山东地区海水养殖区常见抗生素耐药菌及耐药基因分布特征 被引量：14

1

作者 李壹 曲凌云 +2 位作者 朱鹏飞 田欣欣 王琛 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期55-62,共8页

对山东地区海水养殖海域常见抗生素耐药菌及耐药基因分布进行调查,结果表明所调查5个海水养殖区水样中四环素类、磺胺类、β-内酰胺类耐药菌比例显著(p<0.05)高于氯霉素类和喹诺酮类耐药菌;此外用RT-PCR方法对共计15种耐药基因在水... 对山东地区海水养殖海域常见抗生素耐药菌及耐药基因分布进行调查,结果表明所调查5个海水养殖区水样中四环素类、磺胺类、β-内酰胺类耐药菌比例显著(p<0.05)高于氯霉素类和喹诺酮类耐药菌;此外用RT-PCR方法对共计15种耐药基因在水样中的丰度测定表明磺胺类(sul、dfra/16S rRNA=10^(-6)~10^(-2))、喹诺酮类(qnr/16S rRNA=10^(-6)~10^(-2))以及四环素类耐药基因(tet/16S rRNA=10^(-7)~10^(-2))在各水样中丰度差异不显著,而氯霉素耐药基因(cata、cmle/16S rRNA=10^(-8)~10^(-2))在不同水样中丰度差异显著,且cata1和cmle1丰度与可培养氯霉素耐药菌比例存在相关线性关系。实验数据说明山东海水养殖区水样中存在一定的抗生素耐药菌和耐药基因污染。 展开更多

关键词 海水养殖区 耐药菌 耐药基因 rt-pcr定量

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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患儿G-6-PDmRNA表达的研究 被引量：1

2

作者 李长钢 陈小文 +4 位作者 陈运生 王缨 石红松 赵维玲 李成荣 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2006年第5期385-387,共3页

目的检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏症患者及其家系成员的G-6-PDmRNA表达水平,从转录水平探讨其可能的发病机制。方法提取G-6-PD缺乏症患者及其直系家属(患者父亲和/或母亲等)外周血RNA,采用逆转录方法形成cDNA后,运用逆转录实时... 目的检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏症患者及其家系成员的G-6-PDmRNA表达水平,从转录水平探讨其可能的发病机制。方法提取G-6-PD缺乏症患者及其直系家属(患者父亲和/或母亲等)外周血RNA,采用逆转录方法形成cDNA后,运用逆转录实时定量PCR(QuantitativeReal-TimePCR,QRT-PCR)技术,测定G-6-PDmRNA的表达量。使用SPSS10.0统计分析软件将3组进行组间两两比较。结果G-6-PD缺乏症患儿组mRNA表达量为0.57±0.19,父系组为0.74±0.21,母系组为0.67±0.21,患儿组与父系组比较t=-3.18,(P<0.01);与母系组比较t=-2.54,(P<0.05)。结论G-6-PD缺乏症患者的G-6-PD基因发生突变后其G-6-PDmRNA表达量发生了改变,提示该病的发生与在转录水平上发生变化有关,在G-6-PD缺乏症的发病过程中起到一定的作用。 展开更多

关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏 rt—pcr定量 MRNA

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前列腺增生与前列腺癌特异性膜抗原mRNA的表达 被引量：9

3

作者 蔡岳斌 钟惟德 +8 位作者 何慧婵 江福能 刘文华 戴奇山 彭志强 谢克基 欧汝彪 刘良式 魏鸿蔼 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期860-861,共2页

目的以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术研究良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(Pca)组织标本PSMmRNA的表达,探讨前列腺特异性膜抗原(PSM)在前列腺癌诊断的特异性意义。方法通过实时荧光定量PCR对23例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织PSM... 目的以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术研究良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(Pca)组织标本PSMmRNA的表达,探讨前列腺特异性膜抗原(PSM)在前列腺癌诊断的特异性意义。方法通过实时荧光定量PCR对23例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织PSMmRNA的表达,比较其在3种组织定量的差异。结果BPH与PCa组织PSMmRNA的定量表达值分别为1.54±0.21与4.95±0.78,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光RTPCR定量检测PSMmRNA为前列腺癌的诊断、治疗、预后监测等提供了更为可靠的辅助指标。 展开更多

关键词 mRNA 前列腺癌 良性前列腺增生(BPH) 聚合酶链反应(pcr) rt-pcr定量检测 前列腺特异性膜抗原 实时荧光定量pcr 前列腺组织 PSM 组织标本 定量表达 辅助指标 预后监测 PCa 统计学 诊断

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非小细胞肺癌患者外周血Lunx mRNA的检测及意义 被引量：3

