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沙参麦冬汤通过调节EGFR/MEK/ERK信号通路对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响 被引量：11
1
作者 郭晓黎 任小宁 +3 位作者 樊一波 庞鹏宇 任红艳 马静维 《中国药师》 CAS 2022年第10期1707-1713,共7页
目的:探讨沙参麦冬汤(ROD)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和自噬的影响,并分析其潜在机制。方法:制备ROD含药血清,体外培养人NSCLC细胞株A549,MTT法检测不同浓度的ROD含药血清对A549细胞活力的影响,筛选合适的干预浓度;将A549细... 目的:探讨沙参麦冬汤(ROD)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和自噬的影响,并分析其潜在机制。方法:制备ROD含药血清,体外培养人NSCLC细胞株A549,MTT法检测不同浓度的ROD含药血清对A549细胞活力的影响,筛选合适的干预浓度;将A549细胞随机分为空白组、阿法替尼组、20%ROD组、20%ROD+EGFR激活剂NSC 228155组;给予相应的干预后,采用细胞集落形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术分析细胞凋亡情况,GFP-LC3转染检测细胞自噬情况,蛋白质印迹(Western blot)检测细胞增殖、凋亡、自噬和表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路相关蛋白表达。结果:ROD含药血清可抑制A549细胞增殖,且20%ROD含药血清对A549细胞活力的抑制作用最显著(P<0.05)。20%ROD含药血清可显著减少细胞集落数,升高细胞凋亡率,增加GFP-LC3斑点数,并降低Ki-67、p62蛋白水平和p-EGFR/EGFR、p-MEK/MEK和p-ERK/ERK比值,升高Cleaved Caspase-3/Caspase-3和LC3II/LC3I比值(P<0.05);EGFR抑制剂Afatinib对A549细胞增殖、凋亡、自噬和EGFR/MEK/ERK通路的作用与ROD含药血清相似;使用NSC 228155激活EGFR/MEK/ERK通路可显著减弱ROD含药血清对A549细胞凋亡和自噬的诱导作用以及对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:ROD含药血清可有效抑制A549细胞增殖,并诱导细胞凋亡、自噬,其作用机制可能与抑制EGFR/MEK/ERK通路有关。 展开更多
关键词 沙参麦冬汤 非小细胞肺癌 增殖 凋亡 自噬 表皮生长因子受体/丝裂原活化蛋白激酶激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路
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N-甲基-D-天冬氨酸受体-丝裂原活化蛋白激酶信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制 被引量：1
2
作者 廖伟 黎云鹏 +2 位作者 潘亮发 余俊键 刘子由 《中国当代医药》 CAS 2023年第2期20-25,F0004,共7页
目的探究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制。方法选择健康SD大鼠40只,采用随机数字表法将其分为对照组、心脏骤停/复苏组、地卓西平马来酸盐(MK801)干... 目的探究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制。方法选择健康SD大鼠40只,采用随机数字表法将其分为对照组、心脏骤停/复苏组、地卓西平马来酸盐(MK801)干预组、MEK特异性抑制剂(U0126)干预组、联合干预组,每组各8只。除对照组外,其余组大鼠建立心脏骤停-心肺复苏模型,在复苏72 h取各组血样本进行血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肌酸激酶(CK)活性、丙二醛(MDA)测定,并测定各组大鼠脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率以及脑组织和心肌组织的N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR-1)、p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达情况。结果心脏骤停/复苏组的脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率高于对照组、MK801干预组、U0126干预组、联合干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组的脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率低于MK801干预组、U0126干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组复苏72 h后的血清IL-1β、TNF-α、CK-MB、MDA低于MK801干预组、U0126干预组、心脏骤停/复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组复苏72 h后的心肌组织、脑组织NMDAR1、p38MAPK、p-JNK、p-ERK蛋白表达低于MK801干预组、U0126干预组、心脏骤停/复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NMDA受体-MAPK信号通路可能参与介导心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控过程,其机制是通过调节机体炎症反应实现的。 展开更多
