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瑞氏木霉分子生物学研究进展 被引量:30
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作者 汪天虹 吴静 邹玉霞 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2000年第1期147-152,共6页
瑞氏木霉(Trichoderma reesei)是自然界中普遍存在并有重要经济意义的一种丝状真菌。从瑞氏木霉的转化系统、基因克隆、基因表达调控、过量产生同源和异源重组蛋白等方面对瑞氏木霉分子生物学研究进展情况进行了综述。
关键词 瑞氏土霉 丝状真菌 转化系统 基因克隆 重组蛋白
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严重烫伤后高迁移率族蛋白-1基因表达的改变及意义 被引量:19
2
作者 吴成如 董英海 +7 位作者 高学纯 方文慧 姚咏明 施志国 于燕 陆连荣 盛志勇 吴叶 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期137-140,共4页
目的 观察烫伤后肝、肺组织高迁移率族蛋白 1(HMG 1)mRNA表达的变化规律及其与器官功能损害的关系。 方法 采用大鼠 35 %Ⅲ度烫伤模型 ,动物随机分为正常对照组、烫伤组和重组杀菌 /通透性增加蛋白 (rBPI2 1)治疗组 ,留取组织和血标... 目的 观察烫伤后肝、肺组织高迁移率族蛋白 1(HMG 1)mRNA表达的变化规律及其与器官功能损害的关系。 方法 采用大鼠 35 %Ⅲ度烫伤模型 ,动物随机分为正常对照组、烫伤组和重组杀菌 /通透性增加蛋白 (rBPI2 1)治疗组 ,留取组织和血标本分别检测组织内毒素含量、HMG 1mRNA表达及器官功能指标。 结果 严重烫伤后早期肝、肺组织HMG 1基因表达改变不明显 (正常对照组肝组织 :0 2 0 2± 0 0 97;肺组织 :0 2 6 3± 0 0 91) ,伤后 2 4h则明显增多 (肝组织 :0 487± 0 189;肺组织 :0 5 13± 0 0 6 9,P <0 0 5 ,0 0 1) ,且一直持续至伤后 72h (肝组织 :0 6 87± 0 142 ;肺组织 :0 5 2 0±0 0 76 ,P <0 0 1)。给予rBPI2 1治疗可有效抑制肝和肺中内毒素水平的升高 ,并显著抑制肝、肺组织HMG 1mRNA水平 (P <0 0 1)。相关分析结果显示 ,肝组织HMG 1mRNA表达与血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平、肺组织HMG 1mRNA表达与髓过氧化物酶活性呈显著正相关 (P <0 0 5 ,0 0 1)。 结论 严重烫伤后肝、肺组织HMG 1表达显著增多 ,且持续时间较长 ,局部组织HMG 展开更多
关键词 烧伤 基因表达 内毒素类 重组蛋白质类 高迁移率族蛋白-1
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胃泌素释放肽前体对小细胞肺癌的诊断价值 被引量:29
3
作者 杨兴 孙桂荣 +3 位作者 丛培珊 宗金宝 李海霞 刘明军 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期736-741,共6页
目的评估分析血清胃泌素释放肽前体(ProGRP)对小细胞肺癌(SCLC)的临床诊断价值。方法用化学发光法和电化学发光法检测2010年9月至2011年4月期间,青岛大学医学院附属医院46例初诊SCLC(局限期26例、广泛期20例)、51例非小细胞肺癌... 目的评估分析血清胃泌素释放肽前体(ProGRP)对小细胞肺癌(SCLC)的临床诊断价值。方法用化学发光法和电化学发光法检测2010年9月至2011年4月期间,青岛大学医学院附属医院46例初诊SCLC(局限期26例、广泛期20例)、51例非小细胞肺癌(NSCLC)、45例肺良性疾病患者及56名健康体检者血清ProGRP和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平,以受试者工作特征(ROC)曲线确定ProGRP和NSE诊断SCLC的临界值及曲线下面积(ROC—AUC),评估2项指标诊断SCLC的敏感度和特异度。结果健康对照组、肺良性疾病组、NSCLC组和SCLC组血清ProGRP水平分另4为22.9(19.5~28.7)、23.7(20.0~27.8)、28.9(23.8—34.7)和370.9(129.4~1951.6)ng/L;血清NSE水平分别为14.1(12.5~15.7)、13.3(10.3~15.3)、16.8(11.7~22.1)和39.9(16.1~93.9)μg/L;经非参数Kruskal—WallisH检验,各组间ProGRP和NSE的差异均有统计学意义(日值分别为92.116和55.481,P均〈0.001)。局限期SCLC(LD—SCLC)组血清ProGRP[156.2(65.4~547.5)ng/L]也高于健康对照组、肺良性疾病组和NSCLC组(x2值分别为57、70和144,P均〈0.001)。