P38MAPK信号通路在大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF中的作用 被引量：11

1

作者 魏倩萍 邓华聪 赵劼 《重庆医学》 CAS CSCD 2005年第1期16-18,共3页

目的　研究P38信号通路 (P38mitogen activatedproteinkinase,P38MAPK)在大鼠肾小球系膜细胞 (ratmesangialcells,RMCs)表达血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)中的作用 ,从而探讨P38MAPK在糖尿病肾病中的作用机... 目的　研究P38信号通路 (P38mitogen activatedproteinkinase,P38MAPK)在大鼠肾小球系膜细胞 (ratmesangialcells,RMCs)表达血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)中的作用 ,从而探讨P38MAPK在糖尿病肾病中的作用机制。方法　分别以高葡萄糖、糖基化终末产物 (Advancedglycationendproduct ,AGEs)、高胰岛素和过氧化氢孵育RMCs;以P38MAPK特异性抑制剂SB2 0 35 80预处理RMCs,再以上述 4种因素孵育RMCs,观察RMCsP38MAPK和VEGF蛋白的表达。结果　 4种刺激因素均可独立激活P38MAPK ,VEGF表达量也明显增加 ;SB2 0 35 80预处理后 ,VEGF表达被明显抑制。结论　P38MAPK是VEGF的上游激酶 ,P38MAPK和VEGF可能参与了糖尿病肾病的发生发展。 展开更多

关键词 P38信号通路 VEGF 大鼠肾小球系膜细胞 糖尿病肾病

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贝前列素钠对高糖条件下大鼠系膜细胞细胞外基质代谢的影响 被引量：4

2

作者 张倩 薛耀明 +2 位作者 袁园 江颖娟 王玲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1819-1822,共4页

目的探讨前列环素类似物贝前列素钠(BPS)对高糖条件下大鼠系膜细胞细胞外基质代谢的影响及其可能的机制。方法将实验分为对照(NG)组、高糖(HG)组和高糖联合不同浓度BPS组(0.5、1、2、5μmol/L)。体外培养系膜细胞,收集24、48 h时细胞培... 目的探讨前列环素类似物贝前列素钠(BPS)对高糖条件下大鼠系膜细胞细胞外基质代谢的影响及其可能的机制。方法将实验分为对照(NG)组、高糖(HG)组和高糖联合不同浓度BPS组(0.5、1、2、5μmol/L)。体外培养系膜细胞,收集24、48 h时细胞培养上清液,Elisa法测转化生长因子β1(TGFβ1)、纤维连接蛋白(FN)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达;提取细胞总蛋白,免疫印迹法测Smad3磷酸化蛋白的表达。结果与NG组相比,HG培养24及48 h细胞TGFβ1、FN蛋白表达均显著增加(P<0.01),MMP-2蛋白表达量显著下降(P<0.01);细胞培养24、48 h后,与HG组相比,HG+1μmol/L BPS组、HG+2μmol/L BPS组及HG+5μmol/LBPS组细胞TGFβ1蛋白表达量均显著降低(P<0.01);HG+2μmol/L BPS组、HG+5μmol/L BPS组细胞FN蛋白表达量均显著降低(P<0.01);HG+2μmol/L BPS组及HG+5μmol/L BPS组细胞MMP-2蛋白表达量均显著增加(P<0.05);HG组细胞Smad3磷酸化蛋白表达较NG组显著增加(P<0.01);与HG组相比,HG+2μmol/L BPS组与HG+5μmol/L BPS组细胞Smad3蛋白磷酸化水平显著下降(P<0.05)。结论 BPS可能通过抑制TGFβ1/Smad3通路活性对高糖条件下系膜细胞ECM代谢起到了保护性的调节作用。 展开更多

关键词 贝前列素钠 大鼠系膜细胞 细胞外基质 高糖条件

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健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下肾小球系膜细胞增殖的影响 被引量：4

3

作者 刘丹丹 高聆 +1 位作者 赵家军 韩文霞 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第5期29-32,共4页

