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Expression of Rab25 correlates with the invasion and metastasis of gastric cancer 被引量:12
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作者 Chuanwu Cao Chenhui Lu +3 位作者 Jichong Xu Jiaxing Zhang Jun Zhang Maoquan Li 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期192-199,共8页
The objective of this study was to determine the expression of the important vesicle trafficking- regulating factor Rab25 in human gastric cancer tissues, to analyze the correlation between Rab25 protein expression wi... The objective of this study was to determine the expression of the important vesicle trafficking- regulating factor Rab25 in human gastric cancer tissues, to analyze the correlation between Rab25 protein expression with gastric cancer occurrence and development, and to discuss the correlation of Rab25 protein expression with gastric cancer cell metastasis. The overall aim was to provide experimental evidence that can be used to design future biological treatments of human gastric cancer. Human gastric cancer tissue and the adjacent normal gastric tissue were surgically removed, and immunohistochemistry and Western blotting were used to detect Rab25 protein expression. The correlation between Rab25 protein expression with the development and pathological characteristics of gastric cancer was analyzed. Using RNAi, Rab25 expression was reduced in the gastric cancer cell line MGC80-3, and the changes in MGC80-3 cell invasiveness were then monitored. Immunohistochemistry showed that the Rab25 protein expression rates were 78.21% and 23.08% in gastric carcinoma and the adjacent normal gastric tissue, respectively. Immunohistochemistry and Western blot results showed that Rab25 protein expression in gastric cancer was significantly higher than in adjacent normal gastric tissues (t)〈0.01). Less differentiated gastric cancer cells had higher expression of Rab25 protein (P〈0.01). Gastric carcinomas from patients with a late pathological stage (Ⅲ-Ⅳ) had significantly higher Rab25 protein expression than early stage (Ⅰ-Ⅱ) patients (P〈0.01). Gastric carcinomas from patients with lymph node metastasis had significantly higher Rab25 protein expression than lymph node metastasis- free patients (P〈0.01). Gastric carcinomas from patients with distant metastases had significantly higher Rab25 protein expression than the distant metastasis-negative patients (P〈0.01). Rab25 protein expression in gastric cancer was not affected by the patients' sex, age, or tumor size (P〉0.05). M 展开更多
关键词 rab2 5 human gastric cancer IMMUNOHISTOCHEMISTRY Western blot siRNA INVASION
