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农杆菌介导玉米遗传转化影响因子的研究 被引量：25
1
作者 袁鹰 李启云 +4 位作者 郝文媛 谭化 孔祥梅 张光弟 刘德璞 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第2期228-232,共5页
以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美国杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体,利用农杆菌介导法转化Bt(CryIA.)基因,研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除... 以东北春玉米自交系7922、340、78599、921及美国杂交种H99等幼胚愈伤组织为受体,利用农杆菌介导法转化Bt(CryIA.)基因,研究菌液预处理、愈伤组织状态、侵染培养基、侵染时间及共培养条件等因素对转化频率的影响。根据转化愈伤组织的除草剂(Basta)抗性筛选结果评估转化率,表明继代培养3￣5d的愈伤组织适于转化,其中以继代5d的7922愈伤组织转化率最高,为46.6%;不同基因型对农杆菌转化率存在差异,H99的抗性愈伤组织率为34.57%,7922为26.27%、340为21.36%、78599和921抗性愈伤组织率仅为8.02%和6.78%。基因型间差异显著;浸染培养基中加入(AS100￣200mg/L)抗性愈伤转化率明显提高;菌液浓度OD6000.5￣0.6、侵染时间5￣10min、共培养时间3d最佳。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 转化频率 影响因素 抗性愈伤组织
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农杆菌介导籼稻转化体系的优化 被引量：9
2
作者 潘素君 戴良英 +2 位作者 刘雄伦 张昊 王国梁 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期263-268,共6页
以8个籼稻品种作材料，研究了携带抗稻瘟病基因Pi9片段的pCAMBIA1301质粒的根癌农杆菌EHA105转化籼稻幼胚愈伤组织的影响因素。结果表明，NB培养基适用于籼稻愈伤组织的诱导，共培养时间以3d为宜。40mg/L的潮霉素可用于籼稻愈伤组织的... 以8个籼稻品种作材料，研究了携带抗稻瘟病基因Pi9片段的pCAMBIA1301质粒的根癌农杆菌EHA105转化籼稻幼胚愈伤组织的影响因素。结果表明，NB培养基适用于籼稻愈伤组织的诱导，共培养时间以3d为宜。40mg/L的潮霉素可用于籼稻愈伤组织的筛选，抗性愈伤率在69．4％-85．3％之间；抗性愈伤组织经分化培养，幼苗分化率在15．4％-47．4％；鉴于多数籼稻愈伤组织分化时对潮霉素特别敏感，因此分化培养基中不加潮霉素；但为了减少假阳性，生根培养基中分别用20mg／L和30mg／L的潮霉素对幼苗进行筛选。 展开更多
关键词 籼稻 抗性愈伤 分化 潮霉素
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籼稻不同品种的遗传转化和植株再生 被引量：6
3
作者 王慧梅 殷丽青 +1 位作者 王新其 沈革志 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2002年第1期7-12,共6页
用携带水稻蜡质基因反义 RNA片段的 p1 3 W4质粒的根癌农杆菌 EHA1 0 5 ,分别感染籼稻品种龙特甫 B、协青早B、珍汕 97B和 -3 2 B的幼胚愈伤组织 ,经共培养和在潮霉素 2 5～ 5 0 mg/L浓度下的二次筛选后 ,获得了对潮霉素表现抗性的愈... 用携带水稻蜡质基因反义 RNA片段的 p1 3 W4质粒的根癌农杆菌 EHA1 0 5 ,分别感染籼稻品种龙特甫 B、协青早B、珍汕 97B和 -3 2 B的幼胚愈伤组织 ,经共培养和在潮霉素 2 5～ 5 0 mg/L浓度下的二次筛选后 ,获得了对潮霉素表现抗性的愈伤组织 ,抗性愈伤组织的频率在 2 0 .1 %～ 2 7.1 %之间 ;抗性愈伤组织经分化培养 ,分化频率在 1 2 .0 %～ 2 1 .2 %。品种间绿菌分化情况存在较大差异 ,龙特甫 B的抗性愈伤组织分化成绿苗的频率为 8.8% ;珍汕 97B的抗性愈伤组织虽能分化 ,但是 ,无法获得绿苗。对转基因植株分别进行了 GUS活性测定和 PCR检测 ,结果显示 :获得的转基因植株 ,92 %的植株GUS检测呈阳性反应 ,并能正常结实 ,在 T1种子的胚乳中也能检测到 GUS染色的分离 ,证明外源基因确已导入这些植株中 ,而且 ,能正常遗传。在抗性愈伤组织的分化中 ,试验了潮霉素对分化的影响 ,结果显示 :不添加潮霉素 ,能明显地提高绿苗频率 ,但转基因植株的可靠性也随之下降。 展开更多
关键词 灿稻 抗性愈伤组织 分化 潮霉素 遗传转化 植株再生 根癌农杆菌介导 蜡质基因反义RNA
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水稻基因枪转化过程中抗性愈伤的生长规律 被引量：1
4
作者 林鸿生 华志华 +2 位作者 张祥喜 颜美仙 黄大年 《江西农业学报》 CAS 2000年第1期5-9,共5页
从籼稻基因枪转化过程中选择压的确定、愈伤组织的生长规律以及不同分化培养基对抗性愈伤出苗率的影响上 。
关键词 抗性愈伤 生长规律 基因枪转化 水稻
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抗赖氨酸加苏氨酸芦笋细胞变异体的筛选与鉴定
5
作者 尹延海 陈晖 +1 位作者 匡伯健 王敬驹 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1990年第1期79-82,共4页
1974年,Green 等提出用赖氨酸加苏氨酸可能筛选得到积累赖氨酸、苏氨酸或甲硫氨酸的突变体。迄今已在玉米,大麦,胡萝卜等材料中得到成功。本实验的目的在于建立有效的芦笋筛选体系并得到对赖氨酸加苏氨酸具抗性的愈伤组织,为进一步得到... 1974年,Green 等提出用赖氨酸加苏氨酸可能筛选得到积累赖氨酸、苏氨酸或甲硫氨酸的突变体。迄今已在玉米,大麦,胡萝卜等材料中得到成功。本实验的目的在于建立有效的芦笋筛选体系并得到对赖氨酸加苏氨酸具抗性的愈伤组织,为进一步得到天冬氨酸族某些氨基酸含量提高的芦笋突变体奠定基础。 展开更多
关键词 芦笋 赖氨酸加苏氨酸 抗性愈伤组织
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荔枝转基因抗性胚性愈伤组织的酯酶同工酶分析 被引量：2
6
作者 赖呈纯 赖钟雄 +1 位作者 车建美 郭志雄 《亚热带农业研究》 2005年第2期21-23,共3页
通过对荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(EC)的酯酶(EST)同工酶分析发现,9个转基因抗性EC的EST同工酶谱带没有差异,并且与对照的未转化HX30的细胞系差异也不大,这表明荔枝胚性愈伤组织的酯酶同工酶具有保守性,并未受到转基因的影响,可以作为... 通过对荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(EC)的酯酶(EST)同工酶分析发现,9个转基因抗性EC的EST同工酶谱带没有差异,并且与对照的未转化HX30的细胞系差异也不大,这表明荔枝胚性愈伤组织的酯酶同工酶具有保守性,并未受到转基因的影响,可以作为不同荔枝品种转基因材料混杂鉴定的标记。 展开更多
关键词 胚性愈伤组织 同工酶分析 荔枝 抗性 同工酶谱带 酯酶同工酶 转基因材料 EST 细胞系 保守性
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