RANK-RANKL-OPG信号通路在骨重建中的分子作用机制 被引量：14

1

作者 李雪 周延民 +3 位作者 马珊珊 马遥 郭天奇 徐昭南 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期659-662,共4页

骨是动态的活性组织,通过由骨吸收和骨形成所组成的骨重建来维持自身的平衡及结构的完整性。核因子kB受体活化因子--kB受体活化因子配体--骨保护蛋白通路是骨吸收和骨形成发生耦联的关键通路,其对于维持骨重建的平衡、成骨细胞的分化以... 骨是动态的活性组织,通过由骨吸收和骨形成所组成的骨重建来维持自身的平衡及结构的完整性。核因子kB受体活化因子--kB受体活化因子配体--骨保护蛋白通路是骨吸收和骨形成发生耦联的关键通路,其对于维持骨重建的平衡、成骨细胞的分化以及调控破骨细胞生成等过程起着重要的作用。此外,此通路的深入研究对于骨质疏松症、心血管疾病的临床治疗具有重要的指导意义。本文就RANK-RANKL-OPG信号通路在骨发生和吸收中的分子作用机制作一综述。 展开更多

关键词 核因子kb受体活化因子 kb受体活化因子配体 骨保护素 骨重建 破骨细胞

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重组人骨保护素与重组核因子κb活化因子受体蛋白对破骨前体细胞分化的影响 被引量：13

2

作者 熊琦 张里程 +2 位作者 张立海 姚琦 唐佩福 《中国骨伤》 CAS 2013年第4期324-327,共4页

目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响。方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25(OH)2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法。研究分3组:rhRANK组:... 目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响。方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25(OH)2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法。研究分3组:rhRANK组:10-5g/L;rhOPG-Fc组:10-5g/L;空白对照组。作用9d后观察破骨细胞数目和形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数。结果:在空白对照组,小鼠成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养6d后,开始出现多核细胞,9d时可见大量成熟多核细胞,经TRAP染色证实为成熟破骨细胞,而rhRANK组及rhOPG-Fc组TRAP染色阳性多核细胞数较对照组均减少,特别是rhRANK组减少更明显。骨片吸收陷窝计数显示rhRANK组及rhOPG-Fc组较对照组也明显减少,而相对来说,rhRANK组较rhOPG-Fc组更少。结论:rhOPG-Fc与rhRANK均可以有效抑制破骨前体细胞分化成为成熟破骨细胞,且rhRANK较rhOPG-Fc抑制效果更明显。 展开更多

关键词 骨保护素 核因子κb活化因子受体蛋白 破骨前体细胞 细胞分化

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雷公藤多苷对2型糖尿病肾脏疾病大鼠肾脏保护作用的研究 被引量：9

3

作者 王云存 刘丽秋 杨鹏鹏 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期909-913,共5页

目的观察雷公藤多苷对STZ诱导的糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠肾脏中细胞核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体(RANK/RANKL)的表达变化,探讨其保护肾脏的机制。方法采用高糖高脂喂养加STZ腹腔注射法建立T2DM动物模型,造模成功后... 目的观察雷公藤多苷对STZ诱导的糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠肾脏中细胞核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体(RANK/RANKL)的表达变化,探讨其保护肾脏的机制。方法采用高糖高脂喂养加STZ腹腔注射法建立T2DM动物模型,造模成功后随机分为DKD模型组(DKD,n=8)和雷公藤多苷组(DT,n=8),另选健康大鼠作为正常对照组(NC,n=8)。DT组予雷公藤多苷50mg/(kg·d)剂量灌胃,NC组和DN组每日予等量生理盐水灌胃。12周后处死大鼠,检测FPG、FIns、UAlb、BUN、Scr、Ucr,计算Ccr。PAS染色观察肾脏病理改变,免疫组织化学法检测肾脏中RANK、RANKL的表达分布,Western blot检测RANK、RANKL、Nephrin的蛋白表达。结果与NC组比较,DKD组FPG、FIns、UAlb、Ccr、BUN在给药12周末表达均升高,肾脏中RANK[(0.27±0.05)vs(0.68±0.11)]、RANKL[(0.23±0.07)vs(0.62±0.08)]蛋白表达增加,而Nephrin表达水平下降(P<0.01);与DN组比较,DT组上述生化指标均改善,肾脏病理改变减轻;RANK[(0.45±0.09)vs(0.68±0.11)]、RANKL[(0.39±0.06)vs(0.62±0.08)],而Nephrin蛋白表达增多(P<0.01)。结论雷公藤多苷可以抑制RANK/RANKL的表达,减轻T2DM大鼠肾脏病理改变,减少蛋白尿,起到肾脏保护作用。 展开更多