目的探讨健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)增殖的影响及对转化生长因子-β1(TGF-β1)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响。方法将常规培养的RMCs分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖组)、甘露醇组(5.6 mmol/... 目的探讨健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)增殖的影响及对转化生长因子-β1(TGF-β1)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响。方法将常规培养的RMCs分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖组)、甘露醇组(5.6 mmol/L葡萄糖+24.4 mmol/L甘露醇)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖组)、高糖+中药复方组(30 mmol/L葡萄糖+0.65 mg/mL中药复方)。培养48 h,采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,分析健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下RMCs增殖的影响。酶联免疫法检测TGF-β1的表达,实时定量PCR法检测BMP-7 mRNA的表达。结果高糖组RMCs增生及TGF-β1的表达较对照组增加明显,BMP-7 mRNA的表达则明显下降,高糖+中药复方组较高糖组RMCs增生及TGF-β1的表达明显下降,BMP-7mRNA的表达明显升高。结论健脾益肾、活血化瘀中药复方能够抑制高糖刺激下的RMCs增殖及TGF-β1的表达,并上调BMP-7 mRNA的表达。 展开更多

关键词 大鼠肾小球系膜细胞 健脾益肾 活血化瘀中药复方 转化生长因子-β1 骨形态发生蛋白-7

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丁酸钠对大鼠系膜细胞增殖和凋亡的影响

4

作者 林志民 蔡志根 +2 位作者 施珊红 李渊根 林威远 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期3439-3443,共5页

目的研究丁酸钠对大鼠系膜细胞增殖、凋亡及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,并分析可能的机制。方法原代培养并分离、纯化大鼠肾小球系膜细胞。将细胞随机分为空白组、对照组[10... 目的研究丁酸钠对大鼠系膜细胞增殖、凋亡及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,并分析可能的机制。方法原代培养并分离、纯化大鼠肾小球系膜细胞。将细胞随机分为空白组、对照组[10μg·L^(-1)表皮生长因子(EGF)]、低剂量实验组(10μg·L^(-1)EGF+0.5 mmol·L^(-1)丁酸钠)、中剂量实验组(10μg·L^(-1)EGF+1.0 mmol·L^(-1)丁酸钠),高剂量实验组10(μg·L^(-1)EGF+2.0 mmol·L^(-1)丁酸钠)。用细胞计数法-8(CCK-8)法检测细胞存活率,用碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用蛋白质印迹法检测PI3K/AKT/mTOR通道相关蛋白的表达。结果细胞活力检测显示:作用24 h,空白组、对照组和低、中、高剂量实验组的光密度值分别为0.36±0.03、0.66±0.03、0.57±0.05、0.47±0.02和0.41±0.01;作用48 h,空白组、对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组的光密度值分别为0.55±0.03、0.83±0.04、0.68±0.03、0.65±0.02和0.60±0.02,表明10μg·L^(-1)EGF明显刺激系膜细胞增殖活化(P<0.05),而不同浓度丁酸钠干预24、48 h后各组系膜细胞增殖显著受抑制(均P<0.05)。PI染色测定细胞周期发现,空白组、对照组和低、中、高剂量实验组的G1期阻滞率分别为(53.37±0.43)%、(46.84±0.67)%、(57.81±0.48)%、(62.77±0.77)%和(67.57±0.71)%,表明丁酸钠能够诱导细胞周期阻滞于G1期,且呈现浓度依赖性(均P<0.01)。空白组、对照组和低、中、高剂量实验组的细胞凋亡率分别为(4.43±0.48)%、(2.45±0.31)%、(6.16±0.33)%、(8.25±0.40)%和(12.12±0.41)%,低、中、高剂量实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论丁酸钠可有效抑制大鼠系膜细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路活化有关。 展开更多

关键词 丁酸钠 大鼠系膜细胞 增殖 凋亡 信号通路

原文传递

辛伐他汀与阿托伐他汀对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞p27蛋白表达的影响 被引量：3

5

作者 徐艳丽 李青菊 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第28期3400-3402,共3页

