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体外双轴拉伸应变诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨特异性标志物的表达 被引量：2
1
作者 张梦颖 李晋川 +4 位作者 李汇明 武庚 曹成建 吴文超 李良 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期499-505,519,共8页
探讨体外双轴拉伸应变对大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）向成骨细胞分化的影响。分离4周龄SD大鼠BMSCs,将P3～P4代rBMSCs接种于DMEM-LG完全培养基的双轴拉伸应变细胞培养小室中。当细胞生长至亚融合状态后,给予细胞施加拉伸应变,频率为1... 探讨体外双轴拉伸应变对大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）向成骨细胞分化的影响。分离4周龄SD大鼠BMSCs,将P3～P4代rBMSCs接种于DMEM-LG完全培养基的双轴拉伸应变细胞培养小室中。当细胞生长至亚融合状态后,给予细胞施加拉伸应变,频率为1 Hz,应变幅度为1%、2%、5%,每个应变幅度均分别加载2h/d、4h/d、6h/d,连续作用3d。以未受拉伸应变的rBMSCs为空白对照组。以未受拉伸应变,含100nmol/L雌二醇（E2）培养的rBMSCs为阳性对照组。通过实时荧光定量PCR和Western blot方法检测各组rBMSCs的碱性磷酸酶（ALP）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Runt相关转录因子-2（Runx2）、骨钙蛋白（OCN）mRNA和蛋白的表达量。实验结果表明：（1）E2组rBMSCs中Runx2、ColⅠ、ALP、OCN mRNA及蛋白表达量均明显高于空白对照组（P〈0.05）;（2）1%拉伸应变组rBMSCs中ALP、Runx2mRNA和蛋白表达量均明显高于空白对照组（P〈0.05）,但与E2组相比明显降低（P〈0.05）;（3）2%拉伸应变组rBMSCs中ALP、ColⅠ、Runx2、OCN mRNA和蛋白表达量均明显高于空白对照组（P〈0.05）,其中,加载时间4h/d组rBMSCs中ColⅠ、Runx2 mRNA和蛋白表达量明显高于E2组（P〈0.05）;（4）5%拉伸应变组,加载时间2h/d、4h/d组rBMSCs中ALP、ColⅠ、Runx2mRNA和蛋白表达量均明显高于空白对照组（P〈0.05）,与E2组相比,加载时间4h/d组的ColⅠ、Runx2mRNA和蛋白表达量也明显上调（P〈0.05）。本实验结果提示,雌二醇和体外双轴拉伸应变均可以诱导rBMSCs向成骨细胞分化,且拉伸应变幅度2%、加载时间4h/d时,促rBMSCs成骨分化的作用最强。 展开更多
关键词 大鼠骨髓间充质干细胞 拉伸应变 Ⅰ型胶原 runt相关转录因子-2 骨钙蛋白
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碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响 被引量：1
2
作者 张胜雷 徐金升 +4 位作者 杨硕 白亚玲 张俊霞 崔立文 俞啟遥 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期398-402,共5页
目的:探讨碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。方法:将21只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(甲基纤维素灌胃)、钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、碱干预组(甲基纤维素及骨化三醇灌胃... 目的:探讨碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。方法:将21只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(甲基纤维素灌胃)、钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、碱干预组(甲基纤维素及骨化三醇灌胃及5%碳酸氢钠腹腔注射)。采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测大鼠胸主动脉钙化情况;免疫组织化学方法检测胸主动脉Runx2表达。体外采用组织块贴壁法培养原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞,利用10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型。使用HCl和NaHCO3调节培养基pH值。细胞随机分为3组:正常对照组(pH 7.4)、钙化组(10mmol/Lβ-甘油磷酸钠+pH7.4)、碱干预组(10mmol/Lβ-甘油磷酸钠+pH 7.7),共培养12d。采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,RT-PCR和Western Blot法检测Runt相关转录因子-2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达。结果:体内实验中,成功制备了慢性肾衰竭血管钙化的大鼠模型,与钙化组相比,给予碳酸氢钠干预后,大鼠血管钙盐沉积均明显增加(P<0.05);免疫组织化学结果显示碱性环境可明显升高Runx2表达(P<0.05)。体外实验中,与正常对照组相比,钙化组钙盐沉积明显增加(P<0.05);与钙化组相比,碱干预组钙盐沉积明显增加(P<0.05)。RT-PCR和Western Blot显示,与正常对照组相比,钙化组Runx2表达明显增加(P<0.05);与钙化组相比,碱干预组Runx2表达明显增加(P<0.05)。结论:碱性环境可能通过促进类骨表型转化进而促进慢性肾衰竭大鼠血管钙化。 展开更多
关键词 碱性环境 慢性肾衰竭 血管平滑肌细胞 钙化 runt相关转录因子-2
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地塞米松影响下颌骨再生修复的相关分子机制研究
3
作者 李君 周晨 +1 位作者 尚多 江宏兵 《口腔医学》 CAS 2011年第4期206-209,共4页
