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铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响 被引量:31
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作者 童微 余强 +2 位作者 李虎 崔武卫 聂少平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第7期155-160,共6页
采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccha... 采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccharides of Dendrobium officinale,DOP)的中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为87.37%、3.19%和0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子质量为960 k D,硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰的铁皮石斛多糖能够增强RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖对免疫活性的影响。 展开更多
关键词 铁皮石斛 多糖 化学修饰 raw264.7巨噬细胞 免疫活性
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12味止血中药对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮的抑制作用 被引量:28
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作者 廖晖 Linda K Banbury David N Leach 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期649-651,共3页
目的:研究12味止血中药对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮(NO)的抑制作用,并探讨其止血机制。方法:以1μg.mL-1LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,22h后以Griess法测定NO的终产物亚硝酸盐的含量,观察LPS对NO生成的影响。结果:12味... 目的:研究12味止血中药对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞产生一氧化氮(NO)的抑制作用,并探讨其止血机制。方法:以1μg.mL-1LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,22h后以Griess法测定NO的终产物亚硝酸盐的含量,观察LPS对NO生成的影响。结果:12味止血药均可抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7中NO的生成。三七、地榆、仙鹤草、槐花、艾叶、蒲黄、侧柏叶及白茅根的抑制作用显著(P<0.05)。结论:本实验为12味止血中药对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞产生NO的抑制作用提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 止血中药 脂多糖 一氧化碳 巨噬细胞raw264.7
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三七总皂苷调节iNOS-NO-NF-κB信号通路抑制LPS诱导的RAW246.7细胞炎症研究 被引量:21
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作者 冯晓异 赵微 +2 位作者 何朋伦 陈文慧 姚政 《药物评价研究》 CAS 2020年第4期670-675,共6页
目的探讨三七总皂苷(PNS)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞iNOS-NO-NF-κB信号通路相关分子表达及活性的影响。方法MTT比色法检测PNS对RAW264.7细胞增殖的抑制作用;不同浓度PNS(25、50、100μg/mL)干预体外培养LPS诱导的RAW264.7细胞24... 目的探讨三七总皂苷(PNS)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞iNOS-NO-NF-κB信号通路相关分子表达及活性的影响。方法MTT比色法检测PNS对RAW264.7细胞增殖的抑制作用;不同浓度PNS(25、50、100μg/mL)干预体外培养LPS诱导的RAW264.7细胞24、48 h后,Griess法检测NO变化;PNS干预24 h后,Western blotting检测iNOS、NF-κB、p-NF-κB、IKKα、p-IKKα、p-ΙκΒα蛋白表达量的变化;PNS干预4 h后,激光共聚焦显微镜检测NF-κB转位入核情况。结果PNS浓度大于150μg/mL时,才表现出显著抑制细胞增殖的作用。25、50、100μg/mL PNS作用于RAW264.7细胞24和48 h后,与模型组比较,NO生成量均显著降低(P<0.001)。50、100μg/mL PNS作用于RAW264.724 h后,iNOS、NF-κB蛋白表达量显著降低,磷酸化蛋白p-NF-κB、p-IKKα、p-ΙκΒα表达水平也显著降低(P<0.01、0.001)。与模型组比较,PNS 25、50、100μg/mL组核因子p65入核荧光强度显著降低(P<0.01、0.001)。结论PNS能够显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS-NO-NF-κB信号通路的活性,降低细胞炎症反应。 展开更多
