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梯棱羊肚菌镉胁迫响应基因ATX1功能分析 被引量:3
1
作者 陈新 吕首云 +2 位作者 牟春叶 边银丙 康恒 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期827-838,共12页
梯棱羊肚菌Morchella importuna是一种可以大田覆土栽培的珍稀食用菌,而土壤重金属污染状况日益严重,对梯棱羊肚菌菌丝生长和子实体产品质量安全构成了潜在的威胁。本研究先采用镉离子胁迫处理梯棱羊肚菌菌丝体,RT-PCR检测发现候选基因A... 梯棱羊肚菌Morchella importuna是一种可以大田覆土栽培的珍稀食用菌,而土壤重金属污染状况日益严重,对梯棱羊肚菌菌丝生长和子实体产品质量安全构成了潜在的威胁。本研究先采用镉离子胁迫处理梯棱羊肚菌菌丝体,RT-PCR检测发现候选基因ATX1的表达量显著下调。克隆梯棱羊肚菌ATX1基因,对ATX1p蛋白结构进行功能预测,发现ATX1p可能与铜离子转运及重金属胁迫相关。然后分别构建ATX1的超表达和RNAi基因沉默载体,采用农杆菌介导的转化方法,将其转入梯棱羊肚菌同核体菌株A50中,分别筛选到4个ATX1表达显著上调的超表达转化子和4个ATX1表达显著下调的RNAi基因沉默转化子,镉敏感性检测发现ATX1的RNAi基因沉默转化子表现为镉抗性增强,而ATX1超表达转化子则表现为镉抗性减弱。结果表明,梯棱羊肚菌ATX1基因表达与镉抗性呈负相关,ATX1p可能在梯棱羊肚菌镉胁迫响应过程中发挥着某种重要作用。 展开更多
关键词 梯棱羊肚菌 铜伴侣蛋白 镉胁迫 rnai 基因沉默 基因超表达
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RNA干涉的研究进展 被引量:1
2
作者 过七根 陈付学 +1 位作者 宋红生 文铁桥 《河南科技大学学报(农学版)》 2004年第1期5-9,共5页
就RNAi的特征、可能机制、存在问题及应用前景进行了综述。研究表明 :RNAi是一种强有力的基因功能研究工具 ,具有重要的生物功能 ,能防御病毒侵染、维持转座子的稳定等。dsRNA介导的基因沉默现象已经广泛存在各种生物中 ,尤其在哺乳动物... 就RNAi的特征、可能机制、存在问题及应用前景进行了综述。研究表明 :RNAi是一种强有力的基因功能研究工具 ,具有重要的生物功能 ,能防御病毒侵染、维持转座子的稳定等。dsRNA介导的基因沉默现象已经广泛存在各种生物中 ,尤其在哺乳动物中 ,RNAi的存在为治疗人类疾病提供了有利的研究工具。 展开更多
关键词 RNA干涉 基因沉默 特征 机制 导入方式 特异性
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转录后基因沉默的机制及其应用 被引量:15
3
作者 刘杨 蒋彦 +1 位作者 乔代蓉 曹毅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期140-143,共4页
确定导致转录后基因沉默的原因 ,探索在转基因植物研究中避免基因沉默的对策。方法是将转基因沉默分为转录水平的沉默和转录后水平的沉默 ,分别对RNA阈值模型、异位配对和异常RNA模型、双连RNA模型等几种导致转录后基因沉默模型的分析... 确定导致转录后基因沉默的原因 ,探索在转基因植物研究中避免基因沉默的对策。方法是将转基因沉默分为转录水平的沉默和转录后水平的沉默 ,分别对RNA阈值模型、异位配对和异常RNA模型、双连RNA模型等几种导致转录后基因沉默模型的分析。结果确定了转基因沉默抑制现象和转录后基因沉默的形成机制 ,以及转录后基因沉默理论和实践意义。 展开更多
关键词 转录后基因沉默 基因沉默 aRNA RDRP 异位配对 沉默抑制因子 rnai 机制
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RNA干扰技术的研究进展 被引量:21
4
作者 秦玉新 蒙凌华 丁健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期421-424,共4页
RNA干扰是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。尽管RNA干扰发现的时间较短,但由于其具有操作简单、成本低、特异性高和高效性等特点,因而发展迅速,... RNA干扰是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。尽管RNA干扰发现的时间较短,但由于其具有操作简单、成本低、特异性高和高效性等特点,因而发展迅速,目前对于它的机制已有初步的了解,同时RNA干扰在功能基因组学以及疾病的基因干预治疗方面也有一定的进展。该文就RNA干扰技术的历史、作用机制、生物学意义及应用作简要概述。 展开更多
关键词 rnai SIRNA miRNA RISC DICER 基因沉默
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RNAi技术在植物功能基因组学中的研究进展 被引量:24
5
作者 李丽文 朱延明 +2 位作者 李杰 柏锡 才华 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第1期119-124,共6页