关键词 心脑缺血再灌注损伤 N-甲基-D-天冬氨酸受体-丝裂原活化蛋白激酶信号通路 细胞凋亡 免疫蛋白印迹法
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四羟基壬烯对前列腺癌雄激素拮抗作用的机制研究
3
作者 宋旭 宋蔷 +2 位作者 王蓉 左庆军 张智源 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期402-408,共7页
目的:探讨四羟基壬烯(4-HNE)通过雄激素受体(AR)-促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在前列腺癌雄激素拮抗作用中的机制。方法:将前列腺癌LNCaP细胞分为野生型组(对照组)和转染组,转染组又分为空载体转染组(NC-L7组)及GSTA4基因转染组(... 目的:探讨四羟基壬烯(4-HNE)通过雄激素受体(AR)-促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在前列腺癌雄激素拮抗作用中的机制。方法:将前列腺癌LNCaP细胞分为野生型组(对照组)和转染组,转染组又分为空载体转染组(NC-L7组)及GSTA4基因转染组(A0718,GSTA4-OE组)。GSTA4-OE组给予LNCaP细胞培养、GSTA4质粒转染构建LNCaP的4-HNE稳转细胞系,对照组给予LNCaP细胞培养、未做GSTA4质粒转染。通过不同浓度4-HNE(0、40、80、120μmol/L)刺激前列腺癌细胞,活化AR信号通路,采用Western印迹检测AR、MAKP、AKT、PKCα蛋白的表达。选择60例患者前列腺癌组织及60例患者良性前列腺增生组织,采用免疫组化染色技术测定以上组织中4-HNE的阳性表达率,分析4-HNE阳性表达与肿瘤Gleason分级以及前列腺癌进展为CRCP的相关性。结果:GSTA4-OE组细胞内4-HNE的水平受到抑制。Western印迹检测结果显示:与对照组相比,GSTA4-OE组细胞PKCα蛋白表达水平显著降低(P<0.05),AR、AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。40、80、120μmol/L 4-HNE处理前列腺癌细胞后,与对照组相比,处理组AKT的表达量显著降低(P<0.01),MAKP(P<0.01)、PKC(P<0.01)、AR(P<0.01)的表达量显著升高。免疫组化结果显示,60例良性前列腺增生组织中4-HNE阳性率为5.0%,60例前列腺癌组织中4-HNE阳性率为63.3%,差异有统计学意义(P<0.01)。在Gleason分级1~5级中4-HNE阳性率分别为41.2%、50.0%、63.6%、81.8%、100.0%,随着Gleason分级越高,4-HNE阳性率越高,差异有统计学意义(P<0.05)。随访10~35个月,其中33例患者进展为CRCP,27例患者未进展为CRCP,4-HNE在2组中的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在4-HNE作用下AR-MAPK通路相关蛋白表达上升,4-HNE可能通过AR-MAPK通路对前列腺癌进展起到促进作用,有望成为CRPC新的治疗靶点。 展开更多
关键词 前列腺癌 四羟基壬烯 雄激素拮抗 雄激素受体-促分裂素原活化蛋白激酶信号通路 LNCAP细胞
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核桃青皮提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及EGFR/MAPK信号通路的影响 被引量：1
4
作者 张硕稳 李丹 +5 位作者 贺静 杜志兴 庞建民 李瑞池 刘永建 郑丽华 《中国医院用药评价与分析》 2022年第6期684-689,695,共7页