关键词 三七总皂苷 raw264.7 NO通路 NF-ΚB通路 炎症
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青蛤酶解多肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用 被引量:20
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作者 叶盛旺 杨最素 +5 位作者 李维 唐云平 黄芳芳 张小军 余方苗 丁国芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期185-191,共7页
研究酶解法制备的青蛤多肽(Cyclina sinensis peptides,CSP)对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标,选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解,酶解液经超滤、冷冻干燥后,采用噻唑蓝(methyl thiazolyltetrazolium,... 研究酶解法制备的青蛤多肽(Cyclina sinensis peptides,CSP)对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标,选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解,酶解液经超滤、冷冻干燥后,采用噻唑蓝(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)法筛选出增殖活性最高的组分进行免疫调节作用研究。采用MTT细胞增殖实验、倒置显微镜观察、中性红吞噬实验、硝酸根还原酶法及酶联免疫吸附检测法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定CSP-5对RAW264.7巨噬细胞的生长与增殖、细胞形态、吞噬能力、一氧化氮(nitric oxide,NO)分泌能力及细胞因子白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌能力的影响;同时还研究了CSP-5对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明,分子质量小于3 kDa的CSP-5对RAW264.7细胞的生长与增殖具有明显的促进作用,且主要作用于G0/G1期,对细胞吞噬能力、NO分泌能力和细胞因子分泌能力的提高具有显著的促进效果;形态学观察结果显示经CSP-5作用后巨噬细胞体积变大且长出较多伪足。由此可知,CSP-5具有激活巨噬细胞增强机体免疫力的潜在作用。 展开更多
关键词 酶解 青蛤多肽 raw264.7巨噬细胞 免疫调节作用
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两种方法提取佛手渣多糖及其对巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性的研究 被引量:19
5
作者 王淑惠 杨玉洁 +3 位作者 周爱梅 肖苏尧 曹庸 陈汉民 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第15期179-187,共9页
本文以提取精油和黄酮后的佛手渣为原料,分别采用连续相变萃取(CPE)法和热水浸提法(HWE)法提取佛手多糖,在单因素实验的基础上,以佛手多糖提取率为指标,通过响应面优化得出两种方法的最佳提取工艺,并利用RAW264.7巨噬细胞模型评价佛手... 本文以提取精油和黄酮后的佛手渣为原料,分别采用连续相变萃取(CPE)法和热水浸提法(HWE)法提取佛手多糖,在单因素实验的基础上,以佛手多糖提取率为指标,通过响应面优化得出两种方法的最佳提取工艺,并利用RAW264.7巨噬细胞模型评价佛手多糖的免疫活性,采用MTT法、中性红比色法和Griess法分别检测佛手多糖对RAW264.7细胞的生长、吞噬活性和释放NO能力的影响。结果表明,CPE法提取佛手多糖的最佳工艺条件为:温度99℃,时间4.5 h,流速66 L/h,提取率为16.09%±0.12%,得率为21.31%±0.13%;HWE法提取佛手多糖的最佳工艺条件为:95℃,时间6.0 h,液料比63 m L/g,提取率为15.43%±0.21%,得率为20.22%±0.16%;与HWE法相比,CPE法将佛手多糖提取率提高了4.28%(P<0.05),得率提高了5.39%(P<0.05),且提取时间缩短了1/4。佛手多糖在浓度低于500μg/m L时对RAW264.7巨噬细胞无明显毒性作用,且可以促进NO的分泌以及提高吞噬活性。上述结果说明,CPE法适合佛手多糖的提取,优于传统的HWE法,且佛手多糖具有免疫类保健食品和药品开发的潜力。 展开更多
关键词 佛手渣 多糖 连续相变萃取法 热水浸提法 raw264.7巨噬细胞 免疫调节活性
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黄连解毒汤含药血清激活PPARγ诱导RAW264.7源性泡沫细胞向M2表型极化 被引量:18
