三叶青黄酮抗肺癌作用研究 被引量：26

1

作者 钟良瑞 林霜 魏克民 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期480-483,共4页

目的研究三叶青黄酮对肺癌A549细胞增殖抑制和侵袭转移作用及其机制。方法采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;集落形成试验检测三叶青黄酮对A549细胞抗癌活性的影响;划痕试验检测三叶青黄酮对细胞迁移力的影响;Transwel... 目的研究三叶青黄酮对肺癌A549细胞增殖抑制和侵袭转移作用及其机制。方法采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;集落形成试验检测三叶青黄酮对A549细胞抗癌活性的影响;划痕试验检测三叶青黄酮对细胞迁移力的影响;Transwell实验检测三叶青黄酮对A549细胞侵袭力变化;Western blot法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-2等侵袭转移相关蛋白表达水平。结果三叶青黄酮抑制A549细胞增殖程度与用药浓度、时间呈正相关;随着药物浓度的增高,细胞集落形成的数量明显减少,细胞向划痕区的迁移速度不断减慢;穿过Transwell小室的侵袭细胞亦明显减少;MMP-2、MMP-9蛋白表达逐渐降低,TIMP-2蛋白表达升高,呈浓度依赖性。结论三叶青黄酮能够抑制肺癌A549细胞的侵袭转移,可能与降低MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。 展开更多

关键词 三叶青 抑制 A549细胞 增殖 侵袭转移 MMP

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三叶青提取物对人肺癌H1299细胞凋亡的影响及机制研究 被引量：10

2

作者 钟良瑞 林霜 +1 位作者 陈伟芳 魏克民 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1354-1358,共5页

目的探讨三叶青提取物对人肺癌H1299细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测三叶青提取物对H1299细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜观察三叶青提取物对H1299细胞形态的影响;荧光显微镜观察三叶青提... 目的探讨三叶青提取物对人肺癌H1299细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测三叶青提取物对H1299细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜观察三叶青提取物对H1299细胞形态的影响;荧光显微镜观察三叶青提取物作用细胞后经Hoechst 33258染色的凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白印迹法(Western blot)检测pro-caspase-3、9,cle-caspase-3、9,poly-ADP-ribose polymerase(PARP)蛋白表达变化。结果与对照组比较,浓度为0.5、1、5、10 mg/m L三叶青提取物作用H1299细胞后抑制率升高(P<0.05,P<0.01);同时作用时间越长,抑制率越高(P<0.01)。倒置显微镜下观察给药后细胞形态明显改变,细胞减少;荧光显微镜下观察荧光染色后细胞核浓染和凋亡小体形成。流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈明显的量-效关系。Western blot结果表明:与对照组比较,浓度为5、10 mg/m L三叶青提取物明显抑制H1299细胞中pro-caspase-3、9和PARP蛋白表达,增加cle-caspase-3、9,cle-PARP蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论三叶青提取物对人肺癌H1299细胞具有明显抑制其增殖,促进细胞凋亡作用,且其机制可能与激活caspase蛋白表达有关。 展开更多

关键词 三叶青 人肺癌细胞 增殖 凋亡

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三叶青黄酮对肺癌A549细胞生长抑制与MAPKs通路关系的研究 被引量：41

3

作者 钟良瑞 魏克民 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期101-104,共4页

目的探讨三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用CCK-8检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测p-... 目的探讨三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用CCK-8检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测p-p38、p-ERK,p-JNK蛋白表达变化。结果体外实验CCK-8检测显示三叶青黄酮各浓度组作用不同时间点细胞的抑制率比较,差异有显著性;呈剂量、时间依赖性。荧光显微镜观察经Hoechst 33258染色的细胞凋亡形态变化,显示细胞减少,细胞核改变和凋亡小体形成。流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈明显的量-效关系。Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调A549细胞中p-p38和p-ERK蛋白表达,且与浓度呈正相关。结论三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞具有明显抑制增殖,促进凋亡作用,其机制可能与激活p38MAPK途径和ERK途径有关。 展开更多

关键词 三叶青 人肺癌细胞 凋亡 MAPKs通路 P38MAPK ERK

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三叶青提取物对肺癌A549细胞的体外抑制作用 被引量：32