广泛期SCLC(ED—SCLC)组血清ProGRP和NSE为[1933.1(325.9~4512.1)ng/L和61.0(35.4~115.5)μg/L],均高于LD—SCLC组ProGR和NSE[24.3(15.1~61.3)μg/L,U值分别为119和153,P均〈0.05]。以健康组为对照,tlOC曲线上取约登指数最大点确定ProGRP和NSE的临界值分别为34.0ng/L和20.2μg/L,SCLC组ProGRP的ROC—AUC(0.96)较NSE(0.86)明显增高(Z:2.57,P〈0.05);ProGRP和NSE联合检测的ROC—AUC(0.96)与ProGRP单项检测(0.96)比较,差异无统计学意义(Z=0.21,P〉0.05)。ProGRP的敏感度(89.1%)也高于NSE(71.7%,x2=4.90,P〈0.05);其特异度(98.2%)与NSE比� 展开更多
关键词 肺肿瘤 小细胞肺 肽碎片 重组蛋白质类
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冻干重组人脑利钠肽联合缬沙坦氢氯噻嗪在急诊急性心力衰竭伴高血压病人中的应用 被引量:26
4
作者 赵坤芳 岳志城 费睿成 《安徽医药》 CAS 2021年第2期412-416,共5页
目的探讨冻干重组人脑利钠肽联合缬沙坦氢氯噻嗪在急诊急性心力衰竭(AHF)伴高血压病人中的应用。方法选取2017年4月至2018年12月郑州大学附属洛阳中心医院收治的AHF伴高血压病人106例,以随机数字表法分为对照组和联合组各53例,对照组给... 目的探讨冻干重组人脑利钠肽联合缬沙坦氢氯噻嗪在急诊急性心力衰竭(AHF)伴高血压病人中的应用。方法选取2017年4月至2018年12月郑州大学附属洛阳中心医院收治的AHF伴高血压病人106例,以随机数字表法分为对照组和联合组各53例,对照组给予缬沙坦氢氯噻嗪+螺内酯治疗,联合组给予冻干重组人脑利钠肽+缬沙坦氢氯噻嗪+螺内酯治疗。对比两组治疗前及治疗2周后的血压、心率、心功能指标、心率变异性指标、血清肌钙蛋白T(TNT)、N末端B型脑钠肽前体(NTproBNP)及胱抑素C(Cys-C)水平变化,对比临床疗效及治疗期间的不良反应。结果治疗2周后,收缩压(SBP)[对照组(165.16±34.83)mmHg比(133.78±23.41)mmHg、联合组(166.23±35.37)mmHg比(124.32±22.57)mmHg]和舒张压(DBP)[对照组(108.76±22.75)mmHg比(87.57±12.89)mmHg、联合组(109.23±23.14)mmHg比(82.16±13.17)mmHg]均降低(P<0.05),联合组更低(P<0.05);治疗2周后,心脏指数(CI)[对照组(2.13±0.37)L·min^-1·m^-2比(3.32±0.53)L·min^-1·m^-2、联合组(2.15±0.24)L·min^-1·m^-2比(3.65±0.48)L·min^-1·m^-2]、心排血量(CO)[对照组(4.96±0.32)L/min比(5.23±0.85)L/min、联合组(4.95±0.36)L/min比(5.41±0.72)L/min]及左室射血分数(LVEF)[对照组(50.79±7.26)%比(55.37±7.18)%、联合组(51.03±6.83)%比(59.37±7.52)%]均显著高于治疗前(P<0.05),且联合组CI、LVEF均更高(P<0.05),两组病人心率(HR)[对照组(88.28±9.14)次/分比(77.83±6.51)次/分、联合组(87.94±8.86)次/分比(73.58±7.16)次/分]明显低于治疗前(P<0.05),联合组更低(P<0.05);治疗2周后,两组RR间期标准差(SDNN)、相邻RR间期差值均方根(RMSSD)及相邻RR之差>50 ms个数所占百分比(PNN50)均明显高于治疗前(P<0.05),联合组均更高(P<0.05);TNT、NT-proBNP及Cys-C水平均明显低于治疗前(P<0.05),联合组更低(P<0.05);两组临床疗效分布差异有统计学意义(P<0.05),联合组总有效率明显高于对照组(94.45%比77.36%,P<0.05);治疗期� 展开更多
关键词 心力衰竭 高血压 重组蛋白质类 冻干重组人脑利钠肽 缬沙坦氢氯噻嗪
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血清可溶性Sema4D水平与扩张型心肌病心室重构的相关性研究 被引量:22
5
作者 唐俊燕 杨国杰 +4 位作者 李栋博 魏子寒 李国栋 秦鹏 朱晨恺 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第1期63-66,共4页
