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三焦针法对SAM小鼠血脑屏障通透性的改善作用及通过RhoA/ROCK通路的调控作用 被引量：9
1
作者 王煜 阚伯红 +2 位作者 赵岚 史慧妍 贾玉洁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1086-1091,共6页
目的:探讨三焦针法对SAM小鼠血脑屏障(BBB)通透性及RhoA/Rho相关蛋白激酶(ROCK)的影响,并阐明其作用机制。方法:36只SAMP8老年痴呆小鼠随机分为模型组、非穴位组(腹中线平行、过髂嵴尖端直上2 mm处,1.5寸毫针向下斜刺约3 mm,角度90°... 目的:探讨三焦针法对SAM小鼠血脑屏障(BBB)通透性及RhoA/Rho相关蛋白激酶(ROCK)的影响,并阐明其作用机制。方法:36只SAMP8老年痴呆小鼠随机分为模型组、非穴位组(腹中线平行、过髂嵴尖端直上2 mm处,1.5寸毫针向下斜刺约3 mm,角度90°~180°、频率60~120 min^(-1)、每侧各105 s)、穴位组[血海穴(双)直刺2~3 mm,大幅度(角度>180°)、低频率(频率<60 min^(-1))捻转泻法30 s,膻中、中脘、气海、足三里(双)直刺2~3 mm,小幅度(角度<90°)、高频率(频率>120 min^(-1))捻转泻法30 s],每组12只;12只SAMR1正常衰老小鼠作为对照组。采用Morris水迷宫实验评估各组小鼠学习和记忆功能,伊文思蓝染色法检测各组小鼠脑组织中伊文思蓝含量(代表BBB通透性),电镜下观察各组小鼠BBB超微结构,蛋白免疫印迹检测各组小鼠海马组织中闭合蛋白(Occludin)、密封蛋白5(Claudin-5)、闭锁连接蛋白1(ZO-1)、RhoA和ROCK蛋白表达水平。结果:模型组和非穴位组小鼠血管内皮细胞边界模糊,基底膜增厚,部分出现断裂现象,血管水肿明显;穴位组小鼠血管周围水肿现象明显缓解,内皮细胞基本处于正常状态,BBB情况得以改善。与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期、脑组织中伊文思蓝含量和海马组织中RhoA和ROCK蛋白表达水平升高(P<0.05),海马组织中Occludin、Claudin-5和ZO-1蛋白表达水平降低(P<0.05),空间探索时间减少(P<0.05);模型组与非穴位组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与非穴位组比较,穴位组小鼠逃避潜伏期、脑组织中伊文思蓝含量和海马组织中RhoA和ROCK蛋白表达水平降低(P<0.05),海马组织中Occludin、Claudin-5和ZO-1蛋白表达水平升高(P<0.05),空间探索时间增加(P<0.05)。结论:三焦针法可以改善SAM小鼠BBB通透性,其机制可能与抑制RhoA/ROCK通路有关。 展开更多
关键词 三焦针法 阿尔兹海默病 rhoa/rho相关蛋白激酶通路 血脑屏障
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丹酚酸B调节RhoA/ROCK1信号通路抑制糖尿病大鼠心肌纤维化的作用研究 被引量：3
2
作者 张昕 符丽娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1487-1491,共5页
目的基于RhoA/ROCK1信号通路,研究丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其作用机制。方法健康♂SD大鼠尾静脉一次性注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型;12周末,天狼星红试剂染色检测大鼠左室心肌胶原表达情况... 目的基于RhoA/ROCK1信号通路,研究丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其作用机制。方法健康♂SD大鼠尾静脉一次性注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型;12周末,天狼星红试剂染色检测大鼠左室心肌胶原表达情况;Western blot检测大鼠左室心肌中α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达。SD大鼠乳鼠差速贴壁培养心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFs),不同浓度的SalB(12.5,25,50μmol·L^(-1))预处理CFs 1 h,高糖诱导确定最佳给药剂量;免疫荧光检测CFs内RhoA蛋白表达;Western blot检测CFs内α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、RhoA、ROCK1蛋白表达。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠左室心肌组织胶原表达明显增多,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达明显升高,经SalB干预后,胶原表达明显减少,上述各蛋白表达明显降低(P<0.01)。25 mmol·L^(-1)高糖刺激CFs 24 h,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、RhoA、ROCK1表达明显升高,经SalB(25μmol·L^(-1))及抑制剂Y-27632(10μmol·L^(-1))预处理后,CFs活力明显受到抑制,上述各蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论SalB可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,对保护糖尿病大鼠心肌具有一定的作用,其机制可能是与抑制RhoA/ROCK1信号通路有关。 展开更多