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MiR-186-5p通过靶向调控RAB2A在乳腺癌细胞阿霉素耐药性中的逆转作用机制 被引量:5
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作者 孙玉国 王照岩 +3 位作者 杨玉玲 杨志一 尹崇高 李洪利 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1668-1673,共6页
目的探讨miRNA-186-5p在乳腺癌细胞阿霉素耐药性逆转作用中的分子机制。方法采用阿霉素诱导人乳腺癌细胞系MCF-7,建立阿霉素耐药性细胞株,命名为MCF-7/ADR;采用双荧光素酶实验检测miR-186-5p与RAB2A的靶向结合情况;采用qRT-PCR和Western... 目的探讨miRNA-186-5p在乳腺癌细胞阿霉素耐药性逆转作用中的分子机制。方法采用阿霉素诱导人乳腺癌细胞系MCF-7,建立阿霉素耐药性细胞株,命名为MCF-7/ADR;采用双荧光素酶实验检测miR-186-5p与RAB2A的靶向结合情况;采用qRT-PCR和Western blot分别检测细胞中miR-186-5p、RAB2A mRNA的表达及RAB2A蛋白的表达情况;特异性上调MCF-7/ADR中的miR-186-5p,下调MCF-7中的miR-186-5p后,采用CCK-8和Western blot分别检测乳腺癌细胞增殖情况以及RAB2A蛋白的表达;采用Western blot和CCK-8分别检测共转染后,细胞增殖情况的变化及PI3K/Akt信号通路的激活情况。结果双荧光素酶实验结果显示,RAB2A是miR-186-5p的直接靶点;qRT-PCR结果显示,在MCF-7/ADR细胞中miR-186-5p mRNA表达明显下调,而RAB2A mRNA表达没有明显变化,RAB2A的蛋白表达明显上调。特异性上调MCF-7/ADR中的miR-186-5p,其增殖能力明显下降,RAB2A蛋白的表达明显下调;下调MCF-7中的miR-186-5p,其增殖能力明显增加,RAB2A蛋白的表达明显上调。Western blot和CCK-8结果显示,过表达miR-186-5p使PI3K/Akt信号通路表达明显减弱,且上调RAB2A逆转了上调miR-186-5p所致的增殖能力的减弱。结论 miR-186-5p通过靶向调控RAB2A,经PI3K/Akt信号通路调控乳腺癌细胞的阿霉素耐药和增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-186-5p rab2A 阿霉素耐药 增殖 PI3K/AKT
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与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定 被引量:4
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作者 崔桂梅 魏盼 +3 位作者 赵玉玺 潘垒昌 徐晓晗 彭其胜 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期6-10,共5页
以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白,通过RT-PCR获得鼠Rab2基因,利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L];然后IPTG诱导GST-Rab2、GST-Rab2[N119I]和GST-Rab2[Q65L]融合蛋... 以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白,通过RT-PCR获得鼠Rab2基因,利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L];然后IPTG诱导GST-Rab2、GST-Rab2[N119I]和GST-Rab2[Q65L]融合蛋白的表达,使用琼脂糖亲和介质分离纯化融合蛋白;最后将纯化的融合蛋白与超声破碎的野生布鲁菌或Δvirb2缺失布鲁菌株上清互作,利用SDS-PAGE电泳和银染确定差异蛋白,质谱分析差异蛋白。结果表明:所鉴定出的布鲁菌株效应蛋白为热休克蛋白HSP70。这为未来研究HSP70如何调节布鲁菌胞内寄生奠定基础。 展开更多
关键词 布鲁菌 rab2 效应蛋白 HSP70
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MiR-186-5p通过靶向调控RAB2A对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的作用机制研究
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作者 刘中 汤杰 +1 位作者 张松岳喜成 周莹 《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》 2023年第5期181-184,共4页
探究miRNA-186-5p在乳腺癌阿霉素耐药性作用的分子机制。方法:以阿霉素诱导人乳腺癌细胞MCF-7建立阿霉素耐药性细胞株,视为MCF-7/ADR;miRNA-186-5p与RAB2A的靶向结合情况采用双荧光素酶实验检测。结果:MCF-7/ADR中的miR-186-5P/RAB2A表... 探究miRNA-186-5p在乳腺癌阿霉素耐药性作用的分子机制。方法:以阿霉素诱导人乳腺癌细胞MCF-7建立阿霉素耐药性细胞株,视为MCF-7/ADR;miRNA-186-5p与RAB2A的靶向结合情况采用双荧光素酶实验检测。结果:MCF-7/ADR中的miR-186-5P/RAB2A表达呈下降/上升趋势(P<0.05)。转染后72h,miR-186-5p组细胞增值能力下降(P<0.05);anti-miR-186-5P组细胞增值能力较MCF-7及anti-NC组相比增强(P<0.05)。miR-186-5P组细胞中RAB2A表达明显低/高于NC组/anti-NC组(P<0.05)。转染72h后,miR-186-5P+RAB2A组细胞增殖能力较miR-186-5P+Con增加;miR-186-5P+SiR-AB2A组较miR-186-5P+Ser组相比明显降低(P<0.05)。结论:miR-186-5p通过靶向调控RAB2A,经PI3K/Akt信号通路调控乳腺癌细胞的阿霉素耐药和增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-186-5P rab2A 阿霉素耐药 增殖
