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牦牛S100A12基因的克隆及其在生殖器官中表达情况的检测 被引量:2
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作者 曹随忠 崔亚飞 +5 位作者 姚学萍 雍康 杨德英 沈留红 余树民 刘宗平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期177-183,共7页
为了解S100A12基因在牦牛生殖器官中的表达情况,采用RT-PCR技术从牦牛脾组织中扩增S100A12基因序列,用半定量RT-PCR技术和免疫组织化学染色方法分别检测S100A12基因mRNA和S100A12蛋白在牦牛脾、淋巴结、乳腺及生殖器官中的表达。结果显... 为了解S100A12基因在牦牛生殖器官中的表达情况,采用RT-PCR技术从牦牛脾组织中扩增S100A12基因序列,用半定量RT-PCR技术和免疫组织化学染色方法分别检测S100A12基因mRNA和S100A12蛋白在牦牛脾、淋巴结、乳腺及生殖器官中的表达。结果显示,克隆的牦牛S100A12基因序列片段大小为279bp,包含一个完整开放阅读框(ORF),推导编码92个氨基酸;S100A12mRNA和蛋白在脾中表达量相对最高,在睾丸、附睾、淋巴结、乳腺、卵巢中相对强表达,在阴茎、阴道、子宫(子宫角、子宫体和子宫颈)中相对弱表达。结果表明,S100A12mRNA和蛋白在牦牛生殖器官中均有不同程度的表达,提示其在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。 展开更多
关键词 牦牛 S100A12基因 组织表达
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奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析
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作者 曹随忠 雍康 +4 位作者 姚学萍 崔亚飞 杨德英 余树民 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期849-854,共6页
克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达。采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化。SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白... 克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达。采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化。SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白形式表达,表达量占菌体总蛋白的46.7%,纯化的重组蛋白(80mg/L)。琼脂扩散法测定重组蛋白对乳腺炎主要致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性。结果显示:重组蛋白对大肠杆菌有抗菌活性,而对金黄色葡萄球菌无抗菌活性。本研究为S100A12蛋白抗体制备及基因功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 奶牛 乳房炎 S100A12基因 原核表达 抗菌活性
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