6
作者 盛蒙许滔 于红红 +2 位作者 赵立凤 俞琦 田维毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期277-281,288,共6页
目的:通过体外细胞实验观察黄连解毒汤干预RAW264.7源性泡沫细胞PPARγ表达对细胞极化的影响,探讨黄连解毒汤抗动脉粥样硬化的部分作用机制。方法:氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7源性泡沫细胞;油红O染色法鉴定细胞泡沫化;以一定... 目的:通过体外细胞实验观察黄连解毒汤干预RAW264.7源性泡沫细胞PPARγ表达对细胞极化的影响,探讨黄连解毒汤抗动脉粥样硬化的部分作用机制。方法:氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7源性泡沫细胞;油红O染色法鉴定细胞泡沫化;以一定浓度的黄连解毒汤含药血清干预细胞,流式细胞术鉴定M2型巨噬细胞表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清IL-1β、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定细胞过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ),精氨酸酶1(Arg-1)的蛋白表达水平。结果:油红O染色显示,泡沫细胞模型制备成功。含药血清干预后,与模型组相比,巨噬细胞CD206分子表达阳性数量明显升高(P<0.01)。细胞上清IL-1β、TNF-α的表达下调,IL-10、TGF-β的表达明显增多(P<0.05,P<0.01),PPARγ、Arg-1的蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:黄连解毒汤可通过激活PPARγ促进ox-LDL诱导的RAW264.7源性泡沫细胞向M2表型极化,发挥抗炎作用,这可能是其防治动脉粥样硬化机制之一。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 动脉粥样硬化 raw264.7细胞 巨噬细胞极化 PPARΓ
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基于“IL-34”-Rho/Rock信号通路探讨生地黄水煎总提物对动脉粥样硬化的作用分析 被引量:15
7
作者 刘艳宾 秦洁洁 +3 位作者 杨树涵 陈红伟 邢永生 张文才 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期624-631,共8页
目的观察生地黄水煎总提物对动脉粥样硬化(AS) Apo E-/-小鼠脂质斑块的改善作用以及对"IL-34"-Rho/Rock通路的影响。方法①动物实验:将40只Apo E-/-小鼠分成空白对照组(CTL组)、模型对照组(Model组)、5μg·g^(-1)生地黄... 目的观察生地黄水煎总提物对动脉粥样硬化(AS) Apo E-/-小鼠脂质斑块的改善作用以及对"IL-34"-Rho/Rock通路的影响。方法①动物实验:将40只Apo E-/-小鼠分成空白对照组(CTL组)、模型对照组(Model组)、5μg·g^(-1)生地黄干预组(Reh-L组)和10μg·g^(-1)生地黄干预组(Reh-H组)。空白对照组小鼠给予普通饲料,其余组小鼠腹腔注射人血清低密度脂蛋白(LDL) 2周,并喂以高脂饲料。连续灌胃4周,检测小鼠血脂指标,并计算AS指数(AI)。②细胞实验:将RAW264. 7细胞分为空白对照组(con组)、ox-LDL组、IL-34组和Reh组;油红O染色观察泡沫细胞形成,检测细胞内胆固醇酯含量和胆固醇流出率。免疫荧光染色法、qRT-PCR法和Western blot法检测Rho A和Rock1表达量。结果①动物实验:Reh-H组小鼠外周血TC、TG、LDL-C、内皮素-1(ET-1)、白介素-34(IL-34)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平、AI值以及AS斑块面积比低于Model组和Reh-L组,而HDL-C水平高于Model组和Reh-L组(P <0. 05)。经qRT-PCR法和Western blot法检测,Reh-H组小鼠主动脉组织Rho A和Rock1表达量较Model组和Reh-L组降低(P <0. 05)。②细胞实验:经oxLDL和IL-34共诱导,RAW264. 7细胞内胆固醇酯含量、胆固醇流出率以及Rho A和Rock1蛋白表达量较con组和ox-LDL组细胞增加(P <0. 05)。而加入Reh干预后泡沫细胞数量、胆固醇酯含量、胆固醇流出率以及RAW264. 7细胞Rho A和Rock1蛋白表达量较IL-34组细胞明显减少(P <0. 05)。结论生地黄可通过抑制"IL-34"-Rho/Rock信号通路抑制巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞,从而有效地预防AS的形成和进展。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 生地黄 IL-34 RHO/ROCK信号通路 raw264. 7巨噬细胞
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姬松茸多糖ABD的结构表征及抗炎活性研究 被引量:13
8
作者 刘玮 杨继国 +2 位作者 任杰 张登辉 宁正祥 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第5期27-32,26,共7页