目的探讨抗炎药地塞米松延缓下颌骨缺损骨再生的相关分子机制。方法建立SD大鼠双侧下颌骨颊舌向贯穿的骨缺损模型,随机分为用药组与生理盐水对照组,分别给予治疗剂量的地塞米松或者等体积的生理盐水,连续给药5 d后的第1、3、6、10、17... 目的探讨抗炎药地塞米松延缓下颌骨缺损骨再生的相关分子机制。方法建立SD大鼠双侧下颌骨颊舌向贯穿的骨缺损模型,随机分为用药组与生理盐水对照组,分别给予治疗剂量的地塞米松或者等体积的生理盐水,连续给药5 d后的第1、3、6、10、17天分别处死大鼠并取双侧下颌骨,用免疫组化染色,分别检测骨再生修复不同阶段炎症因子环氧化酶-2(COX2)、成骨分化关键性调控因子runt相关转录因子-2(RUNX2)及骨钙蛋白(BGP)的表达。结果炎症因子COX2及成骨因子RUNX2、BGP在骨再生修复过程中的表达存在相同的变化趋势,半定量数据表明RUNX2、BGP表达和COX2表达存在正相关关系。结论抗炎药地塞米松通过抑制炎症阶段COX2表达,从而抑制成骨分化关键性调控因子RUNX2/BGP表达,导致下颌骨缺损再生修复的延迟。 展开更多
关键词 骨再生 地塞米松 环氧化酶-2 runt相关转录因子-2 SD大鼠
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人参-三七-川芎提取物对高糖诱导小鼠血管老化后α-SMA和Runx2蛋白表达的影响 被引量：4
4
作者 胡艳红 方靖漪 +5 位作者 王雪 杨静 修成奎 王佳丽 刘奕清 雷燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期21-29,共9页
目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖... 目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),造模成功后,喂食高脂饲料7个月,之后再次随机分为模型组,GNC低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg^-1)及二甲双胍组(150 mg·kg^-1)。灌胃给药,每天1次,连续9周。取材前7 d,新购一批4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,实验结束后分别用苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠颈总动脉形态学变化,马松(Masson)染色观察小鼠颈总动脉纤维化,免疫组化检测小鼠颈总动脉中基质金属蛋白酶-2(MMP-2),周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16),周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21),α-SMA与Runx2蛋白表达。结果:HE,TEM,Masson 3个实验结果显示:与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉中内外膜厚度、超微结构和血管壁中胶原和弹性纤维的相对含量几乎无变化;与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉内膜不光滑,内皮细胞几乎完全脱落,胞质裂解,内弹性膜变薄、断裂、甚至脱离,可见增生的胶原纤维潜入中膜,中外膜增生明显且排列紊乱(P<0.01),血管平滑肌细胞变形、突起、分叉增多、甚至碎裂,并可见局灶性坏死,细胞内空泡和溶酶体等大量增多,并可见明显的自噬泡。血管壁中外膜胶原和弹性纤维的相对含量增加明显(P<0.01);与模型组比较,各给药组以上病理情况均有所改善(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉MMP-2,p16,p21,Runx2高表达(P<0.01),α-SMA低表达(P<0.01);与模型组比较,各给药组各蛋白表达趋于正常(P<0.05,P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉血管老化,改变α-SMA,Runx2蛋白表达。GNC可通 展开更多
关键词 血管老化 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) runt相关转录因子-2(Runx2) 高糖 人参-三七-川芎提取物 颈总动脉
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淫羊藿苷促进骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量：39
5
作者 鲍远 黄俊明 +5 位作者 靖兴志 李兴艳 董永辉 张津铭 郭风劲 陈安民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第24期3501-3507,共7页
背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷... 背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷作用于骨髓间充质干细胞,通过RT-PCR检测runx2、ocn和osx基因的表达情况,以及通过茜素红染色检测成骨细胞分泌的钙结节数量。用淫羊藿苷喂养大鼠(2 mg/d)5周后,进行Micro CT扫描并分析胫骨上段骨结构。结果与结论:(1)无论是否存在成骨诱导培养条件,淫羊藿苷均能促进成骨分化相关基因的表达;(2)在成骨诱导培养时,淫羊藿苷能明显增加钙结节沉积;(3)动物实验表明淫羊藿苷能显著促进骨小梁的生成。 展开更多
关键词 淫羊藿属 骨髓 间质干细胞 骨钙素 核心结合因子α1亚基 组织工程 组织构建 骨细胞 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 成骨分化 runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 国家自然科学基金
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基于BMP/Runx2/Osx信号通路研究淫羊藿总黄酮改善绝经后骨质疏松模型大鼠的作用机制 被引量：21
6
作者 徐众华 莫雨晴 周驰 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第19期2333-2338,共6页