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弓形虫H4和Rab2基因真核表达载体的构建及其对N2a细胞凋亡和自噬的影响
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作者 李贵峰 孟婷婷 +2 位作者 杨子鹏 王亚培 袁子国 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期580-588,共9页
本研究旨在探索弓形虫Rab2和H 4基因在神经细胞凋亡和自噬过程中的作用,并进一步研究雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对其的影响。本试验以弓形虫M e49虫株c DN A为模板,扩增H4和Rab2基因,并构建到真核表达载体pcDNA3.1 (+)上,转染小鼠神经母... 本研究旨在探索弓形虫Rab2和H 4基因在神经细胞凋亡和自噬过程中的作用,并进一步研究雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对其的影响。本试验以弓形虫M e49虫株c DN A为模板,扩增H4和Rab2基因,并构建到真核表达载体pcDNA3.1 (+)上,转染小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a),同时设置RAPA给药组,检测目的基因及凋亡和自噬相关蛋白的表达情况。结果显示,重组质粒成功构建,弓形虫Rab2和H4基因在N2a细胞中表达,导致细胞凋亡相关蛋白Bcl-2下调和细胞自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ上调,但在RAPA组,Bcl-2却有上调趋势。此外还发现H4基因对于Rab2表达有促进作用。结果表明,H4和Rab2的表达可以促进N2a细胞的凋亡和自噬,而RAPA具有抑制细胞凋亡的作用,从而保护神经系统,这为弓形虫病的预防治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 H4 rab2 雷帕霉素 细胞凋亡 自噬
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华支睾吸虫Rab2基因的克隆表达及生物学特性分析
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作者 贾飞飞 黎壮伟 +1 位作者 郭音彤 余新炳 《热带医学杂志》 CAS 2016年第9期1107-1111,共5页
目的获得原核表达的华支睾吸虫Rab2蛋白,并探索其生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得CsRab2的全长cDNA,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用Vector NTI程序对来自于Gen Bank中与之有较高相似度的基因序... 目的获得原核表达的华支睾吸虫Rab2蛋白,并探索其生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得CsRab2的全长cDNA,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用Vector NTI程序对来自于Gen Bank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;Swiss-model预测其三维立体结构,原核表达重组融合蛋白CsRab2,采用Western blot鉴定重组蛋白CsRab2,采用q RT-PCR测定CsRab2基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsRab2全长基因的ORF包含588个碱基,编码195个氨基酸。Prot Param预测该编码蛋白的理论分子量和等电点分别是22.29×103 Mr和5.87。不含有信号肽,也未发现线粒体等亚细胞定位序列,三维预测结果显示,Rab2同Rab家族的其他蛋白类似:由保守的G结构域和长度、序列上高度可变的N端和C端形成。将纯化后的蛋白进行SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝染色观察该目的蛋白分子量约28×103 Mr。经过亲和层析方法纯化获得的rCsRab2,可被His tag小鼠单克隆抗体识别。CsRab2在华支睾吸虫各生活史阶段均有表达,且在囊蚴和尾蚴阶段表达较高。结论 CsRab2属于保守蛋白,其生物信息学分析符合Rab家族蛋白的共有特性,在囊蚴和尾蚴阶段表达较高,但CsRab2在细胞内确切的定位信息和功能仍有待进一步研究。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 rab2 原核表达
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小G蛋白Rab2基因参与小麦抗叶锈病反应的研究 被引量:10
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作者 杨静静 李星 +1 位作者 李亚宁 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期1-5,共5页
