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电离辐射对人外周血淋巴细胞GADD45基因表达的影响 被引量:17
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作者 徐丽昕 艾辉胜 +5 位作者 蒋本荣 姚波 余长林 郭梅 黄雅静 孙琪云 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期111-114,共4页
观察生长抑制和DNA损伤基因45(Growth arrest and DNA damage gene 45,GADD45)X射线照射后表达的改变,并研究其与照射剂量之间的关系。外周血给予0-5 GyX线照射后分离出单个核细胞并培养,在不同时间点上用反转录聚合酶链反应(Reverse tr... 观察生长抑制和DNA损伤基因45(Growth arrest and DNA damage gene 45,GADD45)X射线照射后表达的改变,并研究其与照射剂量之间的关系。外周血给予0-5 GyX线照射后分离出单个核细胞并培养,在不同时间点上用反转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase-Polymerase clain reaction,RT-PCR)的方法测定 GADD45基因的相对表达量,分析该基因的剂量、效应关系。照射后GADD45基因在转录水平表达呈剂量依赖性增加,照射后4h达峰值,以后开始下降,但在24h仍未恢复到初始水平。 展开更多
关键词 研究生长抑制 DNA损伤基因45 生物剂量计 基因表达 反转录聚合酶链反应
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MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:10
2
作者 胡晓霞 李力 +4 位作者 黎丹戎 张玮 陈心秋 张洁清 唐步坚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1194-1198,共5页
背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-... 背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值(0.91±0.67)明显高于正常卵巢组织(0.15±0.34)。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ~Ⅳ期患者中的表达(1.13±0.66)显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者(0.60±0.54)(P<0.05);MMP-9其阳性患者平均生存时间为(43.00±17.12)个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者(100%)。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。 展开更多
关键词 MMP-9 卵巢癌 表达水平 MMP-7 TIMP-2 TIMP-1 TIMP-3 RNA 抑制剂 高表达
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逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移的临床意义 被引量:16
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作者 袁宏银 程伏林 +2 位作者 魏正专 杨国樑 陈家宽 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1069-1073,共5页
背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋... 背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋巴结中细胞角质蛋白CK20mRNA,揭示微转移灶的存在,并与常规病理苏木精伊红(HE)染色和免疫组化染色结果进行比较;分析HE染色和RT-PCR检测结果对判定临床病理分期和统计生存率的影响。结果:共检测432个淋巴结,HE染色、免疫组化染色和RT-PCR法淋巴结转移检出率分别为57.2%、62.3%和73.1%。HE染色和免疫组化的检出率无显著性差异(P>0.05),而HE染色和RT-PCR法检测结果有显著性差异(P<0.05)。56例患者中,按HE染色结果确定的PN0、PN1和PN2期,其5年无复发转移生存率分别为80%、60%和50%;通过RT-PCR技术检测,升级后的PN0、PN1和PN2期5年无复发转移生存率分别为100%、61.9%和55.6%,两种方法分析的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:HE染色未确切指出淋巴结微转移癌;RT-PCR法检测CK20mRNA可以推断淋巴结微转移癌的存在,从而有助于确定结直肠癌临床分期和预测预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 淋巴结微转移 逆转录聚合酶链反应 CK20
