固定化酵母非水相催化羰基不对称还原反应的研究 被引量：14

1

作者 何成 许建和 +1 位作者 刘幽燕 庄英萍 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期632-635,共4页

用海藻酸钙包埋法对增殖培养的酵母细胞进行了固定化 ,并用于催化有机溶剂中乙酰乙酸乙酯的不对称还原反应。考察了固定化时所用缓冲溶液的pH、催化剂颗粒大小与用量、辅助底物种类、底物浓度、以及重复利用批次等因素对反应产物 (S) 3... 用海藻酸钙包埋法对增殖培养的酵母细胞进行了固定化 ,并用于催化有机溶剂中乙酰乙酸乙酯的不对称还原反应。考察了固定化时所用缓冲溶液的pH、催化剂颗粒大小与用量、辅助底物种类、底物浓度、以及重复利用批次等因素对反应产物 (S) 3 羟基丁酸乙酯的浓度和光学纯度的影响。结果表明 ,固定化时应采用pH为 7的Tris HCl缓冲溶液 ,颗粒的直径以 2mm左右为较佳 ;反应时应以正己烷为溶剂 ,正己醇为辅助底物 ,固定化酵母颗粒的最适用量为 6g/ 2 0ml反应液 ;底物的初始浓度以 10 0mmol/L为佳 ,浓度过高对反应有一定的抑制作用 ; 展开更多

关键词 固定化酵母 乙酵乙酸乙酯 (S)-3-羟基丁酸乙酯 不对称还原 非水相系统 羰基 催化性能

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有效控制活性酵母细胞催化β-羰基酯不对称还原反应立体选择性的研究 被引量：12

2

作者 杨忠华 姚善泾 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期805-808,共4页

以 4 氯乙酰乙酸乙酯为 β 羰基酯的模型底物 ,对面包酵母催化其不对称还原反应立体选择性的控制进行了研究 .实验发现 ,利用诸如烯丙基醇和烯丙基溴等酶抑制剂对面包酵母进行预处理 ,可以控制反应的立体选择性 .用烯丙基醇预处理面包... 以 4 氯乙酰乙酸乙酯为 β 羰基酯的模型底物 ,对面包酵母催化其不对称还原反应立体选择性的控制进行了研究 .实验发现 ,利用诸如烯丙基醇和烯丙基溴等酶抑制剂对面包酵母进行预处理 ,可以控制反应的立体选择性 .用烯丙基醇预处理面包酵母时可以提高S型产物的立体选择性 ;用烯丙基溴预处理时 ,可以使反应的立体选择性从通常的S型产物转变为R型产物 .立体选择性随着预处理时抑制剂浓度的增大和处理时间的延长而提高 .合适的预处理条件可使S型和R型产物的ee值分别达到 95 %和 98% . 展开更多

关键词 不对称还原 手性醇 酵母 活性细胞生物催化 4-氯乙酰乙酸乙酯 4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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CTAB透性化酵母细胞生物催化合成(S)-(+)-3-羟基丁酸乙酯 被引量：11

3

作者 于明安 朱晓冰 +2 位作者 祁巍 赵领 魏郁梦 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期609-613,共5页

利用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)透性化啤酒酵母细胞中高活性的脱氢酶,借助于辅助底物乙醇和葡萄糖,对3羰基丁酸乙酯(EOB)不对称还原合成(S)(+)3羟基丁酸乙酯((S)(+)3EHB)进行了研究.结果表明,CTAB透性化酵母细胞中的醇脱氢酶和6磷酸葡... 利用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)透性化啤酒酵母细胞中高活性的脱氢酶,借助于辅助底物乙醇和葡萄糖,对3羰基丁酸乙酯(EOB)不对称还原合成(S)(+)3羟基丁酸乙酯((S)(+)3EHB)进行了研究.结果表明,CTAB透性化酵母细胞中的醇脱氢酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶的活性分别比未经处理的酵母细胞高482倍和6.5倍.在相同条件下,CTAB透性化细胞对EOB的还原比未经处理的酵母细胞快.细胞浓度对反应有明显影响,当透性化酵母细胞浓度<90mg/ml时,(S)(+)3EHB的产率和对映体过量值都较低;当酵母细胞浓度≥90mg/ml,在最佳进料速率、最适温度和pH条件下,振摇速度为125r/min时,(S)(+)3EHB的浓度达到最大值314mmol/L.在反应开始的6h内,(S)(+)3EHB的产率可达94%,对映体过量值≥98%,但24h后产率和对映体过量值分别降低到85%和91%. 展开更多