目的 :研究扩张型心肌病慢性心力衰竭患者血清可溶性Sema4D(s Sema4D)与基质金属蛋白酶14(MMP14)水平的变化,探讨s Sema4D与扩张型心肌病慢性心力衰竭心室重构的相关性。方法 :选取86例新入院的扩张型心肌病慢性心力衰竭患者为扩张型心... 目的 :研究扩张型心肌病慢性心力衰竭患者血清可溶性Sema4D(s Sema4D)与基质金属蛋白酶14(MMP14)水平的变化,探讨s Sema4D与扩张型心肌病慢性心力衰竭心室重构的相关性。方法 :选取86例新入院的扩张型心肌病慢性心力衰竭患者为扩张型心肌病组,32例健康体检者为正常对照组。酶联免疫吸附法检测血清s Sema4D、MMP14、B型利钠肽原(pro BNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;彩色多普勒超声心动仪检测左心房内径(LAD)、右心室内径(RVD)、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室短轴缩短率(LVFS)。对s Sema4D、MMP14及左心室重构指标进行相关性分析。结果 :两组间血清s Sema4D、MMP14水平差异均有统计学意义(P<0.001)。扩张型心肌病组血清s Sema4D水平分别与血清MMP14水平、左心室舒张末期内径呈正相关(r=0.462,P<0.001;r=0.643,P<0.000)。结论 :扩张型心肌病慢性心力衰竭患者血清s Sema4D蛋白与MMP14蛋白水平、左心室舒张末期内径呈正相关。 展开更多
关键词 重组蛋白质类 基质金属蛋白酶14 心肌病 扩张型 心力衰竭
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重组人肝再生增强因子可逆转免疫损伤性肝纤维化 被引量:14
6
作者 王爱民 杜双存 +3 位作者 杨晓明 郭瑞峰 王清明 贺福初 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期298-300,共3页
目的:了解重组人肝再生增强因子(hALR)抗免疫损伤性肝纤维化的活性。方法:建立人血白蛋白免疫损伤性大鼠肝纤维化模型。模型完成后予hALR腹腔注射。观察肝纤维化大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)... 目的:了解重组人肝再生增强因子(hALR)抗免疫损伤性肝纤维化的活性。方法:建立人血白蛋白免疫损伤性大鼠肝纤维化模型。模型完成后予hALR腹腔注射。观察肝纤维化大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,肝组织胶原蛋白含量及肝脏病理学改变。结果:重组人肝再生增强因子(hALR)可降低肝纤维化大鼠的ALT、AST、LDH水平;肝组织胶原蛋白含量的测定表明hALR治疗组大鼠肝组织胶原含量明显低于模型组及阴性对照组;病理组织切片也发现hALR治疗组大鼠肝纤维化程度较模型组及阴性对照组明显减轻。结论:重组人肝再生增强因子(hALR)可逆转免疫损伤性大鼠肝纤维化。 展开更多
关键词 重组蛋白质类 免疫刺激复合物 肝纤维化
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重组日本血吸虫SjGST-Sj32蛋白诱导小鼠保护性免疫的研究 被引量:16
7
作者 蔡春 易新元 +2 位作者 曾宪芳 周金春 舒新华 《湖南医科大学学报》 CSCD 1999年第3期225-228,共4页
应用基因工程技术分别表达出SjGSTSj32,Sj32和SjGST,用于保护性免疫的动物实验及其体液免疫机制的初步探讨。结果:与对照组相比,重组SjGSTSj32组,Sj32组,Sj32+SjGST组均有明显的减... 应用基因工程技术分别表达出SjGSTSj32,Sj32和SjGST,用于保护性免疫的动物实验及其体液免疫机制的初步探讨。结果:与对照组相比,重组SjGSTSj32组,Sj32组,Sj32+SjGST组均有明显的减虫效果(P<0.05)。上述三组及SjGST组的肝脏虫卵计数均较对照组为少(P<0.01)。提示重组Sj32kD蛋白可诱导小鼠产生明显的抗日本血吸虫攻击感染的保护性免疫及抗生殖免疫效果,而SjGST仅表现出一定的抗生殖免疫效果。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组蛋白类 疫苗 免疫 小鼠
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重组结核分枝杆菌11000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用 被引量:17
8
作者 徐苗 罗永艾 +4 位作者 黎友伦 陈保文 沈小兵 苏城 王国治 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期762-765,共4页
目的研究重组结核分枝杆菌11000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用。方法以不同分枝杆菌分别致敏豚鼠,致敏成功后给所有动物皮内注射重组结核分枝杆菌11000蛋白和结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)或胞内分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD-B),用双盲法... 目的研究重组结核分枝杆菌11000蛋白对结核分枝杆菌感染的鉴别作用。