文章主要综述了RNA干涉(RNAi)技术在植物功能基因组学中的研究策略及研究现状,包括RNA干涉的作用机制及技术特征,引发植物RNAi机制的转基因RNAi技术以及病毒介导的基因沉默技术。转基因RNAi技术方面,包括载体结构的优化策略、高通量载... 文章主要综述了RNA干涉(RNAi)技术在植物功能基因组学中的研究策略及研究现状,包括RNA干涉的作用机制及技术特征,引发植物RNAi机制的转基因RNAi技术以及病毒介导的基因沉默技术。转基因RNAi技术方面,包括载体结构的优化策略、高通量载体的构建方法以及该技术的优缺点。病毒介导的基因沉默技术方面包括病毒载体及宿主种类,病毒感染方法,试验对照的建立、环境因素的影响以及该技术的优缺点。 展开更多
关键词 rnai 转基因rnai 病毒介导的基因沉默
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昆虫的RNA干扰 被引量:18
6
作者 杨广 尤民生 +1 位作者 赵伊英 刘春辉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1156-1162,共7页
RNA干扰(RNAi)是一种强有力的分子生物学技术,在昆虫研究中得到了较多的应用。目前,RNAi技术主要应用于昆虫功能基因和功能基因组研究,已在多个目的19种昆虫上实现了RNAi。在昆虫上实现RNAi的方法主要有注射、浸泡、喂食、转基因和病毒... RNA干扰(RNAi)是一种强有力的分子生物学技术,在昆虫研究中得到了较多的应用。目前,RNAi技术主要应用于昆虫功能基因和功能基因组研究,已在多个目的19种昆虫上实现了RNAi。在昆虫上实现RNAi的方法主要有注射、浸泡、喂食、转基因和病毒介导等方法,这些方法各有特点,其中喂食法因其简单而最有应用前景。昆虫RNAi的系统性较为复杂,只有部分昆虫具有RNAi的系统性。昆虫中RNAi信号传导的基因可能是sid-1,但昆虫RNAi的系统性机理还不是很清楚。转基因植物产生的dsRNA实现了对作物的保护,证实了RNAi技术可用于害虫控制,为害虫控制开辟了新领域。昆虫的RNAi研究处在起步阶段,研究昆虫RNAi的机理,特别是RNAi在昆虫体内的系统性扩散机理,改进实现RNAi的方法,提高RNAi技术在昆虫研究中的应用,有利于昆虫基因功能鉴定和害虫控制,促进昆虫学科的发展。 展开更多
关键词 昆虫 RNA干扰(rnai) 功能基因 基因沉默 害虫控制
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RNAi及其在植物遗传改良中的应用 被引量:18
7
作者 朱龙付 张献龙 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期472-477,共6页
RNAi(RNAinterfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默。这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实 ,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制。对RNAi... RNAi(RNAinterfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默。这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实 ,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制。对RNAi的研究是目前生物学领域研究的热点之一 ,近几年来该技术已经在功能基因组学、遗传学和医学等诸学科得到大量应用。本文将就RNAi的机制研究及其在植物遗传改良中的应用进行综述。 展开更多
关键词 rnai 植物 遗传改良 基因沉默 RNA干涉
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昆虫RNAi技术及其应用 被引量:15
8
作者 何正波 陈斌 冯国忠 《昆虫知识》 CSCD 北大核心 2009年第4期525-532,共8页
RNAi是近几年发展起来的抑制基因表达的新技术。部分昆虫存在RNAi信号的系统性传播现象,可以将dsRNA直接注射进昆虫的卵、血腔或局部组织,引发远距离靶基因的特异性沉默,建立起了Embryo RNAi,Larval RNAi,Adult RNAi,Parental RNAi,Feed... RNAi是近几年发展起来的抑制基因表达的新技术。部分昆虫存在RNAi信号的系统性传播现象,可以将dsRNA直接注射进昆虫的卵、血腔或局部组织,引发远距离靶基因的特异性沉默,建立起了Embryo RNAi,Larval RNAi,Adult RNAi,Parental RNAi,Feeding RNAi和基于转基因技术的可遗传RNAi等昆虫RNAi技术,使RNAi迅速成为了研究昆虫尤其是非模式昆虫基因功能的主要方法。文章拟就RNAi的系统性、昆虫RNAi技术及其应用进行综述。 展开更多
关键词 rnai 系统性基因沉默 昆虫 应用
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dsRNA介导植物基因沉默及其应用 被引量:14
9
作者 曾晓珊 戴良英 +1 位作者 刘雄伦 王国梁 《生命科学》 CSCD 2007年第2期132-138,共7页
植物双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)能有效干扰同源基因的表达,近年来已成为功能基因组学研究上的新方法。本文综述了植物dsRNA介导的转基因沉默现象及其特点、分子作用机制、主要介导方法,以及近年来在植物功能基因组学研究上的... 植物双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)能有效干扰同源基因的表达,近年来已成为功能基因组学研究上的新方法。本文综述了植物dsRNA介导的转基因沉默现象及其特点、分子作用机制、主要介导方法,以及近年来在植物功能基因组学研究上的应用情况。 展开更多
