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PMA及乏氧诱导VEGF上调的细胞模型构建及用于RNAi研究
1
作者
杨艳
吕国军
+5 位作者
郭昕
张德蒙
于炜婷
张英
刘袖洞
马小军
《现代生物医学进展》
CAS
2012年第2期265-269,共5页
目的:探讨佛波酯(PMA)与乏氧诱导对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达量的影响,构建适合RNA干扰(RNAi)的体外细胞模型。方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)在蛋白质水平上检测细胞分泌的VEGF量,并用激光共聚焦...
目的:探讨佛波酯(PMA)与乏氧诱导对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达量的影响,构建适合RNA干扰(RNAi)的体外细胞模型。方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)在蛋白质水平上检测细胞分泌的VEGF量,并用激光共聚焦显微镜观察小干扰RNA(siRNA)转染的细胞胞吞及细胞形态。结果:1 M PMA处理细胞2 h能明显上调B16-F10细胞中VEGF蛋白的合成及分泌,与常规培养相比,细胞可增加50%的VEGF水平。再经乏氧诱导48 h,稳定释放到培养液里的VEGF浓度大幅提高200%,范围在55-65 pg/mL/h。结论:经PMA和乏氧诱导后,B16-F10细胞稳定的VEGF分泌量与一定时间内分泌的稳定性均表明其适合作为RNAi的体外细胞模型。初步的RNAi结果表明,TKO/siRNA纳米粒与壳聚糖/siRNA纳米粒对于VEGF的沉默效率达40%。
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关键词
小鼠黑色素瘤细胞
血管内皮细胞生长因子
PMA诱导
乏氧诱导
rnai
模型
原文传递
宫颈癌细胞代谢调控异常与HPV16编码基因表达的关系
2
作者
努尔满古力·肉孜
彭敏
张玲
《现代妇产科进展》
CSCD
北大核心
2022年第12期902-905,910,共5页
目的:探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)感染及宫颈癌发生与宫颈癌细胞内代谢调控异常的关系。方法:利用HPV16编码基因E6或E7序列特异性发夹结构RNA(shRNA)和绿色荧光蛋白质(GFP)的慢病毒表达载体,感染HPV16阳性SiHa宫颈癌细胞,建立RNA干扰(RN...
目的:探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)感染及宫颈癌发生与宫颈癌细胞内代谢调控异常的关系。方法:利用HPV16编码基因E6或E7序列特异性发夹结构RNA(shRNA)和绿色荧光蛋白质(GFP)的慢病毒表达载体,感染HPV16阳性SiHa宫颈癌细胞,建立RNA干扰(RNAi)宫颈癌细胞模型。通过激光共聚焦显微成像和定量RT-PCR分析,评价细胞感染和抑制效率。采用高分辨魔角旋转联合核磁共振技术(HRMAS-1HNMR)和生物信息学方法,对干预前后的宫颈癌细胞进行代谢谱分析,明确差异表达的候选小分子代谢物。结果:建立选择性抑制HPV16编码基因E6或E7表达的RNAi细胞模型,通过代谢组学研究,明确HPV16编码基因表达可能影响细胞内13种小分子化合物表达水平变化,涉及糖脂和氨基酸代谢调控,其中α和β-葡萄糖、乙酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸含量显著上升,乳酸、丙氨酸、甲酸含量下降。结论:HPV16感染引起宫颈癌细胞代谢调控异常,其中HPV16编码基因E6和E7表达可能是重要因素。
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关键词
宫颈癌
HPV感染
代谢组学
rnai
细胞
模型
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职称材料
题名
PMA及乏氧诱导VEGF上调的细胞模型构建及用于RNAi研究
1
作者
杨艳
吕国军
郭昕
张德蒙
于炜婷
张英
刘袖洞
马小军
机构
中国科学院大连化学物理研究所
中国科学院研究生院
大连大学环境与化学工程学院
出处
《现代生物医学进展》
CAS
2012年第2期265-269,共5页
基金
国家自然科学基金(20876018
20736006)
+2 种基金
教育部留学回国人员科研启动基金
中国科学院知识创新工程重要方向项目(KJCX2.YW.M02
KJCX2-YW-210-02)
文摘
目的:探讨佛波酯(PMA)与乏氧诱导对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达量的影响,构建适合RNA干扰(RNAi)的体外细胞模型。方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)在蛋白质水平上检测细胞分泌的VEGF量,并用激光共聚焦显微镜观察小干扰RNA(siRNA)转染的细胞胞吞及细胞形态。结果:1 M PMA处理细胞2 h能明显上调B16-F10细胞中VEGF蛋白的合成及分泌,与常规培养相比,细胞可增加50%的VEGF水平。再经乏氧诱导48 h,稳定释放到培养液里的VEGF浓度大幅提高200%,范围在55-65 pg/mL/h。结论:经PMA和乏氧诱导后,B16-F10细胞稳定的VEGF分泌量与一定时间内分泌的稳定性均表明其适合作为RNAi的体外细胞模型。初步的RNAi结果表明,TKO/siRNA纳米粒与壳聚糖/siRNA纳米粒对于VEGF的沉默效率达40%。
关键词
小鼠黑色素瘤细胞
血管内皮细胞生长因子
PMA诱导
乏氧诱导
rnai
模型
Keywords
Mouse melanoma cell
VEGF
PMA-stimulated
Hypoxia-induced
rnai
model
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
宫颈癌细胞代谢调控异常与HPV16编码基因表达的关系
2
作者
努尔满古力·肉孜
彭敏
张玲
机构
广元市中心医院
出处
《现代妇产科进展》
CSCD
北大核心
2022年第12期902-905,910,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No:81360332)。
文摘
目的:探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)感染及宫颈癌发生与宫颈癌细胞内代谢调控异常的关系。方法:利用HPV16编码基因E6或E7序列特异性发夹结构RNA(shRNA)和绿色荧光蛋白质(GFP)的慢病毒表达载体,感染HPV16阳性SiHa宫颈癌细胞,建立RNA干扰(RNAi)宫颈癌细胞模型。通过激光共聚焦显微成像和定量RT-PCR分析,评价细胞感染和抑制效率。采用高分辨魔角旋转联合核磁共振技术(HRMAS-1HNMR)和生物信息学方法,对干预前后的宫颈癌细胞进行代谢谱分析,明确差异表达的候选小分子代谢物。结果:建立选择性抑制HPV16编码基因E6或E7表达的RNAi细胞模型,通过代谢组学研究,明确HPV16编码基因表达可能影响细胞内13种小分子化合物表达水平变化,涉及糖脂和氨基酸代谢调控,其中α和β-葡萄糖、乙酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸含量显著上升,乳酸、丙氨酸、甲酸含量下降。结论:HPV16感染引起宫颈癌细胞代谢调控异常,其中HPV16编码基因E6和E7表达可能是重要因素。
关键词
宫颈癌
HPV感染
代谢组学
rnai
细胞
模型
Keywords
Cervical cancer
HPV16 infection
Metabolomics
rnai
cell model
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PMA及乏氧诱导VEGF上调的细胞模型构建及用于RNAi研究
杨艳
吕国军
郭昕
张德蒙
于炜婷
张英
刘袖洞
马小军
《现代生物医学进展》
CAS
2012
0
原文传递
2
宫颈癌细胞代谢调控异常与HPV16编码基因表达的关系
努尔满古力·肉孜
彭敏
张玲
《现代妇产科进展》
CSCD
北大核心
2022
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引证文献
统计分析
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