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蜂王浆对顺铂诱导HEK-293细胞损伤的保护作用及其机制研究 被引量：5
1
作者 李佳 喻凯 +3 位作者 何雨轩 冯彤彤 王红 陆群 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期241-245,共5页
目的探讨蜂王浆对顺铂诱导人胚肾细胞损伤的保护作用及其可能的机制。方法将细胞分为损伤组(100μg/ml CDDP)、蜂王浆(RJ)不同剂量组(CDDP+25、50、100μg/ml RJ)和正常对照组(等量溶剂)。各组经处理后,通过CCK-8法检测细胞增殖活力,比... 目的探讨蜂王浆对顺铂诱导人胚肾细胞损伤的保护作用及其可能的机制。方法将细胞分为损伤组(100μg/ml CDDP)、蜂王浆(RJ)不同剂量组(CDDP+25、50、100μg/ml RJ)和正常对照组(等量溶剂)。各组经处理后,通过CCK-8法检测细胞增殖活力,比色法测定培养基乳酸脱氢酶(LDH)活性反映细胞损伤情况;Hoechst33342/PI双染法分析细胞凋亡情况;测定细胞活性氧(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组比较,损伤组培养液中LDH活性增加,细胞损伤增加、增殖活力降低、凋亡增加,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞内SOD、CAT和GSH-Px活性降低,ROS含量增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。25~100μg/ml浓度范围内RJ能明显改善这些指标,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且改善作用和浓度呈正相关(P<0.05)。结论 100μg/ml CDDP可通过氧化损伤诱导的HEK-293细胞凋亡,活力降低。25~100μg/ml浓度范围内RJ能增加胞内SOD、CAT和GSH-Px 3种抗氧化酶活性,降低ROS含量,减轻这种损伤。 展开更多
关键词 蜂王浆 HEK-293细胞 顺铂 细胞凋亡 抗氧化
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适合蜂王浆蛋白质组的双向电泳技术 被引量：2
2
作者 赵方圆 吴亚君 +2 位作者 韩建勋 陈颖 葛毅强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期14-18,共5页
为建立适用于蜂王浆蛋白质组研究的双向电泳技术,对其中的IPG胶条的选择、蛋白质上样量、等电聚焦时间及SDS-PAGE凝胶浓度等关键步骤进行探索和优化。结果显示:蜂王浆蛋白质pH值主要分布在pH 5～8范围内,当上样量为150μg,聚焦时间达到3... 为建立适用于蜂王浆蛋白质组研究的双向电泳技术,对其中的IPG胶条的选择、蛋白质上样量、等电聚焦时间及SDS-PAGE凝胶浓度等关键步骤进行探索和优化。结果显示:蜂王浆蛋白质pH值主要分布在pH 5～8范围内,当上样量为150μg,聚焦时间达到32000V.h的情况下能充分地聚焦,第二向使用10%的梯度胶时获得的双向电泳图谱最佳,在优化后的蜂王浆双向电泳图谱上可检测到62±4蛋白点,重复性高,分辨率较好。优化后的双向电泳技术体系适合于蜂王浆全蛋白质的双向电泳分析。 展开更多
关键词 蜂王浆 蛋白质组 双向电泳 优化
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意大利蜜蜂AmMRJP5基因的克隆及原核表达
3
作者 赵方圆 陈颖 +1 位作者 吴亚君 葛毅强 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期220-226,共7页
从意大利蜜蜂Apismellfera L.的cDNA中克隆出MRJP5基因(简称AmMRJP5),构建pPAL7-AmMRJP5表达载体,并将其转入大肠杆菌原核表达系统,通过抗生素筛选和IPTG诱导获得重组蛋白的高效表达菌株,最后通过SDS-PAGE电泳和Western blot免疫印迹鉴... 从意大利蜜蜂Apismellfera L.的cDNA中克隆出MRJP5基因(简称AmMRJP5),构建pPAL7-AmMRJP5表达载体,并将其转入大肠杆菌原核表达系统,通过抗生素筛选和IPTG诱导获得重组蛋白的高效表达菌株,最后通过SDS-PAGE电泳和Western blot免疫印迹鉴定,确定AmMRJP5蛋白已在大肠杆菌中成功表达。 展开更多
关键词 AmMrjP5 克隆 原核表达 蜂王浆
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