨在建立海马寡肽的制备工艺,探究寡肽的抗氧化活性。采用酶解法将海马原料制备成海马蛋白酶解肽,将游离氨基酸含量、DPPH·清除率及还原力作为考核指标,在获得制备海马酶解寡肽的最佳蛋白酶的基础上,选取酶添加量、pH、酶解温度及... 旨在建立海马寡肽的制备工艺,探究寡肽的抗氧化活性。采用酶解法将海马原料制备成海马蛋白酶解肽,将游离氨基酸含量、DPPH·清除率及还原力作为考核指标,在获得制备海马酶解寡肽的最佳蛋白酶的基础上,选取酶添加量、pH、酶解温度及时间为因素,通过单因素和正交试验设计制备海马蛋白酶解肽,对其酶解工艺进行优化。最终获得海马抗氧化活性肽的最佳工艺条件为:风味蛋白酶添加量6000 U/g,酶解温度45℃,酶解时间9 h;在此工艺条件下,酶解产物的游离氨基酸含量为4.198 mg/m L,DPPH·清除率为92.758%,还原力为1.091。试验获得制备海马抗氧化活性肽最优酶解工艺,为进一步研发成保健食品提供坚实的基础。 展开更多
关键词 海马 抗氧化肽 酶解
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Evolutionary traits and functional roles of chemokines and their receptors in the male pregnancy of the Syngnathidae 被引量:1
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作者 Han Jiang Zhanwei Zhao +2 位作者 Haiyan Yu Qiang Lin Yali Liu 《Marine Life Science & Technology》 SCIE CSCD 2023年第4期500-510,共11页
Vertebrates have developed various modes of reproduction,some of which are found in Teleosts.Over 300 species of the Syngnathidae(seahorses,pipefishes and seadragons)exhibit male pregnancies;the males have specialized... Vertebrates have developed various modes of reproduction,some of which are found in Teleosts.Over 300 species of the Syngnathidae(seahorses,pipefishes and seadragons)exhibit male pregnancies;the males have specialized brood pouches that provide immune protection,nourishment,and oxygen regulation.Chemokines play a vital role at the mammalian maternal–fetal interface;however,their functions in fish reproduction are unclear.This study revealed the evolutionary traits and potential functions of chemokine genes in 22 oviparous,ovoviviparous,and viviparous fish species through comparative genomic analyses.Our results showed that chemokine gene copy numbers and evolutionary rates vary among species with different modes of reproduction.Syngnathidae lost cxcl13 and cxcr5,which are involved in key receptor–ligand pairs for lymphoid organ development.Notably,Syngnathidae have site-specific mutations in cxcl12b and ccl44,suggesting immune function during gestation.Moreover,transcriptome analysis revealed that chemokine gene expression varies among Syngnathidae species with different types of brood pouches,suggesting adaptive variations in chemokine functions among seahorses and their relatives.Furthermore,challenge experiments on seahorse brood pouches revealed a joint immune function of chemokine genes during male pregnancy.This study provides insights into the evolutionary diversity of chemokine genes associated with different reproductive modes in fish. 展开更多
关键词 Reproductive mode Immune response seahorse Brood pouch
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基于能量代谢分析益气解毒方对缺氧损伤的PC12细胞线粒体保护作用的机制 被引量:1
