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RBMS3通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞侵袭及其上皮-间质转化 被引量:10
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作者 赵鹏 刘冬 +1 位作者 张卉 宋扬 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1032-1040,共9页
目的:研究RNA结合基序单链相互作用蛋白3(RNA-binding motif,single-stranded-interacting protein 3,RBMS3)对胃癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能的分子作用机制。方法:首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人正常胃黏膜上皮细胞GE... 目的:研究RNA结合基序单链相互作用蛋白3(RNA-binding motif,single-stranded-interacting protein 3,RBMS3)对胃癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能的分子作用机制。方法:首先采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人正常胃黏膜上皮细胞GES-1以及胃癌细胞MKN-28、MKN-45、NCI-N87和SGC-7901中RBMS3的表达水平。然后采用脂质体转染法将RBMS3过表达载体[RBMS3-pcDNA3.1(+)]转染至胃癌MKN-45和SGC-7901细胞中,同时设置空白对照组和空载体转染的阴性对照组。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证RBMS3过表达效果后,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中上皮-间质转化相关蛋白以及Wnt信号通路中β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平变化。最后,用Wnt通路激动剂氯化锂(lithium chloride,LiCl)处理RBMS3过表达的胃癌MKN-45和SGC-7901细胞后,再次采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化。结果:与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中RBMS3 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P值均<0.05)。RBMS3过表达质粒转染后,胃癌MKN-45和SGC-7901细胞中RBMS 3基因过表达,2种细胞的侵袭能力随之明显降低(P值均<0.05)。在RBMS3过表达的胃癌MKN-45和SGC-7901细胞中,N-钙黏蛋白(N-cadherin)和β-catenin表达水平均明显降低(P值均<0.05),而E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平明显升高(P值均<0.05)。用LiCl处理RBMS3过表达的MKN-45和SGC-7901细胞后,RBMS3对2种细胞侵袭的抑制作用均被部分抵消(P值均<0.05)。结论:RBMS3可能通过阻滞Wnt/β-catenin信号通路,抑制人胃癌细胞的侵袭和上皮-间质转化。 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因表达调控 肿瘤侵润 上皮-间质转化 WNT信号通路 rna结合基序单链相互作用蛋白3
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Genome-wide identification, evolution, and expression analysis of RNA-binding glycine-rich protein family in maize 被引量:2
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作者 Jianhua Zhangy Yanxin Zhaoy +2 位作者 Hailin Xiao Yonglian Zheng Bing Yue 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2014年第10期1020-1031,共12页
The RNA‐binding glycine‐rich protein(RB‐GRP)family is characterized by the presence of a glycine‐rich domain arranged in(Gly)n‐X repeats and an RNA‐recognition motif(RRM). RB‐GRPs participate in varied ph... The RNA‐binding glycine‐rich protein(RB‐GRP)family is characterized by the presence of a glycine‐rich domain arranged in(Gly)n‐X repeats and an RNA‐recognition motif(RRM). RB‐GRPs participate in varied physiological and biochemical processes especially in the stress response of plants. In this study, a total of 23 RB‐GRPs distributed on 10 chromosomes were identified in maize(Zea mays L.), and they were divided into four subgroups according to their conserved domain architecture. Five pairs of paralogs were identified,while none of them was located on the same chromosomal region, suggesting that segmental duplication is predominant in the duplication events of the RB‐GRPs in maize. Comparative analysis of RB‐GRPs in