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雌马酚对高糖高脂诱导的成骨细胞线粒体损伤的保护作用 被引量：1
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作者 李正宙 倪向敏 +3 位作者 白倩 梁馨予 朱文艺 王建 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1152-1160,共9页
目的 观察雌马酚(equol, Eq)干预对高糖高脂诱导的成骨细胞的影响,并探讨其作用机制。方法 体外培养ROS1728成骨细胞,以不同浓度的Eq、棕榈酸钠(sodium palmitate, PA)和葡萄糖(glucose, GLU)处理48 h,通过HE染色观察细胞核凋亡表现及CC... 目的 观察雌马酚(equol, Eq)干预对高糖高脂诱导的成骨细胞的影响,并探讨其作用机制。方法 体外培养ROS1728成骨细胞,以不同浓度的Eq、棕榈酸钠(sodium palmitate, PA)和葡萄糖(glucose, GLU)处理48 h,通过HE染色观察细胞核凋亡表现及CCK-8法检测细胞存活率确定GLU、PA及Eq干预的适宜浓度。将细胞分为对照(Control)组(GLU,5.5 mmol/L)、模型(Model)组(GLU,30 mmol/L+PA,250μmol/L)、LEq组(Model+1×10^(-8)mol/L Eq)、MEq组(Model+1×10^(-7)mol/L Eq)、HEq组(Model+1×10^(-6)mol/L Eq)。CCK8检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33342染色和HE染色观察细胞核凋亡表现,透射电镜观察线粒体结构,Mito-Tracker Red CMXRos(线粒体红色荧光探针)染色检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)变化情况,Western blot检测Sirt1、PGC-1α、Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达。结果 与对照组相比,当GLU和PA浓度分别为30 mmol/L和250μmol/L时细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率升高,确定为诱导成骨细胞高糖高脂环境的适宜浓度;与模型组相比,Eq干预后细胞存活率显著升高、凋亡率显著降低(P<0.05),线粒体结构受损明显改善、MMP显著升高(P<0.05),同时ROS显著减少(P<0.05);细胞Sirt1、PGC-1α、Bcl-2表达水平显著升高,Bax、Cleaved caspase-3表达水平显著降低(P<0.05)。结论 Eq干预可有效减少高糖高脂诱导的成骨细胞线粒体损伤、氧化应激和细胞凋亡,其部分机制可能与Eq促进Sirt1、PGC-1α表达有关。 展开更多
关键词 雌马酚 ros1728细胞 高糖高脂 线粒体 氧化应激 凋亡
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大鼠成骨细胞特异单链DNA适配体的筛选与鉴定
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作者 李慧 丁红梅 +7 位作者 李洁 黄皑雪 苏雪婷 梁超 张令强 赵强 李少华 邵宁生 《生物技术通讯》 CAS 2015年第1期81-84,共4页
目的:筛选能特异识别大鼠成骨细胞的单链DNA(ssDNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用完整细胞为靶标的消减细胞SELEX技术筛选大鼠成骨细胞特异ssDNA适配体,通过荧光显微镜、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure分析... 目的:筛选能特异识别大鼠成骨细胞的单链DNA(ssDNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用完整细胞为靶标的消减细胞SELEX技术筛选大鼠成骨细胞特异ssDNA适配体,通过荧光显微镜、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure分析软件,分析适配体的一、二级结构,并对筛选得到的适配体进行鉴定。结果:经过6轮消减细胞SELEX筛选,荧光显微镜鉴定文库已富集;通过流式细胞术检测及测序分析,得到2条适配体L54和L66与大鼠成骨细胞特异结合,其平衡解离常数分别为494.4±133.3和511.4±160.7 nmol/L。结论:筛选获得特异识别大鼠成骨细胞的ssDNA适配体。 展开更多
关键词 大鼠成骨细胞 DNA文库 适配体 SELEX筛选 鉴定
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