关键词 十六烷基三甲基溴化铵 透性化 啤酒酵母 生物催化 3-羰基丁酸乙酯 不对称还原 (S)-(+)-3-羟基丁酸乙酯

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水／离子液体两相体系中出芽短梗霉催化4-氯-乙酰乙酸乙酯不对称还原合成(S)-4-氯-3-羟基-丁酸乙酯 被引量：11

4

作者 张帆 倪晔 +4 位作者 孙志浩 郑璞 林文清 朱坡 居年丰 《催化学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期577-582,共6页

考察了水/离子液体两相体系中出芽短梗霉(Aureobasidium pullulansCGMCC1244)催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原生成光学活性(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)的性能,并对反应条件如摇床转速、相体积比、温度、初始底物浓度和pH... 考察了水/离子液体两相体系中出芽短梗霉(Aureobasidium pullulansCGMCC1244)催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原生成光学活性(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)的性能,并对反应条件如摇床转速、相体积比、温度、初始底物浓度和pH值等进行了优化.结果表明,在水/1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐体系中,出芽短梗霉催化COBE不对称还原生成(S)-CHBE,在30℃,pH6·6,摇床转速180r/min和不对称反应8h条件下,反应物的转化率、产物ee值和浓度分别达到95·6%,98·5%和47·1g/L.在控制pH值为6·6的情况下,通过分添加底物可有效提高产物(S)-CHBE浓度至75·1g/L. 展开更多

关键词 离子液体 全细胞 出芽短梗霉 4-氯-乙酰乙酸乙酯 不对称还原 (S)4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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面包酵母催化羰基不对称还原合成手性醇的研究 被引量：8

5

作者 黄和 杨忠华 姚善泾 《生物加工过程》 CAS CSCD 2004年第2期52-55,共4页

以 2 辛酮和 4 氯乙酰乙酸乙酯 (COBE)为模型底物分别考察了酵母细胞对直链甲基酮和 β 羰基酯中的羰基不对称还原情况。实验发现不对称还原 2 辛酮的产物主要是S型的 2 辛醇 ,且对映体选择性很高。不对称还原COBE生成的主要是S(D) ... 以 2 辛酮和 4 氯乙酰乙酸乙酯 (COBE)为模型底物分别考察了酵母细胞对直链甲基酮和 β 羰基酯中的羰基不对称还原情况。实验发现不对称还原 2 辛酮的产物主要是S型的 2 辛醇 ,且对映体选择性很高。不对称还原COBE生成的主要是S(D) 型产物 ,反应COBE的转化率、光学选择性都比较高。同时发现COBE的浓度和产物对不对称还原都有一定负面的影响。 展开更多

关键词 不对称还原 手性合成 手性醇 面包酵母 全细胞生物催化 S-2-辛醇 S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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生物催化不对称还原方法生产(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 被引量：7

6

作者 钟萍 孙志浩 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期665-669,共5页

通过筛选得到不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)对映选择性好的微生物菌株出芽短梗霉菌(Aureobasidiumpullulans)SW0202.对其还原反应条件进行优化,得到最佳转化条件为:初始细胞浓度0.32g/mL(以湿... 通过筛选得到不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)对映选择性好的微生物菌株出芽短梗霉菌(Aureobasidiumpullulans)SW0202.对其还原反应条件进行优化,得到最佳转化条件为:初始细胞浓度0.32g/mL(以湿菌体计),底物浓度20g/L,pH7.0,温度30℃.在此优化条件下,产物浓度达20.32g/L,摩尔转化率为79.6%,产物对映体过量值e.e.为97.8%.分批添加底物可显著减小底物的抑制作用. 展开更多

关键词 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 4-氯乙酰乙酸乙酯 出芽短梗霉菌 生物催化 不对称还原反应

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有机相酶催化氨解反应拆分制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 被引量：8