maize, Arabidopsis(Arabidopsis thaliana L.), rice(Oryza sativa L.), and wheat(Triticum aestivum)revealed that two exclusive subgroups were only identified in maize. Expression of eight ZmRB‐GRPs was significantly regulated by at least two kinds of stresses. In addition, cis‐elements predicted in the promoter regions of the ZmRB‐GRPs also indicated that these ZmRB‐GRPs would be involved in stress response of maize. The preliminary genome‐wide analysis of the RB‐GRPs in maize would provide useful information for further study on the function of the ZmRB‐GRPs. 展开更多
关键词 Gene expression MAIZE motif prediction phylogenetic analysis rnabinding glycine‐rich proteins
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RNA结合蛋白与人类男性不育 被引量:1
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作者 崔映宇 余龙 《阜阳师范学院学报(自然科学版)》 2001年第2期13-16,共4页
本文概括了控制精子正常产生的诸多候选基因在染色体上的定位、演化及其编码的 RNA 结合蛋白与人类男性精子发生之间关系研究方面的最新进展,为人类男性不育症的治疗和计划生育的顺利推行奠定了坚实的理论基础并展示出光明的前景。
关键词 rna结合蛋白 人类男性不育 无精因子 rna结合基序 SRGY盒 AZF 遗传缺陷
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Whole-exome sequencing reveals twovariants in thegene in two Chinese patients with left ventricular non-compaction cardiomyopathy 被引量:2
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作者 Qiqing Sun Jun Guo +6 位作者 Chanjuan Hao Ruolan Guo Xuyun Hu Yuanying Chen Weili Yang Wei Li Yingjun Feng 《Pediatric Investigation》 CSCD 2020年第1期11-16,共6页
Importance:Pathogenic variants in theRBM20 gene are associated with aggressive dilated cardiomyopathy(DCM).Recently,RBM20 was found to be associated with left ventricular non-compaction cardiomyopathy(LVNC).Thus far,o... Importance:Pathogenic variants in theRBM20 gene are associated with aggressive dilated cardiomyopathy(DCM).Recently,RBM20 was found to be associated with left ventricular non-compaction cardiomyopathy(LVNC).Thus far,only five families with LVNC have been reported to carry variants inRBM20.It remains unknown whether the variants inRBM20 associated with DCM can also cause LVNC.Objective:To elucidate the causativeRBM20 variant in two unrelated patients with both LVNC and DCM,and to identify the clinical characteristics associated with variants inRBM20.Methods:Trio whole-exome sequencing(WES)was performed.Variants were filtered and classified in accordance with the guidelines of the American College of Medical Genetics and Genomics(ACMG).Results:We identified two distinctde novo variants inRBM20(one per patient)in these two patients with LVNC.Both variants have been reported in patients with DCM,without the LVNC phenotype.Patient 1 was an 11-year-old girl who had DCM,LVNC,and heart failure;the ratio of noncompacted-to-compacted myocardium was 2.7:1.Ade novo heterozygous variant c.1907G>A(p.Arg636His)in exon 9 was identified in this patient.Patient 2 was a 13-year-old boy who had clinical phenotypes identical to those of Patient 1;the ratio of noncompacted-to-compacted myocardium was 3.2:1 in this patient.WES revealed ade novo heterozygous variant c.1909A>G(p.Ser637Gly)in exon 9.Both variants were previously characterized as pathogenic,and our study classified them as pathogenic variants based on the ACMG guidelines.Interpretation:We found that two patients with LVNC had variants inRBM20.Our results extended the clinical spectrum of the twoRBM20 variants and illustrated that the same variant inRBM20 can cause DCM,with or without the LVNC phenotype. 展开更多