4

作者 邱素芳 陈岩松 +1 位作者 陈燕 潘建基 《实用癌症杂志》 2012年第3期232-235,共4页

目的探讨非小细胞肺癌患者外周血中人类肺组织特异性基因Lunx mRNA的表达情况,检验lunx mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法以肺部良性疾病20例、健康人30例外周血为对照。采用实时荧光定量逆转录PCR(fluorescence quantit... 目的探讨非小细胞肺癌患者外周血中人类肺组织特异性基因Lunx mRNA的表达情况,检验lunx mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法以肺部良性疾病20例、健康人30例外周血为对照。采用实时荧光定量逆转录PCR(fluorescence quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,FQ-RT-PCR)法定量检测50例非小细胞肺癌患者外周血lunx mRNA的表达情况;并分析lunx mRNA的表达与各临床因素的关系。结果 50例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)外周血lunx mRNA表达阳性者28例,阳性率为56.0%,而20例肺良性疾病和30例健康者外周血均不表达;同时发现lunx mRNA的表达与肺癌的分期明显相关,而与年龄、性别、病理分型、分化程度等无明显相关。结论 Lunx mRNA RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血微转移具有较高的特异性和敏感性,有助于早期诊断肺癌微转移,从而指导临床分期和治疗。 展开更多

关键词 rt-pcr定量检测 肺癌 微转移

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实时荧光定量RT—PCR定量分析mRNA表达水平原理及应用 被引量：3

5

作者 杨新 刘泽军 《中国检验医学与临床》 2003年第2期78-80,共3页

实时荧光定量RT—PCR技术是一种新近发展起来定量检测mRNA表达水平的灵敏方法。本文介绍了目前应用的四种荧光定量RT—PCR反应系统：即水解探针、杂交探针、DNA—染料结合和分子灯标RT—PCR反应系统，并对实时荣光定量RT—PCR反应系统... 实时荧光定量RT—PCR技术是一种新近发展起来定量检测mRNA表达水平的灵敏方法。本文介绍了目前应用的四种荧光定量RT—PCR反应系统：即水解探针、杂交探针、DNA—染料结合和分子灯标RT—PCR反应系统，并对实时荣光定量RT—PCR反应系统的实验设计原则及所需仪器进行了介绍。 展开更多

关键词 实时荧光定量rt-pcr定量分析 MRNA 表达 原理 应用

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PCR产物定量检测技术进展

6

作者 翟岱安 《中华腹部疾病杂志》 2006年第6期F0003-F0004,共2页

1985年Cetus公司的Mullis发明的聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是现代分子生物学研究中的一项非常重要的技术，它可在短时间内在试管中获得数百万特异DNA序列的拷贝，从而很容易地对目的基因进行分析、鉴定以及其它操... 1985年Cetus公司的Mullis发明的聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是现代分子生物学研究中的一项非常重要的技术，它可在短时间内在试管中获得数百万特异DNA序列的拷贝，从而很容易地对目的基因进行分析、鉴定以及其它操作。这一技术现已广泛应用于生物学的各研究领域。PCR的定量实质是核酸的体外扩增，当人们利用技术扩增出大量的特异DNA序列后，还必须对这些PCR产物进行定性或定量检测，特别是临床检验中，定量分析PCR产物可以为临床诊断、疗效观察等提供更为准确的信息。另外，在研究基因的表达调控研究中，经常利用RT-PCR定量检测某一特定的转录mRNA，因此，建立灵敏、准确、重复性好的PCR产物定量检测法是目前PCR及其相关技术研究的特点，电是定量PCR技术的基础。本文将对这一技术近年来的研究进展状况作一简要综述。 展开更多

关键词 rt-pcr定量检测 pcr产物 技术进展 分子生物学研究 定量pcr技术 DNA序列 聚合酶链反应 目的基因 CHAIN pcr)

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CCR5 mRNA的实时RT-PCR定量检测

7

作者 唐力 王斌 +3 位作者 赖建平 Steven D.Douglas 霍文哲 杨继红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期558-558,560,共2页

关键词 CCR5mRNA 实时rt-pcr定量检测 分子信标 引物 设计

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骨桥蛋白在大肠癌和大肠癌肝转移灶中的表达及其临床意义 被引量：15

8

作者 丁凌 郑树 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期773-775,I001,共4页

目的　检测骨桥蛋白 (osteopontin ,OPN)mRNA在大肠癌及大肠癌肝转移灶中的表达 ,并探讨其在大肠癌发生、发展及肝转移中的临床意义。　方法　提取 4 4例大肠癌及癌旁正常组织 ,2 0例大肠癌肝转移灶及 3例正常肝组织RNA ,采用RT PCR半... 目的　检测骨桥蛋白 (osteopontin ,OPN)mRNA在大肠癌及大肠癌肝转移灶中的表达 ,并探讨其在大肠癌发生、发展及肝转移中的临床意义。　方法　提取 4 4例大肠癌及癌旁正常组织 ,2 0例大肠癌肝转移灶及 3例正常肝组织RNA ,采用RT PCR半定量法检测其OPNmRNA的表达。并用原位杂交行组织定位检测。　结果　 4 4例大肠癌组织OPN表达高于癌旁正常组织 (t =4 89,P =0 0 0 0 )。 4 4例大肠癌组织OPNmRNA表达率为 18 2 % ,而在 2 0例肝转移灶中表达率达 80 0 % (χ2 =2 2 4 2 ,P =0 0 0 0 )。原位杂交表明 ,OPNmRNA定位于大肠癌细胞浆。　结论　OPNmRNA在大肠癌组织中表达高于正常组织 ,而在大肠癌肝转移灶中呈更高表达 ,提示OPN可能是大肠癌肝转移的预测指标之一。 展开更多