本文研究了从姬松茸子实体中提取的水溶性多糖ABD的结构和抗炎活性。水提姬松茸多糖溶液通过sevage法除蛋白,以85%乙醇沉淀,经过DEAE-sepharose Fast Flow层析柱纯化得到多糖ABD。通过紫外全波长扫描证明其中不含蛋白质和核酸等杂质;通... 本文研究了从姬松茸子实体中提取的水溶性多糖ABD的结构和抗炎活性。水提姬松茸多糖溶液通过sevage法除蛋白,以85%乙醇沉淀,经过DEAE-sepharose Fast Flow层析柱纯化得到多糖ABD。通过紫外全波长扫描证明其中不含蛋白质和核酸等杂质;通过刚果红试验证明其不具有三螺旋结构;通过凝胶色谱分析得出,ABD的分子量(Mw)为2.058×103 ku;通过高效液相色谱分析,其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、甘露糖和岩藻糖(比例为83.59:5.46:0.59:1.04);通过MTT实验证明,在62.5~1000μg/mL范围内,多糖ABD对小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)没有明显的毒性;通过脂多糖诱导的小鼠体外炎症模型,测定了肿瘤坏死因子(TNF-α)和一氧化氮(NO)两种细胞因子的分泌情况,结果证明多糖ABD对这两种细胞因子的分泌呈现抑制作用,并且呈现浓度依赖性,表现出抗炎活性。 展开更多
关键词 姬松茸多糖 巨噬细胞(raw264.7) 抗炎活性
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桉叶多酚提取物体内外抗氧化活性评价 被引量:13
9
作者 李伟 叶嘉宜 +1 位作者 陈运娇 曹庸 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第5期160-168,共9页
桉叶资源丰富且生物活性高,但少有研究对桉叶多酚提取物进行系统的抗氧化活性评价。本实验旨在研究纯化后桉叶多酚提取物体内外抗氧化活性。以化学法、RAW264.7巨噬细胞模型、秀丽隐杆线虫(以下简称线虫)模型为评价方法,以自由基清除率... 桉叶资源丰富且生物活性高,但少有研究对桉叶多酚提取物进行系统的抗氧化活性评价。本实验旨在研究纯化后桉叶多酚提取物体内外抗氧化活性。以化学法、RAW264.7巨噬细胞模型、秀丽隐杆线虫(以下简称线虫)模型为评价方法,以自由基清除率、抗氧化酶活力及线虫寿命等为指标,评价桉叶多酚提取物的抗氧化能力。结果表明,桉叶多酚提取物具有良好的自由基清除能力和还原能力,在一定质量浓度下效果接近抗坏血酸。桉叶多酚提取物能显著提高氧化损伤RAW264.7巨噬细胞内抗氧化酶(超氧化物歧化酶、过氧化氢酶)活力和谷胱甘肽含量,并显著降低丙二醛含量(P<0.05),呈量效关系。此外,桉叶多酚提取物显著降低常规培养和氧化损伤条件下线虫体内活性氧积累量(P<0.05),提高线虫抗氧化能力,起到延长线虫寿命的作用。桉叶多酚提取物在体内外均表现出良好的抗氧化活性,具备开发食品抗氧化剂或功能食品的潜力。 展开更多
关键词 桉叶多酚提取物 抗氧化活性 raw264.7巨噬细胞 秀丽隐杆线虫
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不同品种猴头菌子实体粗多糖含量及体外免疫活性比较 被引量:13
10
作者 李玉 李巧珍 +5 位作者 吴迪 于海龙 唐传红 周峰 李正鹏 杨焱 《食用菌学报》 北大核心 2014年第2期54-56,F0003,共4页
对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株栽培获得的子实体多糖含量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株在同样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量和体外刺激RAW264.7产生NO的能力上有明显差异,其中H5粗多糖含量最高且体外... 对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株栽培获得的子实体多糖含量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株在同样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量和体外刺激RAW264.7产生NO的能力上有明显差异,其中H5粗多糖含量最高且体外刺激RAW264.7的活性也最强。 展开更多
关键词 猴头菌菌株 子实体多糖 巨噬细胞
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蘘荷根茎乙醇提取物对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响 被引量:9
11
作者 贾小演 赵晓歌 +6 位作者 谢丹 杨瑶 田玉凤 付立霞 王芹芹 邓国栋 田民义 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期71-77,共7页