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醛固酮对豚鼠耳蜗离子通道蛋白的早期作用 被引量:8
4
作者 李琦 黄德亮 《中华耳科学杂志》 CSCD 2007年第2期221-224,共4页
目的检测醛固酮作用早期豚鼠耳蜗离子通道蛋白基因的表达改变情况。方法使用RT-PCR方法检测醛固酮腹腔注射后6小时豚鼠耳蜗中Na-K ATP酶β1、β3亚单位及钠离子通道蛋白α亚单位(ENaC αsubunit)基因表达的改变情况。结果在豚鼠耳蜗中Na... 目的检测醛固酮作用早期豚鼠耳蜗离子通道蛋白基因的表达改变情况。方法使用RT-PCR方法检测醛固酮腹腔注射后6小时豚鼠耳蜗中Na-K ATP酶β1、β3亚单位及钠离子通道蛋白α亚单位(ENaC αsubunit)基因表达的改变情况。结果在豚鼠耳蜗中Na-K ATP酶β1、β3亚单位的表达情况无明显改变,钠离子通道蛋白α亚单位则出现明显上调。结论醛固酮在豚鼠耳蜗中可能通过基因组作用方式发挥作用。 展开更多
关键词 醛固酮 耳蜗 离子通道蛋白 逆转录聚合酶链反应(rtpcr)
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荧光半定量逆转录-聚合酶链式反应检测大鼠死后肾mRNA 被引量:4
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作者 朱方成 蔡成忠 +3 位作者 王树法 刘良 任亮 朱少华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1628-1630,共3页
目的探讨荧光半定量逆转录-聚合酶链式反应(fluorescencesemi-quantitativereversetranscrip-tase-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测大鼠死后不同时间肾3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA含量变化对死亡时间(postmorteminterval,P... 目的探讨荧光半定量逆转录-聚合酶链式反应(fluorescencesemi-quantitativereversetranscrip-tase-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测大鼠死后不同时间肾3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA含量变化对死亡时间(postmorteminterval,PMI)推断的应用价值。方法28只大鼠断颈处死后置于20℃温控系统内,利用荧光标记半定量RT-PCR技术检测大鼠肾GAPDHmRNA在死后48h内相对表达量的变化情况。结果在死后即刻至40h内大鼠肾均可检测出GAPDHmRNA,且其扩增产物呈规律性下降。结论荧光半定量RT-PCR技术检测大鼠死后肾GAPDHmRNA含量变化对PMI推断具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 死亡时间(PMI) 荧光半定量技术 逆转录-聚合酶链式反应(rt-pcr) 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)
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RT-PCR检测膀胱移行细胞癌患者尿CK20 mRNA表达的研究 被引量:4
6
作者 罗春丽 韩永华 +4 位作者 吴小候 邹琳 刘彦慧 唐敏 蔡晓钟 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期105-107,共3页
目的 探讨膀胱移行细胞癌 (TCCB)患者尿细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )mRNA表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 6 1例TCCB患者、19例非肿瘤患者及 11例健康志愿者尿脱落细胞CK2 0mRNA。结果  6 1例TCCB患者中 5 2例... 目的 探讨膀胱移行细胞癌 (TCCB)患者尿细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )mRNA表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 6 1例TCCB患者、19例非肿瘤患者及 11例健康志愿者尿脱落细胞CK2 0mRNA。结果  6 1例TCCB患者中 5 2例尿脱落细胞CK2 0阳性表达 ,阳性率为 85 .3% ,对照组 30例中 2例表达 ,阳性率为 6 .7%。各分期尿CK2 0mRNA阳性率T1为 83.9% (2 6 / 31) ,T2 4期 86 .7% (2 6 / 30 ) ,两者差异无统计学意义 ;分级G1为 82 .8% (2 4 / 2 9) ,G2 85 .0 % (17/ 2 0 ) ,G3 91.7% (11/ 12 ) ,三者之间差异无统计学意义。行保留膀胱手术患者 5 1例 ,其中 4 2例术前尿CK2 0mRNA表达阳性 ,术后36例阴性 ,术后转阴率 85 .7%。 5 1例中有 2 9例 (术后尿脱落细胞CK2 0阳性表达 4例 )随访 6个月 ,4例CK2 0阳性表达者有2例 (5 0 % )复发 ,2 5例CK2 0阴性表达有 1例 (4 % )复发 ,两者复发率比较有统计学差异 (P <0 .0 0 5 )。结论 RT PCR检测尿脱落细胞CK2 0mRNA表达是诊断TCCB一种简便方法 ,其敏感性为 85 .3% ,特异性为 93.3% ,有助于膀胱TCCB的早期诊断和预后观察 。 展开更多