7

作者 金勇 吴坚平 +1 位作者 徐刚 杨立荣 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1384-1388,共5页

通过脂肪酶催化的氨解反应拆分4-氯-3-羟基丁酸乙酯.经过对脂肪酶及反应溶剂的筛选,确定最佳脂肪酶及溶剂分别为Novozym435和二氧六环;并在该反应体系中考察了温度、底物浓度、酶浓度与摇床转速对反应的影响.综合考虑反应的反应速度和... 通过脂肪酶催化的氨解反应拆分4-氯-3-羟基丁酸乙酯.经过对脂肪酶及反应溶剂的筛选,确定最佳脂肪酶及溶剂分别为Novozym435和二氧六环;并在该反应体系中考察了温度、底物浓度、酶浓度与摇床转速对反应的影响.综合考虑反应的反应速度和对映体选择率,确定较佳的反应条件为:温度30℃、底物浓度0.5mol/L、酶量10mg/mL、摇床转速200n/min.反应35h后,ee可以达到99%以上,此时转化率为57.7%. 展开更多

关键词 脂肪酶 氨解 4-氯-3-羟基丁酸乙酯 拆分

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水/有机溶剂两相体系微生物催化不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 被引量：7

8

作者 何军邀 孙志浩 +1 位作者 郑璞 韩丽 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期310-315,共6页

研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程。有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁... 研究了水/有机溶剂两相体系中,出芽短梗霉SW0202细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)的过程。有机溶剂的选择表明邻苯二甲酸二丁酯为该反应最适有机溶剂,与单一水相体系相比,水/邻苯二甲酸二丁酯两相体系能明显改善反应效率。通过系统考察一些因素如相体积比、振摇速度、反应温度和pH等对反应速度、摩尔转化率和产物光学纯度的影响发现,这些因素对还原反应的初速度和摩尔转化率有较明显的影响,而对产物的光学纯度影响不明显。优化后的条件为:水与有机溶剂的相体积比1:1,振摇速度180r·min-1,温度30℃,pH7.0。在该优化反应条件下,水/有机溶剂两相体系中出芽短梗霉SW0202细胞催化COBE生成(S)-CHBE不对称还原反应的最大摩尔转化率和产物的光学纯度分别达到了94.8%和97.9%e.e.,在用Na2CO3溶液控制水相pH7.0条件下,有机相中的产物浓度积累达58.2g·L-1。 展开更多

关键词 出芽短梗霉SW0202 不对称还原 4-氯乙酰乙酸乙酯 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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柱前衍生化法分离3-羟基丁酸乙酯光学异构体 被引量：6

9

作者 施介华 程向炜 +1 位作者 周亮 严巍 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期714-718,共5页

采用三氟乙酸酐柱前衍生化在β-环糊精毛细管柱(CyclodexB)上分离3-羟基丁酸乙酯光学异构体。考察了衍生化反应条件对3-羟基丁酸乙酯衍生化反应的影响,柱温对3-羟基丁酸乙酯衍生物3-(2,2,2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯光学异构体分离的影响... 采用三氟乙酸酐柱前衍生化在β-环糊精毛细管柱(CyclodexB)上分离3-羟基丁酸乙酯光学异构体。考察了衍生化反应条件对3-羟基丁酸乙酯衍生化反应的影响,柱温对3-羟基丁酸乙酯衍生物3-(2,2,2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯光学异构体分离的影响。通过光学异构体分离过程中的热力学参数的计算,探讨光学异构体分离过程的驱动力。实验结果表明,当三氟乙酸酐与3-羟基丁酸乙酯的摩尔比为5∶1时,室温下反应5min,3-羟基丁酸乙酯可定量转化成3-(2,2,2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯;在柱温为62℃时,3-(2,2,2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯光学异构体的分离因子(α)和分离度(R)分别为1.02和1.26。而且,3-(2,2,2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯光学异构体的拆分过程主要是一个焓驱动的过程,且β-环糊精表面与3-(2,2,2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯之间的相互作用在其分离过程中起了重要作用。 展开更多

关键词 3-羟基丁酸乙酯 3-(2 2 2-三氟乙酰氧基)丁酸乙酯 光学异构体 手性分离 衍生化

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面包酵母非水相催化乙酰乙酸乙酯的不对称还原反应 被引量：3