关键词 Left ventricular non-compaction cardiomyopathy Dilated cardiomyopathy rna-binding motif protein 20 Trio whole-exome sequencing
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HITS-CLIP reveals sex-differential RNA binding and alterative splicing regulation of SRm160 in Drosophila
5
作者 Chen Qiu Yu Zhang +4 位作者 Yu-Jie Fan Ting-Lin Pang Yan Su Shuai Zhan Yong-Zhen Xu 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2019年第2期170-181,共12页
Serine/arginine (SR)-rich proteins are critical for the regulation of alternative splicing (AS), which generates multiple mRNA isoforms from one gene and provides protein diversity for cell differentiation and tissue ... Serine/arginine (SR)-rich proteins are critical for the regulation of alternative splicing (AS), which generates multiple mRNA isoforms from one gene and provides protein diversity for cell differentiation and tissue development. Genetic evidence suggests that Drosophila genital-specific overexpression of SR-related nuclear matrix protein of 160 kDa (SRml60), an SR prot&n with a PWI RNA-binding motif, causes defective development only in male flies and results in abnonnal male genital structures and abnormal testis. However, the molecular characterization of SRm160 is limited. Using the high-throughput sequencing of RNA isolated by crosslinking immunoprecipitation (HITS-CLIP) method in two sex-specific embryonic cell lines, S2 from the male and Kc from the female, we first identified the genome-wide RNA-binding characteristics of SRm160, which preferred binding to the exonic tri-nucleotide repeats GCA and AAC. We then validated this binding through both in vitro gel-shift assay and in vivo splicing of minigenes and found that SRm160 level affects AS of many transcripts. Furthermore, we identified 492 differential binding sites (DBS) of SRm160 varying between the two sex-specific cell lines.Among these DBS-containing genes, splicing factors were highly enriched, including transformer, a key regulator in the sex determination cascade. Analyses of fly mutants demonstrated that the SRm160 level affects AS isoforms of transformer. These findings shed crucial light on SRm160's RNA-binding specificity and regulation of AS in Drosophila sex determination and development. 展开更多
关键词 SR protein SRm160 HITS-CLIP rna-binding motif DROSOPHILA sexual development
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植物RNA结合蛋白的研究进展 被引量:7
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作者 唐蜻 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第1期38-41,共4页
从RNA结合蛋白的鉴定方法,RNA结合蛋白的基序,以及植物RNA结合蛋白在调控叶绿素mRNA的稳定和转录、植物抗逆反应、开花和激素信号传导等过程中的作用等方面介绍了植物RNA结合蛋白的研究进展。
关键词 rna结合蛋白 基因转录后调控 rna识别基序
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微小RNA-543靶向调控RNA结合蛋白47促进胃癌细胞的增殖和转移 被引量:2
