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拉曼光谱用于细菌快速药敏检测的研究进展
1
作者 杨文旭 张心宇 +1 位作者 刘旭(综述) 刘禹(审校) 《检验医学与临床》 2024年第4期542-546,567,共6页
致病菌对人类健康构成重大威胁,抗菌药物的滥用导致了细菌耐药性的发展和传播。目前,临床微生物室常用的药敏试验,如纸片扩散法、浓度梯度纸条扩散法、肉汤稀释法和全自动药敏分析等都是基于细菌生长的方法,且操作流程繁琐,需要8~16 h... 致病菌对人类健康构成重大威胁,抗菌药物的滥用导致了细菌耐药性的发展和传播。目前,临床微生物室常用的药敏试验,如纸片扩散法、浓度梯度纸条扩散法、肉汤稀释法和全自动药敏分析等都是基于细菌生长的方法,且操作流程繁琐,需要8~16 h才能出结果。该文从快速药敏检测(RAST)的研究出发,重点叙述了拉曼光谱在RAST领域的研究进展。利用拉曼光谱对细菌进行基于代谢表型的药敏检测,检测时间明显缩短,优于常规基于细菌生长的药敏方法。但该方法缺少大规模的临床分离株验证,而且难以实现临床标本中细菌的免分离检测。该文对RAST技术的临床验证、可重复性评估、临床适用性评估、准确性评估、拉曼光谱与电阻抗及微流控技术的创新结合及其在复杂临床标本中直接药敏检测等方面进行展望。 展开更多
关键词 拉曼光谱 快速药敏检测 细菌 光学 微流控
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质谱鉴定联合直接快速药敏试验在细菌血流感染中的应用 被引量：1
2
作者 张小云 刘本 +3 位作者 连建春 姜玉章 唐朝贵 王霞 《医学信息》 2023年第3期98-103,共6页
目的评估质谱快速鉴定联合直接药敏试验在革兰阴性细菌血流感染诊断中的临床应用价值。方法对2021年8月-2022年3月我院133瓶血培养阳性标本经SDS沉淀离心富集细菌后,使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOF MS)直接鉴定,对阳性... 目的评估质谱快速鉴定联合直接药敏试验在革兰阴性细菌血流感染诊断中的临床应用价值。方法对2021年8月-2022年3月我院133瓶血培养阳性标本经SDS沉淀离心富集细菌后,使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOF MS)直接鉴定,对阳性血培养液进行直接快速药敏试验(RAST),同时对培养后的菌落进行质谱鉴定和VITEK 2 Compact药敏分析,比较两种方法的一致性。结果133例血培养阳性标本经鉴定后革兰阴性细菌共122株,直接细菌鉴定的准确率为91.73%,包括大肠埃希菌56株、肺炎克雷伯菌26株、鲍曼不动杆菌12株和铜绿假单胞菌12株,其中鲍曼不动杆菌检出率最高为100.00%,阴沟肠杆菌最低为66.67%;所有药物结果符合(CA)比例在4、6、8 h呈现逐渐升高现象;在8 h时除了哌拉西林/他唑巴坦(TZP)和美罗培南(MEN),其他药物的CA均高于可接受值(CA>90%),仅有1例铜绿假单胞菌对TZP的药敏结果在6、8 h时为非常重大错误(VME),1例大肠埃希菌对TZP、阿米卡星(AK)在4、6、8 h时均为重大错误(ME),2例肺炎克雷伯菌对TZP、头孢他啶(CAZ)在4、6、8 h时为ME,1例铜绿假单胞菌对妥布霉素(TOB)和庆大霉素(CN)在6、8 h时为微小错误(mE)。结论5%SDS沉淀法联合MALDI-TOF MS直接鉴定细菌菌种准确性高,RAST的CA比例高,8 h可作为革兰阴性细菌RAST药敏判读的最佳时间点,对于及时指导临床用药及改善患者预后具有重要意义。 展开更多
关键词 血流感染 革兰阴性杆菌 质谱快速鉴定 直接快速药敏试验 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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荧光素酶生物发光法在快速药敏试验中的研究与应用
3
作者 向杰 崔晓莉 +3 位作者 李璐一 周同喜 方娟 郑业焕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1261-1266,共6页
目的通过荧光素酶生物发光法与微量肉汤稀释法对质控菌株和临床收集菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行测定,探讨荧光素酶生物发光法在病原微生物快速药物敏感性试验中的应用价值。方法以D-荧光素钠、Mg^(2+... 目的通过荧光素酶生物发光法与微量肉汤稀释法对质控菌株和临床收集菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)进行测定,探讨荧光素酶生物发光法在病原微生物快速药物敏感性试验中的应用价值。方法以D-荧光素钠、Mg^(2+)、O_(2)和待测菌株为荧光素酶催化反应底物,连续检测待测菌与抗生素孵育过程中相对光强度(relative light unit,RLU)变化,计算发光率并确定MIC,分析与微量肉汤稀释法的基本一致性(essential agreement,EA)和分类一致性(categorical agreement,CA)。结果荧光素酶生物发光法快速检测大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等质控菌株MIC与微量肉汤稀释法检测MIC结果CA和EA值均为100%;并应用该检测体系对91株临床革兰阴性菌样本、93株革兰阳性菌样本进行MIC测定,革兰阴性菌检测结果中的6种药物EA和CA分别大于90%和84%,革兰阳性菌检测结果中的6种药物EA和CA分别大于90%和80%,并使检测周期由常规药敏实验的16~24 h缩短至5~6 h。结论荧光素酶生物发光法快速检测药敏结果与微量肉汤稀释法结果具有较高一致性,且更快速、敏感,可为今后的临床检验工作提供全新的快速药敏检测方法。 展开更多