关键词 rtpcr 检测 膀胱移行细胞癌 尿CK20mRNA 表达 尿细胞角蛋白20
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小细胞肺癌患者外周血胃泌素释放肽前体mRNA的检测及其临床意义 被引量:3
7
作者 李媛 宋丽华 宋现让 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期358-361,共4页
目的探讨小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者外周血胃泌素释放肽前体(progastrin-releasing peptide,ProGRP)mRNA表达水平和血清ProGRP水平的相关性及其与临床病理因素、近期疗效的关系。方法收集61例初治小细胞肺癌患者,分... 目的探讨小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者外周血胃泌素释放肽前体(progastrin-releasing peptide,ProGRP)mRNA表达水平和血清ProGRP水平的相关性及其与临床病理因素、近期疗效的关系。方法收集61例初治小细胞肺癌患者,分别于第1次和第3次化疗前抽取外周静脉血,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RTPCR)法检测ProGRP mRNA的表达水平,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定患者血清ProGRP水平进行比较。结果 SCLC患者外周血ProGRP mRNA表达水平、血清ProGRP水平均与原发肿瘤大小、临床分期及远处转移相关(P<0.05)。直线相关分析表明外周血ProGRP mRNA表达水平与血清ProGRP水平具有相关性(R2=0.34,P<0.05)。化疗2周期后,PR+CR组患者外周血ProGRP mRNA表达水平及血清ProGRP水平均较治疗前明显下降(P<0.05),而SD+PD组患者化疗前后两者水平均无明显下降(P>0.05)。结论 ProGRP mRNA可作为检测SCLC患者外周血循环肿瘤细胞的标志物,定期监测外周血ProGRP mRNA表达水平变化有助于评估化疗疗效和预测预后;血清ProGRP水平检测也可以作为SCLC疗效判断和预后评估指标,且检测方法简便易行。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 循环肿瘤细胞 胃泌素释放肽前体 反转录聚合酶链反应
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细丝蛋白A与蛋白激酶B在小肠腺癌中的表达与意义 被引量:1
8
作者 张鸿滨 张朝军 《转化医学杂志》 2016年第1期14-18,共5页
目的探讨细丝蛋白A(filamin A,FLNA)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)在小肠腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法、逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(W... 目的探讨细丝蛋白A(filamin A,FLNA)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)在小肠腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法、逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western印迹法),检测56例小肠腺癌组织及正常小肠组织(距腺癌组织边缘5 cm以上)中FLNA、PKB的表达情况。结果小肠腺癌组织中FLNA mRNA表达低于正常小肠组织,而PKB mRNA的表达水平高于正常小肠组织(P<0.05)。小肠腺癌组织中FLNA表达低于正常小肠组织,而PKB的表达水平高于正常小肠组织(P<0.05)。FLNA、PKB的表达与患者性别、年龄、肿瘤组织学分级无关(P>0.05),而与肿瘤淋巴结转移、临床肿瘤分期和肿瘤浸润深度相关(P<0.05);Spearman秩相关系数显示FLNA与PKB表达呈负相关(r=-0.289,P=0.008)。结论 FLNA、PKB参与小肠腺癌的发生、发展过程,磷脂酰肌醇3-激酶/PKB信号通路的活化可作为临床潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 小肠肿瘤 细丝蛋白A 蛋白激酶B 磷脂酰肌醇3-激酶 免疫组织化学 逆转录-聚合酶链反应 蛋白质印迹法
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酪酪肽对胰腺癌细胞生长的抑制作用及Y受体在胰腺癌细胞的表达 被引量:1
9