为了解叶锈菌侵染小麦后小G蛋白Rab2基因的表达情况,明确其与抗病性的关系,从分子水平上探讨小麦的抗叶锈病机制。以普通六倍体小麦近等基因系TcLr1和叶锈菌小种05-22-64①和05-8-63①为试验材料,构建小麦亲和与非亲和组合,利用实时定量... 为了解叶锈菌侵染小麦后小G蛋白Rab2基因的表达情况,明确其与抗病性的关系,从分子水平上探讨小麦的抗叶锈病机制。以普通六倍体小麦近等基因系TcLr1和叶锈菌小种05-22-64①和05-8-63①为试验材料,构建小麦亲和与非亲和组合,利用实时定量PCR技术对小麦小G蛋白Rab2基因的表达情况进行检测。结果表明:在小麦叶锈菌侵染过程中,Rab2基因主要在侵染的前期表达迅速,随着时间的推移表达量有所下降。非亲和叶锈菌菌株可以诱导小G蛋白Rab2基因表达量的升高,而亲和叶锈菌菌株抑制小G蛋白Rab2基因的表达。由此表明,小G蛋白可能与寄主和病原物的亲和程度有着直接的关系。 展开更多
关键词 小麦叶锈病 小G蛋白 rab2基因 实时定量PCR
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花生Rab2基因的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 李瑞 隋炯明 《中国农学通报》 CSCD 2012年第27期37-44,共8页
Rab2是小GTP结合蛋白家族成员之一,控制着蛋白从内质网到高尔基体的运输,研究发现有些Rab2基因受多种逆境胁迫的诱导表达。为了获得花生Rab2基因,本试验根据拼接的cDNA序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR克隆了1个花生Rab2基因。测序结... Rab2是小GTP结合蛋白家族成员之一,控制着蛋白从内质网到高尔基体的运输,研究发现有些Rab2基因受多种逆境胁迫的诱导表达。为了获得花生Rab2基因,本试验根据拼接的cDNA序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR克隆了1个花生Rab2基因。测序结果显示其cDNA含有长636bp的完整开放阅读框,编码的蛋白含211个氨基酸,推测分子量为23.4kDa。比对分析发现花生Rab2蛋白与多种生物的Rab2的氨基酸序列具有较高的同源性,荧光定量PCR研究表明AhRab2基因受低温、干旱、盐和植物激素ABA的诱导表达。这为利用基因工程手段调控花生的抗逆性奠定了基础。 展开更多
关键词 花生 rab2基因 进化树 表达分析
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Rab25蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 周璞 刁鑫伟 +3 位作者 汤金梁 彭丽娜 张洪川 陈正堂 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期157-160,共4页
目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤增殖、转移的相关性。方法收集2009年1月-2010年6月第三军医大学新桥医院61例NSCLC组织(鳞癌31例、腺癌26例、腺鳞癌4例)和40例癌旁组织标本作为研究对象。采用免疫组化法检测... 目的探讨Rab25在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤增殖、转移的相关性。方法收集2009年1月-2010年6月第三军医大学新桥医院61例NSCLC组织(鳞癌31例、腺癌26例、腺鳞癌4例)和40例癌旁组织标本作为研究对象。采用免疫组化法检测Rab25在组织标本中的表达情况;分析Rab25表达与临床病理特征(患者性别、年龄、吸烟史,肿瘤组织类型、分化程度、体积、TNM分期、淋巴结转移)的关系。结果 Rab25主要定位于细胞膜和细胞质中,在NSCLC组织的阳性表达率为93.4%,在癌旁组织的阳性表达率为27.5%(P<0.01)。Rab25的表达与肿瘤的TNM分期和大小相关(P<0.05)。结论 Rab25在NSCLC组织中的表达明显升高,NSCLC患者分期越晚、肿瘤直径越大,Rab25表达越高。 展开更多
关键词 非小细胞肺 rab25蛋白质 免疫组织化学
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microRNA let-7a-3调节结直肠癌中RAB11FIP2的表达
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作者 张利苹 董文杰 +1 位作者 李静文 陈璐璐 《河南医学研究》 CAS 2023年第2期197-203,共7页
目的探索microRNA let-7a-3在结直肠癌(CRC)中的表达状态、生物学功能及可能的机制。方法使用联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析法(COBRA)或亚硫酸氢盐测序法(BSP)分析let-7a-3启动子内的DNA甲基化状态。使用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR... 目的探索microRNA let-7a-3在结直肠癌(CRC)中的表达状态、生物学功能及可能的机制。方法使用联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析法(COBRA)或亚硫酸氢盐测序法(BSP)分析let-7a-3启动子内的DNA甲基化状态。使用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测CRC细胞系中let-7a-3和RAB11FIP2的表达。使用流式细胞仪和锚定-非依赖性生长试验检测let-7a-3表达上调时CRC细胞凋亡水平及集落形成能力。结果let-7a-3基因甲基化在CRC组织中很常见,let-7a-3的甲基化状态与组织来源有关(P<0.001)。去甲基化剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza-dC)可以诱导let-7a-3的表达。let-7a-3表达上调时促进细胞凋亡并抑制细胞集落形成能力(P<0.001)。let-7a-3通过靶向RAB11FIP2基因3’-UTR区域中的同源DNA区域抑制RAB11FIP2的表达。结论CRC中let-7a-3甲基化是一种常见现象,let-7a-3过表达可诱导细胞凋亡,抑制锚定非依赖性生长,提示let-7a-3可能是结直肠癌治疗的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 结直肠癌 let-7a-3 甲基化 rab11FIP2