目的:基于骨形态发生蛋白(BMP)/Runt相关转录因子2(Runx2)/成骨细胞特异性转录因子(Osx)信号通路研究淫羊藿总黄酮对绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠的影响,从而明确其防治骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:将50只大鼠按体质量分层法随机... 目的:基于骨形态发生蛋白(BMP)/Runt相关转录因子2(Runx2)/成骨细胞特异性转录因子(Osx)信号通路研究淫羊藿总黄酮对绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠的影响,从而明确其防治骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:将50只大鼠按体质量分层法随机分为假手术组,模型组,淫羊藿总黄酮低、高剂量组[265、530 mg/(kg·d)]和雌二醇组[0.09 mg/(kg·d)],每组10只。除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠均采用卵巢摘除去势法建立PMOP模型。大鼠造模成功并进行正常饲养2个月后开始灌胃给药,每天给药1次,连续给药84 d;假手术组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水。末次给药结束后,测定各组大鼠右侧下肢股骨和椎骨的骨密度(BMD)以及股骨骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp);采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中钙离子、骨钙素、Ⅰ型原胶原N端前肽(P1NP)的水平;采用苏木精-伊红染色法观察股骨的病理学变化;分别采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blotting法检测大鼠骨组织中BMP、Runx2、Osx的mRNA及蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨、椎骨BMD,血清中钙离子、骨钙素、P1NP水平,股骨Tb.N和Tb.Th以及股骨组织中BMP、Runx2、Osx mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),股骨Tb.Sp显著升高(P<0.01);骨小梁组织结构紊乱,断裂明显。与模型组比较,各给药组大鼠上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01),并且淫羊藿总黄酮的作用具有剂量依赖性(P<0.05);骨小梁数目增多,排列整齐,结构较为完整。结论:淫羊藿总黄酮改善OP的作用机制可能与促进BMP/Runx2/Osx信号通路活性有关。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 骨质疏松症 骨形态发生蛋白 runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 大鼠
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补肾益气活血方对去势大鼠Wnt7b/β-catenin信号通路的调控机制 被引量：19
7
作者 王庆谚 郑洪新 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期4249-4253,共5页
目的:基于Wnt7b/β-catenin信号通路研究补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠股骨的作用及影响。方法:将90只雌性SD大鼠随机分成正常组,模空组,补肾益气活血方高、低剂量组和福善美组,每组18只。除正常组外,其余各组大鼠采用一次性摘... 目的:基于Wnt7b/β-catenin信号通路研究补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠股骨的作用及影响。方法:将90只雌性SD大鼠随机分成正常组,模空组,补肾益气活血方高、低剂量组和福善美组,每组18只。除正常组外,其余各组大鼠采用一次性摘除大鼠双侧卵巢法建立骨质疏松症动物模型,正常组、模空组大鼠给予0.9%氯化钠溶液灌胃,其余各组给予相应药物灌胃,共灌胃12周后,取材。采用双能X线吸收测量法(DAX)检测股骨骨密度;采用ELISA法检测血清ALP、TRACP水平以及股骨Wnt7b、Axin2、Runx2蛋白表达水平;采用qRTPCR法检测股骨Wnt7b、Axin2、Runx2 mRNA表达水平。结果:与模空组比较,补肾益气活血方高、低剂量组能够增加股骨骨密度(P<0.01),下调血清ALP和TRACP水平(P<0.01),补肾益气活血方高剂量组能够上调Wnt7b/β-catenin信号通路Wnt7b、Axin2和Runx2 mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01),补肾益气活血方低剂量组能够上调Wnt7b、Axin2蛋白表达(P<0.01)。结论:补肾益气活血方可以通过上调Wnt7b/β-catenin信号通路以促进成骨分化来防治绝经后骨质疏松症。 展开更多
关键词 Wnt7b/β-catenin信号通路 骨质疏松症 碱性磷酸酶 抗酒石酸酸性磷酸酶 Wnt7b蛋白 轴蛋白2 runt相关转录因子2
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基于BMP-2/SMAD/Runx2通路探究骨化三醇胶囊对大鼠胫骨骨折愈合的影响 被引量：16
8
作者 王皓 凃峰 +1 位作者 赵文斌 张麟 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期47-51,共5页