关键词 糖尿病肾脏疾病 核因手.B受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体 雷公藤多苷 尿白蛋白 足细胞损伤

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IL-17和RANKL在胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜的表达及^(99)Tc-TDP的干预作用 被引量：9

4

作者 施青 王美美 《现代医学》 2010年第2期116-122,共7页

目的:探讨白细胞介素17(IL-17)和细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)在胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜病变发生发展中的作用及99锝-亚甲基二膦酸盐(99Tc-TDP)的干预作用。方法:通过完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建CIA大鼠模... 目的:探讨白细胞介素17(IL-17)和细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)在胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜病变发生发展中的作用及99锝-亚甲基二膦酸盐(99Tc-TDP)的干预作用。方法:通过完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建CIA大鼠模型。模型大鼠随机分为模型对照组和99Tc-TDP组,99Tc-TDP组予0.05μg.(kg.d)-199 Tc尾静脉注射,正常对照组与模型对照组予等量生理盐水尾静脉注射。关节炎指数(AI)评分评价关节炎程度,各组大鼠用ELISA法检测血清及关节液IL-17和RANKL浓度,显微镜观察滑膜病理变化,免疫组化法半定量检测滑膜IL-17和RANKL蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组和99Tc-TDP组血清及关节液IL-17浓度、关节液RANKL浓度、滑膜病理积分、滑膜IL-17和RANKL蛋白表达均增加(P<0.05),99Tc-TDP组上述指标较模型对照组均降低(P<0.05),各组血清RANKL浓度无显著性差异(P>0.05)。结论:IL-17和RANKL参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生发展,99Tc-TDP可能通过抑制滑膜IL-17和RANKL的表达延缓关节滑膜病变的进展。 展开更多

关键词 胶原诱导性关节炎 类风湿关节炎 白细胞介素17 细胞核因子-κB受体活化因子配基 99锝-亚甲基二膦酸盐 大鼠

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甲状旁腺激素相关蛋白对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL基因表达的影响 被引量：8

5

作者 徐进 荣海钦 +2 位作者 季虹 王东 刘春艳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第12期854-858,共5页

目的观察不同剂量间歇性注射甲状旁腺激素相关蛋白氨基端片段1-34(PTHrP1-34)对去卵巢大鼠骨密度及股骨RANKL、OPG基因表达的影响。方法4月龄健康雌性未孕Wistar大鼠60只,随机分为6组,假手术组(Sham组)和卵巢切除+安慰剂组(Placebo组)... 目的观察不同剂量间歇性注射甲状旁腺激素相关蛋白氨基端片段1-34(PTHrP1-34)对去卵巢大鼠骨密度及股骨RANKL、OPG基因表达的影响。方法4月龄健康雌性未孕Wistar大鼠60只,随机分为6组,假手术组(Sham组)和卵巢切除+安慰剂组(Placebo组)给予生理盐水;卵巢切除+雌激素治疗组(E2组)给予苯甲酸雌二醇注射液;卵巢切除+PTHrP治疗组分别用20、40、80μg/kg剂量,每日1次注射PTHrP1-34。给药12周后,测定腰椎L3～6及股骨BMD,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测大鼠股骨RANKL、OPG基因表达的水平。结果①BMD结果:PTHrP40组和PTHrP80组大鼠股骨、腰椎BMD明显高于Placebo组。②与Sham组相比,Placebo组OPG mRNA明显下降(P<0.01),RANKLmRNA水平则显著升高(P<0.01)。E2组OPG mRNA水平较Placebo组明显升高(P<0.01),RANKLmRNA水平显著下降(P<0.01)。与Placebo组相比,不同剂量PTHrP(1-34)治疗组OPG、RANKL mRNA水平无明显变化(P>0.05)。结论PTHrP1-34 40或80μg/kg每天皮下注射能提高去卵巢大鼠股骨、腰椎BMD,间歇性注射PTHrP(1-34)对去卵巢大鼠骨组织RANKL、OPG mRNA水平无明显影响。 展开更多

