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2018年-2020年甘肃省天水市发热呼吸道症候群病原体的研究分析 被引量：1
1
作者 史东坡 魏克敏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2022年第2期158-161,169,共5页
目的了解2018年—2020年甘肃省天水地区发热呼吸道疾病患者病原体构成,分析其流行特征。方法首先进行细菌培养,然后用多重实时荧光PCR方法进行病原体核酸检测。结果通过对407份发热呼吸道疾病患者样本检测,共检出22种病原体,阳性267例,... 目的了解2018年—2020年甘肃省天水地区发热呼吸道疾病患者病原体构成,分析其流行特征。方法首先进行细菌培养,然后用多重实时荧光PCR方法进行病原体核酸检测。结果通过对407份发热呼吸道疾病患者样本检测,共检出22种病原体,阳性267例,总阳性率为65.6%(267/407),前9种病原体阳性232例,阳性率为57.0%(232/407)。阳性率较高的前4位依次为肺炎链球菌PRSP(53.2%)、流感嗜血杆菌HiB(25.8%)、流感病毒Flu(13.5%)、呼吸道合胞病毒RSV(11.2%)。前9种病原体感染情况:每年10月—次年3月的检出率较高,12月检出阳性病例数最高,存在明显的季节性变化。男性感染占63.8%,女性感染占36.2%;≤3岁组检出率最高。混合感染者有117例,占50.4%(117/232),以PRSP和HiB的混合感染最为常见。结论2018年—2020年甘肃省天水地区最主要的病原体构成为PRSP、HiB、Flu、RSV 4种,其他病原体也占有较大的比例。 展开更多
关键词 天水市 实时荧光pcr核酸检测 呼吸道病原体 检出率 流行病学规律
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应用数字PCR对新型冠状病毒核酸检测结果的分析 被引量：2
2
作者 王体辉 江亚娟 +2 位作者 范莹莹 孔政 焦伯延 《中国口岸科学技术》 2021年第8期65-69,共5页
比较数字PCR(dPCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测的结果,为利用dPCR对SARS-CoV-2含量低的样品进行核酸检测提供数据支持。利用dPCR和qPCR对济宁市17份新型冠状病毒肺炎(COVID-19)核酸样本进行N基因和ORF1a... 比较数字PCR(dPCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测的结果,为利用dPCR对SARS-CoV-2含量低的样品进行核酸检测提供数据支持。利用dPCR和qPCR对济宁市17份新型冠状病毒肺炎(COVID-19)核酸样本进行N基因和ORF1ab基因检测。qPCR检测N基因17份阳性,ORF1ab基因15份阳性,N基因和ORF1ab基因Ct值差异无统计学意义,但Ct值大于32的样本,N基因和ORF1ab基因Ct值差异有统计学意义。经dPCR检测获得17份样本的N基因和ORF1ab基因的浓度,Ct值和浓度高度相关。且qPCR检测ORF1ab基因阴性2份样本,dPCR可以检出。dPCR和qPCR检测结果一致性较好,而dPCR检测敏感度和准确性均高于qPCR。对于qPCR检测Ct值较大样本或单基因阳性样本,dPCR可以作为qPCR的有效补充。 展开更多
关键词 数字pcr 实时荧光定量pcr 新型冠状病毒 核酸检测
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乳品检测中实时荧光定量PCR仪的研制
3
作者 彭年才 苏明权 张镇西 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2007年第5期62-64,共3页
完成了荧光检测系统、PCR热循环扩增系统、DNA核酸定量分析诊断系统等仪器关键技术研究,针对乳品检验及临床应用要求,在国家权威部门完成了仪器性能检测、使用验证、临床试验等全过程,实现了产品化和应用示范,并达到了准确性、安全性和... 完成了荧光检测系统、PCR热循环扩增系统、DNA核酸定量分析诊断系统等仪器关键技术研究,针对乳品检验及临床应用要求,在国家权威部门完成了仪器性能检测、使用验证、临床试验等全过程,实现了产品化和应用示范,并达到了准确性、安全性和有效性的要求。 展开更多
关键词 乳品检验 荧光pcr仪 快速检测
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TaqMan探针实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测新布尼亚病毒L基因方法的建立与应用 被引量：7
4
作者 虞吉寅 王忠发 +1 位作者 任宜 毛彬 《疾病监测》 CAS 2013年第2期132-135,共4页