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作者 王冰雨 刘文博 +5 位作者 宋步云 李勇 Lu Xue Wang Lu 赵小涵 檀碧波 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第1期52-56,共5页
目的探究微小RNA-543(miR-543)通过抑制RNA结合蛋白47(RBM47)对胃癌细胞增殖和转移的影响和机制。方法荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测40例新鲜胃癌和癌旁组织中miR-543表达;检测正常胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MKN45、NC... 目的探究微小RNA-543(miR-543)通过抑制RNA结合蛋白47(RBM47)对胃癌细胞增殖和转移的影响和机制。方法荧光实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测40例新鲜胃癌和癌旁组织中miR-543表达;检测正常胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MKN45、NCIN87、AGS中miR-543的表达。分析miR-543表达与临床病理特征之间的关系。生物信息学分析miR-543的生物学功能和靶基因。双荧光素酶报告基因分析miR-543和靶基因RBM47之间调控关系。应用miR-543抑制物(inhibitor)干扰胃癌AGS细胞株中miR-543表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法、划痕实验、Transwell小室实验检测胃癌细胞株AGS增殖、侵袭、迁移能力;RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测AGS中人细胞周期素D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、RBM47、组织抑制剂1(TIMP1)表达。数据应用SPSS 25.0统计软件分析。结果miR-543在胃癌组织中(2.476±0.812)的表达高于癌旁组织(1.165±0.295,t=9.880,P<0.01),在胃癌细胞株中的表达均高于GES-1(1.130±0.141,t=9.842,P<0.05;t=13.17,P<0.01;t=35.07,P<0.01),miR-543在AGS细胞株中表达量最高(5.120±0.545)。miR-543表达与胃癌患者淋巴结转移有关(阳性例数:27)。富集分析结果显示miR-543与多种生物学过程有关,RBM47基因是miR-543下游靶基因。RBM47基因在胃癌组织中表达(0.663±0.251)低于癌旁正常组织(1.604±0.613,P<0.01),相关性分析结果显示RBM47基因与miR-543负相关(r=-0.724),双荧光素酶报告基因分析miR-543直接抑制RBM47表达。用miR-543 inhibitor转染AGS后,胃癌细胞增殖、侵袭、迁移能力明显下降(P<0.01);Cyclin D1、MMP-9的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),而RBM47、TIMP1的表达明显增高(P<0.01)。结论miR-543可通过抑制RBM47表达促进胃癌细胞的增殖和转移能力。 展开更多
关键词 胃癌 微小rna-543 rna结合蛋白47 侵袭 迁移 生物信息学
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IGF-1调控RBM3表达抑制低温应激诱导牦牛卵丘细胞凋亡 被引量:6
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作者 潘阳阳 王萌 +8 位作者 芮弦 王立斌 何翃闳 王靖雷 马睿 徐庚全 崔燕 樊江峰 余四九 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2285-2296,共12页
【目的】探索动物机体遭受低温应激及细胞冷冻过程中胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor,IGF-1)与RNA结合基序蛋白3(RNA-binding motif protein 3,RBM3)之间的作用关系,及IGF-1参与哺乳动物细胞抑制低温损伤的机制。【方法... 【目的】探索动物机体遭受低温应激及细胞冷冻过程中胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor,IGF-1)与RNA结合基序蛋白3(RNA-binding motif protein 3,RBM3)之间的作用关系,及IGF-1参与哺乳动物细胞抑制低温损伤的机制。【方法】体外培养牦牛卵丘细胞,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫荧光技术检测不同浓度(0、50、100、200 ng·mL^-1)IGF-1和低温应激(30℃、25℃)对RBM3表达影响。卵丘细胞经最佳浓度IGF-1(100 ng·mL^-1)和对照组(0 IGF-1)作用30 h后,低温(30℃、25℃)应激8 h,比较RBM3表达水平。评估在低温应激组、100 ng·mL^-1IGF-1处理组和100 ng·mL^-1IGF-1+RBM3抑制剂处理组,卵丘细胞25℃应激8 h后凋亡水平差异,并从基因和蛋白水平检测3组卵丘细胞中凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达水平。【结果】(1)IGF-1作用卵丘细胞后RBM3基因和蛋白的表达水平显著上升(P<0.05),其在100 ng·mL^-1IGF-1处理组最高,免疫荧光检测显示100和200 ng·mL^-1IGF-1处理组卵丘细胞胞核和细胞质均可检测到RBM3,而0和50 ng·mL^-1处理组,RBM3仅定位在细胞质。(2)卵丘细胞经受低温应激时,RBM3的表达水平显著增加,但其在30℃和25℃应激处理组差异不显著;100 ng·mL^-1IGF-1作用卵丘细胞30 h后,其再次接受25℃、8 h低温应激,卵丘细胞中RBM3的表达水平显著高于低温应激前未经IGF-1处理卵丘细胞中RBM3的表达水平,且该处理组卵丘细胞胞质和胞核均可检测到RBM3。(3)25℃应激后,100 ng·mL^-1IGF-1处理组卵丘细胞的凋亡率为(15.94±2.03)%,显著低于其在未经IGF-1处理组和100 ng·mL^-1IGF-1+RBM3抑制剂处理组中卵丘细胞的凋亡率,两者分别为(25.86±1.09)%和(20.14±2.65)%,在100 ng·mL^-1IGF-1处理组Bcl-2的表达水平显著高于其余两个处理组(P<0.05),而Bax的表达水平显著低于其余两个处理组(P<0.05)。【结论】RBM3参与牦牛卵丘细 展开更多