作者 李红霞 董蕾 +1 位作者 姜炅 王新阳 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期713-716,共4页
目的观察酪酪肽(PYY)对体外培养的人胰腺癌Miapaca-2细胞的生长抑制作用及Y受体在胰腺癌细胞的表达。方法不同浓度的PYY分别作用于体外常规培养Miapaca-2细胞,采用MTT比色法检测细胞增殖情况,光镜观察细胞形态变化。RT-PCR法检测胰腺癌... 目的观察酪酪肽(PYY)对体外培养的人胰腺癌Miapaca-2细胞的生长抑制作用及Y受体在胰腺癌细胞的表达。方法不同浓度的PYY分别作用于体外常规培养Miapaca-2细胞,采用MTT比色法检测细胞增殖情况,光镜观察细胞形态变化。RT-PCR法检测胰腺癌细胞Y受体亚型Y1、Y2、Y5 mRNA表达。结果 PYY对Miapaca-2细胞生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);胰腺癌Miapaca-2细胞表达Y1、Y2和Y5受体,Y2受体表达较强。结论 PYY对体外培养的胰腺癌细胞有明显的抑制作用,胰腺癌Miapaca-2细胞主要表达Y2受体。 展开更多
关键词 酪酪肽 胰腺癌 Miapaca-2细胞株 Y受体 逆转录-聚合酶链反应 细胞增殖
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瘦素在胃腺癌组织和细胞中的表达和定位
10
作者 赵亮 沈磊 +1 位作者 沈志祥 罗和生 《临床消化病杂志》 2009年第1期8-11,共4页
目的研究胃腺癌组织中瘦素mRNA表达及其细胞定位,明确胃腺癌细胞是否存在瘦素自分泌调节现象和具有合成内源性瘦素的能力。方法采用RT-PCR和组织原位RT-PCR方法检测具有瘦素、瘦素受体蛋白双重表达的胃腺癌组织中瘦素mRNA的表达、细胞... 目的研究胃腺癌组织中瘦素mRNA表达及其细胞定位,明确胃腺癌细胞是否存在瘦素自分泌调节现象和具有合成内源性瘦素的能力。方法采用RT-PCR和组织原位RT-PCR方法检测具有瘦素、瘦素受体蛋白双重表达的胃腺癌组织中瘦素mRNA的表达、细胞定位情况。结果26例具有瘦素和瘦素受体蛋白双重表达的胃腺癌组经RT-PCR和组织原位RT-PCR方法检测发现瘦素mRNA表达均为阳性,定位于胃腺癌细胞的细胞质。结论胃癌细胞自身具有合成和分泌内源性瘦素的功能,存在瘦素自分泌调节现象,可视为胃源性瘦素在胃癌组织中的"异位分泌"。 展开更多
关键词 胃腺癌 瘦素 rtpcr 组织原位rtpcr
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EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF PTEN IN ENDOMETRIAL CARCINOMA
11
作者 葛秀君 刘志辉 +1 位作者 李英勇 高瑞萍 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第1期53-56,共4页
Objective: To investigate the expression of PTEN in endometrial carcinoma and its clinical significance. Methods: Reverse transcriptase-polymerase chain reaction and Western-blot methods were used to detect PTEN expre... Objective: To investigate the expression of PTEN in endometrial carcinoma and its clinical significance. Methods: Reverse transcriptase-polymerase chain reaction and Western-blot methods were used to detect PTEN expression in 28 cases of endometrial carcinoma. Results: mRNA and protein expression levels of PTEN in endometrial carcinomas were significantly lower than those in normal endometrium (P<0.01). Conclusion: PTEN may play an important role in the tumorigenesis of endometrial carcinoma. 展开更多
关键词 PTEN Endometrial carcinoma reverse transcriptase-polymerase chain reaction (rt-pcr) WESTERN-BLOT
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利用RT-PCR的方法检测恶性疟原虫海南株FCC1/HN CT基因在红细胞内期的表达及CTP基因真核表达载体的构建(英文)
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作者 陈慧红 余新炳 +2 位作者 吴忠道 徐劲 陆家海 《热带医学杂志》 CAS 2001年第1期10-12,共3页