目的探讨辛伐他汀和阿托伐他汀对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞p27表达的影响。方法将体外培养大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组(葡萄糖浓度5.6mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度30mmol/L)、高糖辛伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,辛伐他汀浓度1... 目的探讨辛伐他汀和阿托伐他汀对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞p27表达的影响。方法将体外培养大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组(葡萄糖浓度5.6mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度30mmol/L)、高糖辛伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,辛伐他汀浓度10μmol/L)、高糖阿托伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,阿托伐他汀浓度10μmol/L)。每组设置6个复孔,于24、48、72、120h收集细胞,Western blotting法测定大鼠肾小球系膜细胞p27蛋白的表达,逆转录PCR测定p27mRNA的表达。结果高糖组p27蛋白浓度及mRNA水平均较正常对照组升高(P<0.05);高糖辛伐他汀组及高糖阿托伐他汀组p27蛋白浓度及mRNA水平均较高糖组降低(P<0.05)。结论他汀类药物通过调节肾小球系膜细胞p27的表达,可发挥非依赖降脂的肾脏保护作用。 展开更多

关键词 辛伐他汀 阿托伐他汀 高血糖 大鼠肾小球系膜细胞 P27蛋白

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大鼠肾小球系膜细胞表达人白细胞介素10 被引量：2

6

作者 李锦华 陈永雄 +1 位作者 刘军 张仕光 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期90-94,共5页

构建表达人白细胞介素１０的逆转录病毒重组体Ｐ（ｈＩＬ－１０）ＳＮ，经ＰＡ３１７细胞包装，Ｇ４１８筛选，用重组逆转录病毒感染大鼠肾小球系膜细胞，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ），反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＦＩＳＡ... 构建表达人白细胞介素１０的逆转录病毒重组体Ｐ（ｈＩＬ－１０）ＳＮ，经ＰＡ３１７细胞包装，Ｇ４１８筛选，用重组逆转录病毒感染大鼠肾小球系膜细胞，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ），反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＦＩＳＡ检测ｈＩＬ－１０基因的整合和表达．结果显示外源性ｈＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达，高峰在第３天，为每天每个细胞１．８４３×１０－３ｎｇ。 展开更多

关键词 基因转移 逆转录病毒载体 人白细胞介素10基因 大鼠肾小球系膜细胞

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亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞p38MAPK和VEGF表达的调控 被引量：2

7

作者 魏倩萍 邓华聪 赵劼 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第2期191-195,199,共6页

目的:探讨丝裂素活化蛋白激酶p38( p38MAPK )和血管内皮生长因子(VEGF)的关系,从而研究p38MAPK和VEGF在糖尿病肾病中的作用及硒在抗糖尿病肾病中的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终产物,高胰岛素和过氧化氢孵育大鼠肾小球系膜细... 目的:探讨丝裂素活化蛋白激酶p38( p38MAPK )和血管内皮生长因子(VEGF)的关系,从而研究p38MAPK和VEGF在糖尿病肾病中的作用及硒在抗糖尿病肾病中的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终产物,高胰岛素和过氧化氢孵育大鼠肾小球系膜细胞(RMCs) ;以p38MAPK特异抑制剂SB2 0 35 80和亚硒酸钠分别预处理RMCs,再给予上述四种刺激因素孵育RMCs,观察RMCsp38MAPK和VEGF蛋白表达。结果:高葡萄糖、糖基化终产物、高胰岛素和过氧化氢均可独立激活p38MAPK ,使其磷酸化表达量增加,VEGF表达也明显增加:SB2 0 35 80预处理后,VEGF表达被显著抑制;亚硒酸钠预处理后,p38MAPK磷酸化被明显抑制,同时VEGF表达显著降低。结论:p38MAPK调控VEGF的表达,表明p38MAPK和VEGF参与了糖尿病肾病的发生发展;亚硒酸钠可通过抑制p38信号通路而抑制VEGF的表达,从而有效地防治糖尿病肾病。 展开更多

关键词 亚硒酸钠 P38MAPK VEGF 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞

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Resveratrol对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激和p27蛋白表达的影响 被引量：1

8

作者 钱华翔 何爱琴 +2 位作者 缪珩 鲁一兵 游娜 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期656-659,共4页