4

作者 程伟 陆曙梅 《中国实验方剂学杂志》 CAS 2007年第10期53-56,共4页

目的:探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的体外抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物对肺癌细胞A549体外抑制作用的时效、量效关系;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因BcL-2的表达。结果:... 目的:探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的体外抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物对肺癌细胞A549体外抑制作用的时效、量效关系;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因BcL-2的表达。结果:三叶青提取物以1×10-3g·L-1的浓度与A549细胞共培养48 h,其细胞活性有显著降低;不同浓度的三叶青提取物和A549细胞共同培养,药物浓度为1×10-2、1×10-31、×10-4g·L-1的三叶青提取物对A549细胞活性有显著性抑制作用。琼脂糖凝胶电泳有明显的梯状条带;不同浓度三叶青提取物作用于A549细胞后,细胞BcL-2基因的表达随浓度的增加而降低。结论:三叶青提取物对A549细胞具有明显的体外抑制作用,其抑制作用与药物的浓度和作用时间呈明显正相关。 展开更多

关键词 三叶青提取物 A549细胞 体外抑制作用

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三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡与cleaved-caspase-3表达的关系 被引量：18

5

作者 张胜强 张洪艳 +4 位作者 齐宝林 高克峰 黄建伟 刘贵廷 崔虎军 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期1139-1143,1148,共6页

目的:观察三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用和对cleaved-caspase-3表达的影响,探讨其抗肺癌的可能作用机制。方法:体外培养SPC-A-1细胞,以不同剂量三叶青黄酮进行处理,未给予三叶青黄酮组作为对照组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2... 目的:观察三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用和对cleaved-caspase-3表达的影响,探讨其抗肺癌的可能作用机制。方法:体外培养SPC-A-1细胞,以不同剂量三叶青黄酮进行处理,未给予三叶青黄酮组作为对照组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色分析法,观察三叶青黄酮对SPC-A-1细胞增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞仪和TUNEL染色检测三叶青黄酮对SPC-A-1细胞凋亡的影响;分别采用免疫细胞分析和蛋白印记分析(Western blot)检测三叶青黄酮对SPC-A-1细胞cleaved-caspase-3表达的影响。结果:三叶青黄酮对SPC-A-1细胞增殖具有明显抑制作用,呈剂量和时间依赖性,并诱导SPC-A-1细胞凋亡,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);三叶青黄酮显著增加SPC-A-1细胞cleaved-caspase-3表达水平,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:三叶青黄酮可显著抑制SPC-A-1细胞增殖,并诱导其凋亡,机制可能与增强cleaved-caspase-3表达有关。 展开更多

关键词 肺癌 三叶青黄酮 凋亡 cleaved-caspase-3

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三叶青黄酮对结肠癌SW620细胞增殖凋亡的影响 被引量：17

6

作者 吴晓尉 杨妙芳 +2 位作者 余纳 叶院宁 汪芳裕 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2016年第12期902-905,共4页

[目的]观察三叶青黄酮对结肠癌SW620细胞增殖凋亡的作用并探讨可能的机制。[方法]采用体外细胞培养技术,MTT法观察三叶青黄酮对SW620细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞凋亡率,Western Blotting检测Cle-caspase3、Cle-caspase9、Bax、Bc... [目的]观察三叶青黄酮对结肠癌SW620细胞增殖凋亡的作用并探讨可能的机制。[方法]采用体外细胞培养技术,MTT法观察三叶青黄酮对SW620细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞凋亡率,Western Blotting检测Cle-caspase3、Cle-caspase9、Bax、Bcl-2蛋白表达改变。[结果]三叶青黄酮能显著地抑制SW620细胞增殖,并且具有剂量和时间依赖性。三叶青黄酮能显著地促进SW620细胞凋亡,并且呈剂量依赖性上调Cle-caspase3、Clecaspase9、Bax表达,下调Bcl-2表达。[结论]三叶青黄酮对人结肠癌SW620细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。 展开更多

关键词 三叶青黄酮 结肠癌 增殖 凋亡

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三叶青提取物对肺癌细胞株A549的影响 被引量：14

7

作者 王小莉 曾娟 周辉 《肿瘤药学》 CAS 2012年第5期347-350,共4页

目的观察三叶青提取物对肺癌A549细胞的影响并探讨其作用机制。方法体外培养A549细胞,用不同浓度(10-1g.L-1,10-2g.L-1,10-3g.L-1)的三叶青提取物处理,流式细胞术检测细胞凋亡率,westernblot法检测细胞中caspase-3的表达。结果 (1)10-1g... 目的观察三叶青提取物对肺癌A549细胞的影响并探讨其作用机制。方法体外培养A549细胞,用不同浓度(10-1g.L-1,10-2g.L-1,10-3g.L-1)的三叶青提取物处理,流式细胞术检测细胞凋亡率,westernblot法检测细胞中caspase-3的表达。结果 (1)10-1g.L-1、10-2g.L-1三叶青提取物处理A549细胞后,细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)10-1g.L-1、10-2g.L-1、10-3g.L-1三叶青提取物处理后的A549细胞内,Caspase-3蛋白的表达水平均较对照组显著升高,并随着三叶青提取物作用浓度的增高而逐渐上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论三叶青提取物可促进A549细胞的凋亡,可能与其上调细胞内Caspase-3的表达有关。 展开更多