关键词 丹酚酸B 糖尿病心肌病 心肌纤维化 高糖 心肌成纤维细胞 rhoa/rho相关蛋白激酶通路
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RhoA／Rho激酶信号通路在脑出血后血红蛋白影响血脑屏障通透性中的作用 被引量：7
3
作者 付正浩 陈祎招 +6 位作者 杨硕 邓心情 张润 丁锐 冯亮 张世忠 柯以铨 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1244-1248,共5页
目的探讨脑出血后血红蛋白是否通过激活RhoA／Rho激酶（ROCK）信号通路导致血脑屏障通透性增加。方法70只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组（10只1、假手术组（30只）和血红蛋白组（30只），后2组再按照观察时间点的不同分为6h、... 目的探讨脑出血后血红蛋白是否通过激活RhoA／Rho激酶（ROCK）信号通路导致血脑屏障通透性增加。方法70只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组（10只1、假手术组（30只）和血红蛋白组（30只），后2组再按照观察时间点的不同分为6h、12h和24h3个亚组（每个亚组10只）。血红蛋白组采用颅内注入血红蛋白法建立大鼠脑出血模型。采用伊文思蓝浓度检测评估各组大鼠血脑屏障的通透性，采用干湿法测定各组大鼠血肿周围脑组织的水含量．采用免疫组化染色检测RhoA和ROCK2蛋白在各组大鼠血脑屏障的表达分布情况，采用荧光定量PCR测定各组大鼠脑中RhoA和ROCK2mRNA的表达情况。结果与假手术组和正常对照组相比．血红蛋白组6h、12h和24h伊文思蓝渗透量和脑组织含水量均明显升高，差异均有统计学意义（RO．05）。免疫组化染色结果显示：正常对照组血脑屏障内皮细胞RhoA和ROCK2未见明显表达，血红蛋白组血肿侧血脑屏障内皮细胞中RhoA和ROCK2呈棕黄色表达，主要表达于胶质细胞的细胞质：实时荧光定量PCR结果显示：与正常对照组和假手术组相比．血红蛋白组RhoAmRNA表达在6h、12h和24h时均明显增高，血红蛋白组ROCK2mRNA表达在6h和12h均明显增高．差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论脑出血后血红蛋白可能通过激活RhoA／ROCK信号通路引起血脑屏障通透性增加，进而参与脑水肿的发生发展。 展开更多
关键词 脑出血 血红蛋白 rhoa rho激酶信号通路 血脑屏障
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JTE-013介导RhoA/ROCK1/Drp1信号轴调控线粒体损伤和凋亡缓解过敏性鼻炎 被引量：1
4
作者 陈娇 代龙珠 +4 位作者 陈牧 宋艺兰 延光海 王重阳 金永德 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1638-1647,共10页
目的探究JTE-013通过RhoA/ROCK1/Drp1通路调控线粒体损伤和凋亡对过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)保护作用及机制。方法用卵清蛋白(OVA)建立小鼠AR模型。造模结束后,记录揉鼻、打喷嚏的次数。然后鼻组织切片进行HE、TUNEL和DHE染色。... 目的探究JTE-013通过RhoA/ROCK1/Drp1通路调控线粒体损伤和凋亡对过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)保护作用及机制。方法用卵清蛋白(OVA)建立小鼠AR模型。造模结束后,记录揉鼻、打喷嚏的次数。然后鼻组织切片进行HE、TUNEL和DHE染色。在体外,通过人重组白细胞介素-13(IL-13)刺激人鼻黏膜上皮细胞(HNEpCs),Western blot法检测JTE-013和Y27632对RhoA、ROCK1、Drp1及其相关磷酸化的蛋白和细胞凋亡相关蛋白表达影响。免疫荧光观察JTE-013和Y27632对细胞总ROS、线粒体膜电位和线粒体ROS生成,Drp1易位情况以及Cyt-c的表达情况。结果JTE-013减少了AR小鼠的揉鼻和打喷嚏频率,减轻鼻黏膜增厚并降低嗜酸细胞浸润。TUNEL和DHE染色结果提示,JTE-013可以抑制小鼠鼻上皮细胞凋亡并减少ROS表达。Western blot结果表明,JTE-013和Y27632都能明显降低RhoA、ROCK1、Drp1及p-Drp1(616),抑制凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、Cyt-c、cleaved-caspase-9表达并上调了p-Drp1(637)、Bcl-2表达。免疫荧光显示JTE-013或ROCK1的抑制剂几乎阻断了IL-13介导鼻黏膜上皮细胞ROS和mtROS生成增加、抑制了线粒体膜电位降低,阻滞了Cyt-c表达和Drp1易位。结论JTE-013能够通过抑制RhoA/ROCK1/Drp1信号轴调节线粒体的形态和功能,从而缓解AR小鼠鼻黏膜上皮细胞炎症。 展开更多