关键词 甲状旁腺激素相关蛋白氨基端(PTHrP1-34) 护骨素 NF-kb受体活化因子配体 去卵巢大鼠

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RANKL与骨重建 被引量：7

6

作者 陈秋月 商澎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期425-429,共5页

骨是一种动态更新的组织,它不断进行骨吸收(bone resorption)与骨形成(bone formation)的平衡,这个过程称之为骨重建(bone remodeling).核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)是骨吸收和骨... 骨是一种动态更新的组织,它不断进行骨吸收(bone resorption)与骨形成(bone formation)的平衡,这个过程称之为骨重建(bone remodeling).核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)是骨吸收和骨形成耦联的关键,具有诱导破骨细胞(osteoclast,OC)生成、活化,抑制破骨细胞凋亡的作用.RANKL最初发现于活化的T细胞,但骨重建过程中RANKL主要来源于骨细胞、成骨细胞和骨髓基质细胞.RANKL/核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)信号通路在成骨细胞调控破骨细胞生成的过程中起着重要的调节作用,是维持骨重建平衡的关键.本文就RANKL及其在骨中的分子作用机制作一综述. 展开更多

关键词 核因子ΚB受体活化因子配体 骨重建 破骨细胞

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参芪调肾方通过OPG/RANKL/NF-κB/MMP-9通路抑制慢阻肺炎症介导的骨吸收

7

作者 周凡超 杨勤军 +5 位作者 吴迪 丁焕章 王卉 马啸 吴凡 李泽庚 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期54-60,共7页

目的:研究参芪调肾方对香烟烟雾(CS)暴露法建立的慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠的炎症抑制、肺组织病理及骨组织内破骨细胞介导的骨吸收的改善作用机制。方法:将40只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、参芪调肾方8.53、17.06、34.1... 目的:研究参芪调肾方对香烟烟雾(CS)暴露法建立的慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型小鼠的炎症抑制、肺组织病理及骨组织内破骨细胞介导的骨吸收的改善作用机制。方法:将40只小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、参芪调肾方8.53、17.06、34.11 g/kg组,每组8只,除正常对照组外,其余4组采用CS暴露法造模24 w,第12 w-24 w各组灌胃给予相应药物或生理盐水,连续12 w;ELISA法检测肺组织、外周血、骨组织内炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;HE染色观察肺组织病理学改变;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察骨组织内破骨细胞;免疫组化法观察骨组织内骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB p65(NF-κB p65)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白在小鼠胫骨组织中的定位表达;Western blot法检测肺组织NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9及胫骨OPG、RANKL、NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9、组织蛋白酶K(CTSK)蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组肺组织损伤明显,管腔内、管壁及周围见大量炎症细胞聚集;肺组织、外周血及骨组织内炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01);骨组织内破骨细胞数量、RANKL、NF-κB p65、MMP-9、CTSK、TRAP蛋白表达显著升高(P<0.01),OPG蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,参芪调肾方各剂量组可不同程度改善小鼠支气管壁增厚、肺气肿形成等病理改变,减轻炎性细胞浸润,参芪调肾方34.11 g/kg组可显著下调肺组织内NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9蛋白表达(P<0.01)、降低炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量(P<0.01);明显降低骨组织内破骨细胞数量以及下调RANKL、NF-κB p65、p-NF-κB p65、MMP-9、CTSK、TRAP蛋白表达(P<0.05或P<0.01),显著升高OPG蛋白阳性表达(P<0.01)。结论:参芪调肾方对COPD模型小鼠合并骨质疏松(OP)有一定防治作用,可能是通过调控OPG/RANKL 展开更多

关键词 参芪调肾方 慢性阻塞性肺疾病 破骨细胞 骨保护素/核因子κB受体活化因子配体/核因子κB/基质金属蛋白酶-9 炎症 骨吸收

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小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用 被引量：1

8

作者 季秋实 董明 +2 位作者 许诺 姜龙 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第36期5882-5888,共7页