关键词 三叶青提取物 肺癌细胞 CASPASE-3

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三叶青黄酮抑制肺癌A549细胞生长与蛋白酶体活性的关系研究 被引量：14

8

作者 钟良瑞 陈华 +3 位作者 景晶 乔红丽 魏克民 王伟东 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第10期1123-1126,共4页

目的:探讨三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及其机制。方法:采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;酶标仪检测细胞蛋白酶体和DUB活性;Real-time PCR和Western blot法检测细胞泛素-蛋白酶体途径相关蛋白ub-prs... 目的:探讨三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及其机制。方法:采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;酶标仪检测细胞蛋白酶体和DUB活性;Real-time PCR和Western blot法检测细胞泛素-蛋白酶体途径相关蛋白ub-prs、USP14、UCHL5、POH1等表达变化。结果:体外实验MTT法检测三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,显示三叶青黄酮各浓度组的抑制率比较,差异具有统计学意义,并呈剂量依赖性。酶标仪检测结果显示随三叶青黄酮浓度升高,细胞蛋白酶体和DUB活性逐渐降低,呈明显的量-效关系。Real-time PCR和Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调A549细胞中ub-prs蛋白表达,下调USP14、UCHL5、POH1蛋白表达,呈剂量依赖性。结论:三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞具有明显抑制增殖作用,其机制可能与调节泛素-蛋白酶体途径有关。 展开更多

关键词 三叶青 A549细胞 抑制增殖 蛋白酶体

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三叶青黄酮诱导髓系白血病NB-4细胞凋亡及信号通路的研究 被引量：11

9

作者 吴海英 吴元庭 +2 位作者 陈优优 骆惠丽 蒋慧芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1451-1456,共6页

目的:研究三叶青黄酮(RTHF)对人急性早幼粒细胞白血病NB-4细胞活力、凋亡及MAPK信号通路的影响。方法:采用CCK-8法及BrdU实验分别检测RTHF对NB-4细胞活力及增殖的影响;流式细胞术检测RTHF诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期的作用。Western blo... 目的:研究三叶青黄酮(RTHF)对人急性早幼粒细胞白血病NB-4细胞活力、凋亡及MAPK信号通路的影响。方法:采用CCK-8法及BrdU实验分别检测RTHF对NB-4细胞活力及增殖的影响;流式细胞术检测RTHF诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期的作用。Western blot分析RTHF对细胞凋亡及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。结果:RTHF有效地抑制NB-4细胞的活力及增殖,呈时间和剂量依赖性,作用48 h的IC50为2.26 g/L。RTHF阻滞NB-4细胞进入增殖周期,停滞在G2期,并诱导其凋亡(P<0.01),呈剂量依赖性。RTHF下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax、caspase-3和Cyt-C的表达,呈剂量依赖性(P<0.05)。RTHF对ERK1/2及JNK的表达无明显影响,但可降低ERK5蛋白表达,提高p38的表达水平(P<0.05)。结论:RTHF在体外有效地抑制白血病NB-4细胞活力及增殖,并诱导凋亡,其机制可能通过p38 MAPK信号通路及凋亡蛋白途径。 展开更多

关键词 三叶青黄酮 白血病 NB-4细胞 细胞凋亡 MAPK信号通路

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三叶青黄酮通过TLR4/NF-κB通路调控NLRP3小体激活改善大鼠心肌细胞缺氧再复氧损伤的作用及机制