目的探讨骨化三醇胶囊(Cal)通过骨形态发生蛋白2(BMP-2)/SMAD/Runt相关转录因子2(Runx2)通路对大鼠胫骨骨折愈合的影响及相关机制。方法将52只SD大鼠随机分为对照组(Cont)、胫骨骨折组、Cal组(灌胃10 ng/mL Cal,连续4周)、Cal+Noggin(BM... 目的探讨骨化三醇胶囊(Cal)通过骨形态发生蛋白2(BMP-2)/SMAD/Runt相关转录因子2(Runx2)通路对大鼠胫骨骨折愈合的影响及相关机制。方法将52只SD大鼠随机分为对照组(Cont)、胫骨骨折组、Cal组(灌胃10 ng/mL Cal,连续4周)、Cal+Noggin(BMP特异抑制剂)组(灌胃10 ng/mL Cal+经皮注射50 ng/mL Noggin,连续4周)。采用X射线、全自动生化分析仪、micro CT、HE染色、Western blot分析治疗效果及可能机制。结果4周后,胫骨骨折组骨折线明显,Cal组骨折线几乎不可见,断端有大量骨痂,Cal+Noggin组骨折愈合较差。胫骨骨折组骨密度、骨体积分数、ALP、OCN、PINP水平及BMP-2、Runx2、p-SMAD1/5/8/SMAD1/5/8表达高于Cont组,骨小梁分离度低于Cont组(P<0.05)。较于胫骨骨折组,Cal组骨密度、骨体积分数、ALP、OCN、PINP水平及BMP-2、Runx2、p-SMAD1/5/8/SMAD1/5/8表达增高,骨小梁分离度降低(P<0.05)。较于Cal组,Cal+Noggin组骨密度、骨体积分数、ALP、OCN、PINP水平及BMP-2、Runx2、p-SMAD1/5/8/SMAD1/5/8表达降低,骨小梁分离度增加(P<0.05)。结论Cal可能通过激活BMP-2/SMAD/Runx2通路,改善新生骨痂骨密度及微结构,促进胫骨骨折愈合。 展开更多
关键词 骨化三醇胶囊 胫骨 骨折愈合 骨形态发生蛋白2 SMAD runt相关转录因子2
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雄激素和雄激素受体对骨代谢的调控及机制研究进展 被引量：17
9
作者 付绍婷 王晓慧 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第6期1041-1048,共8页
骨代谢由成骨细胞介导的骨形成和破骨细胞介导的骨吸收构成。雄激素能调控骨代谢,即促进骨形成、抑制骨吸收,在骨骼生长、骨峰值的获得和骨量维持中起重要作用;且该作用主要通过雄激素受体(androgen receptor,AR)介导。AR调控骨代谢的作... 骨代谢由成骨细胞介导的骨形成和破骨细胞介导的骨吸收构成。雄激素能调控骨代谢,即促进骨形成、抑制骨吸收,在骨骼生长、骨峰值的获得和骨量维持中起重要作用;且该作用主要通过雄激素受体(androgen receptor,AR)介导。AR调控骨代谢的作用,一方面是通过直接调控骨代谢相关的AR靶基因(如与成骨相关的I型胶原蛋白α1、骨钙素、组织非特异性碱性磷酸酶、小整合素结合配体N-端连接糖蛋白和与破骨相关的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、组织蛋白酶K的表达;另一方面是通过间接调控骨代谢的多个信号通路[如Wnt/β-catenin、骨形态发生蛋白(BMP)/Smads-Runt相关转录因子2(Runx2)、RANKL/骨保护蛋白(OPG)、PI3K/Akt和MAPK信号通路]实现的。该文主要就雄激素/AR在骨代谢调控中的作用及机制作一综述,对丰富AR调控骨代谢的理论认识和骨代谢性疾病的药物研发具有重要意义。 展开更多
关键词 雄激素受体 骨代谢 WNT/Β-CATENIN 骨形态发生蛋白/Smads runt相关转录因子2 RANKL/骨保护蛋白 PI3K/Akt MAPK
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柚皮苷对体外培养骨髓间充质干细胞Runx-2和Osterix表达及骨质疏松模型大鼠骨强度的影响 被引量：12
10
作者 徐展望 李念虎 《中医正骨》 2013年第12期7-10,共4页
目的:探讨柚皮苷对体外培养骨髓间充质干细胞Runx-2和Osterix表达及骨质疏松模型大鼠骨强度的作用。方法:采用髓腔冲洗离心法从雌性Lewis大鼠股骨获取骨髓间充质干细胞,将传代培养后的细胞分为5组。A组不进行干预,B组加入二甲基亚砜,C、... 目的:探讨柚皮苷对体外培养骨髓间充质干细胞Runx-2和Osterix表达及骨质疏松模型大鼠骨强度的作用。方法:采用髓腔冲洗离心法从雌性Lewis大鼠股骨获取骨髓间充质干细胞,将传代培养后的细胞分为5组。A组不进行干预,B组加入二甲基亚砜,C、D、E组分别加入浓度为1μg·mL-1、10μg·mL-1、100μg·mL-1的柚皮苷。培养6 h后收集细胞采用RT-PCR法测定各组细胞Runx-2和Osterix的mRNA表达水平。将24只雌性SD大鼠的卵巢切除,3个月后将其随机分为4组,每组6只。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别以60 mg·kg-1、300 mg·kg-1和1 500 mg·kg-1柚皮苷灌胃,Ⅳ组给予等体积的PBS灌胃,每天灌胃1次,持续2个月。药物干预结束后,测定大鼠股骨强度和胫骨骨小梁面积。结果:①Runx-2 mRNA和Osterix mRNA表达水平。B、C、D、E组大鼠骨髓间充质干细胞Runx-2 mRNA表达水平比较,差异有统计学意义[(1.10±0.02),(2.05±0.31),(2.76±0.14),(1.82±0.10),F=44.021,P=0.000]。进一步两两比较,C、D、E组Runx-2 mRNA表达水平高于B组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);D组高于C组和E组(P=0.001,P=0.000);C组和E组比较,差异无统计学意义(P=0.153)。B、C、D、E组Osterix mRNA表达水平比较,差异有统计学意义[(1.02±0.10),(1.11±1.35),(3.24±0.30),(2.55±0.35),F=7.037,P=0.012]。进一步两两比较,D组和E组Osterix mRNA表达水平高于B组(P=0.031,P=0.005);C组和B组比较,差异无统计学意义(P=0.886);C组低于D组和E组(P=0.006,P=0.039);D组和E组比较,差异无统计学意义(P=0.267)。②股骨生物力学强度。4组骨质疏松模型大鼠股骨强度比较,差异有统计学意义[(773.36±9.21)N·mm-1,(805.66±16.00)N·mm-1,(766.70±38.96)N·mm-1,(707.46±15.88)N·mm-1,F=37.776,P=0.000]。进一步两两比较,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组股骨强度均高于Ⅳ组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);Ⅰ组和Ⅲ组比较,差异无统计学意义(P=0.509);Ⅱ组高于Ⅰ组和Ⅲ组(P=0.004,P=0.001)。③胫骨骨小梁面积。4组骨质疏松模型� 展开更多
关键词 骨质疏松 柚皮苷 骨碎补 骨髓间充质干细胞 runt相关转录因子2 OSTERIX 生物力学 动物实验