目的:探究蘘荷根茎乙醇提取物的抗炎活性及作用机制。方法:以70%乙醇为溶剂对蘘荷根茎回流提取制得提取物,测定其总酚酸和总黄酮含量,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS)鉴定其化学成分;MTT法测定蘘荷... 目的:探究蘘荷根茎乙醇提取物的抗炎活性及作用机制。方法:以70%乙醇为溶剂对蘘荷根茎回流提取制得提取物,测定其总酚酸和总黄酮含量,采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS)鉴定其化学成分;MTT法测定蘘荷根茎乙醇提取物对RAW264.7细胞和L929细胞存活率的影响;用脂多糖(LPS)对RAW264.7细胞进行诱导建立体外炎症模型,通过NO检测试剂盒、ROS检测试剂盒、ELISA、免疫印迹法检测其对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核转录因子κB(NF-κB)信号通路中一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放量、活性氧(ROS)水平及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探究蘘荷根茎乙醇提取物的抗炎作用及可能的作用机理。结果:蘘荷根茎乙醇提取物富含酚类成分[(15.07±0.13)mg GAE/g],鉴定出酚类化合物为L-酪氨酸、原儿茶酸、原儿茶醛、4-甲基水杨酸、对羟基安息香醛、咖啡酸、香兰素、对羟基肉桂酸、白果新酸;蘘荷根茎乙醇提取物在31.3、62.5、125、250μg/mL时对RAW264.7和L929细胞的存活率无显著影响;与空白对照组比较,模型对照组NO、IL-6、TNF-α和ROS含量显著升高(P<0.01),iNOS表达、P38、JNK、ERK、IκBα的磷酸化表达以及细胞核NF-κB p65表达明显上调(P<0.05或P<0.01),IκBα和细胞质NF-κB p65的表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,蘘荷根茎乙醇提取物31.3、62.5、125、250μg/mL组NO、IL-6的释放量明显降低(P<0.05或P<0.01);蘘荷根茎乙醇提取物62.5、125、250μg/mL组ROS水平显著降低,iNOS表达、JNK、ERK、IκBα的磷酸化表达以及细胞核NF-κB p65表达显著下调,细胞质NF-κB p65表达显著上调(P<0.01);蘘荷根茎乙醇提取物125、250μg/mL组IκBα表达明显上调(P<0.05或P<0.01);蘘荷根茎乙醇提取物250μg/mL组TNF-α的释放量明显降低和P38的磷酸化表达明显下调(P<0.05)。结论:蘘荷根茎乙醇� 展开更多
关键词 蘘荷 巨噬细胞raw264.7 抗炎活性 丝裂原活化蛋白激酶 核转录因子ΚB
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冬虫夏草多糖单糖组成及免疫活性研究 被引量:10
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作者 赵彪希 张海德 +4 位作者 张媚健 李文佳 甄达明 钱正明 陈海明 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第13期27-31,共5页
以鲜冬虫夏草为原料,采用水提醇沉、Sevag法脱蛋白制备鲜冬虫夏草粗多糖(FCSP),通过苯酚硫酸法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱联用蒸发光散射检测器(HPGPC-ELSD)、傅立叶红外变换光谱(FT-IR)及离子色谱-脉冲安培检测器联用法(HPAEC-P... 以鲜冬虫夏草为原料,采用水提醇沉、Sevag法脱蛋白制备鲜冬虫夏草粗多糖(FCSP),通过苯酚硫酸法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱联用蒸发光散射检测器(HPGPC-ELSD)、傅立叶红外变换光谱(FT-IR)及离子色谱-脉冲安培检测器联用法(HPAEC-PAD)对FCSP的纯度、分子量分布、单糖组成进行分析,并考察FCSP刺激巨噬细胞增殖和释放NO、TNF-α的免疫活性。结果表明,粗多糖FCSP由葡萄糖(59.13%)、甘露糖(21.73%)和半乳糖(19.14%)三种单糖组成,且含有1.186×10^4 kDa(3.510%)、1.070×10^3 kDa(24.232%)和2.115×10 kDa(72.258%)三个多糖组分;体外细胞实验表明,FCSP可显著增强巨噬细胞增殖活性,有效刺激细胞释放NO和TNF-α(P<0.05)。FCSP良好的免疫调节作用可为后期药品的开发以及冬虫夏草新资源食品的申报提供参考。 展开更多
关键词 冬虫夏草 多糖 分子量 单糖组成 raw264.7巨噬细胞
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金雀异黄素对脂多糖诱导的巨噬细胞MAPK和TLR信号转导通路的影响 被引量:10
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作者 崔树娜 Ursula BILITEWSKI 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期233-236,共4页
目的研究金雀异黄素对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路和Toll样受体(TLR)通路的影响。方法用100 ng/mL脂多糖和金雀异黄素分别处理RAW264.7巨噬细胞不同时间后,采用Western blot法检测对MAPK信号通路蛋... 目的研究金雀异黄素对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路和Toll样受体(TLR)通路的影响。方法用100 ng/mL脂多糖和金雀异黄素分别处理RAW264.7巨噬细胞不同时间后,采用Western blot法检测对MAPK信号通路蛋白磷酸化的影响;采用RT2 ProfilerTMPCR芯片检测金雀异黄素对LPS诱导的TLR信号转导通路基因表达的影响。结果 LPS能够显著诱导蛋白p38和p42/44磷酸化,激活MAPK信号通路,金雀异黄素能够加强其作用,同时,LPS能够显著诱导TLR信号转导通路的细胞因子基因表达,包括IFN-β、IL-10、IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、集落刺激因子2(CSF-2)、CSF-3、趋化因子CCL2和CXCL10、环氧合酶2(COX-2)、NF-κB1和IκB-α等,金雀异黄素能够显著降低这些上调基因的表达。结论金雀异黄素能够显著增强LPS激活的MAPK信号通路并抑制TLR信号通路的激活。 展开更多