关键词 RNA干扰 转基因沉默 双链RNA
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在医药领域中RNA干扰研究进展 被引量:10
10
作者 陈莉 秦婧 朱远源 《药物生物技术》 CAS CSCD 2009年第1期83-89,共7页
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,生物体内利用双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)诱导同源靶基因的mRNA发生特异性降解,从而导致基因沉默。文章综述RNAi在医药领域中研究进展与重大发现。追溯R... RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,生物体内利用双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)诱导同源靶基因的mRNA发生特异性降解,从而导致基因沉默。文章综述RNAi在医药领域中研究进展与重大发现。追溯RNAi现象的发现、阐述其分子机制、主要特征、应用该项技术研究的思路与设计,及在医药领域中研究的成果与挑战。RNAi途径主要存在于细胞质中,为转录后基因沉默(post-transcriptionalgenesilencing,PTGS),具有高特异性和高效性。利用该项技术可以研究与开发治疗各种疾病的靶向性基因药物。RNAi技术不仅可以成为敲除基因的一项实验技术,而且可以成为一种可能的治疗药物,尽管目前该项技术尚不够成熟,但其在医药领域中已经显示出巨大的发展潜力。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因沉默 研究进展
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ω-黑麦碱基因沉默对小麦1B/1R易位系加工品质的影响 被引量:13
11
作者 柴建芳 王海波 +2 位作者 马秀英 张翠绵 董福双 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期627-632,共6页
ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸... ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸性PAGE检测结果表明,这些纯合转基因株系中ω-黑麦碱的总表达量平均下降53%。这些ω-黑麦碱基因沉默的转基因株系的面筋指数、沉降值和稳定时间均显著提高,而其农艺性状,如株高、穗粒数、千粒重和小区产量,均没有受到不良影响,说明沉默ω-黑麦碱基因可以在不影响产量的前提下提高小麦1B/1R易位系的加工品质。 展开更多
关键词 小麦1B/1R易位系 黑麦碱 RNA干扰 基因沉默 加工品质
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RNAi机制研究的最新进展 被引量:6
12
作者 袁婺洲 吴秀山 《生命科学研究》 CAS CSCD 2003年第1期8-14,共7页
RNAi即RNA干涉,是近几年才发现的一种由双链RNA引起的基因沉默的现象.从无脊椎动物到脊椎动物,从低等真菌到高等植物都普遍存在RNAi.RNAi的机制也成为人们关注的焦点,出现了许多有关RNAi机制的报道.从基因组甲基化,转录后水平以及转译... RNAi即RNA干涉,是近几年才发现的一种由双链RNA引起的基因沉默的现象.从无脊椎动物到脊椎动物,从低等真菌到高等植物都普遍存在RNAi.RNAi的机制也成为人们关注的焦点,出现了许多有关RNAi机制的报道.从基因组甲基化,转录后水平以及转译水平三个层次对近两年来关于RNAi机制研究的最新进展结合我们的工作作一较为详细的综述. 展开更多
关键词 rnai 基因沉默 机制
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RNA干涉的研究进展 被引量:3
13
作者 朱旭东 黄培堂 《生物技术通讯》 CAS 2001年第4期293-296,共4页
生物体内导入双链RNA后会引起体内同源基因特异性的沉默 ,这种现象称为RNA干涉。本文主要介绍RNA干涉的研究历史。
关键词 RNA干涉 双链RNA 基因沉默 共抑制 消除作用 rnai 机理
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丝状真菌基因功能研究的方法 被引量:9
14
作者 曹月青 何正波 +3 位作者 王中康 殷幼平 彭国雄 夏玉先 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期284-288,共5页
近年来不少丝状真菌全基因组测序已完成或正在进行,基因功能研究成为真菌研究的一个热点.多种基因功能研究方法都已应用到丝状真菌领域,为丝状真菌的基因功能研究提供了许多不同的技术策略.本文总结了目前丝状真菌基因功能研究中常用的... 近年来不少丝状真菌全基因组测序已完成或正在进行,基因功能研究成为真菌研究的一个热点.多种基因功能研究方法都已应用到丝状真菌领域,为丝状真菌的基因功能研究提供了许多不同的技术策略.本文总结了目前丝状真菌基因功能研究中常用的方法,如转座子标签法、基因敲除技术、RNA干扰、超表达及酵母杂交系统等,并对各方法在丝状真菌研究中的优缺点进行了阐述. 展开更多