10

作者 任伟民 王兴涌 +1 位作者 李峰 石桂珍 《苏州科技学院学报（自然科学版）》 CAS 2006年第2期22-24,共3页

利用面包酵母在非水相中不对称还原乙酰乙酸乙酯,制备了光学活性的手性化合物S()-3-羟基丁酸乙酯。通过转化率和ee..值筛选了lgPl(gP为正辛醇-水体系中的油水分配系数)值不同的有机溶剂,并考察了反应体系中水含量对生物催化乙酰乙酸乙... 利用面包酵母在非水相中不对称还原乙酰乙酸乙酯,制备了光学活性的手性化合物S()-3-羟基丁酸乙酯。通过转化率和ee..值筛选了lgPl(gP为正辛醇-水体系中的油水分配系数)值不同的有机溶剂,并考察了反应体系中水含量对生物催化乙酰乙酸乙酯不对称还原反应的影响。结果表明:lgP>2.0的有机溶剂,可以选用作为面包酵母催化的反应介质,其中以正己烷较为合适;且反应的最佳水含量为19.2%V(水V/有机溶剂)。 展开更多

关键词 面包酵母 非水相 乙酰乙酸乙酯 不对称还原 (S)-3-羟基丁酸乙酯

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近平滑假丝酵母全细胞催化不对称还原反应：底(产)物抑制及其解除 被引量：5

11

作者 乐庸堂 徐岩 穆晓清 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1038-1043,共6页

以不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)为模式反应,从实验室保藏菌种中筛选获得高效生物催化剂近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)CCTCC M 203011,底物浓度为20g/L时产物产率达96%,光学纯度(e.e值... 以不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)为模式反应,从实验室保藏菌种中筛选获得高效生物催化剂近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)CCTCC M 203011,底物浓度为20g/L时产物产率达96%,光学纯度(e.e值)大于99%.底(产)物分别具有对细胞(酶)的毒害作用和对酶促反应的抑制作用,是影响不对称还原反应催化效率的主要因素.采用水-有机双相原位萃取和分批补料联用策略,原位萃取产物并控制水相底物浓度不高于4g/L,可将底物浓度提高到60g/L,产率达95%;同时采用高生物量策略,将产物总体积浓度提高到230g/L,e.e值保持99%以上. 展开更多

关键词 近平滑假丝酵母 不对称还原 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 底物分批补给 产物原位萃取

原文传递

阿伐他汀手性中间体合成研究进展 被引量：4

12

作者 周晋武 汪钊 《化学与生物工程》 CAS 2008年第5期1-4,共4页

综述了近年来阿伐他汀手性中间体的合成研究进展,从手性池反应、不对称合成、外消旋体拆分三个方面介绍了阿伐他汀手性中间体合成的工艺路线和研究水平,对其工业化前景进行了展望。

关键词 阿伐他汀 手性 4-氯-3-羟基丁酸乙酯 手性池反应 不对称合成 外消旋体拆分

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3-羟基丁酸乙酯-巴豆酸乙酯-乙醇三元体系等压汽液平衡 被引量：4

13

作者 王彦飞 马沛生 +2 位作者 王如帆 贾艳宗 孙义 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期9-13,共5页

在汽液双循环玻璃平衡釜中测定3-羟基丁酸乙酯、巴豆酸乙酯、乙醇的二元及三元体系的等压汽液平衡数据,用积分法对其进行了热力学一致性检验。回归实验数据得到3-羟基丁酸乙酯和巴豆酸乙酯的Antoine方程参数。用Wilson活度系数方程对实... 在汽液双循环玻璃平衡釜中测定3-羟基丁酸乙酯、巴豆酸乙酯、乙醇的二元及三元体系的等压汽液平衡数据,用积分法对其进行了热力学一致性检验。回归实验数据得到3-羟基丁酸乙酯和巴豆酸乙酯的Antoine方程参数。用Wilson活度系数方程对实验数据进行了关联,取得了较好的结果。 展开更多