背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳... 背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳朵、免疫系统、黑色素瘤,特别是骨骼和皮肤。目的:文章介绍MITF基因位点的发现与克隆,综述了MITF上调与破骨细胞活性相关的基因的表达和通过细胞融合调节破骨细胞的发育,敲除MITF后抑制破骨细胞的分化以及MITF及其信号通路在破骨细胞的分化中的作用。方法:作者以“MITF、骨破坏、破骨细胞、成骨细胞、小眼畸形相关转录因子、组织蛋白酶K、核因子κB、核因子κB配体”为关键词,检索2000年至2018年中国知网数据库和PubMed数据库中相关文献,并将这些文献进行筛选与总结。结果与结论:最终纳入文献43篇。①MITF对于多种细胞系的分化是必不可少的,并且通过与谱系特异性辅因子的相互作用以及其对特定信号级联的响应而获得其特异性;②MITF在破骨细胞的分化过程中发挥了重要的作用,其能够促进骨破坏;③研究MITF在骨破坏中的作用机制以及骨微环境的改变,可以成为治疗这一系列骨破坏疾病的关键靶点。 展开更多

关键词 MITF 骨破坏 破骨细胞 成骨细胞 小眼畸形相关转录因子 组织蛋白酶K 核因子ΚB 核因子ΚB受体活化因子配体

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压应力对骨愈合过程中破骨细胞的作用机制研究进展 被引量：1

9

作者 郑未来 于大淼 廉永云 《医学综述》 2015年第17期3095-3097,共3页

近年来运用力学技术治疗骨不愈合成为骨科领域的重点,尤其是压应力学对骨细胞作用的分子机制研究更是临床医师和广大科研工作者研究的热点。该文通过分析引起骨不连的力学因素以及骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配基信号系统的组... 近年来运用力学技术治疗骨不愈合成为骨科领域的重点,尤其是压应力学对骨细胞作用的分子机制研究更是临床医师和广大科研工作者研究的热点。该文通过分析引起骨不连的力学因素以及骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配基信号系统的组成和相互作用,进一步探讨压应力抑制破骨细胞分化的内在机制,从而为更深一步拓宽医学与工程学尤其是力学领域的通力合作打下坚实的基础。 展开更多

关键词 破骨细胞 压应力 骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配基/细胞核因子κB受体活化因子

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Caspase-1抑制剂对大鼠血管平滑肌细胞钙化的初步影响 被引量：1

10

作者 彭利静 拓步雄 李超民 《生物技术通讯》 CAS 2014年第2期234-236,共3页

目的:研究Caspase-1抑制剂zVAD对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响。方法:体外分离、培养大鼠血管平滑肌细胞,加入β-磷酸甘油酯(β-GP)诱导细胞发生钙化;在细胞中加入Caspase-1抑制剂zVAD或DMSO对照,按照不同时间点收取细胞进行半定量PCR... 目的:研究Caspase-1抑制剂zVAD对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响。方法:体外分离、培养大鼠血管平滑肌细胞,加入β-磷酸甘油酯(β-GP)诱导细胞发生钙化;在细胞中加入Caspase-1抑制剂zVAD或DMSO对照,按照不同时间点收取细胞进行半定量PCR,检测骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达变化;通过茜素红钙化染色,直观观察zVAD对血管平滑肌细胞钙化的影响。结果:β-GP加入细胞后,可见细胞内OPG/RANKL的mRNA表达水平逐步增加,加入zVAD后增加趋势减缓;茜素红钙化染色显示,zVAD可抑制血管平滑肌细胞钙化。结论:分离、体外培养了大鼠的血管平滑肌细胞,并且发现在钙化过程中OPG/RANKL表达增加,而Caspase-1抑制剂zVAD可有效抑制OPG/RANKL的表达,提示炎症小体可能通过OPG/RANKL诱导动脉钙化的产生。 展开更多