方法以不同分枝杆菌分别致敏豚鼠,致敏成功后给所有动物皮内注射重组结核分枝杆菌11000蛋白和结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)或胞内分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD-B),用双盲法记录注射后24h和(或)48h注射局部皮肤反应的纵、横径,计算其均值。结果PPD或PPD-B对所有分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤反应均为阳性,局部硬结直径均大于10mm;重组结核分枝杆菌11000蛋白对结核分枝杆菌活菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验为阳性,局部硬结直径依次为(14.7±2.0)、(9.3±3.8)、(18.7±2.4)和(14.8±4.2)mm,而对灭活结核分枝杆菌、卡介苗和其他非结核分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验均为阴性。结论重组结核分枝杆菌11000蛋白可有效鉴别结核分枝杆菌活菌感染和卡介苗接种、结核分枝杆菌死菌致敏以及其他非结核分枝杆菌的感染。 展开更多
关键词 重组蛋白质类 分枝杆菌 结核 动物 实验
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植物生物反应器生产药物蛋白的前景 被引量:8
9
作者 肖乃仲 白云峰 +1 位作者 刘锦秀 王兴智 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期107-112,共6页
转基因植物作为生物反应器生产重要的药用蛋白,如抗体、血液替代品和疫苗,为健康保健和科学研究提供充足的生物药物,满足人们日益增长的需要。本文综述了这一领域的研究进展以及商业化前景。
关键词 植物生物反应器 药物蛋白 生物药物 重组蛋白 开发前景
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枯草芽胞杆菌芽胞表面展示外源蛋白的研究进展 被引量:13
10
作者 余小霞 田健 伍宁丰 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期31-38,共8页
枯草芽胞杆菌是一种生物安全的革兰氏阳性细菌,在营养匮乏的环境下,可形成具有强抗逆性的芽胞。枯草芽胞杆菌的芽胞由核心、皮层、孢子外套蛋白三部分组成,目前已成功利用枯草芽胞杆菌芽胞外套蛋白CotB、CotC、CotG、CotX和OxdD为载体,... 枯草芽胞杆菌是一种生物安全的革兰氏阳性细菌,在营养匮乏的环境下,可形成具有强抗逆性的芽胞。枯草芽胞杆菌的芽胞由核心、皮层、孢子外套蛋白三部分组成,目前已成功利用枯草芽胞杆菌芽胞外套蛋白CotB、CotC、CotG、CotX和OxdD为载体,将酶蛋白、抗原蛋白或荧光标记蛋白等展示于芽胞表面。芽胞表面展示的蛋白通常具有较好的稳定性、易于纯化和安全性好等优点,可应用于医药、食品及饲料工业等领域,具有较大的应用前景。详细介绍了枯草芽胞杆菌芽胞的分子特点及芽胞表面展示系统的构建过程及其应用前景,为芽胞表面展示载体的基础及应用研究奠定基础。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 芽胞 外源蛋白 芽胞表面展示
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蛋白质的氧化重折叠 被引量:8
11
作者 张渝英 杨开宇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-8,共8页
经过近几十年来广泛而深入的研究 ,蛋白质氧化重折叠的机制已得到相当详细的阐明。 1 在已研究过的蛋白质中 ,大多数蛋白质都是沿着多途径而非单一、特定的途径进行氧化重折叠 ,这与折叠能量景观学说是一致的。 2 正是氨基酸残基间的... 经过近几十年来广泛而深入的研究 ,蛋白质氧化重折叠的机制已得到相当详细的阐明。 1 在已研究过的蛋白质中 ,大多数蛋白质都是沿着多途径而非单一、特定的途径进行氧化重折叠 ,这与折叠能量景观学说是一致的。 2 正是氨基酸残基间的天然相互作用而不是非天然的相互作用控制蛋白质的折叠过程。这一结论与含非天然二硫键的折叠中间体在牛胰蛋白酶抑制剂 (BPTI)折叠中所起的重要作用并非相互排斥 ,因为后者仅仅是进行链内二硫键重排的化学反应所必需 ,与控制肽链折叠无直接关系。 3 根据对BPTI的研究 ,二硫键曾被认为仅仅具有稳定蛋白质天然结构的作用 ,既不决定折叠途径也不决定其三维构象。这一观点不适用于其它蛋白质。对凝乳酶原的研究表明 ,天然二硫键的形成是恢复天然构象的前提。天然二硫键的形成与肽键的正确折叠相辅相成 ,更具有普遍意义。 4 在氧化重折叠的早期 ,二硫键的形成基本上是一个随机过程 ,随着肽链的折叠二硫键的形成越来越受折叠中间体构象的限制。提高重组蛋白质的复性产率是生物技术领域中的一个巨大的挑战。除了分子聚集外 ,在折叠过程中所形成的二硫键错配分子是导致低复性率的另一个主要原因。氧化重折叠机制的阐明为解决此问题提供了有益的启示。如上所述 ,在折叠的后期 。 展开更多
关键词 氧化重折叠 复性率 二硫键 重组蛋白质
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植物生物反应器生产药用重组蛋白质的研究进展 被引量:7