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作者 戴玉豪 刘黎明 +3 位作者 刘陈 吴文洁 沈建英 李韶菁 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期34-41,共8页
目的:采用Seahorse细胞能量代谢分析仪,通过缺氧损伤的高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)建立一种线粒体能量代谢评价方法并探究益气解毒方的线粒体保护作用。方法:应用缺氧小室体外构建PC12细胞损伤模型,实验设置空白组,模型组(Mod... 目的:采用Seahorse细胞能量代谢分析仪,通过缺氧损伤的高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)建立一种线粒体能量代谢评价方法并探究益气解毒方的线粒体保护作用。方法:应用缺氧小室体外构建PC12细胞损伤模型,实验设置空白组,模型组(Model),益气解毒方高、中、低剂量组(25,5,1μmol·L^(-1);YQ高、中、低)及阳性药曲美他嗪组(TMZ),每组3复孔,实验重复3次。采用建立的能量代谢分析方法对细胞线粒体复合物活性进行检测,筛选最佳给药浓度;随后设置益气解毒方全方及各拆方组,采用Seahorse细胞能量代谢分仪检测有氧呼吸和糖酵解功能;根据非线粒体呼吸值,质子漏值,基础呼吸值,最大呼吸值,ATP生成量,可提升呼吸能力检测值,通过主成份分析(PCA)和变量重要性指标(VIP),分析评价益气解毒方不同配伍组对缺氧损伤线粒体有氧呼吸作用效果;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞色素C(Cytochrome C),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:与其他浓度组比较,FCCP的最佳给药浓度为2μmol·L^(-1);与模型组比较,5μmol·L^(-1)益气解毒方全方能提升线粒体复合物活性(P<0.05);与模型组比较,益气解毒方全方改善效果较好(P<0.01);在各拆方组中,人参皂苷和栀子苷配伍效果较好(P<0.01);VIP分析结果显示,对于线粒体呼吸功能改善,益气解毒方中栀子苷贡献度最大;与模型组比较,益气解毒方中、高剂量组线粒体细胞色素C的渗漏显著减少(P<0.01),Bax蛋白的表达显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:建立了一种细胞水平、高通量线粒体能量代谢多指标定量评价方法,证明了益气解毒方全方能够显著改善缺氧损伤后PC12细胞线粒体能量代谢障碍,而发挥这一作用的机制可能与线粒体凋亡保护相关。 展开更多
关键词 益气解毒方 配伍 seahorse 线粒体能量代谢 缺氧模型
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细胞能量代谢分析法评价对乙酰氨基酚对人肝细胞线粒体有氧呼吸的毒性作用 被引量:2
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作者 李梅 刘宁 +1 位作者 张凡 孙华 《中国药物警戒》 2019年第4期193-198,207,共7页
目的利用Seahorse XF^e24海马细胞能量代谢分析系统分析对乙酰氨基酚(APAP)对人肝细胞线粒体有氧呼吸的整体影响,为APAP在能量代谢角度的毒性防控及毒性机制研究提供方法学的参考。方法体外培养人肝细胞系(HepG2),分别以1、2、4、8、16 ... 目的利用Seahorse XF^e24海马细胞能量代谢分析系统分析对乙酰氨基酚(APAP)对人肝细胞线粒体有氧呼吸的整体影响,为APAP在能量代谢角度的毒性防控及毒性机制研究提供方法学的参考。方法体外培养人肝细胞系(HepG2),分别以1、2、4、8、16 mM APAP处理细胞24 h,MTT法检测细胞增殖情况,倒置显微镜观察细胞形态;BCA法定蛋白含量。采用Seahorse XF^e24海马细胞能量代谢分析系统建立HepG2细胞实验方法,并检测不同浓度APAP对人肝细胞线粒体有氧呼吸的影响和特点。结果 Seahorse XF^e24海马细胞能量代谢分析系统检测HepG2细胞能量代谢的最佳条件为:24孔板细胞密度2×10~4/孔,FCCP浓度为2μM。MTT结果中对人肝细胞增殖有显著抑制作用的APAP(4、8、16 mM)能干扰人肝细胞的线粒体有氧呼吸,其中4、8 mM APAP有降低肝细胞基础呼吸和ATP生成的趋势,16 mM APAP能显著抑制肝细胞的基础呼吸、最大呼吸和ATP合成。结论高剂量APAP(16 mM)在人肝细胞活细胞体系中能够显著抑制细胞能量代谢,对活细胞线粒体有氧呼吸显示显著毒性作用。 展开更多
关键词 对乙酰氨基酚 seahorse XFe24 线粒体有氧呼吸 肝毒性
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Impaired tricarboxylic acid cycle flux and mitochondrial aerobic respiration during isoproterenol induced myocardial ischemia is rescued by bilobalide 被引量:4
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作者 Zhe Wang Fan Zhang +3 位作者 Wei Liu Ning Sheng Hua Sun Jinlan Zhang 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期764-775,共12页
