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二株B亚群禽白血病病毒全基因组序列及其在细胞上的复制性比较 被引量:9
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作者 武专昌 朱美真 +3 位作者 边晓明 马诚太 赵鹏 崔治中 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期447-455,共9页
本研究比较了从山东地方品系鸡群分离到的二株B亚型禽白血病病毒(ALV)SDAU09E3和SDAU09C2的全基因组序列及它们在细胞培养上的复制动态。这二株ALV-B的同源性为95.4%,与GenBank中3株B亚群参考株之间的同源性也均在91.0%~94.9%间,而与... 本研究比较了从山东地方品系鸡群分离到的二株B亚型禽白血病病毒(ALV)SDAU09E3和SDAU09C2的全基因组序列及它们在细胞培养上的复制动态。这二株ALV-B的同源性为95.4%,与GenBank中3株B亚群参考株之间的同源性也均在91.0%~94.9%间,而与其它亚群参考株的同源性均低于87.9%。与亚群无关的gag、pol基因和LTR的核苷酸序列比较表明,这二株ALV-Bgp85基因的gag和pol基因与所有比较的参考株的同源性均在93%以上。LTR与其他外源性ALV参考株的LTR间的同源性在72.6%~88.3%范围内,但与E亚群内源性ALV的LTR的同源性只有51.5%。然而,这二个ALV-B的LTR的同源性也只有74.8%,远低于其他基因组部分的同源性,特别是它们的LTR的U3区同源性只有68.8%,二者在二个CAAT分布上也显著不同。对这二株ALV-B在DF-1细胞上的复制动态比较表明,它们在细胞培养上清液中的TCID50值非常类似,但SDAU09E3株核衣壳蛋白p27抗原的含量显著高于SDAU09C2株。这表明,同一亚群的不同毒株在复制过程中,所表达的p27抗原量与所形成的具有传染性的病毒量间没有平行关系。这一差异与LTR-U3区的相关性则有待应用感染性克隆技术来做进一步深入研究。 展开更多
关键词 B亚型禽白血病病毒 全基因组核苷酸序列 LTR比较 复制能力
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登革2型病毒在RAW264.7细胞和THP-1细胞中复制能力及免疫激活能力的比较
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作者 牟小会 吴家红 +1 位作者 张海龙 匡贵榕 《医学理论与实践》 2024年第17期2897-2901,共5页
目的:比较登革2型病毒(DENV2)在RAW264.7细胞和THP-1细胞中的复制能力及DENV2对这两种靶细胞的免疫激活作用。方法:将DENV2病毒液与靶细胞(RAW264.7细胞和THP-1细胞)分别孵育6h、12h、24h,孵育结束后收集细胞,Trizol法提取不同时间的细... 目的:比较登革2型病毒(DENV2)在RAW264.7细胞和THP-1细胞中的复制能力及DENV2对这两种靶细胞的免疫激活作用。方法:将DENV2病毒液与靶细胞(RAW264.7细胞和THP-1细胞)分别孵育6h、12h、24h,孵育结束后收集细胞,Trizol法提取不同时间的细胞总RNA,检测RNA纯度和浓度后逆转录为cDNA,使用qRT-PCR检测样本中病毒目的基因DENV2 E及细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-β、ISG15、CCL2的mRNA相对表达量。结果:DENV2感染RAW264.7细胞和THP-1细胞后,DENV2 E基因的表达量均显著上调(P<0.05),且呈现逐渐增加的趋势。6h、12h时,DENV2 E基因在两个靶细胞中的相对表达量一致;24h时,DENV2 E基因在RAW264.7细胞中的相对表达量显著高于THP-1细胞。与未感染DENV2组相比,DENV2感染RAW264.7细胞和THP-1细胞6h、12h、24h后,IL-1β、IL-6、TNF-α、ISG15、IFN-β、CCL2基因的相对表达量均显著升高(P<0.05),且在RAW264.7细胞中的相对表达量显著高于THP-1细胞。结论:DENV2在RAW264.7细胞中的复制能力强于THP-1细胞的复制能力,且DENV2在RAW264.7细胞中具有更强的免疫激活能力。 展开更多
关键词 DENV2 RAW264.7细胞 THP-1细胞 复制能力 免疫激活
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Effect of amino acid mutation at position 127 in 3A of a rabbitattenuated foot-and-mouth disease virus serotype Asia1 on viral replication and infection 被引量:2
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作者 Aiguo Xin Mingwang Zhu +5 位作者 Qi Hu Haisheng Miao Zhenqi Peng Yuwen He Lin Gao Huachun Li 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期291-298,共8页