关键词 大鼠血管平滑肌细胞 骨保护素 核因子kb受体活化因子配体 CASPASE-1抑制剂 zVAD 动脉钙化

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细胞核因子κB配体活化因子在肺高压中的作用

11

作者 朱茜 贾代乐 吕安康 《诊断学理论与实践》 2016年第4期405-409,共5页

目的 :评估细胞核因子κB配体活化因子(receptor activator of nuclear facto-κB ligand,RANKL)在肺高压(pulmonary hypertension,PH)中的表达水平及其作用。方法:本研究涉及临床和动物实验两部分。临床实验以48例PH患者和50例无肺高压... 目的 :评估细胞核因子κB配体活化因子(receptor activator of nuclear facto-κB ligand,RANKL)在肺高压(pulmonary hypertension,PH)中的表达水平及其作用。方法:本研究涉及临床和动物实验两部分。临床实验以48例PH患者和50例无肺高压(non-PH)对照者作为研究对象,采用酶联免疫吸附试验检测其血清RANKL水平,并用超声心动图评估其心功能。对于PH组中8例接受靶向治疗的患者,观察2年随访期内其RANKL的变化。动物实验采用低氧(10%O2)诱导的PH小鼠模型,检测其右心室收缩压、右心室肥大情况,以评估其疾病严重程度,并用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)等方法检测小鼠血清、肺组织中RANKL水平。结果:临床研究结果示,PH患者的血清RANKL水平显著高于对照者[(4.00±0.30)pmol/L比(2.23±0.14)pmol/L],且RANKL水平与其疾病严重程度呈正相关;PH患者治疗后测得的血清RANKL水平较治疗前降低。动物实验中,低氧诱导的PH模型小鼠的血清、肺组织及肺动脉中的RANKL水平均显著高于对照组小鼠。结论:RANKL在PH中升高,不仅可作为提示PH诊断的指标,且在随访及疗效评估中也有着重要意义。 展开更多

关键词 细胞核因子kb配体活化因子 低氧 肺高压

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辐射对体外培养的小鼠成骨细胞核因子κB受体活化因子配体／骨保护素mRNA表达的影响

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作者 杨冰 周慧 +7 位作者 张晓东 刘征 仲蕾蕾 赵吉 樊飞跃 韩英 杨福军 孙元明 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期437-440,共4页

目的通过对成骨细胞的RANKL和OPG的基因表达分析揭示辐射对成骨细胞功能的影响。方法在体外诱导骨髓基质细胞生成成骨细胞，碱性磷酸酶（ALP）染色对其特性进行确定，用RT—PCR方法分析了0～4Gy照射的早期成骨细胞和成熟成骨细胞的RANKL... 目的通过对成骨细胞的RANKL和OPG的基因表达分析揭示辐射对成骨细胞功能的影响。方法在体外诱导骨髓基质细胞生成成骨细胞，碱性磷酸酶（ALP）染色对其特性进行确定，用RT—PCR方法分析了0～4Gy照射的早期成骨细胞和成熟成骨细胞的RANKL和OPG的表达。结果骨髓基质细胞在体外被诱导成的成骨细胞，在0—4Gy剂量照射下，早期成骨细胞中RANKL的mRNA表达在1Gy照射时，与0Gy时相比表达最高，达到2．83倍，但各剂量组明显高于成熟成骨细胞的表达（t=8．34—103．57，P〈0．05）。早期成骨细胞各剂量组的RANKL／OPG比值，在1Gy照射最高达0．225±0．018，但明显高于晚期成骨细胞（t=2．84—20．99，P〈0．05）。结论辐射能够增强早期成骨细胞对破骨细胞功能的调节作用，加重骨组织的损伤。 展开更多

关键词 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 辐射损伤 成骨细胞

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淫羊藿苷调节成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的机制 被引量：49

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作者 马小妮 葛宝丰 +7 位作者 陈克明 周建 石文贵 谢艳芳 郭晓宇 吕享 成魁 高玉海 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期432-438,共7页

目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达,Westernblotting检测OPG、RANKL和Ⅰ型胶原蛋白表达。加入10-5mol/LICA作用10～90min,流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。结果与对照组相比,ICA能明显促进骨形成,表现为OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达量及Collagen Ⅰ蛋白表达量明显增加(P均<0.01),同时提高细胞内钙离子浓度。ICA也能明显抑制骨吸收,表现为提高OPG及OPG/RANKL基因和蛋白水平的表达量。结论 ICA可能是通过促进OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达,提高CollagenⅠ蛋白表达量及细胞内钙离子浓度来促进成骨细胞骨形成;并通过促进OPG及OPG、RANKL基因和蛋白水平的表达量来抑制破骨细胞骨吸收。 展开更多

关键词 成骨细胞 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 淫羊藿苷 流式细胞仪

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杜仲中松脂素二葡萄糖苷和松脂素对成骨细胞中OPG和RANKL表达的影响 被引量：27

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作者 胡倩影 尹瑞林 +2 位作者 王一飞 刘雪睛 丁艳霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期181-186,共6页