关键词 JTE-013 rhoa/rho相关蛋白激酶通路 Drp1 线粒体损伤 细胞凋亡 过敏性鼻炎
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淫羊藿苷通过调节RhoA/ROCK信号通路改善AD神经元和树突损伤的机制 被引量：6
5
作者 何丽君 杨彬彬 +4 位作者 卓实 顾承真 丁雯 刘丹琪 徐小妹 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第21期90-97,共8页
目的:观察淫羊藿苷对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路的作用,并探讨其改善神经元和树突损伤的作用机制。方法:通过对大鼠双侧侧脑室注射β样淀粉蛋白1-42(Aβ_(1-42),2.... 目的:观察淫羊藿苷对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路的作用,并探讨其改善神经元和树突损伤的作用机制。方法:通过对大鼠双侧侧脑室注射β样淀粉蛋白1-42(Aβ_(1-42),2.5 g·L^(-1))建立AD模型,并将大鼠分为模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组(0.03、0.06、0.09 g·kg^(-1)),另设空白组。空白组和模型组按10 mL·kg^(-1)的剂量灌胃等体积的生理盐水。采用Morris水迷宫评估大鼠的认知功能。采用尼氏染色观察大鼠海马CA1区病理形态。采用高尔基染色观察大鼠海马CA1区树突棘密度和树突长度。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、RhoA、ROCK1和ROCK2的m RNA表达水平。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、RhoA、ROCK1和ROCK2的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.01),穿越平台次数和目标象限驻留时间显著减少(P<0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷中、高剂量组大鼠逃避潜伏期减少(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数和目标象限驻留时间增加(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠海马CA1区神经元数量、树突棘密度和树突长度显著减少(P<0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷中、高剂量组大鼠海马CA1区神经元数量、树突棘密度和树突长度增加(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、Rho A、ROCK1、ROCK2的m RNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷中、高剂量组大鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、Rho A、ROCK1、ROCK2的m RNA和蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01)。结论:淫羊藿苷改善AD认知功能、神经元和树突损伤可能与抑制Rho A/ROCK信号通路相关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淫羊藿苷 Ras同源基因家族成员A(rhoa)/rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路 神经元和树突损伤
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藁本内酯通过抑制RhoA/ROCK信号通路改善脂多糖诱导小鼠肾足细胞损伤
6
作者 顾海燕 王仲建 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第6期1573-1581,共9页
【目的】探讨藁本内酯对脂多糖(LPS)诱导小鼠肾足细胞损伤的改善作用及机制。【方法】(1)体内实验:将小鼠随机分为空白对照组,LPS诱导组,藁本内酯低、高剂量组及藁本内酯高剂量+pcDNA-NC(RhoA阴性对照)组、藁本内酯高剂量+pcDNA-RhoA(R... 【目的】探讨藁本内酯对脂多糖(LPS)诱导小鼠肾足细胞损伤的改善作用及机制。【方法】(1)体内实验:将小鼠随机分为空白对照组,LPS诱导组,藁本内酯低、高剂量组及藁本内酯高剂量+pcDNA-NC(RhoA阴性对照)组、藁本内酯高剂量+pcDNA-RhoA(RhoA过表达)组。除空白对照组,其他各组小鼠采用LPS诱导法构建急性肾损伤(AKI)模型。