关键词 骨桥蛋白 大肠癌 肝转移 临床意义 rt-pcr半定量法

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胡萝卜atp9基因的克隆表达及细胞质雄性不育的相关性研究 被引量：5

9

作者 张智 梁毅 +1 位作者 丁海凤 张洪伟 《北方园艺》 CAS 北大核心 2012年第24期140-144,共5页

以胡萝卜及其它植物atp9基因序列信息设计引物,分离并克隆了胡萝卜细胞质雄性不育相关的线粒体基因片段,并利用半定量RT-PCR和Real-time PCR技术研究了该基因在不育系和相应保持系中的表达情况。结果表明:与保持系相比,atp9基因在不育... 以胡萝卜及其它植物atp9基因序列信息设计引物,分离并克隆了胡萝卜细胞质雄性不育相关的线粒体基因片段,并利用半定量RT-PCR和Real-time PCR技术研究了该基因在不育系和相应保持系中的表达情况。结果表明:与保持系相比,atp9基因在不育系中发生了若干碱基的置换及缺失;基因表达分析表明,不育系atp9基因在花蕾的前3个发育时期表达量明显较低,并在大花蕾期超过了保持系,但是在盛花期其表达量又低于保持系。推测atp9基因的结构变异和异常表达与胡萝卜细胞质雄性不育有着密切关系。 展开更多

关键词 胡萝卜 atp9基因细胞质雄性不育rt-pcr实时荧光定量pcr

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TRAF1/TRAF2 mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及意义 被引量：1

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作者 柴华旗 黎曼 +4 位作者 贺丹 姚利 王玮 李明 熊重祥 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期298-299,共2页

目的研究肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF1/TRAF2)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及与SLE疾病活动指数(SLE DAI)是否相关。方法14例正常人和20例活动期SLE患者(SLE活动指数以SLE DAI为判断标准),取静脉血... 目的研究肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF1/TRAF2)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及与SLE疾病活动指数(SLE DAI)是否相关。方法14例正常人和20例活动期SLE患者(SLE活动指数以SLE DAI为判断标准),取静脉血分离PB MC,采用RT PCR半定量法,检测TRAF1 和TRAF2 mRNA表达。结果TRAF1 mRNA在SLE患者PBMC的表达较正常人为高,但与SLE DAI指数无相关性。TRAF2与正常人比较无差异。结论TRAF1/TRAF2基因可能在SLE的发病机制中起重要作用。 展开更多

关键词 外周血单个核细胞 TRAF2 TRAF1 系统性红斑狼疮患者 表达及 肿瘤坏死因子受体相关因子 rt-pcr半定量法 SLEDAI SLE患者 疾病活动指数 mRNA表达 判断标准 PBMC 发病机制 正常人 活动期 静脉血 相关性

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IL-6 mRNA在进展期结直肠癌低蛋白血症组织中的表达及意义 被引量：1

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作者 陈利生 朱袭嘉 《结直肠肛门外科》 2008年第1期2-5,共4页

目的研究白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与进展期结直肠癌低蛋白血症的关系。方法根据入院第二天用溴甲酚绿法(bromcresol green,BCG)测量空腹血白蛋白(Albumin,Alb)的浓度,将标本分为两组:低蛋白血症组(Alb<35g/L)及非低蛋白血症... 目的研究白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与进展期结直肠癌低蛋白血症的关系。方法根据入院第二天用溴甲酚绿法(bromcresol green,BCG)测量空腹血白蛋白(Albumin,Alb)的浓度,将标本分为两组:低蛋白血症组(Alb<35g/L)及非低蛋白血症组(Alb≥35g/L),应用RT-PCR半定量的方法检测IL-6mRNA在低蛋白血症组以及非低蛋白血症组中的表达。结果IL-6mRNA在低蛋白血症组癌组织中的阳性表达率较非低蛋白血症组癌组织中的阳性高(P=0.000),在两组相应的正常黏膜组织标本中均不表达。结论IL-6通过影响机体对白蛋白的摄入、排出及代谢,在进展期结直肠癌低蛋白血症的发生、发展中起到重要作用。 展开更多

关键词 白细胞介素6 低蛋白血症 进展期结直肠癌 rt—pcr半定量法

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