关键词 聚3-羟基丁酸酯 3-羟基丁酸乙酯 巴豆酸乙酯 汽液相平衡 活度系数 乙醇

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固定化假单胞菌脂肪酶催化(R,S)-3-羟基丁酸乙酯转酯化拆分 被引量：4

14

作者 谷耀华 薛屏 +1 位作者 李鹏 夏维涛 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1621-1626,共6页

设计制备出比表面积290.6 m2/g、平均孔径和孔体积16.5 nm和1.66 cm3的功能化介孔载体G-NH2-MCF,G-NH2-MCF共价结合假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas sp Lipase,PSL),获得了固定化酶PSL/G-NH2-MCF。在甲苯溶剂中,乙酸乙烯酯作酰化剂,固定化酶... 设计制备出比表面积290.6 m2/g、平均孔径和孔体积16.5 nm和1.66 cm3的功能化介孔载体G-NH2-MCF,G-NH2-MCF共价结合假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas sp Lipase,PSL),获得了固定化酶PSL/G-NH2-MCF。在甲苯溶剂中,乙酸乙烯酯作酰化剂,固定化酶PSL/G-NH2-MCF催化(R,S)-3-羟基丁酸乙酯的转酯化拆分反应,转化率为15.6%,(S)-3-羟基丁酸乙酯的对映体过量值(eeS)为17.8%,(R)-3-乙酸基丁酸乙酯对映体过量值(eeP)为96.2%,对映选择性参数E为61;而在相同条件下,使用游离酶PSL催化拆分反应,转化率、eeS、eeP和E值分别为2.16%,1.95%,88.2%和16,PSL经G-NH2-MCF固定化后催化性能得到明显提高。同时研究了固定化酶PSL/GNH2-MCF催化(R,S)-3-羟基丁酸乙酯转酯拆分的反应条件对转化率和对映选择性的影响规律。 展开更多

关键词 固定化假单胞菌脂肪酶 功能化介孔载体 ( R S)-3-羟基丁酸乙酯 转酯化拆分

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3-羟基丁酸衍生物对PC12细胞凋亡的保护作用 被引量：2

15

作者 邹湘辉 刘博聪 +2 位作者 庄东红 查广才 吴云影 《医药导报》 CAS 北大核心 2014年第11期1427-1430,共4页

目的观察3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯对PC12缺血清诱导凋亡细胞的保护作用。方法化学法降解聚羟基丁酸酯制备3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯。培养PC12细胞,以含血清培养组细胞为阴性对照组,缺血清培养组细胞为阳性对照组,以在缺... 目的观察3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯对PC12缺血清诱导凋亡细胞的保护作用。方法化学法降解聚羟基丁酸酯制备3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯。培养PC12细胞,以含血清培养组细胞为阴性对照组,缺血清培养组细胞为阳性对照组,以在缺血清条件下添加不同浓度3-羟基丁酸甲酯或3-羟基丁酸乙酯细胞为样品组,通过形态学观察法、噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞形态及活性变化。结果与阴性对照组比较,阳性对照组细胞出现大量凋亡,形态变小变细,活性降低。样品处理组细胞活性不同程度提高,低浓度(0.01和0.001 mg·m L-1)3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯对凋亡细胞有保护作用,浓度为1 mg·m L-1时效果最好。结论通过化学法能够制备高纯度3-羟基丁酸甲酯和3-羟基丁酸乙酯,上述两种样品对缺血清诱导凋亡的PC12细胞有保护作用。 展开更多

关键词 3-羟基丁酸 3-羟基丁酸甲酯 3-羟基丁酸乙酯 PC12细胞 细胞凋亡

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E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-cr羰基还原酶分离纯化及酶学性质研究 被引量：3

16

作者 王亚军 吴配配 +1 位作者 罗希 郑裕国 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期607-615,共9页

利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-... 利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯(CHOHB)、4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)合成阿托伐他汀关键手性合成子6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯、(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,对丙酮酸乙酯、丁二酮也表现出较高的还原能力。该羰基还原酶的最适作用条件为:30℃,p H7.5;且活性不依赖于金属离子。它催化CHOHB还原反应的最大反应速度vmax 54.3μmol·mg-1·min-1,KmCHOHB值4.4 mmol·L-1;作用于COBE时,最大反应速度vmax 36.5μmol·mg-1·min-1,KmCOBE值1.2×10-1 mmol·L-1。E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr羰基还原酶在他汀手性侧链制造上具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 R-羰基还原酶 分离纯化 6-氰基-(3R 5R)-二羟基己酸叔丁酯 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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羰基还原酶工程菌构建及其应用于还原制备S-CHBE 被引量：3