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左归丸含药血清调节Runx2激活ALP、OPN蛋白促进BMSCs增殖和分化的研究 被引量：11
11
作者 刘飞祥 樊巧玲 +6 位作者 谭峰 李星 麦聪英 叶素敏 张明玥 柴毅 吴丹 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期653-657,共5页
目的探讨左归丸(Zuoguiwan,ZGW)的补肾填精、益髓壮骨的作用,促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖和向成骨细胞方向分化。方法制备ZGW含药血清,设置10%FBS DMEM组、成骨诱导液组、2.5%空白大鼠血清-... 目的探讨左归丸(Zuoguiwan,ZGW)的补肾填精、益髓壮骨的作用,促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖和向成骨细胞方向分化。方法制备ZGW含药血清,设置10%FBS DMEM组、成骨诱导液组、2.5%空白大鼠血清-成骨诱导液组、2.5%ZGW含药血清-成骨诱导液组。采用MTT法观察各组对BMSCs的增殖,使用碱性磷酸酶钙钴染色法检测BMSCs向成骨细胞方向的分化能力,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)法检测细胞培养液中AKP的含量,Western blot检测BMSCs中Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙蛋白(osteocalcin,OPN)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)蛋白的表达。结果2.5%ZGW含药血清-成骨诱导液组能够促进BMSCs的快速增殖,较早地进入平台期,促进BMSCs中AKP的分泌,提高ALP含量,上调BMSCs细胞中Runx2、ALP和OPN的蛋白表达水平。结论ZGW抗骨质疏松的分子机制,可能与调节Runx2激活ALP、OPN蛋白表达,促进BMSCs增殖和向成骨细胞方向分化有关。 展开更多
关键词 左归丸 runt相关转录因子2 骨髓间充质干细胞 骨质疏松
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ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用 被引量：10
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作者 韩耀伦 王璐 马欣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2587-2592,共6页
目的:探讨ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用。方法:分离和培养牙周膜干细胞,将其分为对照组(成骨诱导液培养)、TNF-α组(成骨诱导液培养+TNF-α培养)和激动剂组(成骨诱导液培养+TNF-α+ERK培养)。ALP和... 目的:探讨ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用。方法:分离和培养牙周膜干细胞,将其分为对照组(成骨诱导液培养)、TNF-α组(成骨诱导液培养+TNF-α培养)和激动剂组(成骨诱导液培养+TNF-α+ERK培养)。ALP和茜素红染色测定成骨分化功能,采用Western blot测定牙周膜干细胞Osterix、OPN、ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白水平。结果:与对照组比较,TNF-α组ALP染色和茜素红染色程度低,ALP活性和矿化结节降低(P<0.05),Osterix和OPN蛋白水平降低(P<0.05),p-ERK1/2、Runx2蛋白水平降低(P<0.05);与TNF-α组比较,激动剂组ALP染色和茜素红染色程度介于对照组和TNF-α组之间,ALP活性和矿化结节升高(P<0.05),Osterix和OPN蛋白水平升高(P<0.05),p-ERK1/2、Runx2蛋白水平升高(P<0.05)。三组牙周膜干细胞ERK1/2蛋白水平比较无明显差异(P>0.05)。结论:TNF-α可能通过影响ERK1/2-Runx2信号通路从而抑制牙周膜干细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-α 细胞外调节蛋白激酶1/2 runt相关转录因子2 牙周膜干细胞 成骨分化
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运动训练老年骨质疏松大鼠骨量及骨微结构的变化 被引量：5
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作者 王金玲 黄夏荣 +7 位作者 屈萌艰 黄福锦 尹林伟 钟培瑞 刘静 孙光华 廖阳 周君 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第5期676-682,共7页
背景:运动训练有维持骨量、改善骨密度的作用,但其对老年骨质疏松的作用及可能机制尚不完全明确。目的:观察运动训练对老年骨质疏松的影响及可能的分子机制。方法:将16只24月龄老年SD大鼠按照随机抽样法分为老年模型组和运动训练组,每组... 背景:运动训练有维持骨量、改善骨密度的作用,但其对老年骨质疏松的作用及可能机制尚不完全明确。目的:观察运动训练对老年骨质疏松的影响及可能的分子机制。方法:将16只24月龄老年SD大鼠按照随机抽样法分为老年模型组和运动训练组,每组8只;将8只3月龄青年SD大鼠作为青年对照组。3组大鼠在饲养笼中自由活动,其中运动训练组大鼠进行跑步机运动干预8周,训练结束后采用ELISA法检测血清骨源性碱性磷酸酶、Ⅰ型前胶原N-端前肽、抗酒石酸酸性磷酸酶和Ⅰ型胶原交联N-末端肽水平,双能X射线骨密度仪检测大鼠股骨和第4腰椎骨密度,Micro-CT检测并分析大鼠胫骨和第5腰椎的骨微结构及参数,反转录聚合酶链反应和Western blot检测股骨骨髓组织中骨形成蛋白2、Runt相关转录因子2、Osterix、过氧化物增殖激活受体γmRNA和蛋白的表达。结果与结论:①与老年模型组比较,运动训练组大鼠血清骨源性碱性磷酸酶和Ⅰ型前胶原N-端前肽水平升高(P<0.05),抗酒石酸酸性磷酸酶和Ⅰ型胶原交联N-末端肽水平降低(P<0.05);股骨骨密度升高(P<0.05);第4腰椎骨密度有上升的趋势,但无显著性差异(P>0.05);胫骨骨体积分数、骨小梁数量升高(P<0.05),骨小梁间隙降低(P<0.05),骨小梁厚度无明显变化(P>0.05);第5腰椎的骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度有升高的趋势,但无显著性差异(P>0.05);骨小梁间隙降低(P<0.05);股骨骨髓中骨形成蛋白2、Runt相关转录因子2与Osterix mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);过氧化物增殖激活受体γmRNA和蛋白表达降低(P<0.05);②结果表明,运动训练可显著改善老年骨质疏松大鼠的骨量、骨微结构,促进成骨分化,抑制成脂分化,其机制可能与骨形成蛋白2/Runt相关转录因子2/Osterix信号通路有关。 展开更多