目的:探讨Resveratrol对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激和p27蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为正常对照组(NC组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L)、Resveratrol组(Res组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L+Resveratrol 20μmol/L)... 目的:探讨Resveratrol对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激和p27蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分为正常对照组(NC组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L)、Resveratrol组(Res组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L+Resveratrol 20μmol/L)、高糖组(HG组,葡萄糖浓度30mmol/L)和高糖+Resveratrol组(HG+Res组,葡萄糖浓度30 mmol/L+Resveratrol 20μmol/L),各组细胞分别培养72 h,用比色法测定细胞上清液丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)含量,蛋白含量/细胞数比值评估系膜细胞大小,Western blot法检测细胞内p27蛋白表达的变化。结果:①与NC组相比,HG刺激后大鼠肾小球系膜细胞内MDA、ROS含量均明显上调(P<0.01);与HG组相比,HG+Resveratrol干预后大鼠肾小球系膜细胞内MDA、ROS含量均降低(P<0.05)。②与NC组相比,HG刺激72 h后,大鼠肾小球系膜细胞肥大、p27蛋白表达明显增加(P<0.01);与HG组相比,HG+Resveratrol干预后大鼠肾小球系膜细胞细胞肥大减轻、p27蛋白表达减少(P<0.05)。Res组和NC组之间p27蛋白表达无统计学意义(P>0.05)。结论:Resveratrol可能通过缓解高糖诱导系膜细胞的氧化应激、抑制p27蛋白高表达,减轻糖尿病肾脏疾病早期的肾脏肥大。 展开更多

关键词 RESVEratROL 高血糖 大鼠肾小球系膜细胞 氧化应激 P27蛋白 肥大

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缬沙坦对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞活性损伤的干预作用 被引量：1

9

作者 蔡承敏 何玉茂 余亚东 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期35-42,共8页

目的探讨缬沙坦对高糖诱导的大鼠肾细胞增殖和凋亡的影响与机制。方法利用高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1损伤,并给予不同浓度的缬沙坦。Western blot检测增殖凋亡相关蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸... 目的探讨缬沙坦对高糖诱导的大鼠肾细胞增殖和凋亡的影响与机制。方法利用高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1损伤,并给予不同浓度的缬沙坦。Western blot检测增殖凋亡相关蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和NOTCH1信号通路蛋白jagged1、NOTCH1的表达,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活力,流式细胞仪评估细胞周期与凋亡。采用NOTCH1信号通路激活剂Jagged 1/Fc融合蛋白和缬沙坦处理高糖诱导的HBZY-1,观察其对细胞的增殖、周期和凋亡的影响。结果高糖诱导的HBZY-1中Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平、24 h、48 h和72 h的细胞增殖活力、S期细胞比例显著降低,G0-G1期细胞比例、Cleaved caspase-3、Bax、jagged1和NOTCH1蛋白表达水平、细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。0.01、0.1、1μmol/L缬沙坦显著提高Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平、24 h、48 h、72 h的细胞增殖活力和S期细胞比例,明显降低G0-G1期细胞比例、Cleaved caspase-3、Bax、jagged1、NOTCH1蛋白表达水平与细胞凋亡率,且均呈浓度依赖性(P <0.05)。NOTCH1信号通路激活剂Jagged 1/Fc融合蛋白部分逆转缬沙坦对高糖处理的HBZY-1增殖、周期和凋亡的影响。结论缬沙坦通过抑制NOTCH1信号通路,促进高糖处理的大鼠肾小球系膜细胞增殖与周期,并减轻细胞凋亡。 展开更多

关键词 缬沙坦 NOTCH1信号通路 高糖 大鼠肾小球系膜细胞 增殖 凋亡

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阻断ERK途径对PTH培育的大鼠系膜细胞上清的TGF-β1的影响 被引量：1

10

作者 黄宝砖 袁伟杰 +4 位作者 湛冯岚 张小瑛 王浩 姜晓宇 肖雨龙 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期368-370,374,共4页