There is an urgent need to elucidate the pathogenesis of myocardial ischemia(MI)and potential drug treatments.Here,the anti-MI mechanism and material basis of Ginkgo biloba L.extract(GBE)were studied from the perspect... There is an urgent need to elucidate the pathogenesis of myocardial ischemia(MI)and potential drug treatments.Here,the anti-MI mechanism and material basis of Ginkgo biloba L.extract(GBE)were studied from the perspective of energy metabolism flux regulation.Metabolic flux analysis(MFA)was performed to investigate energy metabolism flux disorder and the regulatory nodes of GBE components in isoproterenol(ISO)-induced ischemia-like cardiomyocytes.It showed that[U-13 C]glucose derived m+2 isotopologues from the upstream tricarboxylic acid(TCA)cycle metabolites were markedly accumulated in ISO-injured cardiomyocytes,but the opposite was seen for the downstream metabolites,while their total cellular concentrations were increased.This indicates a blockage of carbon flow from glycolysis and enhanced anaplerosis from other carbon sources.A Seahorse test was used to screen for GBE components with regulatory effects on mitochondrial aerobic respiratory dysfunction.It showed that bilobalide protected against impaired mitochondrial aerobic respiration.MFA also showed that bilobalide significantly modulated the TCA cycle flux,reduced abnormal metabolite accumulation,and balanced the demand of different carbon sources.Western blotting and PCR analysis showed that bilobalide decreased the enhanced expression of key metabolic enzymes in injured cells.Bilobalide’s efficacy was verified by in vivo experiments in rats.This is the first report to show that bilobalide,the active ingredient of GBE,protects against MI by rescuing impaired TCA cycle flux.This provides a new mechanism and potential drug treatment for MI.It also shows the potential of MFA/Seahorse combination as a powerful strategy for pharmacological research on herbal medicine. 展开更多
关键词 BILOBALIDE Isoproterenol-induced myocardial ischemia Tricarboxylic acid cycle Stable isotopic tracing metabolic flux analysis seahorse test
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盐度变化对灰海马仔鱼存活及生长的影响 被引量:4
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作者 杨琳 林听听 +3 位作者 刘鑫 张东 来琦芳 么宗利 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2017年第6期657-664,共8页
为研究低盐胁迫对灰海马(Hippocampus erectus)存活和生长的影响,进行了3个实验,即:1)盐度突变实验,分别直接将1日龄和20日龄仔鱼从自然海水(32)移到盐度17和10的水中,观察死亡情况;2)盐度渐变实验,渐变速率分别为0、5 ppt·d^(-1)... 为研究低盐胁迫对灰海马(Hippocampus erectus)存活和生长的影响,进行了3个实验,即:1)盐度突变实验,分别直接将1日龄和20日龄仔鱼从自然海水(32)移到盐度17和10的水中,观察死亡情况;2)盐度渐变实验,渐变速率分别为0、5 ppt·d^(-1)、10 ppt·d^(-1),仔鱼规格分别为1日龄、20日龄、40日龄,观察死亡情况以探明灰海马的耐盐低限;3)不同盐度(14、21、32)对灰海马生长的影响。结果表明:1)盐度突变15个单位对灰海马仔鱼存活基本无影响,突变22个单位对20日龄仔鱼无明显影响,但1日龄苗5 d内相继死亡;2)不同盐度渐变速率对灰海马仔鱼存活率的影响没有显著性差异,而不同规格(1日龄、10日龄、40日龄)仔鱼对低限盐度的耐受性则略有差异,但7是低限,盐度低于7时即出现死亡;3)生长实验结果显示,灰海马仔鱼在盐度14条件生长、存活显著优于另两个盐度组(21、32),灰海马仔鱼在盐度14、21、32养殖40 d后存活率依次为(82.9±4.02)%、(72.0±4.23)%、(61.7±7.73)%。本研究结果表明,灰海马是广盐性鱼类,可以适应低盐环境。在养殖生产中,如有条件,可将盐度控制在14左右,能有效提高其存活率并促进生长。 展开更多