目的:探讨核桃青皮提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)筛选干预乳腺癌MCF-7细胞的核桃青皮提取物合适浓度。将乳腺癌MCF-7细胞分... 目的:探讨核桃青皮提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及表皮生长因子受体(EGFR)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)筛选干预乳腺癌MCF-7细胞的核桃青皮提取物合适浓度。将乳腺癌MCF-7细胞分为空白对照组、阳性对照组、核桃青皮提取物低浓度组、核桃青皮提取物高浓度组和核桃青皮提取物高浓度+EGFR激动剂(NSC228155)组。采用CCK-8和集落形成实验检测各组细胞增殖情况;采用TUNEL法和流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;采用蛋白质印迹法检测各组细胞中增殖、凋亡及EGFR/MAPK信号通路相关蛋白表达水平。结果:当核桃青皮提取物浓度≥20μg/mL时,细胞增殖率显著降低,故选择20、40μg/mL分别为核桃青皮提取物低浓度组、高浓度组的核桃青皮提取物处理浓度。与空白对照组相比,阳性对照组、核桃青皮提取物低浓度组和高浓度组细胞增殖率、细胞集落形成数量,细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)和B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达水平,磷酸化EGFR(p-EGFR)/EGFR、磷酸化胞外信号调节激酶(p-ERK)/胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK和磷酸化c-Jun氨基端蛋白激酶(p-JNK)/c-Jun氨基端蛋白激酶(JNK)蛋白比值均显著降低;TUNEL阳性细胞率、细胞凋亡率和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与核桃青皮提取物低浓度组相比,核桃青皮提取物高浓度组细胞增殖率、细胞集落形成数量,CyclinD1、PCNA和Bcl-2蛋白表达水平,p-EGFR/EGFR、p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK和p-JNK/JNK蛋白比值均降低;TUNEL阳性细胞率、细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。核桃青皮提取物高浓度组与阳性对照组上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。与核桃青皮提取物高浓度组相比,核桃青皮提取物高� 展开更多
关键词 核桃青皮提取物 乳腺癌MCF-7细胞 增殖 凋亡 表皮生长因子受体/丝裂原活化蛋白激酶信号通路
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基于TLR4/MAPK信号通路探讨柚皮素对类风湿关节炎大鼠的治疗作用 被引量：2
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作者 黄浦洋 江强 +2 位作者 黄巧霞 符圣亮 王聪 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第15期3769-3774,共6页
目的探讨柚皮素对类风湿关节炎(RA)大鼠的治疗作用及Toll样受体(TLR)4/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组(1 mg/kg)、柚皮素低剂量组(50 mg/kg)、柚皮素高剂量组(100 mg/kg);除... 目的探讨柚皮素对类风湿关节炎(RA)大鼠的治疗作用及Toll样受体(TLR)4/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组(1 mg/kg)、柚皮素低剂量组(50 mg/kg)、柚皮素高剂量组(100 mg/kg);除对照组外,其余各组建立RA大鼠模型。造模成功后,甲氨蝶呤组、柚皮素低、高剂量组分别灌胃1 mg/kg的甲氨蝶呤、50 mg/kg的柚皮素、100 mg/kg的柚皮素,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,连续给药4 w。检测关节肿胀度、关节肿胀评分、血清炎性指标〔肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β〕、踝关节滑膜组织TLR4、MAPK mRNA和蛋白表达;观察踝关节组织病理变化。结果与对照组比较,模型组踝关节软骨层明显增厚,表现出弥漫性中性粒细胞浸润,关节软骨侵蚀和滑膜炎,关节肿胀度、关节肿胀评分、血清TNF-α、IL-6、IL-1β、踝关节滑膜组织TLR4、MAPK mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,甲氨蝶呤组、柚皮素低、高剂量组踝关节组织病理变化显著改善,关节肿胀度、关节肿胀评分、血清TNF-α、IL-6、IL-1β、踝关节滑膜组织TLR4、MAPK mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);柚皮素高剂量组上述指标改善效果显著优于柚皮素低剂量组(P<0.05);甲氨蝶呤组和柚皮素高剂量组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论柚皮素对RA大鼠的治疗作用明显,可改善RA大鼠关节肿胀和踝关节病理状况,抑制炎症反应,其机制可能与其抑制TLR4/MAPK信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 柚皮素 类风湿关节炎 Toll样受体4/丝裂原活化蛋白激酶信号通路
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