关键词 老年骨质疏松 运动训练 骨形成蛋白2 runt相关转录因子2 OSTERIX 信号通路 骨形成 骨吸收 大鼠
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补肾化痰方对去卵巢大鼠骨形成的影响及其作用机制研究 被引量：9
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作者 张麟 向楠 +4 位作者 周广文 周亚娜 胡娅 张妍 李章青 《中医正骨》 2018年第10期12-18,共7页
目的:观察补肾化痰方对去卵巢大鼠骨形成的影响及其作用机制。方法:将30只6月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补肾化痰组,每组10只。模型组和补肾化痰组大鼠手术摘除双侧卵巢,假手术组不摘除卵巢,只切除卵巢周围与双侧卵... 目的:观察补肾化痰方对去卵巢大鼠骨形成的影响及其作用机制。方法:将30只6月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补肾化痰组,每组10只。模型组和补肾化痰组大鼠手术摘除双侧卵巢,假手术组不摘除卵巢,只切除卵巢周围与双侧卵巢质量相等的脂肪组织。造模术后5周开始,补肾化痰组以0. 94 g·m L^(-1)补肾化痰方药液灌胃,假手术组和模型组以等体积生理盐水灌胃,均每天1次,连续干预8周。药物干预结束后,将所有大鼠处死,摘除双侧眼球取血检测血清骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2、Runt相关转录因子(Runt related transcription factor,RUNX)-2含量,取左侧股骨行Micro CT扫描测定骨密度、骨小梁数量、骨小梁平均厚度、骨小梁分离度,取右侧股骨上端部分骨片以蛋白免疫印迹法测定骨组织中BMP-2、RUNX-2含量,取右侧股骨下端部分骨片以免疫组织化学法检测BMP-2、RUNX-2的定位。结果:(1)一般情况。所有大鼠均在造模手术麻醉3~4 h后完全清醒,正常进食,1周后切口完全愈合。药物干预过程中,模型组1只大鼠死亡、补肾化痰组2只大鼠死亡。(2)血清BMP-2、RUNX-2含量检测结果。3组大鼠的血清BMP-2含量比较,差异有统计学意义[(245. 40±10. 10) pg·m L^(-1),(111. 03±29. 75) pg·mL^(-1),(190. 35±14. 00) pg·mL^(-1),F=109. 998,P=0. 000];模型组、补肾化痰组的血清BMP-2含量均低于假手术组(P=0. 000,P=0. 000),补肾化痰组的血清BMP-2含量高于模型组(P=0. 000)。3组大鼠的血清RUNX-2含量比较,差异有统计学意义[(4 131. 04±277. 39) pg·mL^(-1),(1 601. 09±266. 10) pg·mL^(-1),(3 134. 90±202. 33) pg·mL^(-1),F=237. 192,P=0. 000];模型组、补肾化痰组的血清RUNX-2含量均低于假手术组(P=0. 000,P=0. 000),补肾化痰组的血清RUNX-2含量高于模型组(P=0. 000)。(3)股骨Micro CT扫描结果。3组大鼠骨密度比较,差异有统计学意义[(556. 90±8. 86) mg HA·cm 展开更多
关键词 骨质疏松 补肾化痰方 信号传导 骨形态发生蛋白质2 runt相关转录因子2 大鼠 Sprague-Dawley 动物实验
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三种补肾方含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化及Runx2表达的影响 被引量：4
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作者 杨强健 董克芳 +3 位作者 王凡 林少如 黄勇 李为 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第1期53-58,共6页
目的探究3种补肾方(健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸)含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化及Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx2)表达的影响,研究3种补肾... 目的探究3种补肾方(健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸)含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化及Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx2)表达的影响,研究3种补肾方治疗骨质疏松症的机制。方法将40只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、健骨二仙丸组(75.9 g/kg)、六味地黄丸组(85.8 g/kg)及金匮肾气丸组(89.1 g/kg),每组10只,分别灌胃用于制备含药血清。建立对数增长的P3代BMSCs。500μmol/L 30%H_(2)O_(2)处理以建立氧化衰老BMSCs模型。cck-8法检测衰老BMSCs代谢活性。衰老BMSCs分为模型组、诱导组、空白血清组、健骨二仙丸含药血清组、六味地黄丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组,共6组。在诱导第4、8、12、16天,观察各组细胞形态学变化,Western blot法检测Runx2蛋白表达,RT-PCR法检测Runx2 mRNA相对表达量。