12
作者 蔡绍晖 任先达 +1 位作者 李晓红 王伯瑶 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期561-565,共5页
利用转基因植物作为生物反应器规模化生产药用重组蛋白质是一个新兴的研究领域。本文就转基因植物生物反应器的优点、几种常用的植物表达系统、采用转基因植物生产药用重组蛋白质如疫苗、重组抗体和重组人类防御素等方面的研究进展作一... 利用转基因植物作为生物反应器规模化生产药用重组蛋白质是一个新兴的研究领域。本文就转基因植物生物反应器的优点、几种常用的植物表达系统、采用转基因植物生产药用重组蛋白质如疫苗、重组抗体和重组人类防御素等方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 植物生物反应器 转基因植物 重组蛋白质
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胃泌素释放肽前体和神经元特异性烯醇化酶对小细胞肺癌诊断的差异及联合检测 被引量:12
13
作者 王敏 吕萌 +3 位作者 史小芹 鲁清月 付光宇 杨增利 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1008-1012,共5页
目的 探讨pro-GRP与NSE水平对SCLC临床诊断、疗效监测的意义及治疗后标志物水平与生存期的关系.方法 回顾性研究.收集2008年5月1日至2011年4月30日由郑州人民医院确诊的41例SCLC(男30例,女11例,年龄46 ~ 78岁)、95例NSCLC(男55例,... 目的 探讨pro-GRP与NSE水平对SCLC临床诊断、疗效监测的意义及治疗后标志物水平与生存期的关系.方法 回顾性研究.收集2008年5月1日至2011年4月30日由郑州人民医院确诊的41例SCLC(男30例,女11例,年龄46 ~ 78岁)、95例NSCLC(男55例,女40例,年龄42~88岁)和127名健康人(男80名,女47名,年龄35~ 78岁)样本,检测pro-GRP和NSE的血清学水平,分析评价2项指标在SCLC患者治疗前后的水平变化.采用SPSS 16.0单因素方差分析、随机区组设计的方差分析和log-rank test进行统计分析.结果 SCLC患者治疗前血清pro-GRP中位数水平为357.8 ng/L,NSE治疗前中位数水平为89.5 μg/L,两者均显著高于NSCLC组指标的中位数水平(pro-GRP:39.9 ng/L; NSE:11.43 μg/L)和健康人组指标的中位数水平(pro-GRP:12.7 ng/L; NSE:10.03 μg/L)(F值分别为41.05、100.42,P均<0.001).pro-GRP和NSE诊断SCLC的敏感度分别为80.4%和78.0%,特异度分别为92%和87%;两指标血清水平上相关性较低(r=0.2750),联合检测SCLC敏感度可达95%,特异度可达85%;SCLC-LD患者治疗前、后pro-GRP水平的差异有统计学意义(F=3.53,P=0.038),NSE的水平在SCLC-ED患者治疗前、后的差异有统计学意义(F=16.049,P =0.000).部分缓解的SCLC患者治疗后NSE水平低于界值的患者生存期长于高于界值的患者(P =0.001).结论 pro-GRP和NSE联合检测诊断SCLC的灵敏度优于单指标;pro-GRP水平更能反映SCLC-LD患者的治疗效果,NSE水平则更能反映SCLC-ED患者的治疗效果.治疗后NSE水平对评估部分缓解患者的生存期有一定价值. 展开更多
关键词 肺肿瘤 小细胞 非小细胞肺 肽碎片 重组蛋白质类 磷酸丙酮酸水合酶 肿瘤标记 生物学
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Insect Cell Culture and Biotechnology 被引量:12
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作者 Robert R. Granados Guoxun Li G. W. Blissard 《中国病毒学》 CSCD 2007年第2期83-93,共11页
The continued development of new cell culture technology is essential for the future growth and application of insect cell and baculovirus biotechnology. The use of cell lines for academic research and for commercial ... The continued development of new cell culture technology is essential for the future growth and application of insect cell and baculovirus biotechnology. The use of cell lines for academic research and for commercial