An amino acid mutation(R127→I) in the 3A non-structural protein of an FMDV serotype Asia1 rabbit-attenuated ZB strain was previously found after attenuation of the virus. To explore the effects of this mutation on vi... An amino acid mutation(R127→I) in the 3A non-structural protein of an FMDV serotype Asia1 rabbit-attenuated ZB strain was previously found after attenuation of the virus. To explore the effects of this mutation on viral replication and infection, the amino acid residue isoleucine(I) was changed to arginine(R) in the infectious cDNA clone of the rabbit-attenuated ZB strain by sitedirected mutagenesis, and the R127-mutated virus was rescued. BHK monolayer cells and suckling mice were inoculated with the R127-mutated virus to test its growth property and pathogenicity, respectively. The effects of the R127 mutation on viral replication and virulence were analyzed. The data showed that there was a slight difference in plaque morphology between the R127-mutated and wild-type viruses. The growth rate of the mutated virus was lower in BHK-21 cells and its virulence in suckling mice was also attenuated. This study indicates that the R127 mutation in 3A may play an important role in FMDV replication in vitro and in pathogenicity in suckling mice. 展开更多
关键词 foot-and-mouth disease virus(FMDV) 3A protein MUTATION replication ability VIRULENCE
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模因论视角下的高校英语阅读教学 被引量:3
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作者 赵一奇 《黑龙江教育学院学报》 2013年第9期169-171,共3页
作为一种阐释文化演变规律的新理论,模因论为语言学及语言教学提供了崭新的研究视角。基于此,以模因论为着眼点,以高校英语阅读教学的现状为研究对象,探讨模因论与英语阅读教学的关系,并指出根据语言模因复制、模仿的规律进行阅读教学,... 作为一种阐释文化演变规律的新理论,模因论为语言学及语言教学提供了崭新的研究视角。基于此,以模因论为着眼点,以高校英语阅读教学的现状为研究对象,探讨模因论与英语阅读教学的关系,并指出根据语言模因复制、模仿的规律进行阅读教学,建立行之有效的策略,有助于提高学生的阅读能力和教学效果。 展开更多
关键词 模因论 英语阅读教学 复制和模仿 阅读能力
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鸭肠炎病毒UL41基因缺失株的构建及其体外增殖能力分析 被引量:1
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作者 杨伏春 刘芮 +7 位作者 李晓涵 高立 刘长军 祁小乐 崔红玉 王笑梅 高玉龙 李凯 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2689-2696,共8页
旨在构建鸭肠炎病毒(DEV)UL41基因缺失毒株,并对其生物学特性进行分析,本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架,利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41;将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因... 旨在构建鸭肠炎病毒(DEV)UL41基因缺失毒株,并对其生物学特性进行分析,本研究以克隆有DEV UL41基因的重组黏粒D1为骨架,利用Red/ET重组技术构建缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41;将UL41基因缺失重组黏粒D1 dUL41与其他4个克隆有DEV基因组片段的亲本黏粒共转染鸭胚成纤维细胞(DEF),拯救获得UL41基因缺失毒株rDEV-SD19/dUL41。将该基因缺失病毒感染DEF后,提取病毒基因组进行PCR鉴定及测序,并利用间接免疫荧光试验检测该病毒感染细胞中UL41基因表达情况;绘制拯救的基因缺失病毒的生长曲线,分析其体外复制特性。PCR及测序结果显示,本研究成功构建了缺失UL41基因的重组黏粒D1 dUL41。将该基因缺失黏粒与其他含有DEV基因组的亲本黏粒共转染DEF后能够产生典型的蚀斑病变。PCR及测序结果显示,UL41基因成功从DEV基因组中缺失;间接免疫荧光试验发现,基因缺失病毒rDEV-SD19/dUL41感染DEF后,未见UL41蛋白表达。综上表明,本研究成功构建了DEV UL41基因缺失病毒。体外生长曲线显示,rDEV-SD19/dUL41在DEF中的复制能力明显低于亲本病毒,提示UL41蛋白在DEV复制中发挥重要作用。UL41基因缺失DEV的构建为进一步研究UL41基因在DEV感染和致病中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 UL41基因 基因缺失 复制能力
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生产用流感病毒H3N2型疫苗株血凝素蛋白HA1的基因分析
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作者 马雷钧 杨月莲 +2 位作者 周锋 杨菲茹 马相虎 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1164-1168,共5页