目的探讨阻断ERK途径对甲状旁腺素(PTH)培育大鼠系膜细胞上清的TGF-β1的影响。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法观察PTH培育大鼠系膜细胞上清以及预先阻断ERK途径后上清液中其TGF-β1的变化。结果PTH10-8mol/L培育的大鼠系膜细胞的上清... 目的探讨阻断ERK途径对甲状旁腺素(PTH)培育大鼠系膜细胞上清的TGF-β1的影响。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法观察PTH培育大鼠系膜细胞上清以及预先阻断ERK途径后上清液中其TGF-β1的变化。结果PTH10-8mol/L培育的大鼠系膜细胞的上清的转换生长因子β1呈现时间依赖性增加(12￣48h),而ERK信号途径抑制剂能够抑制PTH培育的大鼠系膜细胞上清的TGF-β1浓度,在一定的范围内呈剂量(5～50μmol/L)及时间(12￣48h)依赖性。结论ERK信号途径对PTH培育的大鼠系膜细胞上清液的TGF-β1的有影响,这可能对探讨慢性肾衰的高PTH血症对机体的毒性作用,特别是高PTH血症可能对肾小球系膜细胞外基质的形成甚至肾小球硬化的形成机制有一定的理论价值。 展开更多

关键词 甲状旁腺素 ERK信号途径 大鼠系膜细胞 转化生长因子Β1

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亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达COX-2 mRNA的调控

11

作者 魏倩萍 邓华聪 +1 位作者 赵劼 Harvest F.Gu 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期493-496,共4页

目的:观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞(RGMC)表达环氧化酶-2(COX-2)的影响,从而研究硒在抗糖尿病肾病中的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终产物,高胰岛素和过氧化氢孵育RGMC;先给予亚硒酸钠预处理细胞后,再分别给予上述4种因... 目的:观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞(RGMC)表达环氧化酶-2(COX-2)的影响,从而研究硒在抗糖尿病肾病中的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终产物,高胰岛素和过氧化氢孵育RGMC;先给予亚硒酸钠预处理细胞后,再分别给予上述4种因素孵育RGMC,观察细胞COX-2 mRNA的表达。结果:4种刺激因素均可作为独立因素,导致RGMC COX-2 mRNA表达量的增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的COX-2 mRNA的表达。结论:亚硒酸钠通过抑制COX-2 mRNA在RGMC中的表达,从而有效地防治糖尿病肾病的发生发展。 展开更多

关键词 亚硒酸钠 环氧化酶-2 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞

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升清降浊胶囊含药血清对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖与凋亡影响的实验研究

12

作者 谢彧轩 罗昕 +2 位作者 杨小双 杨慧 童安荣 《宁夏医学杂志》 CAS 2020年第2期101-103,共3页

目的通过观察升清降浊胶囊含药血清对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响,从细胞水平上探究升清降浊胶囊对慢性肾衰竭的防治作用。方法采用CCK-8法检测升清降浊胶囊含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用,使用流式细胞仪... 目的通过观察升清降浊胶囊含药血清对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响,从细胞水平上探究升清降浊胶囊对慢性肾衰竭的防治作用。方法采用CCK-8法检测升清降浊胶囊含药血清对大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用,使用流式细胞仪FITC/PI双染法探究升清降浊胶囊含药血清对大鼠肾小球系膜细胞凋亡的诱导作用。结果升清降浊胶囊含药血清有明显的抑制肾小球系膜细胞增殖和诱导其凋亡的作用,且作用效果与药物浓度呈正相关性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论升清降浊胶囊可以明显抑制系膜细胞过度增殖并诱导其凋亡,是预防肾小球硬化、防治慢性肾衰、保护肾功能的作用机制有重要作用。 展开更多

关键词 升清降浊胶囊 大鼠肾小球系膜细胞 慢性肾衰竭 增殖与凋亡

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Losartan下调高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β受体的表达

13

作者 郭志新 邱明才 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期3425-3428,3432,共5页