applications is currently dominated by two cell lines; the Spodoptera frugiperda line, SF21 (and its clonal isolate, SF9), and the Trichoplusia ni line, BTI 5B1-4, commercially known as High Five cells. The long perceived prediction that the immense potential application of the baculovirus-insect cell system, as a tool in cell and molecular biology, agriculture, and animal health, has been achieved. The versatility and recent applications of this popular expression system has been demonstrated by both academia and industry and it is clear that this cell-based system has been widely accepted for biotechnological applications. Numerous small to midsize startup biotechnology companies in North America and the Europe are currently using the baculovirus-insect cell technology to produce custom recombinant proteins for research and commercial applications. The recent breakthroughs using the baculovirus-insect cell-based system for the development of several commercial products that will impact animal and human health will further enhance interest in this technology by pharma. Clearly, future progress in novel cell and engineering advances will lead to fundamental scientific discoveries and serve to enhance the utility and applications of this baculovirus-insect cell system. 展开更多
关键词 人类疫苗 免疫治疗 重组体 生物工程
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三种结核分枝杆菌分泌蛋白的抗体制备及其在抗原检测中的应用 被引量:10
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作者 唐宇龙 杨华 +5 位作者 刘湘新 柳斌 秦莲花 郑瑞娟 丁元生 胡忠义 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期597-600,共4页
目的制备结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6、MPT84和MPT63-MPT70重组蛋白抗体,探讨其在检测结核抗原中的应用价值。方法应用重组蛋白CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63- MPT70免疫血清,制备包被抗体和标记抗体,建立检测3种蛋白的双抗体夹心法,并将其... 目的制备结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6、MPT84和MPT63-MPT70重组蛋白抗体,探讨其在检测结核抗原中的应用价值。方法应用重组蛋白CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63- MPT70免疫血清,制备包被抗体和标记抗体,建立检测3种蛋白的双抗体夹心法,并将其用于17种分枝杆菌培养上清液和341份临床血清标本的检测。结果CFP10-ESAT-6的最低检出浓度为25 ng/mL,MPT64和MPT63-MPT70均为50 ng/mL。CFP10-ESAT-6检测17种分枝杆菌培养上清液,只有结核分枝杆菌为阳性;而MPT64和MPT63-MPT70检测除结核分枝杆菌阳性外,还各有5种非结核分枝杆菌培养上清液为阳性结果。CFP10-ESAT6、MPT64和MPT63-MPT70检测165例临床诊断的肺结核患者血清标本阳性率分别为33.9%、41.2%和47.9%;检测112例非结核患者血清标本的假阳性率分别为1.8%、7.1%和10.7%;检测64例健康对照的假阳性率分别为0、3.1%和7.8%。结论CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63-MPT70重组蛋白制备的抗体检测血清标本结核抗原的阳性率均不高,但特异性较好。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 重组蛋白质类 ESAT-6-CFP10融合蛋白 MPT64蛋白 结核分枝杆菌 MPT63-MPT70