目的 利用反转录PCR(RT-PCR)的方法检测CTP基因是否在恶性疟原虫红内期表达,并构建CTP因的真核表达载体,以便进一步研究其功能。方法 按常规方法体外培养红内期恶性疟原虫,用Trizol试剂提取红内期疟原虫总R... 目的 利用反转录PCR(RT-PCR)的方法检测CTP基因是否在恶性疟原虫红内期表达,并构建CTP因的真核表达载体,以便进一步研究其功能。方法 按常规方法体外培养红内期恶性疟原虫,用Trizol试剂提取红内期疟原虫总RNA.通过RT-PCR方法扩增恶性疟原虫FCC1/HN珠CTP M码基因并构建CTP基因的真核表达载体。结果 获得了恶性疟原虫CTPcDNA的全编码区序列并将其克隆入真核表达载体pcDNA3。结论(CTP基因在恶性疟原虫FCC1/HN株红细胞内期表达并成功地构建了CTP基因的重组表达质粒。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 反转录聚合酶链式反应 磷酸胆碱胞苷酰转移酶 CTP 基因 基因真核表达载体 红细胞
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SENP-1在脐带血造血干细胞中的表达研究
13
作者 卞咏梅 刘金宏 谢毅 《中国优生与遗传杂志》 2014年第7期11-13,共3页
目的分析苏素特异蛋白酶1(SENP-1)在脐带血造血干细胞(UCB-HSCs)中的表达情况。方法通过逆转录多聚酶连反应(RT-PCR)法检测SENP-1分子mRNA水平,以?-action为内对照;实验分为对照组A组、B组,实验组C组、D组、E组,每组检测15例标本。结果... 目的分析苏素特异蛋白酶1(SENP-1)在脐带血造血干细胞(UCB-HSCs)中的表达情况。方法通过逆转录多聚酶连反应(RT-PCR)法检测SENP-1分子mRNA水平,以?-action为内对照;实验分为对照组A组、B组,实验组C组、D组、E组,每组检测15例标本。结果对照组中A组和B组均未表达SENP-1mRNA,实验组中C组、D组、E组均表达SENP-1类分子mRNA,以SENP-1mRNA积分光密度值/?-actin mRNA积分光密度值比较各组冻存前后及冻存时间长短SENP-1表达差异,C组为0.146±0.011,D组为0.314±0.011,E组为0.368±0.019。结论白血病细胞(HL-60)不表达SENP-1mRNA分子,即使经炎症因子r-干扰素(IFN-r)刺激也不表达,不能有效激活CD8+杀伤T细胞(CTL),是发生免疫逃逸的重要原因;脐带血造血干细胞中均有SENP-1的表达,随着冻存时间越久,SENP-1表达量越下降,表明冻存可以使脐带血干细胞的免疫原性下降。 展开更多
关键词 脐带血造血干细胞 苏素特异蛋白酶1 逆转录多聚酶连反应
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可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)与不明原因复发性流产的相关性研究 被引量:14
14
作者 庞丽红 李敏清 +3 位作者 杨冬梅 石凌 臧宁 林伟雄 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期58-61,共4页
目的:探讨可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1)与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法:①采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定30例原因不明复发性流产胚胎停育患者(URSA组)和30例正常早孕孕妇(对照组)血清sFlt-1水平;②采用逆转录聚... 目的:探讨可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1)与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法:①采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定30例原因不明复发性流产胚胎停育患者(URSA组)和30例正常早孕孕妇(对照组)血清sFlt-1水平;②采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定各组孕妇绒毛组织sFlt-1mRNA表达水平。结果:复发性流产胚胎停育组与正常早孕对照组血清sFlt-1水平分别为13796.67±11917.08ng/L和3540.67±2989.80ng/L;复发性流产胚胎停育组与正常早孕对照组绒毛组织sFlt-1mRNA表达水平两组计量资料不符合正态分布,用Mann-Whitney秩和检验比较,RSA组sFlt-1mRNA均秩为41.37,正常组sFlt-1mRNA均秩为19.63,P<0.01,组间差异非常显著性意义(P<0.01)。结论:sFlt-1表达异常与复发性流产具有相关性,其表达水平升高可能参与RSA发生的病理生理过程。 展开更多
关键词 可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1) 原因不明复发性流产(uRSA) ELISA rt-pcr
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VEGF-C和FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义 被引量:7