目的观察血管紧张素II受体拮抗剂losartan对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β受体表达的影响。方法取4～8代系膜细胞进行实验。系膜细胞转种在50mL塑料培养瓶和置有消毒盖玻片的24孔培养板中培养。系膜细胞长至亚融合状态时,换成无血... 目的观察血管紧张素II受体拮抗剂losartan对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β受体表达的影响。方法取4～8代系膜细胞进行实验。系膜细胞转种在50mL塑料培养瓶和置有消毒盖玻片的24孔培养板中培养。系膜细胞长至亚融合状态时,换成无血清RPMI-1640培养基培养24h,使细胞同步于静止期,然后分为4组:低糖(LG)组:加10%FBS RPMI-1640培养液(葡萄糖浓度为5.6mmol/L);低糖+D-甘露醇(LG+M)组:加D-甘露醇(D-Mannitol)24.4mmol/L和10%FBS RPMI-1640培养液(葡萄糖浓度为5.6mmol/L);高糖(HG)组:加10%FBS RPMI-1640高糖培养液(葡萄糖浓度为30mmol/L);高糖+losar-tan(HG+L)组:加losartan10-5mol/L和10%FBS RPMI-1640高糖培养液(葡萄糖浓度为30mmol/L)。各组系膜细胞继续培养72h。每3瓶细胞作为1组,用半定量RT-PCR检测各组系膜细胞转化生长因子βI型受体(TβRI)、转化生长因子βII型受体(TβRII)和纤维连接蛋白(FN)mRNA的表达。24孔培养板中每4孔作为1组,用免疫组织化学检测各组系膜细胞TβRI、TβRII和FN蛋白表达。结果HG组TβRI、TβRII和FN mRNA表达以及TβRI、TβRII蛋白表达显著高于LG组和LG+M组(P<0.05)。加入losartan后,HG+L组TβRI、TβRII和FN mRNA表达显著降低,TβRI、TβRII蛋白表达也显著降低(P<0.05)。与LG组比较,LG+M组TβRI、TβRII和FN mRNA表达以及TβRI、TβRII蛋白表达差异均无显著性(P>0.05)。结论高糖上调肾小球系膜细胞TGF-β受体和FN的表达,其作用与渗透压无关。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂losartan能逆转高糖的上述作用,从而产生肾保护作用。 展开更多

关键词 LOSARTAN 高糖 大鼠肾系膜细胞 TGF-Β受体

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尿毒症患者血清PTH对大鼠肾小球系膜细胞体外增殖及PI3KAktmTOR信号通路的影响

14

作者 陈霓 刘秋洪 吴丹 《西部医学》 2021年第6期804-808,共5页

目的探讨尿毒症患者血清甲状旁腺激素(PTH)对大鼠肾小球系膜细胞(GMC)体外增殖及磷脂酰肌醇-3/蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响。方法选取2015年1月~2018年9月成都市第三人民医院肾内科收治的72例尿毒症... 目的探讨尿毒症患者血清甲状旁腺激素(PTH)对大鼠肾小球系膜细胞(GMC)体外增殖及磷脂酰肌醇-3/蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响。方法选取2015年1月~2018年9月成都市第三人民医院肾内科收治的72例尿毒症患者,根据血清PTH水平分为正常组16例、轻中度增高组33例、重度增高组23例,常规体外培养大鼠GMC细胞,比较3组12、24、48 h GMC细胞光密度值、GMC细胞周期时相分布、mTOR、Caspase-3表达情况。结果重度增高组12、24、48 h GMC细胞光密度值均高于正常组、轻中度增高组,且轻中度增高组12、24、48 h GMC细胞光密度值均高于正常组(P<0.05);3组GMC细胞光密度值在12、24、48 h随时间推移逐渐递增(P<0.05);与正常组相比,轻中度增高组、重度增高组GMC细胞进入S、G2/M期明显增多(P<0.05);重度增高组GMC细胞进入S、G2/M期细胞多于轻中度增高组(P<0.05);轻中度增高组、重度增高组mTOR表达量高于正常组,Caspase-3表达量低于正常组(P<0.05);重度增高组mTOR表达量高于轻中度增高组,Caspase-3表达量低于轻中度增高组(P<0.05)。结论尿毒症患者血清可导致GMC增殖,且甲状旁腺功能亢进可促进GMC增殖,提高PI3K/Akt/mTOR信号通路表达,PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂可能有助于抑制GMC增殖,延缓尿毒症患者肾功能衰竭进程。 展开更多

关键词 PI3K/Akt/mTOR信号通路 大鼠肾小球系膜细胞 尿毒症血清 体外增殖 细胞周期时相 CASPASE-3

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缬沙坦抑制高糖刺激下系膜细胞血管紧张素Ⅱ-Notch通路 被引量：3

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作者 袁琴 吕川 +3 位作者 吴灿 雷莎 邵滢 王秋月 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期5-9,共5页