目的：观察杜仲中松脂素二葡萄糖苷及其苷元松脂素对体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的影响。方法：采用质量浓度为1×10^-7-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷与松脂素体外干预MC3T3-E1成骨细胞48,72 h,采... 目的：观察杜仲中松脂素二葡萄糖苷及其苷元松脂素对体外培养的小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的影响。方法：采用质量浓度为1×10^-7-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷与松脂素体外干预MC3T3-E1成骨细胞48,72 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测细胞分化情况,酶联免疫吸附测定法（ELISA）和蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测细胞骨保护素（OPG）与核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）蛋白表达的水平。结果：与空白组相比,培养48 h,1×10^-4-100μg·L^-1松脂素二葡萄糖苷及1×10^-4-1μg·L^-1松脂素均能促进成骨细胞增殖（P〈0.05,P〈0.01）;培养72 h,1×10^-3-100μg·L^-1松脂素二葡萄糖苷及0.1μg·L^-1松脂素能促进成骨细胞增殖（P〈0.05,P〈0.01）。与空白组相比,培养48 h时,质量浓度为1×10^-4-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷、松脂素均能够显著促进成骨细胞ALP分泌（P〈0.01）;培养72 h时,质量浓度为0.1-1×10^3μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷和1×10^-4-1×10^3μg·L^-1松脂素均能显著促进成骨细胞ALP分泌（P〈0.05,P〈0.01）。与空白组相比,培养48 h,1×10^-5-10μg·L^-1的松脂素二葡萄糖苷和松脂素均能促进细OPG蛋白分泌（P〈0.05,P〈0.01）;只有松脂素在1×10^-5,1×10^-3μg·L^-1时能明显抑制RANKL蛋白的分泌（P〈0.01）,在1×10^-5-0.1μg·L^-1时提高OPG/RANKL（P〈0.01）。结论：松脂素二葡萄糖苷与松脂素均能通过促进成骨细胞的增殖和分化达到抗骨质疏松作用,但其作用机制不同,松脂素二葡萄糖苷主要通过促进OPG分泌来发挥,而松脂素则既能通过促进OPG分泌又能通过抑制RANKL表达来发挥作用。 展开更多

关键词 杜仲 松脂素二葡萄糖苷 松脂素 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 增殖分化 骨保护素 核转录因子-κB受体活化因子配体

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不同治法方药对激素性股骨头坏死鸡股骨头OPG,RANKL mRNA表达的影响 被引量：26

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作者 万蓉 李莉 +5 位作者 孔祥英 肖春生 姜宜妮 林娜 孔焕宇 陈卫衡 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2011年第8期149-153,共5页

目的:观察比较健脾化痰、活血通络(简称健脾)与补肾壮骨、活血通络(简称补肾)2种治法对激素性股骨头坏死鸡股骨头骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)mRNA... 目的:观察比较健脾化痰、活血通络(简称健脾)与补肾壮骨、活血通络(简称补肾)2种治法对激素性股骨头坏死鸡股骨头骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、NF-κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)mRNA表达的影响,探讨2者防治股骨头坏死的分子机制。方法:64只来杭鸡,随机分为对照、模型、健脾和补肾组,除对照组外均胸肌注射甲基泼尼松琥珀酸钠(5.2 mg·kg-1),健脾及补肾组在造模同时ig给予相应中药(6,9 g·kg-1.d-1),连续16周。给药8周和16周后,分批处死动物,取双侧股骨头,原位杂交法检测股骨头内OPG,RANKL mRNA的表达情况,并计算其比值。结果:与正常组相比,模型组8周和16周时股骨头内OPG阳性细胞数显著减少,分别为(778±189),(696±108)个,RANKL分别为(717±164),(519±162)个,明显增多(P<0.01);与模型组相比,健脾方在8周就可以明显上调OPG阳性细胞数达(1 049±211)个,同时也降低RANKL阳性细胞数至(454±166)个(P<0.05或P<0.01),升高OPG/RANKL比值(P<0.05),而补肾组此时作用不明显,16周时作用比健脾组强(P<0.05)。结论:健脾化痰、活血通络和补肾壮骨、活血通络2种不同治法方药均可调节股骨头内OPG和RANKL的基因表达,这可能是其有效抑制破骨细胞分化、防治激素性股骨头坏死的作用机制之一;健脾化痰、活血通络方药起效时间相对较早。 展开更多

关键词 股骨头坏死 骨保护素 NF-kb受体活化因子配基

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不同大小机械牵张力对成骨细胞OPG/RANKL表达的影响 被引量：8

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作者 唐林 邵玶 +1 位作者 李永明 林珠 《中国美容医学》 CAS 2008年第4期530-533,共4页