结果与正常BMSCs比较,H_(2)O_(2)处理后的BMSCs活性显著降低(P<0.05)。对比模型组,诱导组和空白血清组衰老BMSCs在分化过程中,茜素红染色增多;对比诱导组及空白血清组,各含药血清组衰老BMSCs在分化过程中,茜素红染色增多;且除模型组外,各组随着时间推移,茜素红染色不断增加。在第4、8、12、16天,对比模型组,诱导组、空白血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);对比诱导组、空白血清组,健骨二仙丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05)。在第4、8、12天,对比诱导组,六味地黄丸含药血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。在第4、12、16天,对比空白血清组,六味地黄丸含药血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸均可促进Runx2的表达,并促进衰老BMSCs往成骨方向分化。 展开更多
关键词 健骨二仙丸 六味地黄丸 金匮肾气丸 衰老骨髓间充质干细胞 成骨分化 runt相关转录因子2
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基于RUNX2、VEGF蛋白研究补骨生髓方治疗老年性骨质疏松症的作用机制 被引量：4
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作者 方圣杰 李秋月 +5 位作者 刘宁 齐保玉 孙凯 孙传睿 章轶立 魏戌 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期561-565,共5页
目的 探究补骨生髓方通过调控Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达治疗老年性骨质疏松症(osteoporosis,OP)的作用机制。方法 将雄性快... 目的 探究补骨生髓方通过调控Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达治疗老年性骨质疏松症(osteoporosis,OP)的作用机制。方法 将雄性快速老化型(senescence-accelerated mouse prone 6,SAMP6)小鼠随机分为模型组,补骨生髓方高、中、低剂量组,阿仑膦酸钠组,以SAMR1小鼠作为空白对照。选用补骨生髓方对雄性3.5月龄SAMP6自发型老年性OP模型小鼠进行灌胃治疗,给药3个月后处死,取小鼠胫骨、股骨进行骨密度检测、HE染色以确定最佳给药剂量,后续通过免疫组化、蛋白免疫印迹方法检测SAMR1组、SAMP6组与补骨生髓方最佳剂量组小鼠骨组织中RUNX2、VEGF蛋白的表达。结果 通过骨密度和HE染色结果,确定补骨生髓方高剂量[40.64 g/(kg·d)]为老年性OP的最佳给药剂量。与SAMR1组比较,SAMP6组小鼠RUNX2、VEGF蛋白的表达均降低,与SAMP6组比较,补骨生髓方高剂量组小鼠RUNX2、VEGF蛋白的表达显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 补骨生髓方能够提高SAMP6小鼠骨组织中RUNX2、VEGF蛋白表达,有效改善小鼠骨密度水平。 展开更多
关键词 补骨生髓方 老年性骨质疏松症 runt相关转录因子2 血管内皮生长因子
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RUNX家族在调控T细胞发育中的研究进展
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作者 李安 李源 +2 位作者 陈陆俊 蒋敬庭 郑晓 《现代免疫学》 北大核心 2023年第6期529-532,537,共5页
Runt相关转录因子(Runt-related transcription factor,RUNX)是胚胎发育过程中的主要调节因子,同时也是所有造血谱系所必需的调节因子,其基因突变与多种疾病发生有关。RUNX转录因子家族由Runx1、Runx2和Runx3组成。RUNX蛋白通过调控CD4^... Runt相关转录因子(Runt-related transcription factor,RUNX)是胚胎发育过程中的主要调节因子,同时也是所有造血谱系所必需的调节因子,其基因突变与多种疾病发生有关。RUNX转录因子家族由Runx1、Runx2和Runx3组成。RUNX蛋白通过调控CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞的发育和分化,参与适应性免疫系统的形成。该文主要就RUNX家族成员在T细胞发育过程中的调控机制进行综述。 展开更多
关键词 runt相关转录因子1 runt相关转录因子2 runt相关转录因子3 T细胞
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骨形态发生蛋白2介导同型半胱氨酸促进血管钙化 被引量：1
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作者 裴建升 杨文娟 +3 位作者 何静 燕茹 黄晖 贾绍斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第25期4027-4033,共7页
背景:高同型半胱氨酸血症与血管钙化之间存在一定的内部联系。但是,目前有关高同型半胱氨酸血症促进血管钙化的发病机制还不清楚。目的:探讨骨形态发生蛋白2在高同型半胱氨酸血症诱导血管钙化中的作用。方法:人颈动脉蜡块标本根据有无... 背景:高同型半胱氨酸血症与血管钙化之间存在一定的内部联系。但是,目前有关高同型半胱氨酸血症促进血管钙化的发病机制还不清楚。目的:探讨骨形态发生蛋白2在高同型半胱氨酸血症诱导血管钙化中的作用。方法:人颈动脉蜡块标本根据有无钙化斑块分为钙化组(n=29)与非钙化组(n=13)。16只ApoE-/-小鼠随机分为对照组和高同型半胱氨酸血症组,每组8只。骨形态发生蛋白2转染大鼠胸大动脉平滑肌A7r5细胞,然后应用梯度浓度同型半胱氨酸(50,100,200,400μmol/L)干预A7r5细胞。