目的探讨血管紧张素Ⅱ-Notch通路对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(RMC)基质分泌的影响以及缬沙坦的保护作用。方法将传代培养的RMC同步化后分为正常糖对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(含30.0 mmol/L葡萄糖)、高渗对照组(含5.5 mmol/... 目的探讨血管紧张素Ⅱ-Notch通路对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(RMC)基质分泌的影响以及缬沙坦的保护作用。方法将传代培养的RMC同步化后分为正常糖对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(含30.0 mmol/L葡萄糖)、高渗对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖联合24.5 mmol/L甘露醇)、正常糖联合1μmol/L N-N-(3,5-氟苯乙酰基)-L-丙氨酰-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)组、正常糖联合(1、5、10)μmol/L缬沙坦组、高糖联合1μmol/L DAPT组、高糖联合(1、5、10)μmol/L缬沙坦组。培养12、24、48 h后,收集细胞及上清液,Western blot法检测Notch1蛋白表达情况,ELISA检测上清液转化生长因子β(TGF-β)、纤维连接蛋白(FN)的水平。结果与正常糖组相比,高糖刺激RMC 12 h,可检测到Notch1表达升高,峰值出现在24 h;与正常糖组相比,高糖状态下RMC上清液中TGF-β、FN含量随时间明显升高;高糖状态下缬沙坦或DAPT预处理组与未处理组相比,培养24 h左右,Notch1表达明显减少;与未处理组相比,随缬沙坦浓度增加,Notch1表达逐渐降低。高糖状态下,与未处理组相比,缬沙坦或DAPT预处理组TGF-β、FN水平均明显下降。结论高糖可活化培养的RMC中Notch通路,TGF-β以及FN分泌增加;缬沙坦可通过浓度依赖性的方式抑制血管紧张素Ⅱ-Notch通路,减少下游FN的分泌。 展开更多

关键词 Notch信号转导通路 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂 转化生长因子-Β 纤维连接蛋白

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亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF的调控 被引量：1

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作者 魏倩萍 邓华聪 赵劼 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第10期871-873,876,共4页

目的观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物孵育细胞系HBZ... 目的观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响,从而研究硒在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物孵育细胞系HBZY-1;先给予亚硒酸钠预处理细胞后,再分别给予上述4种因素孵育细胞系HBZY-1,观察细胞系HBZY-1 VEGF蛋白表达。结果4种刺激因素均可作为独立因素,导致细胞系HBZY-1 VEGF蛋白表达量增加;亚硒酸钠能抑制上述4种因素所致的VEGF蛋白表达。结论亚硒酸钠通过抑制VEGF在细胞系HBZY-1中的表达,从而有效地防治糖尿病肾病的发生发展。 展开更多

关键词 亚硒酸钠 血管内皮生长因子 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1

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益气养阴消癥通络中药对高糖联合AngⅡ培养的大鼠系膜细胞p38MAPK信号通路的影响 被引量：2

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作者 赵雯红 陈志强 +3 位作者 张江华 孙玉凤 王月华 王凤丽 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第8期669-672,754,共5页

目的:探讨益气养阴消癥通络中药对高糖联合血管紧张素Ⅱ培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)p38MAPK信号通路的作用。方法:原代培养MCs,第5代时,予高糖、高糖联合血管紧张素Ⅱ刺激,并同时进行药物血清干预,48h后ELISA法检测细胞上清ColⅣ蛋... 目的:探讨益气养阴消癥通络中药对高糖联合血管紧张素Ⅱ培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)p38MAPK信号通路的作用。方法:原代培养MCs,第5代时,予高糖、高糖联合血管紧张素Ⅱ刺激,并同时进行药物血清干预,48h后ELISA法检测细胞上清ColⅣ蛋白含量,Western blot检测MCs p-p38MAPK、p38MAPK、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果:中药血清可显著减少细胞上清ColⅣ蛋白含量(P<0.01),且能明显抑制p38MAPK、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论:益气养阴消癥通络中药可能是通过下调p38MAPK信号通路表达,减少细胞外基质合成,从而发挥对肾脏的保护作用。 展开更多

关键词 益气养阴消癥通络中药 大鼠肾脏系膜细胞 P38MAPK信号通路

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黄芪甲苷对血管紧张素Ⅱ诱导肾小球系膜细胞增殖及炎症因子表达的影响 被引量：7

