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养精种玉汤经FTO调控卵巢细胞自噬的机制研究 被引量：1
1
作者 李宛静 邓蒂斯 +2 位作者 汪景仪 张俊新 许金榜 《海峡药学》 2022年第10期1-4,共4页
目的研究养精种玉汤经FTO对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠细胞自噬的机制。方法正常SD雌性大鼠,雷公藤甲素制备DOR大鼠模型,设空白组、模型组、DHEA组、养精种玉汤低、中、高剂量组6组,每组各10只。ELISA检测血清E_(2)、FSH、AMH浓度;W... 目的研究养精种玉汤经FTO对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠细胞自噬的机制。方法正常SD雌性大鼠,雷公藤甲素制备DOR大鼠模型,设空白组、模型组、DHEA组、养精种玉汤低、中、高剂量组6组,每组各10只。ELISA检测血清E_(2)、FSH、AMH浓度;Western Blotting测定卵巢组织中FTO、ULK1、LC3BⅡ的蛋白表达量。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠E_(2)、AMH下降(P<0.05)而FSH上升(P<0.05),FTO、ULK1、LC3BⅡ表达水平均下调(P<0.05);(2)与模型组比较,中药高剂量组E_(2)、FSH显著升高(P<0.05),中药中剂量与低剂量组AMH显著升高(P<0.05),中药高剂量组和中剂量组FTO、ULK1、LC3B-Ⅱ蛋白相对表达显著升高(P<0.05),低剂量组及DHEA组ULK1蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论养精种玉汤能通过上调RNA-m6A甲基化修饰的脱甲基酶FTO的表达,启动卵巢细胞自噬,从而调节卵巢性激素水平,改善DOR模型大鼠的卵巢功能。 展开更多
关键词 养精种玉汤 rna-m6A甲基化修饰 脂肪含量和肥胖相关蛋白(FTO) 细胞自噬
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MeRIP-qPCR技术检测RNA m^(6)A甲基化修饰对t(8;21)AML细胞中KDM4B基因表达的调控作用
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作者 李雨晴 邵杨柳 +2 位作者 李梦月 王莉莉 高晓宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期382-388,共7页
目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t... 目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t(8;21)AML细胞系Kasumi-1和SKNO-1中WTAP或KDM4B基因表达,以转染随机打乱序列(scramble)的shRNA的细胞为对照。用超纯RNA提取试剂盒(DNaseⅠ)提取细胞RNA,Magna MeRIP^(TM)m^(6)A Kit试剂盒富集甲基化修饰片段,并通过RT-qPCR检测m^(6)A甲基化修饰的RNA区域;采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)和逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞中WTAP、KDM4B蛋白和mRNA的表达水平。采用克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力。结果:沉默Kasumi-1细胞中WTAP的表达后,m^(6)A甲基化修饰在KDM4B mRNA 3’UTR的富集程度显著下降(P<0.01),沉默Kasumi-1和SKNO-1细胞中WTAP的表达可显著抑制KDM4B蛋白(P<0.001)和mRNA表达水平(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)、细胞体外克隆形成能力下降(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)。结论:t(8;21)AML细胞系中,WTAP通过调控KDM4B基因mRNA 3’UTR的m^(6)A修饰调控KDM4B的表达,沉默KDM4B表达可以抑制t(8;21)AML细胞增殖。 展开更多
关键词 MeRIP-qPCR 急性髓系白血病 t(8 21)染色体易位 KDM4B rna m^(6)A甲基化修饰
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