关键词 金雀异黄素 脂多糖 raw264 7巨噬细胞 MAPK TLR
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桂皮醛对LPS诱导的Raw264.7巨噬细胞迁移和M1极化的抑制作用研究 被引量:9
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作者 姜涛 王剑 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期361-365,共5页
目的研究桂皮醛对脂多糖(LPS)诱导的Raw264.7巨噬细胞迁移和M1极化的抑制作用。方法培养Raw264.7巨噬细胞,随机分为空白对照组(不加LPS及药物)、LPS组(加入终浓度为20μg·L^(-1)的LPS)、桂皮醛(0.1μmol·L^(-1),0.3μmol·... 目的研究桂皮醛对脂多糖(LPS)诱导的Raw264.7巨噬细胞迁移和M1极化的抑制作用。方法培养Raw264.7巨噬细胞,随机分为空白对照组(不加LPS及药物)、LPS组(加入终浓度为20μg·L^(-1)的LPS)、桂皮醛(0.1μmol·L^(-1),0.3μmol·L^(-1))组。应用Transwell小室法观察桂皮醛对LPS诱导的巨噬细胞迁移的影响;应用流式细胞术观察桂皮醛对LPS诱导的巨噬细胞M1极化的影响。结果 Transwell小室迁移实验结果与流式细胞术检测结果均显示,LPS(20 ug·L^(-1))可明显促进RAW264.7巨噬细胞的迁移及M1极化(P<0.01);与LPS组比较,桂皮醛0.1μmol·L^(-1)组、桂皮醛0.3μmol·L^(-1)组可明显抑制LPS诱导的Raw64.7巨噬细胞的迁移和M1极化(P<0.01),且桂皮醛0.3μmol·L^(-1)组作用优于桂皮醛0.1μmol·L^(-1)组(P<0.05)。结论桂皮醛对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞的迁移和M1极化有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。 展开更多
关键词 桂皮醛 raw264.7巨噬细胞 迁移 M1极化
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芍药苷对LPS诱导的RAW264.7细胞HMGB1表达的影响 被引量:9
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作者 常蕴青 赵中夫 刘明社 《长治医学院学报》 2009年第2期81-84,共4页
目的:观察芍药苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核/巨噬细胞株(RAW264.7)高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放和表达的影响。方法:体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞培养三代后,转种于放置了无菌处理盖玻片的6孔培养板中,将细胞分为对照组、LPS刺激组(100... 目的:观察芍药苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核/巨噬细胞株(RAW264.7)高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放和表达的影响。方法:体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞培养三代后,转种于放置了无菌处理盖玻片的6孔培养板中,将细胞分为对照组、LPS刺激组(100ng/mL)、芍药苷组(LPS100ng/mL+芍药苷0.625mg/mL);LPS刺激20h后,免疫细胞化学法检测各组培养细胞HMGB1的表达水平。结果:LPS刺激RAW264.7细胞20h后,LPS组细胞核HMGB1特异性染色变淡,胞浆染色加深,表明HMGB1从胞核转移到胞浆;芍药苷组大部分细胞核HMGB1特异性染色深,而胞浆染色浅,表明芍药苷抑制HMGB1从胞核转移到胞浆。对HMGB1免疫组化数字图像的累积光密度值分析显示,HMGB1含量在三个实验组间差异有统计学意义(F=918.67,P<0.01),LPS刺激组和芍药苷组间差异有统计学意义(q=22.66,P<0.01)。结论:芍药苷可能通过抑制HMGB1的核转位和释放,对LPS诱导的肝损伤起保护作用。 展开更多
关键词 芍药苷 脂多糖 小鼠腹腔巨噬细胞 高迁移率族蛋白B1
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植物乳杆菌JLK0142胞外多糖对RAW264.7巨噬细胞和免疫抑制小鼠的免疫调节作用 被引量:8
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作者 王辑 房晓彬 吴彤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1614-1624,共11页