目的分析生产用流感病毒H3N2型疫苗株血凝素蛋白HA1基因变异对病毒特性的影响。方法比较2005~2008年间上海生物制品研究所流感病毒H3N2型各疫苗株的生产数据,并对H3N2型各疫苗株的HA1基因序列数据进行分析。结果各疫苗株中,A/NewYork/5... 目的分析生产用流感病毒H3N2型疫苗株血凝素蛋白HA1基因变异对病毒特性的影响。方法比较2005~2008年间上海生物制品研究所流感病毒H3N2型各疫苗株的生产数据,并对H3N2型各疫苗株的HA1基因序列数据进行分析。结果各疫苗株中,A/NewYork/55/2004(NYMCX-157)的血凝素得率最高,A/Brisbane/10/2007(IVR-147)最低;2006~2007年度疫苗候选株A/Wisconsin/67/2005(NYMCX-161B)的病毒复制能力优于A/Hiroshima/52/2005(IVR-142);各疫苗株的氨基酸差异均未直接涉及到HA1蛋白二硫键组成位点,直接涉及到HA1蛋白抗原决定簇位点、HA1蛋白糖基化位点和HA蛋白受体结合位点的变异分别有3处(140、156和193位)、1处(165位)和1处(225位)。结论2005~2008年间各流感病毒疫苗株血凝素得率因株而异,HA1蛋白抗原决定簇位点变异属于正常的不同毒株间的差异;糖基化位点、二硫键组成位点和受体结合位点基本保守;还需进一步研究部分位点氨基酸变异是否与病毒复制能力密切相关,并探讨改善复制能力的可能性。 展开更多
关键词 流感病毒 H3N2型疫苗株 血凝素 重配株 复制能力 抗原性
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MicroRNA-A6增效的HEV体外瞬时转染HepG2复制体系的建立及鉴定
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作者 张伟 游绍丽 +4 位作者 刘鸿凌 朱冰 臧红 辛绍杰 荣义辉 《肝脏》 2017年第10期899-903,共5页
目的验证HEV编码的MicroRNA-A6对全长HEV瞬转HepG2细胞系中病毒复制的增效作用。方法按照已报道序列合成miR-A6,利用重组PCR、基因克隆以及体外转录技术获得单一高浓度的HEV RNA。HEV RNA与miR-A6按比例采用脉冲电流转染HepG2细胞,转染... 目的验证HEV编码的MicroRNA-A6对全长HEV瞬转HepG2细胞系中病毒复制的增效作用。方法按照已报道序列合成miR-A6,利用重组PCR、基因克隆以及体外转录技术获得单一高浓度的HEV RNA。HEV RNA与miR-A6按比例采用脉冲电流转染HepG2细胞,转染后24、48和96 h后观察细胞上清IgG分泌和HEV RNA表达载量,与不加miR-A6的HepG2细胞进行比较,分析miR-A6对HEV复制的作用,然后加入anti-A6抑制miR-A6表达,分析其对HEV表达和复制的影响。结果 MiR-A6∶HEV RNA质量比为0.5∶1和1∶1,共转染HepG2细胞后48 h,与单转染HEV RNA相比,lg值升高了1.57和2.44。HEV-IgG先于HEV RNA表达。体外实验显示,Ⅰ型和Ⅳ型HEV复制力没有明显差别,都在转染后48 h达到峰值,加入anti-A6抑制miR-A6后HEV-IgG抑制47.12%,HEV RNA抑制43.3%。结论 MiR-A6可以在体外显著增加HEV RNA瞬转HepG2细胞系中HEV病毒的复制力,为后续HEV分子病毒学和表型耐药研究奠定基础。 展开更多
关键词 MICRORNA 肝炎病毒 戊型 全长扩增 瞬时转染 复制力
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茵陈贞芪六君子汤加减联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的疗效及对肝功能、病毒复制能力的影响 被引量:8
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作者 司永 《四川中医》 2020年第9期105-109,共5页
目的:观察茵陈贞芪六君子汤加减联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的效果及对肝功能、病毒复制能力的影响。方法:选取2016年2月~2019年12月就诊于我院的慢性乙型肝炎肝硬化患者85例,根据其治疗方法不同,分为观察组(n=43)和对照组(n=42... 目的:观察茵陈贞芪六君子汤加减联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化的效果及对肝功能、病毒复制能力的影响。方法:选取2016年2月~2019年12月就诊于我院的慢性乙型肝炎肝硬化患者85例,根据其治疗方法不同,分为观察组(n=43)和对照组(n=42)。对照组采用恩替卡韦治疗,观察组在其基础上采用茵陈贞芪六君子汤加减治疗,连续治疗12w。比较两组临床疗效;检测并比较两组治疗前后谷丙转氨酶(AlanineAminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、总胆红素(Total Bilirubin,TBIL)、直接胆红素(Direct Bilirubin,DBIL)水平;检测并比较治疗12w后两组乙肝病毒-脱氧核糖核酸(Hepatitis B Virus-Deoxyribonucleic Acid,HBV-DNA)、乙型肝炎e抗原(Hepatitis B e-Antigen,HBeAg)变化情况。结果:治疗12w后,观察组临床总有效率(95.35%)显著高于对照组(80.95%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗12w后,与对照组相比,观察组ALT、AST、TBIL、DBIL水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗12w后,与对照组相比,观察组HBV-DNA转阴率(97.67%)和HBeAg转阴率(65.12%)显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:茵陈贞芪六君子汤加减联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎肝硬化能够明显提高其临床疗效,改善肝功能,抑制病毒复制能力。 展开更多
关键词 茵陈贞芪六君子汤加减 恩替卡韦 慢性乙型肝炎肝硬化 临床疗效 肝功能 病毒复制能力
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