关键词 盐度胁迫 灰海马 存活 生长
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基于氧化石墨烯荧光传感技术对中药海马的鉴定
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作者 钟洪金 任九卓林 +1 位作者 张灵迂 侯飞侠 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期185-193,共9页
目的:建立基于氧化石墨烯荧光传感技术鉴定中药海马的方法,为中药鉴定提供一个新的研究思路。方法:在小海马特异性上游引物Ja-F的5’端标记荧光基团FAM作为核酸探针FAM-单链DNA(ssDNA),在下游引物Ja-R的5’端加上RNA聚合酶Ⅱ的识别位点... 目的:建立基于氧化石墨烯荧光传感技术鉴定中药海马的方法,为中药鉴定提供一个新的研究思路。方法:在小海马特异性上游引物Ja-F的5’端标记荧光基团FAM作为核酸探针FAM-单链DNA(ssDNA),在下游引物Ja-R的5’端加上RNA聚合酶Ⅱ的识别位点记为Ja-R1,用Ja-F/Ja-R1扩增海马样品,利用体外转录法对扩增产物进行反转录获得小海马ssDNA。取500 nmol·L^(-1)FAM-ssDNA 20μL,90℃孵育5 min,逐渐冷却至室温,加入不同体积的氧化石墨烯溶液(100 mg·L^(-1))和三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲液(pH 7.6,50 mmol·L^(-1)),使反应终体积为1 mL,混匀,室温避光放置不同时间后测荧光强度,筛选制备传感器的最佳氧化石墨烯浓度和反应时间。再加入探针互补序列FAM-ssDNA-match溶液,室温放置不同时间后测荧光值,筛选荧光恢复的最适反应时间并检测传感器可行性。向核酸探针-氧化石墨烯溶液中分别加入ddH2O和不同浓度的小海马ssDNA进行灵敏度检测,最后根据最佳实验条件对市售海马药材进行检测,验证该方法用于中药材基原鉴定的可行性。结果:构建鉴别小海马的核酸探针-氧化石墨烯生物传感器条件为1 mL反应体积中,10 nmol·L^(-1)FAM-ssDNA+12 mg·L^(-1)氧化石墨烯溶液,室温避光反应20 min,可彻底淬灭探针荧光。传感器可行性检测显示,当向传感器溶液中加入探针互补序列溶液(终浓度90 nmol·L^(-1)),室温反应1 h后,体系的荧光信号明显增强。灵敏度检测显示,该方法能够检测到的小海马ssDNA的最低质量浓度约为10 mg·L^(-1)。将该方法用于检测市售海马药材,发现只有小海马样品有明显的荧光信号。结论:该实验建立的氧化石墨烯荧光传感技术可用于中药海马的基原鉴定。 展开更多
关键词 氧化石墨烯荧光传感技术 核酸探针 海马 鉴定 单链DNA(ssDNA)
原文传递
DNA条形码技术在海马物种鉴定中的应用分析
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作者 曾韵颖 陈信忠 +3 位作者 朱黄鑫 龚艳清 郭书林 叶鹏 《现代农业科技》 2023年第16期176-180,184,共6页
海马具有重要的药用和观赏价值,但因其可供鉴定的形态特征较少,应用形态学对海马进行种水平的鉴定时经常会遇到很多困难。DNA条形码技术为海马物种鉴定提供了重要的鉴定方法。通过检索生命条形码数据库(BOLD)和GenBank数据库中海马的DN... 海马具有重要的药用和观赏价值,但因其可供鉴定的形态特征较少,应用形态学对海马进行种水平的鉴定时经常会遇到很多困难。DNA条形码技术为海马物种鉴定提供了重要的鉴定方法。通过检索生命条形码数据库(BOLD)和GenBank数据库中海马的DNA条形码信息,应用MEGA软件计算海马种间遗传距离,分析DNA条形码在海马物种鉴定中的应用效果。结果表明,COI基因条码可以有效鉴别大部分种以上阶元的海马,但对亲缘关系较近的海马难以获得准确的鉴定结果。还有一些海马尚无相关的基因信息,也无法通过基因条形码进行鉴别。因此,应用DNA条形码鉴定海马物种尚有一定的局限性。 展开更多
关键词 海马 DNA条形码 物种鉴定 基因信息
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利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对线粒体功能的影响
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作者 李晓栩 崔宇 +6 位作者 阳一栋 周晓英 矫力 王辰元 杨诚忠 史诗 黄缄 《局解手术学杂志》 2022年第4期284-291,共8页
目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、400... 目的利用Seahorse XF-96探讨不同细胞浓度和血清对HUVEC细胞和U87细胞线粒体功能的影响。方法利用细胞线粒体应激试剂盒,在不同浓度的HUVEC细胞和U87细胞中加入抑制剂(寡霉素、解偶联剂、鱼藤酮和抗霉素A),根据细胞浓度分为2000组、4000组、6000组和8000组,根据有无血清和不同的解偶联剂浓度分为血清+低解偶联剂组、血清+高解偶联剂组、无血清+低解偶联剂组和无血清+高解偶联剂组。在Seahorse XF-96中测定线粒体的耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR),并比较HUVEC细胞和U87细胞各组线粒体的基础氧耗、质子漏、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、储备的呼吸能力、三磷酸腺苷(ATP)生成能力、线粒体呼吸潜力和偶联效率;比较HUVEC细胞和U87细胞之间上述指标的差异;观察血清和解偶联剂浓度对HUVEC细胞线粒体功能的影响。