15
作者 刘杏娥 毛伟敏 《实用癌症杂志》 2007年第1期44-46,共3页
目的研究VEGF-C、FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用半定量RT-PCR和免疫组化方法,检测60例非小细胞肺癌肿瘤组织中VEGF-C、FLT-4的表达。结果60例非小细胞肺癌组织中,36例(60%)VEGF-C阳性表达,30例(50%)... 目的研究VEGF-C、FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用半定量RT-PCR和免疫组化方法,检测60例非小细胞肺癌肿瘤组织中VEGF-C、FLT-4的表达。结果60例非小细胞肺癌组织中,36例(60%)VEGF-C阳性表达,30例(50%)FLT-4阳性表达。有淋巴结转移者VEGF-C和FLT-4的阳性表达率分别为80.5%和69.4%,明显高于淋巴结阴性组(29.2%和33.3%),有非常显著性差异(P值均<0.01)。经半定量RT-PCR分析,VEGF-C和FLT-4在有淋巴结转移者中的表达量明显高于无淋巴结转移者,有显著性差异(分别为P<0.01,P<0.05)。结论VEGF-C及其受体FLT-4的表达与非小细胞肺癌的淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子C 血管内皮生长因子受体-3 半定量rtpcr 肿瘤转移 免疫组织化学
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乌头、白及配伍存在基于CYP3A1/2的相互作用 被引量:11
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作者 金科涛 王宇光 +2 位作者 石苏英 沈建幸 高月 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期598-602,共5页
目的:阐明基于药物代谢酶的乌头、白及配伍产生相互作用的机制。研究二者合用对主要药物代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2在酶活性、mRNA水平和蛋白质水平的影响。方法:采用高效液相色谱法测定CYP1A2、CYP2E1活性;采用紫外-可见分光光度... 目的:阐明基于药物代谢酶的乌头、白及配伍产生相互作用的机制。研究二者合用对主要药物代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2在酶活性、mRNA水平和蛋白质水平的影响。方法:采用高效液相色谱法测定CYP1A2、CYP2E1活性;采用紫外-可见分光光度法测定CYP3A1/2活性;分别采用RT-PCR和WesternBlot方法评价药物对CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA及蛋白水平的影响。结果:乌头、白及合用后CYP3A1/2的酶活性明显下降;Western Blot检测显示CYP1A2、CYP3A1、CYP3A2的蛋白质表达水平下降;RT-PCR检测显示CYP1A2、CYP3A1、CYP3A2的mRNA水平均上升。结论:乌头、白及合用后抑制CYP3A1/2的酶活性,乌头、白及配伍存在基于CYP3A1/2的药物相互作用。 展开更多
关键词 细胞色素P450 酶活性 蛋白质免疫印迹 反转录聚合酶链式反应
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用RT-PCR快速检测血清中的登革热病毒及分型 被引量:7
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作者 文建华 梁凤屏 +1 位作者 陈伟师 郝瑞峰 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1997年第6期447-451,共5页
目的:检测血清中的登革热(DF)病毒.并进行分型研究。方法:采用SiO2快速提取DF病毒RNA,用通用引物(D1~D4型)RT-PCR扩增方法,检测广东省1995年55份疑似DF患者急性期(1~7天)血清标本中的DF病毒RNA,并与病毒分离法相比较。... 目的:检测血清中的登革热(DF)病毒.并进行分型研究。方法:采用SiO2快速提取DF病毒RNA,用通用引物(D1~D4型)RT-PCR扩增方法,检测广东省1995年55份疑似DF患者急性期(1~7天)血清标本中的DF病毒RNA,并与病毒分离法相比较。结果;病毒分离阳性率为49.09%,RT-PCR的检出率为38.18%,敏感性为77.78%,特异性为100%,符合率为89.09%,两者差异无显著性(X2=2.08,P>0.05)。用通用引物扩增D1~D4型标准毒株和标本,出现511bp的扩增带,乙脑病毒不出现扩增带。用HinfⅠ、HaeⅢ、HincⅡ和Sau3aⅠ等4种限制性内切酶,对D1~D4型标准毒株的RT-PCR产物进行酶切分型,用琼脂糖电泳,结果HinfⅠ和HaeⅢ对D1~D4型均能酶切,Sau3aⅠ能酶切D1~D3型,HincⅡ能酶切D1和D4型。根据两种或以上的酶切结果,可以对DF病毒的型别作出鉴定。用这4种酶对5份标本进行酶切分型,结果与D1型标准毒株的电泳带型相同。结论:用本方法检出DF病毒的RNA仅需5~6小时,在2天内可以鉴定出型别,是诊断DF病毒感染的一种快速简单的方法。 展开更多