关键词 牦牛 rna结合基序蛋白3(RBM3) 胰岛素样生长因子(IGF-1) 低温应激 细胞凋亡
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RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解 被引量:1
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作者 颜秋霞 曾鹏 +9 位作者 黄树强 谭翠钰 周秀琴 乔静 赵晓英 冯玲 朱振杰 张国志 胡鸿 陈彩蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期9-16,共8页
目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采... 目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采用RT-qPCR和Westernblotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Westernblotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果RT-qPCR和Westernblotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P<0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反。Westernblotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05)。结论RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。 展开更多
关键词 X连锁rna结合基序蛋白 M2型丙酮酸激酶 膀胱癌 PKM2 糖酵解
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亚低温上调冷休克蛋白RBM3表达减轻肾脏缺血-再灌注损伤 被引量:5
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作者 宋克芹 肖琦 +1 位作者 肖建生 罗凯锋 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期571-578,共8页
目的探讨亚低温对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的作用,以及RNA结合基序蛋白3(RBM3)及其下游效应分子在这一过程中的表达情况。方法健康SD雄性大鼠18只,随机分为正常对照(NC)组、IRI组和亚低温预处理(MHP)组,每组6只。通过检测血清肌酐水平... 目的探讨亚低温对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的作用,以及RNA结合基序蛋白3(RBM3)及其下游效应分子在这一过程中的表达情况。方法健康SD雄性大鼠18只,随机分为正常对照(NC)组、IRI组和亚低温预处理(MHP)组,每组6只。通过检测血清肌酐水平评价肾功能,苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织损伤情况,蛋白质印迹法检测肾脏组织的RBM3、Yes相关蛋白1(YAP1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量,免疫组织化学染色进一步检测RBM3及YAP1蛋白的表达情况,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肾脏组织细胞凋亡情况,通过测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性检测肾脏组织氧化应激水平。结果与NC组相比较,IRI组和MHP组血清肌酐水平、肾脏组织病理损伤评分均升高,RBM3、YAP1和Nrf2蛋白表达水平均升高,Bcl-2/Bax比值均降低,细胞凋亡率均升高,MDA含量均升高,SOD活性均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与IRI组相比较,MHP组血清肌酐水平、肾脏组织病理损伤评分均降低,RBM3、YAP1和Nrf2蛋白表达水平均升高,Bcl-2/Bax比值升高,细胞凋亡率降低,MDA含量降低,SOD 活性升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 亚低温对肾脏IRI 具有保护作用,可减轻IRI 所致细胞凋亡和氧化应激损伤,其机制可能为亚低温上调RBM3 及其下游效应分子YAP1 和Nrf2 的表达水平。 展开更多
关键词 亚低温 rna结合基序蛋白3(RBM3) Yes相关蛋白1(YAP1) 核因子E2相关因子2(Nrf2) 肾移植 缺血-再灌注损伤 氧化应激 丙二醛(MDA) 超氧化物歧化酶(SOD)
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低温诱导的RBM3对各器官缺血再灌注损伤研究进展
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作者 孙路轩 党晓平 孙子健 《新医学》 CAS 2024年第4期260-264,共5页
缺血再灌注损伤(IRI)是一种复杂的血流动力学紊乱状态,致死率极高,且目前的治疗方法相对有限。亚低温治疗是临床上公认的一种缓解缺血、缺氧损伤的治疗方式,尤其在脑保护中的研究较多。多项研究表明,RNA结合基序蛋白3(RBM3)作为一种冷... 缺血再灌注损伤(IRI)是一种复杂的血流动力学紊乱状态,致死率极高,且目前的治疗方法相对有限。亚低温治疗是临床上公认的一种缓解缺血、缺氧损伤的治疗方式,尤其在脑保护中的研究较多。多项研究表明,RNA结合基序蛋白3(RBM3)作为一种冷应激蛋白,主要在低温诱导下产生,可促进翻译,减轻氧化应激、降低细胞凋亡率。因此,诱导RBM3可能代表一种治疗IRI的新策略,代替亚低温治疗,减轻低温对机体的不良影响。基于这一观点,文章对RBM3蛋白功能的最新发现进行综述,重点关注RBM3对各器官IRI相关疾病的保护作用以及未来前景,为相关研究提供新思路。 展开更多
关键词 低温 rna结合基序蛋白3 脑缺血再灌注损伤 心缺血再灌注损伤 肝缺血再灌注损伤 肾缺血再灌注损伤
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RNA结合基序蛋白3在神经系统疾病中的神经保护作用
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作者 凌园园 蒋国会 《中国临床神经科学》 2024年第4期469-473,共5页