目的:研究不同大小机械牵张力对成骨细胞OPG/RANKL表达的影响。方法:通过自制多通道细胞牵张应力加载系统对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1同时施加0%、6%、12%和18%的机械牵张力,作用24h后,用RT-PCR方法检测细胞受力后OPGmRNA/RANKL mRNA表达... 目的:研究不同大小机械牵张力对成骨细胞OPG/RANKL表达的影响。方法:通过自制多通道细胞牵张应力加载系统对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1同时施加0%、6%、12%和18%的机械牵张力,作用24h后,用RT-PCR方法检测细胞受力后OPGmRNA/RANKL mRNA表达的变化,用免疫印迹法(Western Blotting)检测其蛋白表达的变化。结果:细胞受力后,其OPG mRNA及蛋白表达随牵张力值的增大明显增加,而RANKL mRNA及蛋白表达随牵张力值的增大明显减少。结论:不同大小机械牵张力可以影响成骨细胞的OPG/RANKL表达,进而影响正畸骨改建。 展开更多

关键词 机械牵张力 成骨细胞 骨保护素 骨保护素配体

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抗风湿颗粒对胶原诱导关节炎大鼠骨保护素、核因子-κB受体激活因子配体和巨噬细胞集落刺激因子表达的影响 被引量：6

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作者 刘亦恒 张海英 +2 位作者 臧洪敏 陈君长 李彦民 《中西医结合学报》 CAS 2006年第3期307-310,共4页

目的:观察抗风湿颗粒(Kangfengshi Granules,KFSG)对胶原诱导关节炎大鼠骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macropha... 目的:观察抗风湿颗粒(Kangfengshi Granules,KFSG)对胶原诱导关节炎大鼠骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)mRNA表达的影响,探讨KFSG治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)治疗组和KFSG治疗组。除正常对照组外,其余各组大鼠予以皮下注射Ⅱ型胶原诱导关节炎模型。治疗4周后,采用实时定量PCR技术检测各组大鼠骨组织中OPG、RANKL和M-CSF mRNA的表达水平。结果:造模大鼠90%出现关节炎症状。治疗4周后,模型组、CsA治疗组和KFSG治疗组与正常对照组比较,RANKL mRNA和M-CSF mRNA的表达增高,OPGmRNA的表达降低,RANKL mRNA/OPG mRNA比值亦增高,差异均有统计学意义。KFSG治疗组与模型组比较,OPG mRNA的表达水平上调,M-CSF mRNA的表达水平下调,RANKL mRNA/OPG mRNA比值下降,差异均有统计学意义。结论:KFSG治疗RA骨质破坏的分子机制可能与其上调OPG mRNA的表达、下调M-CSF mRNA的表达及降低RANKL mRNA/OPG mRNA比值有关。 展开更多

关键词 抗风湿颗粒 关节炎 骨保护素 核因子-κB受体激活因子配体 巨噬细胞集落刺激因子

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多发性骨髓瘤骨病患者骨代谢及调节因子水平及其意义 被引量：7

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作者 鲍立 黄晓军 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期243-247,共5页

目的 研究多发性骨髓瘤（MM）患者血清Dickkopf^-1（DKK-1）、可溶性核因子KB配体受体激活剂（sRANKL）、护骨素（OPG）和骨代谢因子[碱性磷酸酶（ALP）、抗洒石酸酸性磷酸酶（TRACP-5b）]水平及其与MM分期、溶骨性病变的关系，探讨骨... 目的 研究多发性骨髓瘤（MM）患者血清Dickkopf^-1（DKK-1）、可溶性核因子KB配体受体激活剂（sRANKL）、护骨素（OPG）和骨代谢因子[碱性磷酸酶（ALP）、抗洒石酸酸性磷酸酶（TRACP-5b）]水平及其与MM分期、溶骨性病变的关系，探讨骨代谢及调节因子DKK-l和sRANKI．在MM骨病中的临床意义。方法 采用双抗体夹心ELISA检测30例初诊MM患者和20例健康人血清DKK-1、sRANKL、OPG、ALP、TRACP-5b等骨代谢因子及调节因子的水平。结果 MM患者血清DKK－1、sRANKL、OPG和TRACP水平均显著高于键康人，分别为42．96μg／L比5．33μg/L，1．83pmol／L比0．79pmol／L，1799．30pmol／L比822．40pmol／L，5．81U／L比0．28U／L，P值均〈0．05。国际分期系统（ISS）分期Ⅲ期患者血清DKK-1水平（46．33μg／1．）和sRANKI．（2．26pmol／L）水平显著高于Ⅰ／Ⅱ期患者（37．91斗g／L和1．19pmol／L，P值均〈0．05）。3处以上与1～3处溶骨病变患耆相比，血清DKK－1、sRANKL和’FRACP－5b水平屁著升高（46．30μg/L比31．98μg/L，2．18pmo1／L比0．69pmol／L，6．02U／L比5．13U／L,P值均〈0．05）：结论 MM患者血清DKK-l、sRANKL、OPG和TRACP-5h水平均显著高于健康人；血清DKK-1、sRANKL水平与MM分期及溶骨病变程度相关。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 酶联免疫吸附测定 溶骨病变 DICKKOPF-1 可溶性粒因子kb 配体受体激活剂