茜素红染色和苏木精-伊红染色法检测钙化反应,免疫荧光法检测骨形态发生蛋白2与Runt相关转录因子2相互作用关系,免疫组化法和Western blot检测骨形态发生蛋白2、Runt相关转录因子2、α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果与结论:①人体颈动脉组织染色显示,与非钙化组比较,钙化组炎性细胞增多,钙化阳性率增加(P<0.05);与非钙化组比较,钙化组骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2表达量均上调,α-平滑肌肌动蛋白表达量下降(P均<0.05);②小鼠动脉标本染色显示,高同型半胱氨酸血症组钙化面积阳性率高于对照组(P<0.05);高同型半胱氨酸血症组血清同型半胱氨酸水平明显高于对照组(P<0.05);与对照组比较,高同型半胱氨酸血症组骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2表达量均上调,α-平滑肌肌动蛋白表达量下降(P均<0.05);③A7r5细胞培养分析,随着同型半胱氨酸浓度梯度增加,A7r5细胞钙化程度、骨形态发生蛋白2和Runt相关转录因子2的蛋白表达增加(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达降低(P<0.05);④过表达骨形态发生蛋白2的A7r5细胞培养分析,骨形态发生蛋白2过表达组较相对应的对照组、β-甘油磷酸钠组和同型半胱氨酸组钙化程度增加;Runt相关转录因子2表达上调(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白表达下调(P<0.05);⑤同型半� 展开更多
关键词 血管钙化 同型半胱氨酸 骨形态发生蛋白2 runt相关转录因子2 平滑肌肌动蛋白
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Runt相关转录因子2基因在骨骼发育及间充质干细胞分化中的作用进展 被引量：7
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作者 葛宇翔 滕华建 蒋青 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期182-186,共5页
Runt相关转录因子2(Runx2)是Runt相关基因家族成员之一,在个体发育和肿瘤发生等方面起重要作用。Runx2作为成骨细胞和软骨细胞形成过程中的关键调节因子,参与骨骼发育多个步骤的调节,对于成骨细胞和软骨细胞的发育成熟均起重要的作用。... Runt相关转录因子2(Runx2)是Runt相关基因家族成员之一,在个体发育和肿瘤发生等方面起重要作用。Runx2作为成骨细胞和软骨细胞形成过程中的关键调节因子,参与骨骼发育多个步骤的调节,对于成骨细胞和软骨细胞的发育成熟均起重要的作用。对于成骨细胞,Runx2在体内不仅是调控间充质干细胞向成骨细胞分化起始阶段的重要转录因子,又能抑制成骨细胞的成熟和增殖,阻止成骨细胞继续向骨细胞分化。对软骨细胞,Runx2可以影响软骨细胞的分化发育和肥大的进程,促进软骨细胞的肥大,还参与肥大过程中新生血管的生成,促进软骨内成骨;Runx2还可以促进软骨细胞的增殖和静止期软骨的肥大化,影响关节软骨的稳态。Runx2还影响体外间充质干细胞分化的过程,是应力以及缺氧等调控成骨分化的靶基因,也影响着成软骨分化的进程。我们就Runx2对骨骼发育及体外间充质干细胞分化的作用作一综述。 展开更多
关键词 runt相关转录因子2 成骨细胞 软骨细胞 干细胞分化 综述
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转录因子Runx2对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化能力的影响 被引量：7
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作者 张萍 何晓刚 +6 位作者 徐晓丹 张露 刘雪 刘亚坤 姜玉 汪思应 李菲菲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期577-583,共7页
目的:建立稳定敲减Runt相关转录因子2(Runx2)表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,探讨Runx2对MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化(EMT)、转移和侵袭能力的影响。方法:利用LV-Runx2-RNAi慢病毒载体感染MDA-MB-231细胞,构建稳定低表达Runx2的MDA-... 目的:建立稳定敲减Runt相关转录因子2(Runx2)表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,探讨Runx2对MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化(EMT)、转移和侵袭能力的影响。方法:利用LV-Runx2-RNAi慢病毒载体感染MDA-MB-231细胞,构建稳定低表达Runx2的MDA-MB-231细胞株,检测比较Runx2表达水平对MDA-MB-231细胞的形态及E-cadherin、N-cadherin、β-catenin和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。侵袭实验和软琼脂集落形成实验分析比较抑制Runx2表达对乳腺癌细胞侵袭和非锚定生长能力的效应。结果:E-cadherin蛋白表达在敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞中明显高于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05),而N-cadherin、β-catenin和MMP-9蛋白表达在敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞中明显低于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05)。敲减Runx2表达的MDA-MB-231细胞侵袭和非锚定生长能力明显低于常规MDA-MB-231细胞(P<0.05)。结论:在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中抑制Runx2表达可以通过调控EMT相关蛋白的表达进而抑制乳腺癌细胞的EMT过程,从而对细胞的侵袭和转移起负调控作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤转移 上皮-间充质转化 runt相关转录因子2
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