目的建立敏感、特异、实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reversetranscription-polymerase chain reaction,rRT-PCR)方法,用于新布尼亚病毒的核酸检测。方法以新布尼亚病毒L基因为靶基因设计引物以... 目的建立敏感、特异、实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reversetranscription-polymerase chain reaction,rRT-PCR)方法,用于新布尼亚病毒的核酸检测。方法以新布尼亚病毒L基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针,建立real-time RT-PCR方法,并对舟山市岱山县50份临床疑似患者血清、血浆、25份正常人群血清和从患者血清中分离到的2株病毒样本进行了检测鉴定,并验证了方法的特异性、敏感性和重复性。结果建立的real-time RT-PCR具有良好的特异性,标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(R2=0.999),最低检出浓度为1拷贝/μl,重复性评估批内变异系数均<1.0%。在103份检测标本中,50份临床病例血清血浆标本,30份为阳性,健康人群血清25份和28份鼠肺、鼠肾均为阴性,8份病毒分离培养血样中2份为阳性。结论本研究建立的real-time RT-PCR方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,可用于人与动物新布尼亚病毒核酸的快速检测、病毒分离培养的初步鉴定等。 展开更多
关键词 real-time RT-pcr 新布尼亚病毒 核酸检测
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猴B病毒通用核酸检测体系的建立与评价 被引量：2
5
作者 马丽敏 贾俊婷 +4 位作者 钟亚迪 范瑞 马玉媛 刘兴友 章金刚 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第2期22-27,共6页
建立能同时检测猴B病毒5种基因型的通用核酸检测体系,并对其进行方法学评价。首先,对猴B病毒5种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域(g B基因)设计猴B病毒的通用引物和探针。其次,构建参考品质粒,并以其为模板建立核酸检测体... 建立能同时检测猴B病毒5种基因型的通用核酸检测体系,并对其进行方法学评价。首先,对猴B病毒5种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域(g B基因)设计猴B病毒的通用引物和探针。其次,构建参考品质粒,并以其为模板建立核酸检测体系的标准曲线。最后,对该核酸检测体系分别进行特异性、通用性、敏感性和重复性评价。建立的标准曲线在3×107~3×102 copies模板范围内相关系数|r|=0.999。方法学评价结果显示,该核酸检测体系与人单纯疱疹病毒1型、人单纯疱疹病毒2型、水痘带状疱疹病毒、EB病毒、巨细胞病毒均无交叉反应;可同时检测猴B病毒5种基因型,检测下限为30 copies;批内和批间实验重复性良好。建立的猴B病毒通用核酸检测体系对于疑似猴B病毒感染病例的辅助诊断,以及高质量实验猴群的建立均有着重要意义。 展开更多
关键词 猴B病毒 实时荧光定量pcr 核酸检测
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基于实时荧光定量PCR的番木瓜多重PCR高效检测方法 被引量：1
6
作者 张玉山 陈洁彬 +3 位作者 吴亮君 朱璇 欧阳淑芬 沈志华 《湖北农业科学》 2023年第9期170-174,共5页
以pCaMV35S基因核酸检测试剂盒反应体系为基础,添加多重PCR反应所需的目标基因引物和番木瓜(Carica papaya L.)DNA,进行多重PCR反应,同时考察不合成荧光探针的情况下对目标基因进行实时荧光定量检测。结果表明,在实时荧光定量PCR反应体... 以pCaMV35S基因核酸检测试剂盒反应体系为基础,添加多重PCR反应所需的目标基因引物和番木瓜(Carica papaya L.)DNA,进行多重PCR反应,同时考察不合成荧光探针的情况下对目标基因进行实时荧光定量检测。结果表明,在实时荧光定量PCR反应体系中,多重PCR扩增的基因条带比常规PCR扩增的基因条带更亮,在不合成荧光探针的情况下实现目标基因的实时荧光定量PCR反应,以期建立一种基于实时荧光定量PCR的多重PCR检测方法。 展开更多
关键词 转基因番木瓜(Carica papaya L.) 多重pcr反应 实时荧光定量pcr 荧光探针 pCaMV35S基因核酸检测试剂盒(pcr-荧光探针法)
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