RNA结合基序蛋白3(RBM3)是一种RNA结合蛋白,在低温诱导下RBM3表达增加。近年来,RBM3在中枢神经系统中对神经的保护作用引起了人们的重点关注,被认为是一个具有潜力的治疗靶点。文中对RBM3的表达、神经保护作用机制以及在各种神经系统疾... RNA结合基序蛋白3(RBM3)是一种RNA结合蛋白,在低温诱导下RBM3表达增加。近年来,RBM3在中枢神经系统中对神经的保护作用引起了人们的重点关注,被认为是一个具有潜力的治疗靶点。文中对RBM3的表达、神经保护作用机制以及在各种神经系统疾病中的研究进行了综述。 展开更多
关键词 rna结合基序蛋白3 神经保护作用 神经系统疾病 机制
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RBM20和MURC双基因杂合变异对心肌细胞结构和生物学特性的影响
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作者 李乔薇 袁音 +2 位作者 朱文晴 杨艳芳 黄峰 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第10期882-892,899,共12页
目的探讨RNA结合基元蛋白20(RBM20)和肌肉相关卷曲螺旋蛋白(MURC)双基因杂合变异对人心肌细胞AC16(成人左心室心肌细胞系)结构和生物学特性的影响。方法构建对照组、空载组、野生组、MURC或RBM20单基因突变组、RBM20和MURC双基因突变组... 目的探讨RNA结合基元蛋白20(RBM20)和肌肉相关卷曲螺旋蛋白(MURC)双基因杂合变异对人心肌细胞AC16(成人左心室心肌细胞系)结构和生物学特性的影响。方法构建对照组、空载组、野生组、MURC或RBM20单基因突变组、RBM20和MURC双基因突变组的心肌细胞AC16;采用Western blotting、免疫荧光染色和实时荧光定量PCR观察心肌细胞中RBM20和MURC定位、细胞表面积、骨架排列、骨架相关蛋白、细胞极性、细胞内钙浓度;采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡;采用Ki-67染色检测心肌细胞增殖;采用划痕实验检测心肌细胞迁移。结果与RBM20或MURC单基因突变相比,RBM20和MURC双基因突变对心肌细胞结构和生物学特性影响更显著,表现为细胞表面积增大,细胞肥大相关基因肌球蛋白重链7和α肌动蛋白基因m RNA表达升高,骨架排列紊乱度升高,骨架蛋白β-tubulin和Vinculin荧光强度降低(均P<0.01);极性蛋白Part6荧光强度升高(P<0.05);心肌细胞凋亡率升高,增殖活性下降,迁移率增高,细胞内钙离子浓度升高(均P<0.01)。结论RBM20和MURC双基因杂合变异使心肌细胞结构及生物学特性发生改变,表现为细胞表面积增大,骨架排列紊乱,极性改变,凋亡率和迁移率升高,增殖活性和钙处理能力降低。 展开更多
关键词 rna结合基元蛋白20 肌肉相关卷曲螺旋蛋白 双基因杂合变异 心肌病
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RBMX在肝细胞癌中的临床意义及其对免疫微环境的影响
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作者 何友梧 余谦 邓甘露 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第3期398-405,共8页
目的:利用肿瘤相关数据库探讨RNA结合基序蛋白X连锁(RBMX)在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义,同时探讨其与免疫微环境(TIME)的关系。方法:使用GEO数据库和TCGA数据库分析多个HCC数据集中RBMX mRNA的表达情况,分析其与临床参数的关系,用... 目的:利用肿瘤相关数据库探讨RNA结合基序蛋白X连锁(RBMX)在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义,同时探讨其与免疫微环境(TIME)的关系。方法:使用GEO数据库和TCGA数据库分析多个HCC数据集中RBMX mRNA的表达情况,分析其与临床参数的关系,用ROC曲线评价RBMX在HCC诊断模型中的价值。利用Kaplan-Meier生存曲线分析RBMX表达水平与HCC患者生存预后的相关性。利用CIBERSORT、ssGSEA、TIMER数据库分析RBMX表达与免疫指标的相关性;并利用TISCH数据库分析RBMX在不同HCC单细胞数据集中免疫细胞的富集情况。利用免疫组织化学(IHC)验证RBMX在23例HCC癌组织与癌旁组织的表达情况。通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)验证RBMX在HCC细胞系中的表达。采用CCK-8法、EdU染色实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移。结果:多个数据集均显示RBMX在HCC组织中表达上调(P<0.001),临床分级越高、淋巴结转移程度越高,表达水平越高(P<0.001)。RBMX对HCC具有显著的诊断价值(AUC=0.936),RBMX与HCC较短的总生存时间呈正相关关系(P<0.001)。RBMX高表达与M0巨噬细胞、Treg细胞、Tprolif浸润密切相关(P<0.05)。23例HCC组织标本及5个HCC细胞系表明RBMX在HCC中的异常上调。敲低RBMX可抑制HCC细胞的增殖与迁移。结论:RBMX可能是一种与免疫相关的HCC预后生物标志物。 展开更多
关键词 rna结合基序蛋白X连锁 肝细胞癌 免疫微环境
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RBM6通过GSK-3β/β-catenin调节途径对膀胱尿路上皮癌细胞发挥抗增殖和促进凋亡作用 被引量:4
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作者 杨展 瞿长宝 +4 位作者 张勇 王亚轩 黎玮 温进坤 刘凯隆 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期909-916,共8页