关键词 丝状真菌 基因功能 RNA干扰 同源重组 基因沉默
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植物中RNA干扰技术的研究与应用 被引量:9
15
作者 陈李淼 赵琳 +1 位作者 郝迪萩 李文滨 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期122-128,共7页
RNA干扰(RNAi)是与靶基因同源的双链RNA引发的,在真菌、植物和动物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默(PTGS)现象。该方法的研究是目前分子生物学和基因工程领域研究的热点之一。作为反向遗传学研究的新工具,RNAi在基因功能研究、基... RNA干扰(RNAi)是与靶基因同源的双链RNA引发的,在真菌、植物和动物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默(PTGS)现象。该方法的研究是目前分子生物学和基因工程领域研究的热点之一。作为反向遗传学研究的新工具,RNAi在基因功能研究、基因治疗以及病毒防治等方面发挥着巨大的作用,文章将RNAi的发现、作用机理、特点、导入思路和方法及其在植物中的广泛应用进行了综述。 展开更多
关键词 rnai 作用机理 基因沉默载体 基因功能 遗传改良 植物抗逆
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RNA干扰的机制及其应用 被引量:10
16
作者 尚仁福 吴立刚 《生命科学》 CSCD 2016年第5期576-583,共8页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物中高度保守的,由小分子干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)介导的转录后基因沉默现象,在基因功能的研究中得到了非常广泛的应用,并有望成为小核酸药物在疾病治疗中发挥重要作用。现对近年... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物中高度保守的,由小分子干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)介导的转录后基因沉默现象,在基因功能的研究中得到了非常广泛的应用,并有望成为小核酸药物在疾病治疗中发挥重要作用。现对近年来RNAi的作用机制、si RNA的产生途径、引起RNAi副作用的原因以及RNAi表达载体的设计这四个方面的国内外研究进展进行了总结,对RNAi与CRISPR技术在应用中的关系进行了探讨,展望了RNAi技术未来的发展。 展开更多
关键词 rnai SIRNA rnai表达载体 Ago2 基因沉默 脱靶效应
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利用RNAi技术沉默小菜蛾类钙粘蛋白基因 被引量:11
17
作者 杨中侠 吴青君 +4 位作者 王少丽 文礼章 徐宝云 张杰 张友军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期832-837,共6页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种调控基因表达的方法,其通过体外合成一段与内源靶基因同源的双链RNA(dsRNA)或siRNA,导入生物体内,使内源靶基因中同源mRNA降解,从而达到阻抑基因表达的目的。类钙粘蛋白(cadherin-likeprotein)是... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种调控基因表达的方法,其通过体外合成一段与内源靶基因同源的双链RNA(dsRNA)或siRNA,导入生物体内,使内源靶基因中同源mRNA降解,从而达到阻抑基因表达的目的。类钙粘蛋白(cadherin-likeprotein)是位于昆虫中肠刷状缘膜囊(brush border membrane vesicles,BBMV)上与钙粘蛋白(cadherin)结构相似的物质,是多种昆虫体内Bt杀虫蛋白的受体。本研究利用基因特异引物通过RT-PCR扩增了小菜蛾类钙粘蛋白基因的2个片段(CAD1和CAD2),合成相对应的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA);并将dsRNA通过显微注射导入小菜蛾3龄幼虫体内,测定了不同靶位点、不同剂量、不同检测时间对目的基因mRNA表达量的影响。结果表明:将70nLCAD1对应的dsRNA注射到幼虫体内48h后,基因表达量显著下降,72h后恢复。免疫印迹检测结果表明,类钙粘蛋白在注射dsRNA48h后幼虫BBMV中的含量明显下降。本实验成功实现了小菜蛾类钙粘蛋白基因的沉默,该体系的成功建立为利用RNAi技术分析小菜蛾及其他鳞翅目昆虫基因的功能提供了参考。 展开更多
关键词 小菜蛾 苏云金芽胞杆菌 类钙粘蛋白 RNA干扰 基因沉默
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利用RNAi技术沉默东方粘虫V-ATP酶H亚基研究 被引量:10
18
作者 张淑静 王高振 +2 位作者 刘爽 吴文君 祁志军 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期170-174,共5页