【目的】研究植物乳杆菌JLK0142胞外多糖(EPS)对RAW264.7巨噬细胞和免疫抑制小鼠免疫活性的影响。【方法】从植物乳杆菌JLK0142培养液中分离纯化EPS,采用体外细胞培养,测定EPS对巨噬细胞增殖、吞噬活性和一氧化氮(NO)分泌的影响;采用环... 【目的】研究植物乳杆菌JLK0142胞外多糖(EPS)对RAW264.7巨噬细胞和免疫抑制小鼠免疫活性的影响。【方法】从植物乳杆菌JLK0142培养液中分离纯化EPS,采用体外细胞培养,测定EPS对巨噬细胞增殖、吞噬活性和一氧化氮(NO)分泌的影响;采用环磷酰胺构建免疫抑制小鼠模型,灌胃不同剂量的EPS,分别测定小鼠脾脏指数、T淋巴细胞增殖活力及血清中IL-2和TNF-α水平。【结果】植物乳杆菌JLK0142胞外多糖在50–800μg/m L浓度范围内能促进正常状态RAW264.7巨噬细胞的增殖,显著提高巨噬细胞的吞噬活性及NO的分泌量;与模型组相比,EPS中、高剂量组小鼠脾脏指数和T淋巴细胞增殖活力显著提高;EPS高剂量组小鼠血清中IL-2和TNF-α含量显著提高。【结论】植物乳杆菌JLK0142胞外多糖能有效提高RAW264.7巨噬细胞的免疫活力,并拮抗环磷酰胺对小鼠免疫功能的抑制作用。 展开更多
关键词 植物乳杆菌JLK0142 胞外多糖 raw264.7巨噬细胞 免疫调节
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响应面法优化紫贻贝免疫活性肽的制备工艺 被引量:8
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作者 于莹 宿小杰 +3 位作者 周德庆 刘楠 孙永 王珊珊 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2021年第6期21-29,共9页
目的探讨紫贻贝免疫活性肽的酶解制备工艺。方法本研究以紫贻贝(Mytilus edulis)为原料,选用5种不同的蛋白酶对其进行酶解,以小鼠RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率和酶解液中活性肽的浓度为指标,在单因素实验基础上通过响应面法优化制备紫... 目的探讨紫贻贝免疫活性肽的酶解制备工艺。方法本研究以紫贻贝(Mytilus edulis)为原料,选用5种不同的蛋白酶对其进行酶解,以小鼠RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率和酶解液中活性肽的浓度为指标,在单因素实验基础上通过响应面法优化制备紫贻贝免疫活性肽(Mytilus edulis immunomodulatory peptides, MIP),同时采用CCK-8和中性红吞噬实验对其免疫活性进行初步研究。结果实验数据表明,胰蛋白酶为最适蛋白酶,最佳酶解条件为:酶解温度43.7℃,p H 8.9,时间3.2 h,加酶量3 000 U/g。在此条件下,100μg/mL MIP对RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率为92.4%。CCK-8结果显示,MIP对RAW264.7细胞无毒性作用且能显著促进细胞增殖。当MIP浓度为100μg/mL时,中性红吞噬指数可提高至1.22。同时,形态学观察结果显示MIP可以刺激细胞分化形成伪足,细胞形态以不规则多边形为主。结论 MIP对RAW264.7细胞具有较好的免疫调节活性。 展开更多
关键词 紫贻贝 免疫活性肽 响应面法 raw264.7巨噬细胞
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黄连解毒汤含药血清对脂多糖诱导的巨噬细胞炎症因子影响研究 被引量:7
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作者 于红红 吴玛莉 +4 位作者 张智伟 陈瑞 吴云 段智璇 田维毅 《亚太传统医药》 2016年第14期11-13,共3页
目的:观察黄连解毒汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的影响。方法:以大、中、小剂量黄连解毒汤水煎剂灌胃SD大鼠制备含药血清,采用MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响,选择各剂量浓度为20%的含药血清体外干预LP... 目的:观察黄连解毒汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的影响。方法:以大、中、小剂量黄连解毒汤水煎剂灌胃SD大鼠制备含药血清,采用MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响,选择各剂量浓度为20%的含药血清体外干预LPS刺激的巨噬细胞;采用Griess法检测NO释放量,采用ELISA法检测细胞上清液中TNF-α及IL-6含量。结果:采用LPS刺激细胞后,引起NO、TNF-α及IL-6因子的高表达,与正常对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);采用黄连解毒汤含药血清干预后,可明显抑制NO、TNF-α及IL-6因子的高表达,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连解毒汤含药血清可抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,可能是该方防治动脉粥样硬化的重要机制。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 黄连解毒汤 raw264.7巨噬细胞 炎症