结果在HUVEC细胞和U87细胞中,2000组OCR显著低于4000组、6000组和8000组(P<0.01);2000组的ECAR显著低于4000组(P<0.01),4000组显著低于6000组和8000组(P<0.01)。在HUVEC细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、储备的呼吸能力、ATP生成能力和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组非线粒体的氧耗和质子漏增强(P<0.05);在U87细胞中,与2000组比较,6000组和8000组的基础氧耗、非线粒体的氧耗和最大呼吸能力增强(P<0.05),8000组ATP生成能力、储备的呼吸能力和质子漏增强(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组间线粒体的偶联效率和线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。U87细胞8000组的质子漏高于HUVEC细胞(P<0.05);HUVEC细胞2000组、6000组和8000组的偶联效率高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞6000组的ATP生成能力和储备的呼吸能力高于U87细胞(P<0.05);HUVEC细胞和U87细胞各组基础氧耗、最大呼吸能力、非线粒体的氧耗、线粒体呼吸潜力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。血清+低解偶联剂组储备的呼吸能� 展开更多
关键词 线粒体 能量代谢 氧耗 seahorse
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基于能量代谢系统评价延胡索乙素对人肝癌细胞的影响 被引量:1
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作者 尹逊哲 刘作家(指导) 郭焱(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期426-430,共5页
目的:利用Seahorse XFp体外细胞能量代谢分析系统探讨延胡索乙素(THP)对人肝癌(HCC)SMMC-7721细胞能量代谢的影响。方法:不同浓度的THP作用SMMC-7721细胞后,CCK-8法检测THP对SMMC-7721细胞增殖的影响;采用Seahorse XFp细胞能量代谢分析... 目的:利用Seahorse XFp体外细胞能量代谢分析系统探讨延胡索乙素(THP)对人肝癌(HCC)SMMC-7721细胞能量代谢的影响。方法:不同浓度的THP作用SMMC-7721细胞后,CCK-8法检测THP对SMMC-7721细胞增殖的影响;采用Seahorse XFp细胞能量代谢分析系统检测THP对SMMC-7721细胞线粒体呼吸和糖酵解的影响;优化Seahorse XFp细胞能量代谢分析系统检测SMMC-7721细胞线粒体压力(OCR)和糖酵解条件;流式细胞术检测THP诱导SMMC-7721细胞的凋亡率及细胞周期;Western blot检测SMMC-7721细胞中caspase-3、caspase-9及cytochrome c蛋白的表达差异。结果:THP处理后的SMMC-7721细胞增殖明显受到抑制,且具有时间和剂量效应关系;OCR最优条件为:葡糖糖浓度2.5 mol/L、谷氨酰胺0.2 mol/L、丙酮酸钠0.1 mol/L,寡霉素1μmol/L、FCCP 1μmol/L、鱼藤酮0.5μmol/L;ECAR最优条件为:葡糖糖10 mmol/L、寡霉素10μmol/L、2-DG 50 mmol/L。THP(150μg/ml)作用SMMC-7721细胞24 h后,线粒体呼吸作用被抑制,线粒体基础呼吸、ATP产量及最大呼吸能力均下降;同时抑制糖酵解作用,糖酵解能力、最大糖酵解能力及糖酵解储备均下降;流式细胞术结果显示细胞凋亡率升高,G1期细胞增多,且阻滞在G1期;同时,caspase-9及cytochrome c蛋白表达水平显著升高,形成凋亡小体上调caspase-3表达。结论:THP显著抑制人HCC细胞SMMC-7721的线粒体呼吸和糖酵解作用,延缓细胞周期进程,诱导线粒体途径的细胞凋亡。 展开更多
关键词 延胡索乙素 人肝癌SMMC-7721细胞 seahorse XFp 氧化磷酸化 糖酵解
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海马病原菌的分离鉴定及其对抗生素敏感性的研究 被引量:3
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作者 杨弘诣 杨为东 +3 位作者 赵文 腾力平 张国辉 程刚 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2006年第2期131-133,共3页
从患病海马Hippocampus kelloggi体内分离到3株菌株,用分离菌株的纯培养物感染健康海马,48 h内海马全部发病,其临床症状与原患病海马相似,经形态学、生化和室内感染试验,鉴定该菌株为副溶血弧菌Vibrio parahem olyticus。药敏试验结果表... 从患病海马Hippocampus kelloggi体内分离到3株菌株,用分离菌株的纯培养物感染健康海马,48 h内海马全部发病,其临床症状与原患病海马相似,经形态学、生化和室内感染试验,鉴定该菌株为副溶血弧菌Vibrio parahem olyticus。药敏试验结果表明,所分离菌株对链霉素、利福平、卡那霉素、环丙沙星、氟派酸、四环素、复达欣、菌必治、奈定酸等抗菌药表现为高敏感性;对红霉素、新霉素、先锋霉素Ⅵ、强力霉素、新生霉素、头孢呋肟、呋喃妥因等药物敏感性较高;对氨苄青霉素、羟苄青霉素、头孢氨苄、林可霉素等药物敏感性较差。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 分离鉴定 药敏试验 海马
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