昆虫V-ATP酶(vacular-type ATPase)是以ATP为能量跨膜转运H+的质子泵,对其亚基进行干扰都会影响ATPase的活性,进而影响昆虫的生理生化指标。本研究利用特异性引物通过RT-PCR法扩增东方粘虫(Mythimna separata)V-ATPase H亚基的2个片段,... 昆虫V-ATP酶(vacular-type ATPase)是以ATP为能量跨膜转运H+的质子泵,对其亚基进行干扰都会影响ATPase的活性,进而影响昆虫的生理生化指标。本研究利用特异性引物通过RT-PCR法扩增东方粘虫(Mythimna separata)V-ATPase H亚基的2个片段,合成相应dsRNA,通过显微注射导入3龄粘虫体内,观察试虫表型及存活情况,RT-PCR检测试虫体内H亚基的表达。结果表明,注射粘虫V-ATPase H亚基的dsRNA能够显著降低粘虫中肠V-ATPase H亚基的表达水平,直至导致目的基因沉默和粘虫死亡。本项研究成功实现东方粘虫体内V-ATPase H亚基基因沉默。 展开更多
关键词 东方粘虫 V-ATPASE RNA干扰 基因沉默
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microRNAs-powerful repression comes from small RNAs 被引量:7
19
作者 MA Cong, LIU YuFei & HE Lin 535 LSA, Division of Cell and Developmental Biology, MCB Department, University of California at Berkeley, Berkeley, CA 94720-3200 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2009年第4期323-330,共8页
microRNAs (miRNAs) encode a novel class of small, non-coding RNAs that regulate gene expression post-trancriptionally. miRNAs comprise one of the major non-coding RNA families, whose diverse bio- logical functions and... microRNAs (miRNAs) encode a novel class of small, non-coding RNAs that regulate gene expression post-trancriptionally. miRNAs comprise one of the major non-coding RNA families, whose diverse bio- logical functions and unusual capacity for gene regulation have attracted enormous interests in the RNA world. Over the past 16 years, genetic, biochemical and computational approaches have greatly shaped the growth of the field, leading to the identification of thousands of miRNA genes in nearly all metazoans. The key molecular machinery for miRNA biogenesis and silencing has been identified, yet the precise biochemical and regulatory mechanisms still remain elusive. However, recent findings have shed new light on how miRNAs are generated and how they function to repress gene expression. miRNAs provide a paradigm for endogenous small RNAs that mediate gene silencing at a genome-wide level. The gene silencing mediated by these small RNAs constitutes a major component of gene regu- lation during various developmental and physiological processes. The accumulating knowledge about their biogenesis and gene silencing mechanism will add a new dimension to our understanding about the complex gene regulatory networks. 展开更多
关键词 miRNA rnai gene silencing mRNA DEGRADATION
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RNAi在癌症治疗中的应用 被引量:7
20
作者 谭余良 殷勤伟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期193-198,共6页
关键词 RNA干扰 双链RNA 基因沉默 癌症 SIRNA
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