RNA结合模体蛋白(RBM)家族几乎在所有细胞中均有表达,而且在进化上高度保守。以前的研究表明,RBM5在膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)组织中表达下调,由此引起的细胞凋亡减少,进而促进肿瘤的进展。然而,RBM5氨基酸序... RNA结合模体蛋白(RBM)家族几乎在所有细胞中均有表达,而且在进化上高度保守。以前的研究表明,RBM5在膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)组织中表达下调,由此引起的细胞凋亡减少,进而促进肿瘤的进展。然而,RBM5氨基酸序列与其同源的RBM6在膀胱尿路上皮癌中的作用及相关机制尚不清楚。本研究检测RBM6在膀胱尿路上皮癌中的表达,探索其在膀胱癌细胞系中过表达对细胞增殖和凋亡的影响。利用qRT-PCR和Western印迹等技术,研究发现,RBM6在人膀胱尿路上皮癌组织和所检测的2个膀胱癌细胞系中表达均显著下调,并且其下调程度与患者的预后不良呈正相关。MTS检测细胞增殖的结果显示,RBM6过表达导致细胞增殖活性下降。细胞克隆形成实验结果也表明,RBM6过表达抑制细胞克隆形成能力(P<0.01)。原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay, TUNEL染色)检测细胞凋亡表明,在RBM6过表达的细胞中,TUNEL阳性细胞数由对照组的17.17±3.27增加到44.00±8.04(P<0.05)。RBM6抗增殖及促凋亡的作用机制研究发现,在T24细胞中过表达RBM6后,β-联蛋白(β-catenin)和G1/S-特异性细胞周期蛋白-D1(G1/S-specific cyclin-D1,cyclin D1)mRNA表达水平分别降低65%和79%,对应的蛋白质水平分别降低60%和73%;反之,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(cyclin dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A/p21)mRNA表达水平升高约1.9倍,对应蛋白质水平升高约1.8倍。重要的是,糖原合酶激酶3 beta(glycogen synthase kinase-3 beta,GSK-3β)磷酸化水平升高约2.4倍。细胞过表达β-联蛋白促进细胞增殖(P<0.05),而利用小分子化合物LY294002促进GSK-3β磷酸化后,抑制细胞增殖(P<0.05)。综上所述,RBM6通过GSK-3β/β-catenin调节途径对膀胱尿路上皮癌细胞发挥抗增殖和促进凋亡作用。干预该调节途径可能是治疗膀胱尿路上皮癌的潜� 展开更多
关键词 膀胱尿路上皮癌 rna结合模体蛋白6 信号通路 细胞增殖 凋亡
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RNA结合蛋白RBM38表达对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响 被引量:2
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作者 郭中叶 蒋世一 +3 位作者 邱云 廖克曼 侯鹏 鲁晓杰 《临床神经外科杂志》 CAS 2019年第4期282-288,共7页
目的 探讨RNA结合蛋白RBM38(RNA结合基序蛋白38,RNA-binding motif protein 38)在胶质瘤组织和细胞中的表达水平及其对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的调节作用。方法 采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检... 目的 探讨RNA结合蛋白RBM38(RNA结合基序蛋白38,RNA-binding motif protein 38)在胶质瘤组织和细胞中的表达水平及其对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的调节作用。方法 采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测胶质瘤组织和瘤旁正常组织的RBM38表达水平。采用qRT-PCR和Western blot检测胶质瘤细胞U87、U251和正常星形胶质细胞HA1800的RBM38表达水平。用免疫组化染色检测59例胶质瘤组织的RBM38表达水平,并分析其与临床病理资料的关系。将靶向RBM38的特异性小干扰RNA运用脂质体介导转染法转染至胶质瘤细胞U87和U251。应用CCK-8(cholecystokinin-8)增殖实验、划痕实验、Transwell小室实验、流式细胞仪测凋亡细胞,检测RBM38对于胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。采用qRT-PCR检测抑制RBM38表达后肿瘤细胞P53基因的表达水平。结果 相较于瘤旁的脑组织,胶质瘤组织RBM38的表达量明显升高(P<0.05)。胶质瘤细胞中的RBM38表达水平明显高于正常胶质细胞(均P<0.001)。免疫组化结果显示,与低级别胶质瘤相比,高级别胶质瘤的RBM38表达水平更高(P<0.05)。抑制RBM38的表达后,胶质瘤细胞U87和U251的增殖速率明显下降、迁移距离变短、能透过生物膜的细胞数目明显下降(均P<0.05)。下调了RBM38的表达后胶质瘤细胞的凋亡比率升高(P<0.05)。被抑制了RBM38表达的胶质瘤细胞P53基因的表达水平升高(P<0.05)。结论 RBM38在胶质瘤组织及细胞系中呈高表达,RBM38的高表达与胶质瘤的临床分级密切相关。下调RBM38的表达后能抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞的凋亡,并使P53基因的表达水平增高;可能为临床诊断和治疗胶质瘤提供新的靶点。 展开更多
关键词 rna结合蛋白 rna结合基序蛋白38 胶质瘤 细胞增殖 细胞迁移
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RNA结合基序蛋白20在心肌病中作用的研究进展 被引量:3
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作者 杨珍 刘宇宁 +1 位作者 余薇 郑萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1505-1508,共4页
心肌病是异质性的心肌病变,表现为心肌结构和功能的异常,心肌病最终会导致心力衰竭甚至死亡。RNA结合基序蛋白20(RBM 20)在心肌中高度表达,是富含丝氨酸/精氨酸蛋白家族的一种,对RNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程起着重要作用,参... 心肌病是异质性的心肌病变,表现为心肌结构和功能的异常,心肌病最终会导致心力衰竭甚至死亡。RNA结合基序蛋白20(RBM 20)在心肌中高度表达,是富含丝氨酸/精氨酸蛋白家族的一种,对RNA剪接体的组装和选择性剪接的调控过程起着重要作用,参与心肌病的发生、发展。RBM 20调控Titin、RyR 2、LDB 3、CaMKIIδ、CACNA1C等多种基因的选择性剪接,这些基因与心脏舒张功能、肌节组装、离子转运密切相关。该文将对RBM 20在心肌病中的作用和RBM 20调控机制进行综述,为心肌病的防治提供相应的理论参考。 展开更多
