目的探讨miR-204-5p对脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)建立细胞损伤模型,实验分组:NC组、LPS组、LPS+miR-con组、LPS+miR-204-5p组、LPS+si-con组、LPS+si-T...目的探讨miR-204-5p对脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)建立细胞损伤模型,实验分组:NC组、LPS组、LPS+miR-con组、LPS+miR-204-5p组、LPS+si-con组、LPS+si-TRIB3组、LPS+miR-204-5p+pcDNA组、LPS+miR-204-5p+pcDNA-TRIB3组;MTT法检测细胞活力;qRT-PCR、Western blot检测miR-204-5p、TRIB3表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测TNF-α、IL-6水平;双荧光素酶实验检测miR-204-5p与TRIB3的靶向关系。结果与NC组比较,LPS组细胞活力、miR-204-5p表达量降低(1.00±0.10比0.43±0.04),细胞凋亡率、TRIB3 mRNA(1.00±0.09 vs 2.13±0.18)和蛋白(0.40±0.04 vs 0.83±0.08)水平、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05);过表达miR-204-5p或敲低TRIB3可升高细胞活力,降低细胞凋亡率和TNF-α、IL-6水平(P<0.05);TRIB3是miR-204-5p的靶基因,上调TRIB3可减弱过表达miR-204-5p对细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响。结论miR-204-5p过表达可靶向负调控TRIB3表达促进细胞增殖,抑制细胞凋亡和炎症反应,从而减轻LPS诱导的肺微血管内皮细胞损伤。展开更多
文摘目的探讨miR-204-5p对脂多糖(LPS)诱导的肺微血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用LPS诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)建立细胞损伤模型,实验分组:NC组、LPS组、LPS+miR-con组、LPS+miR-204-5p组、LPS+si-con组、LPS+si-TRIB3组、LPS+miR-204-5p+pcDNA组、LPS+miR-204-5p+pcDNA-TRIB3组;MTT法检测细胞活力;qRT-PCR、Western blot检测miR-204-5p、TRIB3表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测TNF-α、IL-6水平;双荧光素酶实验检测miR-204-5p与TRIB3的靶向关系。结果与NC组比较,LPS组细胞活力、miR-204-5p表达量降低(1.00±0.10比0.43±0.04),细胞凋亡率、TRIB3 mRNA(1.00±0.09 vs 2.13±0.18)和蛋白(0.40±0.04 vs 0.83±0.08)水平、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05);过表达miR-204-5p或敲低TRIB3可升高细胞活力,降低细胞凋亡率和TNF-α、IL-6水平(P<0.05);TRIB3是miR-204-5p的靶基因,上调TRIB3可减弱过表达miR-204-5p对细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响。结论miR-204-5p过表达可靶向负调控TRIB3表达促进细胞增殖,抑制细胞凋亡和炎症反应,从而减轻LPS诱导的肺微血管内皮细胞损伤。