干预结束后,检测小鼠血清中尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,高碘酸-希夫(PAS)染色法观察小鼠肾脏组织的病理变化,Western Blot法检测肾脏组织中RhoA、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)蛋白的表达。(2)体外实验:将培养的小鼠足细胞MPC5分为空白对照组,LPS诱导组,藁本内酯低、高剂量组,藁本内酯高剂量+pcDNA-NC组,藁本内酯高剂量+pcDNA-RhoA组,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测足细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,鬼笔环肽染色法分析细胞骨架,Western Blot法检测细胞RhoA、ROCK蛋白的表达。【结果】与空白对照组比较,LPS诱导组小鼠血清中BUN和Cr的水平、肾小管损伤评分、RhoA和ROCK蛋白表达水平升高(P<0.05);与LPS诱导组比较,藁本内酯低、高剂量组小鼠血清中BUN和Cr水平、肾小管损伤评分、RhoA和ROCK表达水平降低(P<0.05)。与空白对照组比较,LPS诱导组MPC5细胞增殖活性、F-肌动蛋白荧光强度、RhoA和ROCK的表达降低(P<0.05),凋亡率升高(P<0.05);与LPS诱导组比较,藁本内酯低、高剂量组MPC5细胞增殖活性、F-肌动蛋白荧光强度、RhoA和ROCK的表达升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05)。利用过表达RhoA进行回补实验发现,RhoA过表达逆转了藁本内酯对LPS诱导小鼠肾组织和足细胞损伤的缓解作用(P<0.01)。【结论】藁本内酯可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路改善LPS诱导小鼠肾足细胞损伤。 展开更多
关键词 藁本内酯 急性肾损伤 rhoa/rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路 脂多糖 足细胞 小鼠
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川芎嗪对两肾一夹高血压模型大鼠心肌的保护作用及机制 被引量：2
7
作者 关丽文 黄良玖 +1 位作者 赵红梅 张爽 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期364-370,共7页
目的 探讨川芎嗪对两肾一夹高血压模型大鼠心肌的保护作用及对Ras同源基因家族蛋白A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)通路的影响。方法 通过两肾一夹法构建高血压大鼠模型,将SD雄性大鼠50只随机分成5组:假手术组(灌胃等量生理盐水)... 目的 探讨川芎嗪对两肾一夹高血压模型大鼠心肌的保护作用及对Ras同源基因家族蛋白A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)通路的影响。方法 通过两肾一夹法构建高血压大鼠模型,将SD雄性大鼠50只随机分成5组:假手术组(灌胃等量生理盐水),模型组(造模成功后灌胃等量生理盐水),坎地沙坦组[造模成功后灌胃10 mg/(kg·d)坎地沙坦],川芎嗪低、高剂量组[造模成功后分别灌胃30、50 mg/(kg·d)川芎嗪],每组各10只。每日1次,连续给药4周。通过血压仪测量给药2、4周后各组大鼠动脉收缩压、心率。末次给药24 h后,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血浆中内皮素1、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)含量,HE染色观察各组大鼠左心室心肌细胞形态变化,Masson染色观察心肌胶原组织结构变化,计算心肌胶原容积分数(CVF),实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测各组大鼠左心室组织RhoA、ROCK1、转化生长因子β;(TGF-β;)mRNA及蛋白表达情况。结果与假手术组相比,干预前,干预2、4周,模型组大鼠收缩压、心率升高(均P<0.05)。干预2、4周,与模型组相比,坎地沙坦组,川芎嗪低、高剂量组大鼠收缩压、心率降低(P<0.05);坎地沙坦组和川芎嗪高剂量组大鼠收缩压低于川芎嗪低剂量组(均P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠出现心肌细胞排列紊乱、细胞间隙不明显、纤维组织增生、排列不规则、有大量蓝色胶原组织表达等病理变化,心肌CVF升高;与模型组相比,坎地沙坦组,川芎嗪低、高剂量组大鼠上述病理变化明显减轻,心肌CVF降低[心肌CVF:坎地沙坦组(1.71±0.15)%比川芎嗪高剂量组(1.76±0.21)%比川芎嗪低剂量组(3.53±0.37)%比模型组(4.72±0.43)%比假手术组(1.15±0.10)%,F=230.903,P<0.001]。与假手术组相比,模型组大鼠血浆内皮素1、Ang 展开更多
关键词 川芎嗪 坎地沙坦 Ras同源基因家族蛋白A(rhoa)/rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)通路 两肾一夹 高血压 大鼠 心肌损伤
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