17

作者 张志斌 吴小芳 +4 位作者 杨慧林 颜日明 曾庆桂 汪涯 朱笃 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期24-29,共6页

S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列... S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列构建了基因工程菌BL21(DE3)/pET28a-S1',提高了羰基还原酶表达效率,经诱导条件优化后羰基还原酶活力达11.49 U/mg蛋白;将BL21(DE3)/pET28a-S1'与E.coli BL21(DE3)/pET28a-gdh进行偶联,在单一水相中未添加辅酶条件下转化10 h,产物的摩尔转化率和对映体过量值(e.e.)分别达92.1%和100%。 展开更多

关键词 生物催化 羰基还原酶 密码子优化 诱导表达 S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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固定化细胞有机相催化不对称还原β-羰基酯 被引量：1

18

作者 何军邀 孙志浩 《生物加工过程》 CAS CSCD 2005年第4期23-27,共5页

将酵母细胞用海藻酸钙包埋后用于有机相催化不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯制备光学活性的4-氯-3-羟基丁酸乙酯,从中筛选得到具有较高立体选择性和还原能力的菌株假丝酵母SW0401,将此菌株的细胞固定化细胞作为研究对象,系统考察了固定化条... 将酵母细胞用海藻酸钙包埋后用于有机相催化不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯制备光学活性的4-氯-3-羟基丁酸乙酯,从中筛选得到具有较高立体选择性和还原能力的菌株假丝酵母SW0401,将此菌株的细胞固定化细胞作为研究对象,系统考察了固定化条件、固定化细胞大小、反应溶剂、初始底物浓度、辅助底物、固定化细胞热处理和抑制剂对还原反应的影响。结果表明,上述因素对反应的摩尔转化率和产物(S)-CHBE光学纯度有显著影响。固定化时所用缓冲液的pH值为7.0时和固定化细胞颗粒平均直径为2.5 mm较合适,以正己烷为反应介质时反应的摩尔转化率和产物光学纯度最优,初始底物浓度以54.7 mmol/L为宜,辅助底物以1-己醇为佳。对固定化细胞的热处理和添加抑制剂烯丙醇均能够明显改善产物的光学纯度,但对提高摩尔转化率有负面影响。 展开更多

关键词 固定化细胞 有机相 不对称还原 4-氯乙酰乙酸乙酯 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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微生物细胞生物催化3-羰基丁酸乙酯制备光学活性3-羟基丁酸乙酯的研究进展 被引量：2

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作者 周莺 何军邀 +3 位作者 王普 欧志敏 周丽敏 祖蕾 《科技通报》 2008年第1期56-62,共7页

综述了当前国内外在以微生物活细胞生物催化制备光学活性3-羟基丁酸乙酯(EHB)的研究进展,重点介绍了各种提高微生物活细胞催化不对称合成反应立体选择性的方法:反应物的浓度、辅助底物和添加剂的选择、基因工程等。最后对生物催化制备... 综述了当前国内外在以微生物活细胞生物催化制备光学活性3-羟基丁酸乙酯(EHB)的研究进展,重点介绍了各种提高微生物活细胞催化不对称合成反应立体选择性的方法:反应物的浓度、辅助底物和添加剂的选择、基因工程等。最后对生物催化制备光学活性EHB的工业化前景进行了展望。 展开更多

关键词 生物催化 光学活性 不对称还原 3-羟基丁酸乙酯

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他汀类药物中间体(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯生物催化合成的研究进展 被引量：2

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作者 陶源 胡又佳 +1 位作者 周斌 朱宝泉 《世界临床药物》 CAS 2013年第6期359-363,共5页

(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯[(S)-CHBE]是羟甲戊二酰辅酶A还原酶抑制剂即他汀类药物的关键手性中间体。本文综述生物催化合成(S)-CHBE的研究进展。

关键词 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 他汀类药物 生物催化

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