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亲环素A在巨噬细胞荷脂过程中的影响 被引量:8
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作者 涂剑 严鹏科 +3 位作者 王北冰 曹轩 王蓉蓉 廖端芳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第5期541-544,共4页
目的观察胆固醇转运复合物中关键蛋白亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而分析亲环素A在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的作用。方法采用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.... 目的观察胆固醇转运复合物中关键蛋白亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而分析亲环素A在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的作用。方法采用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育,建立巨噬细胞荷脂化模型;Western-blot、免疫荧光法检测亲环素A蛋白的表达水平;高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化。结果75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育48 h后,亲环素A的蛋白表达逐渐减弱,48 h、72 h分别较未处理组下降了54.5%±6.3%、59.8%±5.9%(P<0.05)。间接免疫荧光定位检测发现氧化型低密度脂蛋白显著抑制RAW264.7细胞中亲环素A在胞膜、胞浆中的表达,且随着处理时间的延长作用更明显。细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值由未处理组的28.3%±1.2%上升至48 h的42.3%±5.9%(P均<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞泡沫化过程中,亲环素A的表达下调与细胞胆固醇蓄积密切相关。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 亲环素A 巨噬细胞 荷脂化 脂蛋白 低密度 氧化 胆固醇蓄积 Western BLOT法 高效液相色谱法
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异荭草苷通过MAPK/FoxO信号通路减轻LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应 被引量:2
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作者 杨兰珠 李诗怡 +2 位作者 孙雨伟 王勇 杨靖亚 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2024年第1期132-137,共6页
为了研究异荭草苷(Isoorientin,ISO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制,将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、模型组(LPS 1μg·mL^(-1))和异荭草苷(ISO 2.5~40μg·mL^(-1)+L... 为了研究异荭草苷(Isoorientin,ISO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制,将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、模型组(LPS 1μg·mL^(-1))和异荭草苷(ISO 2.5~40μg·mL^(-1)+LPS)给药组。各组细胞培养24 h后,MTT法检测ISO对RAW 264.7细胞毒性,Griess法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)的含量,ELISA法检测细胞培养液中TNF-α的含量,q RT-PCR方法检测环氧合酶2(COX-2)m RNA的表达水平,蛋白质印迹分析法测定细胞中COX-2、JNK、p-JNK、p38、p-p38、FoxO1和FoxO3蛋白的表达。结果表明,与LPS模型组比较,ISO显著抑制LPS诱导的TNF-α(P<0.001)和NO(P<0.01)的产生,且未见其细胞毒性。此外,ISO以剂量依赖的方式显著抑制RAW 264.7细胞COX-2基因(P<0.001)和蛋白(P<0.05)的表达。蛋白质印迹分析显示,ISO显著抑制MAPK信号通路中p-JNK和p-p38的磷酸化,并减少Fox O1/3的核转位。综上所述,ISO可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,其作用机制可能与其在MAPK/FoxO信号通路中发挥调节作用有关。 展开更多
关键词 异荭草苷 炎症 raw264.7巨噬细胞 MAPK信号通路 FoxO信号通路
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