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重组蛋白正确折叠与修饰的提高策略 被引量:11
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作者 李家冬 王弘 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期591-600,共10页
随着分子生物学的研究和不断发展,基因表达技术有了很大的进步。到目前为止,人们已经研究出多种表达系统用以生产重组蛋白,但没有一种表达系统能够完全满足当前需要,各种活性肽和蛋白质类药物的需求逐年攀升,不仅对表达量有要求,更需要... 随着分子生物学的研究和不断发展,基因表达技术有了很大的进步。到目前为止,人们已经研究出多种表达系统用以生产重组蛋白,但没有一种表达系统能够完全满足当前需要,各种活性肽和蛋白质类药物的需求逐年攀升,不仅对表达量有要求,更需要正确的翻译后折叠、修饰,使表达蛋白和天然构象更加接近,具有更高的活性和稳定性。结合目前的研究工作从表达系统与宿主、分泌表达、共表达、融合表达和培养条件等方面综述了其对重组蛋白正确折叠以及翻译后修饰的影响,并提出可能改进的策略。 展开更多
关键词 重组蛋白 表达系统 折叠 翻译后修饰
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重组蛋白的体外再折叠 被引量:4
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作者 龙建银 王会信 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期103-108,共6页
重组蛋白的再折叠是基因工程下游处理中非常重要的环节。本文在分析了蛋白体外折叠的机制后,指出了重组蛋白再折叠的一般策略,并综述了近年来的主要新方法,包括:分子伴侣介导的再折叠,去污剂协助的再折叠,反向微团中的蛋白再折叠。
关键词 重组蛋白 再折叠 复性
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非洲猪瘟病毒E183L、B602L、K205R和A104R基因表达及诊断抗原筛选 被引量:10
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作者 张鑫宇 陈宇 +2 位作者 刘文俊 夏晓莉 孙怀昌 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期3-5,9,共4页
为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重组蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,将Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分别亚克隆进行原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-... 为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重组蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,将Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分别亚克隆进行原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-A104R,转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,纯化表达的蛋白,并进行Western blotting鉴定,结果4种重组蛋白与预期大小一致,且与ASFV抗体发生特异性反应。为了从表达的4种重组蛋白中筛选最佳诊断抗原,将其分别包被酶标板,间接ELISA检测ASFV阳性血清,发现重组蛋白pK205R、p54和pB602L血清学反应良好;在检测ASFV感染后第13天分离血清时,重组蛋白p54和pK205R效果更佳,这表明p54和pK205R重组蛋白是较好的诊断抗原,可用于ASFV感染后早期或中后期血清学诊断。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 重组蛋白 诊断抗原
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ProGRP对小细胞肺癌的疗效与预后评价的价值 被引量:10