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糖尿病合并牙周炎患者龈沟液中OPG/RANKL表达与炎症因子、自由基生成及骨代谢的相关性 被引量：6

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作者 郝瑞 贺菲菲 +2 位作者 梁艳 魏媛媛 高婷婷 《海南医学院学报》 CAS 2018年第5期585-588,共4页

目的:研究糖尿病合并牙周炎患者龈沟液中OPG/RANKL表达与炎症因子、自由基生成及骨代谢的相关性。方法:选择在西安市第四医院就诊的糖尿病合并牙周炎患者作为研究的牙周炎组,选择同期接受牙周检查的健康志愿者作为对照组。采集龈沟液并... 目的:研究糖尿病合并牙周炎患者龈沟液中OPG/RANKL表达与炎症因子、自由基生成及骨代谢的相关性。方法:选择在西安市第四医院就诊的糖尿病合并牙周炎患者作为研究的牙周炎组,选择同期接受牙周检查的健康志愿者作为对照组。采集龈沟液并测定OPG/RANKL的表达量、炎症因子及骨代谢分子的含量、自由基的生成量。结果:牙周炎组龈沟液中OPG的蛋白表达量及OPG/RANKL表达量的比值、ICTP、Runx2的含量均显著低于对照组,RANKL的蛋白表达量、TNF-α、IL-1β、IL-17、HMGB1、DKK1、MMP1的含量及ROS、MDA、8-OHdG的生成量均显著高于对照组;牙周炎组患者龈沟液中OPG/RANKL表达量的比值与TNF-α、IL-1β、IL-17、HMGB1、DKK1、MMP1的含量及ROS、MDA、8-OHdG的生成量呈负相关关系,与ICTP、Runx2的含量呈正相关关系。结论:糖尿病合并牙周炎患者牙周组织中炎症及氧化应激反应的过度激活能够引起OPG/RANKL表达紊乱,进而造成骨代谢异常。 展开更多

关键词 牙周炎 骨保护素 核因子ΚB受体活化因子 炎症反应 自由基 骨代谢

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黄芩苷对人牙周膜细胞RANKL-OPG表达的影响及其作用机制 被引量：4

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作者 陈悦 吴织芬 杨连甲 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期492-497,共6页

目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默... 目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默,继而将转染与未转染靶向性TGF-βⅡR基因沉默的T细胞和正常人牙周膜成纤维细胞置于加有黄芩苷和内毒素的培养基中,分为6组:①正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞+黄芩苷;②正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞;③正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞+黄芩苷;④正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞;⑤正常牙周膜成纤维细胞+黄芩苷;⑥正常牙周膜成纤维细胞。共培养48h,RT-PCR检测牙周膜细胞RANKL和OPG的表达,计算RANKL/OPG比值。结果①酶切鉴定正确的克隆测序结果与设计的目的序列完全一致;②转染siRNA1的T细胞组的TGF-βⅡRmRNA的表达被明显抑制;③RANKL/OPG的比值在各组间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了TGF-βⅡR靶向siRNA真核表达载体并成功转染T细胞;黄芩苷可以降低牙周膜细胞表面RANKL/OPG比值;TGF-β的信号传导在黄芩苷影响牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG表达过程中起着重要作用;黄芩苷并非只通过TGF-β信号传导通路,而是亦通过其他通路对牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG进行调控。 展开更多

关键词 转化生长因子βⅡ型受体 小干扰RNA 核因子-κB受体激活物配基 骨保护素 牙周膜成纤维细胞

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