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血管内皮细胞衰老过程中S1P2受体表达和细胞功能改变的相关性 被引量：3
1
作者 闾宏伟 陈淑华 +5 位作者 阳国平 袁洪 邓昊 邢晓为 黄志军 向红 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期404-406,共3页
目的研究衰老血管内皮细胞的功能和S1P2受体表达的相关性。方法采用RT-PCR和Western印迹检测年轻、中年和衰老内皮细胞的S1P2受体的表达;运用细胞跨膜迁移实验分析内皮细胞的趋化性,以及采用种植在Matrigel胶上的内皮细胞的形态发生实验... 目的研究衰老血管内皮细胞的功能和S1P2受体表达的相关性。方法采用RT-PCR和Western印迹检测年轻、中年和衰老内皮细胞的S1P2受体的表达;运用细胞跨膜迁移实验分析内皮细胞的趋化性,以及采用种植在Matrigel胶上的内皮细胞的形态发生实验,评价内皮细胞体外血管新生反应。结果S1P2受体在衰老内皮细胞中的表达显著上调(P<0.05);S1P刺激能增加内皮细胞的迁移,但衰老组迁移率明显低于其他组(P<0.05);Matrigel种植方法评价内皮细胞体外血管生成实验显示,S1P能刺激内皮细胞形成管状样结构,且衰老内皮细胞形成管状样结构的能力明显减弱(P<0.05)。结论S1P通过S1P2受体介导而影响内皮细胞的功能,且衰老内皮细胞的S1P2受体表达上调与内皮细胞迁移及血管生成能力等功能下调改变相关联。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 衰老 S1p2受体
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S1P2受体shRNA腺病毒载体的构建及筛选 被引量：2
2
作者 闾宏伟 陈淑华 +3 位作者 阳国平 朱晒红 邓昊 邢晓为 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期513-516,共4页
目的为探讨S1P2受体介导血管内皮细胞衰老的机制,构建和筛选特异性S1P2受体shRNA腺病毒载体。方法设计并合成4对靶向S1P2受体的单链寡核苷酸(ssoligo),经变性退火为双链寡核苷酸(dsoligo)插入穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle载体,测序正确... 目的为探讨S1P2受体介导血管内皮细胞衰老的机制,构建和筛选特异性S1P2受体shRNA腺病毒载体。方法设计并合成4对靶向S1P2受体的单链寡核苷酸(ssoligo),经变性退火为双链寡核苷酸(dsoligo)插入穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle载体,测序正确后经脂质体介导转染人肺动脉内皮细胞(HPAEC),通过RT-PCR方法筛选对S1P2受体基因沉默效果最佳的穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle-shRNA,提取质粒DNA,经双酶切,回收S1P2受体基因沉默效果最佳的shRNA片段,亚克隆到腺病毒表达载体(pAdeno-X),筛选出正确重组子,转染HEK293A细胞,收集重组的腺病毒,测定病毒滴度,通过Westernblot方法检测S1P2受体沉默效果。结果测序结果证实所构建的pRNAT-H1.1/Shuttle-shRNA质粒正确,并从4对dsoligos筛选出对S1P2受体沉默效果最佳的穿梭质粒pRNAT-H1.1/Shuttle-shRNA,经亚克隆到腺病毒表达载体。转染人肺动脉内皮细胞后,Western印迹检测显示构建的腺病毒载体pAdeno-shRNA对S1P2受体蛋白的沉默有明显效果。结论成功地构建和筛选出介导特异性shRNA-S1P2的重组腺病毒。 展开更多
关键词 重组腺病毒 S1p2受体 短发夹RNA 人肺动脉内皮细胞
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衰老血管内皮细胞增殖和凋亡与S1P2受体表达的关系
3
作者 闾宏伟 陈淑华 +5 位作者 黄利华 向红 阳国平 邓昊 黄志军 袁洪 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期3519-3521,共3页
目的研究衰老血管内皮细胞增殖和凋亡与S1P2受体表达的相关性。方法采用RT-PCR检测年轻(Y)、中年(I)和衰老(S)内皮细胞的S1P2受体的表达;运用MTT法和流式细胞术(FCA)分别检测年轻(Y)、中年(I)和衰老(S)内皮细胞的增殖和凋亡。结果 S1P2... 目的研究衰老血管内皮细胞增殖和凋亡与S1P2受体表达的相关性。方法采用RT-PCR检测年轻(Y)、中年(I)和衰老(S)内皮细胞的S1P2受体的表达;运用MTT法和流式细胞术(FCA)分别检测年轻(Y)、中年(I)和衰老(S)内皮细胞的增殖和凋亡。结果 S1P2受体mRNA在衰老内皮细胞中的表达显著上调(P<0.01);衰老内皮细胞的增殖能力显著下调(P<0.01);衰老内皮细胞凋亡明显增加(P<0.01)。结论衰老内皮细胞的S1P2受体表达上调与内皮细胞的增殖和凋亡改变相关联。 展开更多
关键词 内皮细胞 衰老 增殖 凋亡 S1p2受体
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