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鹅细小病毒Rep1蛋白的原核表达及抗体制备
被引量:
4
1
作者
王建业
段进坤
朱国强
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
北大核心
2015年第4期5-8,共4页
为深入研究鹅细小病毒(GPV)Rep蛋白的功能,采用PCR方法扩增出完整的Rep1基因,并克隆入原核表达载体pET-28a(+)。将重组质粒pET28-Rep1导入到大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE分析表明:37℃下经1mmol·L^(-1) IPTG诱导4h,Rep1蛋...
为深入研究鹅细小病毒(GPV)Rep蛋白的功能,采用PCR方法扩增出完整的Rep1基因,并克隆入原核表达载体pET-28a(+)。将重组质粒pET28-Rep1导入到大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE分析表明:37℃下经1mmol·L^(-1) IPTG诱导4h,Rep1蛋白可获得高效表达。重组蛋白经切胶免疫BALB/c小鼠制备针对Rep1蛋白的多克隆抗体。经间接免疫荧光检测,1∶1 000稀释的多抗能特异性识别在鹅胚成纤维细胞上增殖的GPV抗原,说明所制备的多抗具有良好反应原性,可用于后续针对Rep蛋白的相关功能研究。
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关键词
鹅细小病毒
rep
1
蛋白
原核表达
间接免疫荧光
原文传递
番鸭细小病毒Rep1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
被引量:
2
2
作者
王志仙
凌珏怡
+2 位作者
贾婧宇
王建业
朱国强
《中国家禽》
北大核心
2018年第6期15-18,共4页
Rep蛋白在番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)感染中的作用尚不清楚。研究将MDPV的Rep1基因克隆入p ET-28a原核表达载体并转化BL21(DE3)大肠杆菌,在IPTG诱导下成功表达了分子量约为82 ku的目的蛋白,菌体分析表明目的蛋白主要...
Rep蛋白在番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)感染中的作用尚不清楚。研究将MDPV的Rep1基因克隆入p ET-28a原核表达载体并转化BL21(DE3)大肠杆菌,在IPTG诱导下成功表达了分子量约为82 ku的目的蛋白,菌体分析表明目的蛋白主要以包涵体存在。将重组蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备了针对Rep1蛋白的多克隆抗体。在间接免疫荧光试验中,Rep1多克隆抗体能与鹅胚成纤维细胞上增殖的MDPV特异性发生反应,免疫印迹试验则显示Rep1多克隆抗体能够在MDPV感染的GEF中识别出两条蛋白条带Rep1和Rep2。结果表明制备的Rep1多克隆抗体具有良好反应特异性,为深入研究Rep蛋白在MDPV感染中的作用奠定了基础。
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关键词
番鸭细小病毒
rep
1
蛋白
原核表达
间接免疫荧光试验
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职称材料
题名
鹅细小病毒Rep1蛋白的原核表达及抗体制备
被引量:
4
1
作者
王建业
段进坤
朱国强
机构
扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
出处
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
北大核心
2015年第4期5-8,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(31172317)
江苏省高校优势学科建设工程项目(201010)
文摘
为深入研究鹅细小病毒(GPV)Rep蛋白的功能,采用PCR方法扩增出完整的Rep1基因,并克隆入原核表达载体pET-28a(+)。将重组质粒pET28-Rep1导入到大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE分析表明:37℃下经1mmol·L^(-1) IPTG诱导4h,Rep1蛋白可获得高效表达。重组蛋白经切胶免疫BALB/c小鼠制备针对Rep1蛋白的多克隆抗体。经间接免疫荧光检测,1∶1 000稀释的多抗能特异性识别在鹅胚成纤维细胞上增殖的GPV抗原,说明所制备的多抗具有良好反应原性,可用于后续针对Rep蛋白的相关功能研究。
关键词
鹅细小病毒
rep
1
蛋白
原核表达
间接免疫荧光
Keywords
Goose parvovirus
rep
l protein
prokaryotic expression
indirect immunofluorescence
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
番鸭细小病毒Rep1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
被引量:
2
2
作者
王志仙
凌珏怡
贾婧宇
王建业
朱国强
机构
扬州大学兽医学院
江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
出处
《中国家禽》
北大核心
2018年第6期15-18,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31572511)
江苏高校优势学科建设工程资助项目
文摘
Rep蛋白在番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)感染中的作用尚不清楚。研究将MDPV的Rep1基因克隆入p ET-28a原核表达载体并转化BL21(DE3)大肠杆菌,在IPTG诱导下成功表达了分子量约为82 ku的目的蛋白,菌体分析表明目的蛋白主要以包涵体存在。将重组蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备了针对Rep1蛋白的多克隆抗体。在间接免疫荧光试验中,Rep1多克隆抗体能与鹅胚成纤维细胞上增殖的MDPV特异性发生反应,免疫印迹试验则显示Rep1多克隆抗体能够在MDPV感染的GEF中识别出两条蛋白条带Rep1和Rep2。结果表明制备的Rep1多克隆抗体具有良好反应特异性,为深入研究Rep蛋白在MDPV感染中的作用奠定了基础。
关键词
番鸭细小病毒
rep
1
蛋白
原核表达
间接免疫荧光试验
Keywords
Muscovy duck parvovirus
rep
1
protein
prokaryotic expression
indirect immunofluorescence assay
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
鹅细小病毒Rep1蛋白的原核表达及抗体制备
王建业
段进坤
朱国强
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
北大核心
2015
4
原文传递
2
番鸭细小病毒Rep1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
王志仙
凌珏怡
贾婧宇
王建业
朱国强
《中国家禽》
北大核心
2018
2
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