10

作者 沈盛晖 叶建华 +3 位作者 吴相忠 张祺箐 彭鹏 吕珩 《浙江中西医结合杂志》 2024年第6期507-513,共7页

目的探究三叶青黄酮(RTHF)对大鼠心肌细胞缺氧再复氧(H/R)损伤的作用及其可能机制。方法以大鼠心肌细胞H9C2为研究对象,分为对照组、H/R组、H/R+低浓度RTHF(L-RTHF)组(25μg/mL)、H/R+中浓度RTHF(M-RTHF)组(50μg/mL)和H/R+高浓度RTHF(H... 目的探究三叶青黄酮(RTHF)对大鼠心肌细胞缺氧再复氧(H/R)损伤的作用及其可能机制。方法以大鼠心肌细胞H9C2为研究对象,分为对照组、H/R组、H/R+低浓度RTHF(L-RTHF)组(25μg/mL)、H/R+中浓度RTHF(M-RTHF)组(50μg/mL)和H/R+高浓度RTHF(H-RTHF)组(100μg/mL)。通过CCK-8法检测各组细胞活力;试剂盒检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D的N端切割产物(GSDMD-N)、Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子κB p65(NF-κB p65)的表达水平。结果与对照组比较,H/R组H9C2细胞活力[(71.33±1.70)%比(100.00±2.94)%,P<0.01]、SOD水平[(15.54±0.36)U/mg prot比(34.54±0.87)U/mg prot,P<0.01]降低,ROS相对DCF强度[(3.72±0.12)比(1.00±0.10),P<0.01]和LDH水平[(387.57±9.37)U/L比(182.80±11.53)U/L,P<0.01]升高,NLRP3[(2.75±0.04)比(1.00±0.02)、(4.71±0.18)比(1.00±0.11),P<0.01]、Caspase-1[(3.02±0.11)比(1.00±0.06)、(3.33±0.09)比(1.00±0.12),P<0.01]、ASC[(3.32±0.12)比(1.00±0.09)、(5.30±0.15)比(1.00±0.10),P<0.01]、GSDMD-N[(3.69±0.14)比(1.00±0.13)、(3.23±0.08)比(1.00±0.06),P<0.01]、TLR4[(4.00±0.12)比(1.00±0.09)、(5.68±0.20)比(1.00±0.10),P<0.01]、p-NF-κB p65[(6.81±0.16)比(1.00±0.10)、(3.25±0.07)比(1.00±0.05),P<0.01]相对mRNA和蛋白水平升高;与H/R组比较,H/R+M-RTHF组和H/R+H-RTHF组的细胞活力[(77.00±2.16)%、(82.00±2.16)%比(71.33±1.70)%,P<0.05或P<0.01]、SOD水平[(23.43±1.50)U/mg prot、(28.66±1.22)U/mg prot比(15.54±0.36)U/mg prot,P<0.05或P<0.01]升高,ROS[(3.24±0.05)、(2.57±0.04)比(3.72±0.12),P<0.05或P<0.01]、LDH[(332.77±5.76)U/L、(253.36±9.43)U/L比(387.57±9.37)U/L,P<0.05或P<0.01]水平降低,NLRP3[(1.86±0.06)、(1.56±0.09)比(2 展开更多

关键词 大鼠 三叶青黄酮 心肌细胞 缺氧再复氧损伤 NLRP3小体 TLR4/NF-κB

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三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及自噬的影响

11

作者 殷晓庆 涂铭书 +3 位作者 庄婉珍 夏雨 张毅 黄毅 《福建中医药》 2023年第4期17-20,32,共5页

目的 探讨三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法 取对数生长期的人ESCC细胞株KYSE150细胞(以下简称KYSE150细胞)分为0μg/mL组、25μg/mL组、50μg/mL组、75μg/mL组,采用CCK-8法检测三叶青黄酮溶液干预0... 目的 探讨三叶青黄酮对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭及自噬的影响。方法 取对数生长期的人ESCC细胞株KYSE150细胞(以下简称KYSE150细胞)分为0μg/mL组、25μg/mL组、50μg/mL组、75μg/mL组,采用CCK-8法检测三叶青黄酮溶液干预0、24、48 h后各组细胞活力并计算干预48 h的半抑制浓度(IC_(50)),筛选出三叶青黄酮溶液最佳干预浓度为50μg/mL。取对数生长期的KYSE150细胞分为0μg/mL组、50μg/mL组,采用Transwell小室法检测三叶青黄酮溶液干预48 h后2组细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量。取对数生长期的KYSE150细胞分为空白组、氯喹组、三叶青黄酮组、三叶青黄酮+氯喹组,空白组不使用药物干预,氯喹组加入10μmol/L氯喹,三叶青黄酮组加入50μg/mL三叶青黄酮溶液,三叶青黄酮+氯喹组加入10μmol/L氯喹与50μg/mL三叶青黄酮溶液干预,均干预48 h后采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量。结果 与0μg/mL组比较,各药物组随着三叶青黄酮溶液浓度的增加,KYSE150细胞活力均逐渐下降(P均<0.05);与0μg/mL组比较,50μg/mL组KYSE150细胞迁移和侵袭数量,N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量均降低(P均<0.05);与空白组比较,氯喹组、三叶青黄酮组及三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量均显著增高(P均<0.05);与氯喹组比较,三叶青黄酮+氯喹组KYSE150细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62蛋白表达量增高更显著(P<0.05)。结论 三叶青黄酮可下调N-cadherin、Snail、Slug蛋白表达量以抑制ESCC细胞的迁移和侵袭能力,上调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达诱导自噬体的产生,从而抑制细胞自噬流,发挥对ESCC细胞活力的抑制作用。 展开更多

关键词 三叶青黄酮 自噬 细胞迁移侵袭 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ P62

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