关键词 登革病毒 分型 微生物学检验 聚合酶链反应
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白血病患者WT1基因表达及其临床意义 被引量:5
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作者 李晓云 李洪滨 +2 位作者 张丽杰 孙文洲 马文杰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期686-689,共4页
目的:探讨WT1基因在白血病中表达情况与临床意义。方法:采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(NestRT-PCR)检测K562白血病细胞系、78例急性白血病(AL)患者、10例慢性粒细胞白血病(CML)患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果:6... 目的:探讨WT1基因在白血病中表达情况与临床意义。方法:采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(NestRT-PCR)检测K562白血病细胞系、78例急性白血病(AL)患者、10例慢性粒细胞白血病(CML)患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果:60例初治或复发AL中有44例患者高表达WT1基因,阳性率73.3%。在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)阳性率分别为70.8%和83.3%,两组无显著性差异。随着WT1基因表达水平的升高,完全缓解(CR)率有明显下降的趋势,CR后WT1基因表达水平明显下降,复发后又显著升高。结论:用NestRT-PCR测定WT1基因的表达可用作检测白血病微小残留病(MRD)的一项指标。 展开更多
关键词 白血病 WT1 基因 微小残留病 逆转录聚合酶链反应
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抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39轻链可变区基因的克隆与序列分析
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作者 沈树泉 周筱梅 +2 位作者 黄强 周丽英 杜子威 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 1996年第2期72-74,共3页
从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,并以Oligo(dT)柱纯化mRNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)直接扩增出318bp的轻链可变区(VL)cDNA片断,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了S... 从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA,并以Oligo(dT)柱纯化mRNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)直接扩增出318bp的轻链可变区(VL)cDNA片断,经核苷酸序列分析研究,证实已获得了SZ-39单抗轻链可变区基因。这为今后进一步制备基因工程抗体打下基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体 可变区基因 胶质瘤 脑肿瘤
原文传递
RT-PCR技术检测猪瘟病毒的应用研究 被引量:34
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作者 罗廷荣 莫扬 +7 位作者 吴文德 黄玉华 黄伟坚 秦爱珍 刘芳 温荣辉 陆芹章 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期307-309,312,共4页
本试验应用反转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PC... 本试验应用反转录_聚合酶链式反应 (RT_PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT_PCR对来自广西不同地区的 135份疑似猪瘟病料进行检测 ,84份诊断为阳性 ,阳性率 6 2 2 %。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共 2 76份 ,经RT_PCR检测 ,37份为阳性 ,阳性率为 13 4 %。其中健康猪扁桃体带毒较高 ,2 4 6份扁桃体中有 35份阳性 ,占 14 2 %。采自柳州健康猪的 2 6份淋巴结材料全为阴性 ,只有邕宁县的 1份健猪淋巴结阳性。结果表明 ,RT_PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断。 展开更多
关键词 猪瘟 反转录-聚合酶链式反应 诊断
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