关键词 rna结合基序蛋白20 心肌病 心力衰竭 TITIN RyR2 CA 2+/CaM依赖激酶
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牦牛RBM3的基因克隆及其在不同繁殖时期卵巢、输卵管、子宫中的表达定位 被引量:3
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作者 张晖 潘阳阳 +4 位作者 王靖雷 张瑞 黄嘉馨 余四九 崔燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2202-2214,共13页
旨在研究RBM3在牦牛(Bos grunniens)生殖相关调控中的作用。本研究以卵泡期、黄体期和妊娠期4~6岁健康雌性牦牛各3头为采集对象,采集其卵巢、子宫和输卵管共9组试验样品,每组设置3个生物学重复。利用基因克隆技术克隆牦牛RBM3基因并进... 旨在研究RBM3在牦牛(Bos grunniens)生殖相关调控中的作用。本研究以卵泡期、黄体期和妊娠期4~6岁健康雌性牦牛各3头为采集对象,采集其卵巢、子宫和输卵管共9组试验样品,每组设置3个生物学重复。利用基因克隆技术克隆牦牛RBM3基因并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)分别在基因层面和蛋白层面检测RBM3在牦牛子宫、卵巢和输卵管中的相对表达量;利用免疫组织化学(immunocytochemistry,IHC)方法检测RBM3蛋白在试验样品中的分布定位。牦牛RBM3基因(GenBank No.:MF142258.1)被成功克隆并预测出二、三级结构,发现其与野牦牛亲缘性最近,基因编码区第51位、98位核苷酸不同于常见哺乳动物,生物信息学分析预测其编码的蛋白质为稳定的非跨膜蛋白。RBM3蛋白在本试验9组样品的表达量有如下差异:在卵巢中,黄体期显著高于卵泡期和妊娠期(P<0.05);输卵管中,卵泡期显著低于黄体期和妊娠期(P<0.05);子宫上,卵泡期显著高于黄体期和妊娠期(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,RBM3在卵巢中的主要表达位置是卵泡膜、颗粒层和黄体细胞;在输卵管的表达位置是黏膜上皮;子宫上的表达主要以子宫内膜和子宫腺为主。本研究结果提示,RBM3可能参与牦牛个体发情周期和妊娠过程的调控以及妊娠识别等过程,为RBM3这一冷应激调节因子参与牦牛对高原环境的适应性生理机制方面的研究提供参考。 展开更多
关键词 牦牛 生殖调控 rna结合基序蛋白3 冷应激
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肺腺癌组织中RNA结合基序蛋白38和p53基因的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 尚自强 童莹 +3 位作者 宋佳 薛亚斌 况志星 王洪江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期900-903,共4页
目的:分析肺腺癌组织中RNA结合基序蛋白38基因(RNA-binding motif protein 38,RBM38)及抑癌基因p53 m RNA和蛋白的表达情况,探讨其在肺腺癌发生发展中的意义。方法:取2012年10月至2015年6月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的50例肺腺癌患... 目的:分析肺腺癌组织中RNA结合基序蛋白38基因(RNA-binding motif protein 38,RBM38)及抑癌基因p53 m RNA和蛋白的表达情况,探讨其在肺腺癌发生发展中的意义。方法:取2012年10月至2015年6月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的50例肺腺癌患者的肿瘤组织标本作为实验组,相对应的癌旁组织标本作为对照组。用RT-PCR法检测两组中RBM38及p53m RNA相对表达量,用Western blotting法检测两组中RBM38及p53蛋白的相对表达量。结果:实验组RBM38 m RNA及蛋白相对表达量(0.357±0.170、0.294±0.149)均高于对照组(0.271±0.128、0.206±0.099),实验组p53 m RNA及蛋白(0.457±0.208、0.671±0.200)相对表达量均高于对照组(0.308±0.167、0.332±0.071),差异均有统计学意义(均P<0.01)。RBM38表达与肺腺癌患者TNM分期、浸润深度有关(P<0.05),p53表达与患者TNM分期有关(P<0.05)。实验组RBM38与p53蛋白表达呈负相关(r=-0.626,P<0.01)。结论:肺腺癌组织RBM38、p53 m RNA及蛋白表达均高于癌旁组织,两者均与患者TNM分期等病理参数关系密切。随着RBM38蛋白表达的增加p53蛋白随之减少,RBM38可能通过抑制p53的翻译从而促进肺癌的发生发展,RBM38可能成为肺腺癌分子靶向治疗的靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 rna结合基序蛋白38基因 P53基因
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RNA结合基序蛋白20相关心肌病的研究进展
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作者 孙肖云 申阳 洪葵 《临床心血管病杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期761-767,共7页
扩张型心肌病(DCM)是临床常见的原发性心肌病之一,是造成心脏性猝死的重要原因,至今已报道51个相关致病基因。不同基因导致的DCM亚型具有特异性临床特征与遗传异质性。其中RNA结合基序蛋白20(RNA-binding motif protein 20,RBM20)编码... 扩张型心肌病(DCM)是临床常见的原发性心肌病之一,是造成心脏性猝死的重要原因,至今已报道51个相关致病基因。不同基因导致的DCM亚型具有特异性临床特征与遗传异质性。其中RNA结合基序蛋白20(RNA-binding motif protein 20,RBM20)编码心肌特异性mRNA剪接调节因子,是DCM明确致病基因之一。RBM20基因相关DCM具有遗传外显率高、发病年龄早、心脏猝死率高等严重临床表现。其独特的致病分子机制也显示出其作为心力衰竭潜在治疗靶点的可能性。本文将对RBM20相关DCM的发病机理、分子遗传学、临床特征与治疗进行进展性综述,对于DCM亚型的研究强调了基因检测在心血管精准医疗中的重要性。 展开更多
关键词 扩张型心肌病 rna结合基序蛋白20 rna结合蛋白 基因检测
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