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包装细胞转导提高逆转录病毒滴度的研究
1
作者
傅建新
陈子兴
+2 位作者
王玮
岑建农
阮长耿
《江苏医药》
CAS
CSCD
1998年第10期706-708,共3页
将含标志基因NeoR的逆转录病毒载体pLXSN用脂质体转染法导入包装细胞,然后利用宿生范围不同的包装细胞(PA317/GP+envAm12与GP+E86)相互转导来提高病毒滴度,并用敏感方法检测其安全性。结果显示脂质体DOSPER转染法获得生产细胞的...
将含标志基因NeoR的逆转录病毒载体pLXSN用脂质体转染法导入包装细胞,然后利用宿生范围不同的包装细胞(PA317/GP+envAm12与GP+E86)相互转导来提高病毒滴度,并用敏感方法检测其安全性。结果显示脂质体DOSPER转染法获得生产细胞的病毒滴度为(2.0~8.0)×105CFU/ml,而病毒相互转导方法则为(2.8~16)×106CFU/ml,可提高滴度达10倍以上;以NIH3T3细胞为靶细胞证实NeoR基因可被重组病毒转移至靶细胞基因组,巢式PCR与标志基因补救分析均未能检测到野生型辅助病毒。提示“乒乓效应”为提高病毒滴度的有效方法且无辅助病毒产生,因而该基因转移系统是安全的。
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关键词
逆转录病毒
基因转移
基因标记
白血病
基因治疗
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题名
包装细胞转导提高逆转录病毒滴度的研究
1
作者
傅建新
陈子兴
王玮
岑建农
阮长耿
机构
苏州医学院附属第一医院江苏省血液研究所
出处
《江苏医药》
CAS
CSCD
1998年第10期706-708,共3页
基金
国防科技预研项目!55.73.1.01-1资助
江苏省卫生厅科技基金!H9549
国家自然科学基金!39770306
文摘
将含标志基因NeoR的逆转录病毒载体pLXSN用脂质体转染法导入包装细胞,然后利用宿生范围不同的包装细胞(PA317/GP+envAm12与GP+E86)相互转导来提高病毒滴度,并用敏感方法检测其安全性。结果显示脂质体DOSPER转染法获得生产细胞的病毒滴度为(2.0~8.0)×105CFU/ml,而病毒相互转导方法则为(2.8~16)×106CFU/ml,可提高滴度达10倍以上;以NIH3T3细胞为靶细胞证实NeoR基因可被重组病毒转移至靶细胞基因组,巢式PCR与标志基因补救分析均未能检测到野生型辅助病毒。提示“乒乓效应”为提高病毒滴度的有效方法且无辅助病毒产生,因而该基因转移系统是安全的。
关键词
逆转录病毒
基因转移
基因标记
白血病
基因治疗
Keywords
retrovirus
gene
transfer
gene
marking
polymerase
chain
reaetion
分类号
R733.705 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
包装细胞转导提高逆转录病毒滴度的研究
傅建新
陈子兴
王玮
岑建农
阮长耿
《江苏医药》
CAS
CSCD
1998
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