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作者 荆结线 杜丽莉 +4 位作者 徐晓琴 田保国 孙婷 赵先文 韩存芝 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期708-712,共5页
目的探讨血清胃泌素前体释放肽(ProGRP)对小细胞肺癌(SCLC)疗效监测的临床意义,评估ProCRP水平与SCLC预后的关系。方法临床诊断研究。用ELISA检测2005年12月至2008年10月期间山西省肿瘤医院呼吸与放疗科治疗、有完整资料的SCLC患者... 目的探讨血清胃泌素前体释放肽(ProGRP)对小细胞肺癌(SCLC)疗效监测的临床意义,评估ProCRP水平与SCLC预后的关系。方法临床诊断研究。用ELISA检测2005年12月至2008年10月期间山西省肿瘤医院呼吸与放疗科治疗、有完整资料的SCLC患者413例,非小细胞肺癌(NSCLC)418例、良性疾病患者120例及200名健康人的血清ProGRP、NSE水平。2005年12月至2011年10月随访368例SCLC患者ProGRP水平。以413例SCLC患者标本绘制ProGRP、NSE受试者工作特征曲线(R0c);Kaplan—Meier法分析SCLC患者生存时间,Cox比例风险模型分析影响SCLC患者预后的因素。结果ProGRP诊断SCLC的ROC曲线AUC为0.798(95%CI:0.746—0.850),以45.3μg/L为临界值,其敏感度、特异度分别为79.2%,98.1%;NSE诊断SCLC的ROC曲线AUC为0.786(95%CI:0.726~0.746),以12.4μg/L临界值,其敏感度、特异度分别为71.9%,96.7%;ProGRP与NSE联合诊断SCLC的敏感度、特异度分别为88.1%,95.8%。SCLC患者治疗前血清ProGRP为1758.7(368.4~2967.3)μg/L,高于NSCLC患者组[21.3(18.6—35.2)μg/L]、肺良性疾病组[36.8(26.3~43.4)μg/L]和健康对照组[6.89(5.3~8.6)μg/L],差异有统计学意义(H=103.66,P=0.000)。I~Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期SCLC患者血清ProGRP分别为543.3(256.8~843.2)、1440.6(1042.4~2543.3)、1897.6(1586.5~3958.7)μg/L,差异有统计学意义(日=25.974,P:0.000)。完全缓解(CR)的165例患者治疗后ProGRP水平[226.3(69.3~456.7)¨昏/L]比治疗前[1025.2(436.8—1060.9)μg/L]明显下降(U=11.65,P〈0.01);部分缓解(PR)的146例患者治疗后ProGRP水平[563.7(246.2~869.4)μg/L]与治疗前[1351.5(859.5—1883.4)μg/L]相比有所下降(U=9.17,P〈0.01);治疗后病情无变化(NR)的63例患者[1575.6 展开更多
关键词 小细胞 肺肿瘤 肽碎片 重组蛋白质类 治疗结果 预后
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酵母表达的戊型肝炎病毒结构区ORF_2蛋白的免疫原性研究 被引量:7
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作者 佟玉品 詹美云 +2 位作者 鲁健 白玉 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期23-26,共4页
目的 研究巴氏毕赤酵母表达系统表达的戊型肝炎病毒 (HepatitisEvirus ,HEV)结构区ORF2 蛋白的免疫原性。方法 将重组蛋白免疫BALB c小鼠 ,首先通过亲和捕获反转录PCR鉴定免疫小鼠抗血清是否能结合感染HEV恒河猴粪便及胆汁中的病毒颗... 目的 研究巴氏毕赤酵母表达系统表达的戊型肝炎病毒 (HepatitisEvirus ,HEV)结构区ORF2 蛋白的免疫原性。方法 将重组蛋白免疫BALB c小鼠 ,首先通过亲和捕获反转录PCR鉴定免疫小鼠抗血清是否能结合感染HEV恒河猴粪便及胆汁中的病毒颗粒。其次将重组蛋白分别以不同免疫途径、不同佐剂免疫小鼠 ,通过检测小鼠血清中抗 HEVORF2 抗体阳转率及抗体滴度 ,观察其免疫原性。结果 亲和捕获反转录PCR阳性 ,表明免疫鼠抗血清可以捕获感染恒河猴粪便及胆汁样品中的HEV。在小鼠免疫实验中 ,肌内免疫优于腹腔免疫 ,抗原联合铝佐剂及CpG佐剂优于抗原联合铝佐剂。以抗原联合铝佐剂和CpG佐剂经股四头肌免疫小鼠 ,4周后加强一次的免疫效果最佳 ,ED50为 0 0 2 3μg。实验表明 ,巴氏毕赤酵母表达的重组HEVORF2 蛋白刺激小鼠产生的抗体 ,不仅可以特异性结合天然HEV ,而且该蛋白在小鼠体内可以有效地诱发体液免疫反应。结论 巴氏毕赤酵母表达系统表达的HEVORF2 蛋白具有良好的免疫原性 。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 重组蛋白质类 免疫原性 聚合酶链反应 半数有效量
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