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鼠肉瘤病毒家族相关蛋白2A对胃癌细胞增殖与侵袭和迁移能力的影响 被引量:2
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作者 黄国定 卢宏全 +2 位作者 潘敏丽 吕琼秀 陈其珠 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期3244-3248,共5页
目的研究鼠肉瘤病毒家族相关蛋白2A(RAB2A)在胃癌组织样本中的表达以及对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法 (1)收集胃癌患者,将胃癌组织分为癌组织组及癌旁组织组,用荧光定量-PCR法检测RAB2A基因表达水平。(2)将MGC-803细胞分... 目的研究鼠肉瘤病毒家族相关蛋白2A(RAB2A)在胃癌组织样本中的表达以及对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法 (1)收集胃癌患者,将胃癌组织分为癌组织组及癌旁组织组,用荧光定量-PCR法检测RAB2A基因表达水平。(2)将MGC-803细胞分为4组:过表达对照组、过表达RAB2A组、干扰表达对照组和干扰表达RAB2A组(分别命名为第1、第2、第3和第4转染组)。用慢病毒感染细胞,第1转染组感染对照慢病毒,第2转染组感染过表达RAB2A慢病毒,第3转染组感染干扰对照慢病毒,第4转染组感染干扰表达RAB2A慢病毒,各组的感染量根据细胞数目决定,感染复数均为5(细胞与病毒颗粒比为1∶5),处理2 d。用噻唑蓝法检测细胞增殖水平(光密度)值,用划痕实验检测细胞迁移情况,用侵袭实验检测细胞侵袭数量,用蛋白质印迹法检测RAB2A和细胞外调节蛋白激酶(Erk)信号通路相关蛋白的蛋白表达水平。结果 (1)RAB2A在正常组织和癌组织中的相对表达水平分别为0.66±0.39和1.04±0.59,癌组织中RAB2A表达水平为正常组织的1.58倍。(2)第1、第2、第3和第4转染组的伤口愈合率为(50.91±4.33)%,(81.03±6.21)%,(73.97±2.55)%和(37.99±4.83)%;这4组的穿孔细胞数分别为67.67±8.32,135.67±16.17,75.00±10.54和43.00±12.29;这4组的磷酸化Erk相对表达量分别为0.97±0.02,1.51±0.12,1.14±0.11,0.46±0.13。第2转染组的上述指标与第1转染组比较,或第4转染组的上述指标和第3转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论抑制RAB2A表达可以抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,而过表达RAB2A则能促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 鼠肉瘤病毒家族相关蛋白2A 鼠肉瘤病毒 胃癌 增殖 侵袭 迁移
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宿主RAB3GAP2基因单核苷酸多态性与流感疫苗免疫应答的关联性
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作者 陈嘉敏 文思敏 +6 位作者 钟舒怡 李茂 隗合江 成艳辉 黄维娟 王大燕 舒跃龙 《中国疫苗和免疫》 CSCD 北大核心 2022年第1期46-51,共6页
目的探讨宿主RAB3GAP2基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与流感疫苗免疫应答的关联性。方法采用巢式病例对照研究方法,于2009-2019年在中国2个地区招募健康人群接种三价流感灭活疫苗,采集接种前和接种后28d血... 目的探讨宿主RAB3GAP2基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与流感疫苗免疫应答的关联性。方法采用巢式病例对照研究方法,于2009-2019年在中国2个地区招募健康人群接种三价流感灭活疫苗,采集接种前和接种后28d血清样本,检测血凝抑制抗体;三种流感病毒疫苗成分抗体均血清阳转者(应答组)和均未血清阳转者(低应答组)进行RAB3GAP2基因5个SNP位点的基因型检测,比较两组基因型频率分布。结果流感疫苗低应答组和应答组分别纳入227名和365名研究对象。宿主RAB3GAP2基因rs12404566位点的AA基因型频率与TT+TA基因型相比在低应答组中更高(OR=3.67,95%CI:1.09-12.35);rs2289189位点的CG+GG基因型频率与CC基因型相比在低应答组中更高(OR=1.93,95%CI:1.20-3.10);5个SNP位点组成的GTTTG单体型频率与GTGTC单体型相比在低应答组中更高(OR=1.90,95%CI:1.14-3.18)。结论宿主RAB3GAP2基因SNP与流感疫苗的免疫应答存在关联性,可为优化流感疫苗个体化接种提供参考。 展开更多
关键词 流感疫苗 预防接种 免疫应答 rab3GAP2基因 单核苷酸多态性 关联性
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