关键词 荧光素酶 发光率 一致性 快速药敏
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质谱快速鉴定联合直接药敏试验在肠杆菌目细菌血流感染诊断中的应用评估 被引量：6
4
作者 陆燕飞 刘根焰 +3 位作者 张晓慧 许雨乔 倪芳 文怡 《临床检验杂志》 CAS 2021年第11期822-827,共6页
目的评估质谱快速鉴定联合直接药敏试验在肠杆菌目细菌血流感染诊断中的临床应用价值。方法收集2020年4月—7月南京医科大学第一附属医院镜检为革兰阴性杆菌的血培养阳性培养物,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直... 目的评估质谱快速鉴定联合直接药敏试验在肠杆菌目细菌血流感染诊断中的临床应用价值。方法收集2020年4月—7月南京医科大学第一附属医院镜检为革兰阴性杆菌的血培养阳性培养物,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接鉴定,根据欧洲药敏试验委员会(EUCAST)发布的阳性血培养液直接快速药敏(RAST)指南对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行快速药敏试验和4 h、6 h和8 h药敏结果判读。将鉴定结果与Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定和药敏系统结果比较。结果126例血培养阳性标本中经常规鉴定后共有肠杆菌目细菌104株,质谱快速鉴定检出率为96.2%(100/104)。共有90株肠杆菌目细菌进行血培养RAST,包括肺炎克雷伯菌50株和大肠埃希菌40株。肠杆菌目细菌在4 h、6 h、8 h时判读的药敏结果与常规药敏试验结果的符合率分别为76.0%(453/596)、92.4%(551/596)、94.0%(560/596);6 h判读药敏符合率优于4 h(χ^(2)=15.566,P<0.001),与8 h差异无统计学意义(χ^(2)=0.495,P=0.482);肺炎克雷伯菌在4 h、6 h和8 h判读的药敏符合率均高于大肠埃希菌(87.4%vs 48.8%;95.7%vs 87.8%;94.6%vs 93.1%),且在4 h和6 h判读时的差异有统计学意义(χ^(2)=105.839,P<0.001;χ^(2)=12.947,P<0.001);耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)在4 h、6 h、8 h的检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.528,P=0.768),药敏结果符合率差异无统计学意义(χ^(2)=1.908,P=0.385)。结论肠杆菌目细菌血培养阳性标本质谱快速鉴定准确性高,6 h可作为肠杆菌目细菌RAST药敏判读的最佳时间点,4 h即可判断是否存在CRE感染并推测其整体抗菌谱。 展开更多
关键词 血培养 肠杆菌目细菌 快速鉴定 直接快速药敏 欧洲药敏试验委员会 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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基于原位延时成像算法的快速抗菌药物敏感性测试方法
5
作者 高千惠 徐亦雯 +6 位作者 陈弘毅 胡慧杰 蒙思宇 张长松 王婷 张志强 宋一之 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3533-3546,共14页
【目的】每年有700多万人因抗生素使用不当或不及时而死于细菌感染。抗菌药物敏感性测试(antimicrobial susceptibility test,AST)在临床上被用于指导抗生素治疗,传统的临床检测方法至少需要16-20 h才能获得检测结果,存在局限性。开发... 【目的】每年有700多万人因抗生素使用不当或不及时而死于细菌感染。抗菌药物敏感性测试(antimicrobial susceptibility test,AST)在临床上被用于指导抗生素治疗,传统的临床检测方法至少需要16-20 h才能获得检测结果,存在局限性。开发基于细菌形态分析的新型快速AST方法,有助于提高诊断效率,为危急重症的细菌感染患者提供及时的治疗。【方法】开发一种原位微菌落延时成像技术,将细菌孵育、抗生素给药、显微成像和图像处理算法相结合。通过成像设备和算法两个维度对齐图像,原位追踪不同浓度抗生素作用下菌落的形态变化,从而判断药敏结果。【结果】经过实验验证,该技术对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有效,可在2 h内测定最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),与临床金标准方法结果一致。【结论】本研究的快速AST方法显著缩短了获得AST报告的时间,并且有望用于更广泛的菌株和抗生素组合。 展开更多
关键词 霍夫变换 细菌形态 图像识别 快速药敏 原位孵育
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