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作者 熊莉 吕梦娟 +1 位作者 窦德宇 马玉红 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期414-417,421,共5页

目的:研究黄芪甲苷(As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖及炎症因子表达的影响。方法:采用10^(-6)mol/L的AngⅡ刺激GMCs增殖,同时分别加入25,50,100μmol/L的As-Ⅳ对GMCs作用48 h,运用MTT法检测各组细胞增殖状... 目的:研究黄芪甲苷(As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖及炎症因子表达的影响。方法:采用10^(-6)mol/L的AngⅡ刺激GMCs增殖,同时分别加入25,50,100μmol/L的As-Ⅳ对GMCs作用48 h,运用MTT法检测各组细胞增殖状况;流式细胞术观察GMCs中细胞内活性氧(ROS)水平变化;ELISA法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量; Western blot法检测细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的表达。结果:与AngⅡ刺激组相比,As-Ⅳ干预显著抑制GMCs细胞增殖,减少细胞内ROS水平,抑制MCP-1及TGF-β1的表达。结论:As-Ⅳ对于AngⅡ诱导GMCs的增殖具有抑制作用,且能降低相关炎症因子的表达。 展开更多

关键词 大鼠 肾小球系膜细胞 黄芪甲苷 反应氧产物 单核细胞趋化蛋白-1

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秦皮甲素对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维连接蛋白表达的影响 被引量：6

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作者 包昀 林双峰 +6 位作者 邓波 刘彬 刘少军 黎佼 庄佳纯 李雨卓 刘慰华 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期214-218,共5页

目的探讨秦皮甲素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖及纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度秦皮甲素(10、30、90μmol·L-1)对正常培养条件(含糖5.6 mmol·L-1)和高糖培养条件(含糖25 mmol·... 目的探讨秦皮甲素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖及纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度秦皮甲素(10、30、90μmol·L-1)对正常培养条件(含糖5.6 mmol·L-1)和高糖培养条件(含糖25 mmol·L-1)下的HBZY-1细胞增殖的影响;以PI3K抑制剂Wortmannin(1μmol·L-1)干预为对照,采用Western Blot法检测秦皮甲素对高糖培养条件下HBZY-1细胞FN蛋白表达及PI3K/Akt蛋白磷酸化水平变化的影响。结果在正常培养条件下,与正常组比较,秦皮甲素给药组(10、30、90μmol·L-1)的HBZY-1细胞增殖均无明显变化(P>0.05)。在高糖培养条件下,与正常组比较,高糖组的细胞活力明显增加(P<0.05),HBZY-1细胞FN蛋白表达和PI3K/Akt磷酸化水平明显升高(P<0.05);与高糖组比较,90μmol·L-1秦皮甲素给药组的HBZY-1细胞活力明显降低(P<0.05),FN蛋白表达和PI3K/Akt磷酸化水平亦显著下调(P<0.05)。结论秦皮甲素能够抑制高糖诱导的HBZY-1细胞增殖,下调FN蛋白表达,可能与其抑制PI3K/Akt信号通路激活密切相关。 展开更多

关键词 秦皮甲素 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞 纤维连接蛋白 PI3K/AKT信号通路

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双参粗提组分对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的影响 被引量：1

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作者 张兴宇 郭海慧 +1 位作者 解文静 王福生 《广东化工》 CAS 2022年第12期60-62,共3页

研究药用植物双参对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞异常增殖的影响,本实验对双参进行水提,水提液经脱蛋白、脱色素以及95%乙醇醇沉,得到双参粗提组分。检测该组分对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞异常增殖的抑制作用,以及其对高糖模型细胞中... 研究药用植物双参对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞异常增殖的影响,本实验对双参进行水提,水提液经脱蛋白、脱色素以及95%乙醇醇沉,得到双参粗提组分。检测该组分对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞异常增殖的抑制作用,以及其对高糖模型细胞中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,该双参粗提组分可明显抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的异常增殖,同时可显著提高模型细胞中SOD的活力,降低MDA的含量,提示其对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞具有保护作用。 展开更多

关键词 双参 粗提组分 高糖诱导 大鼠肾小球系膜细胞 氧化应激

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