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黄秋葵果实转录组测序及分析 被引量:9
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作者 李和平 姚运法 +2 位作者 练冬梅 赖正锋 洪建基 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期121-127,共7页
为了研究黄秋葵果实转录组中功能基因的表达情况,采用RNA-Seq技术对3份黄秋葵果实进行测序分析。结果显示,3份测序材料组装后共获得了77 476个Unigene序列,有61 891个Unigene在4大数据库中得到注释,占79.88%;以KEGG代谢途径数据库为依据... 为了研究黄秋葵果实转录组中功能基因的表达情况,采用RNA-Seq技术对3份黄秋葵果实进行测序分析。结果显示,3份测序材料组装后共获得了77 476个Unigene序列,有61 891个Unigene在4大数据库中得到注释,占79.88%;以KEGG代谢途径数据库为依据,可将13 336个黄秋葵果实的Unigene分成128个代谢途径;在黄秋葵果实转录组中发现3 830个SSR(Simple Sequence Repeats)位点,分布在3 569条Unigenes中,发生频率为4.61%。 展开更多
关键词 黄秋葵 果实 rna-seq技术 SSR标记
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基于转录组挖掘不同性别贵州白山羊肌肉生长发育的关键基因及PI3K/ATK信号通路分析 被引量:5
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作者 安清明 王星 +3 位作者 吴震洋 孟金柱 赵园园 宋兴超 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期213-222,共10页
胴体生长发育是影响山羊养殖效益的重要评价指标,旨在通过RNA-Seq技术挖掘不同性别贵州白山羊生长发育的关键候选基因,为贵州白山羊生长发育研究提供理论依据,以同等饲养水平条件下贵州白山羊为研究对象,测定2周龄不同性别贵州白山羊的... 胴体生长发育是影响山羊养殖效益的重要评价指标,旨在通过RNA-Seq技术挖掘不同性别贵州白山羊生长发育的关键候选基因,为贵州白山羊生长发育研究提供理论依据,以同等饲养水平条件下贵州白山羊为研究对象,测定2周龄不同性别贵州白山羊的屠宰性能指标,通过背最长肌转录组分析,筛选差异表达基因,分析相关基因的信号通路,最后通过RT-qPCR对筛选的基因进行验证。结果表明,测序得到的Raw reads进行过滤后,6个样本共得到78.99 Gb Clean Data,单个样本获得Clean reads在83030104~95739024条,各样本与参考基因组的比对效率在93.75%~94.79%,共获得25089个表达基因,筛选差异表达基因共获得1077个差异基因,其中194个为新发现转录本基因,发现的差异基因中563个在公羊背最长肌中表达显著上调,514个表达显著下调。对获得的1077个差异基因进行GO功能富集分析,其中587个为显著富集(Q-value≥0.05),主要分为三大类35个亚类。KEGG信号通路分析发现,这些差异基因共参与243条信号通路,其中参与PI3K/AKT信号通路相关的基因最为富集,共注释到32个基因,其中17个注释基因显著上调,1个显著下调,且在该通路中COL4A1和COL4A2基因编码蛋白共表达估值最高,ITGAV基因编码蛋白互作最为丰富。筛选出6个与贵州白山羊背最长肌生长发育相关的差异表达基因进行验证,其中FHL3、WFIKKN2、SOX6基因在公羊背最长肌中为上调基因,QSOX2、MYH2、LAP基因为下调基因,RT-qPCR结果显示,这6个候选基因的mRNA表达趋势与转录组测序结果一致,且差异均较为显著(P<0.05),表明测序结果可靠。基于RNA-Seq技术筛选出不同性别贵州白山羊背最长肌的差异表达基因1077个,其中194个为新发掘转录本基因,筛选的差异表达基因及PI3K/AKT信号通路与贵州白山羊背最长肌生长发育相关。 展开更多
关键词 贵州白山羊 rna-seq技术 不同性别 生长发育 差异表达基因
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不同性别滩羊背最长肌中肌肉发育相关LncRNA的筛选及分析
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作者 宋昀静 田彦梅 +2 位作者 孟科 尤科梅 冯登侦 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期219-227,共9页
旨在从基因水平分析LncRNA对公母滩羊肌肉发育的影响,因肌肉的生长发育是养殖业经济效益的重要指标,而骨骼肌的发育与产肉性能显著相关。为初步揭示影响肌肉发育差异的分子机理,从而进行转录组测序分析,筛选与绵羊肌肉发育相关的LncRNA... 旨在从基因水平分析LncRNA对公母滩羊肌肉发育的影响,因肌肉的生长发育是养殖业经济效益的重要指标,而骨骼肌的发育与产肉性能显著相关。为初步揭示影响肌肉发育差异的分子机理,从而进行转录组测序分析,筛选与绵羊肌肉发育相关的LncRNA。通过对公母滩羊各3头(8月龄)的背最长肌组织进行全转录组测序(RNA-seq)和分析,从而筛选出可能与滩羊肌肉发育相关的LncRNA。结果显示:鉴定到的8513个LncRNAs中共筛选出45个组间差异表达LncRNAs,其中18个上调,27个下调。预测DELncRNA的co_location靶基因并进行GO功能富集分析结果显示:靶基因显著富集在268个GO条目中,其中有促生长激素分泌细胞分化、典型的Wnt受体信号通路参与对细胞凋亡过程的负向调节、对生长激素分泌的正向调节、cAMP介导的信号传递等条目;KEGG通路富集分析结果表明,DEGs富集在AMPK、NF-KB、PI3K-AKT、MAPK、cAMP、FOXO等信号通路,进一步筛选出TCONS_00017263、TCONS_00147966、TCONS_00163484、TCONS_00079802、TCONS_00079803这5个可能参与肌肉发育相关的LncRNA。对随机挑选的6个DELs进行实时荧光定量PCR验证,其结果的表达趋势与转录组测序结果趋势一致,进一步验证了测序结果的准确性。研究获得的这些DELncRNA可能造成了滩羊公母肌肉生长发育上的差异,同时这些相关LncRNA为调控肌肉发育提供了更多信息,并为今后宁夏地区不同性别滩羊肉用性能的分子育种提供了科学依据。 展开更多
关键词 滩羊 Lncrna rna-seq技术 肌肉发育 QRT-PCR
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转录组学在抑菌机制中的应用研究进展 被引量:6
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作者 赵圣明 赵岩岩 +1 位作者 马汉军 别小妹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期259-264,共6页
微生物是导致食品腐败变质和引起食源性疾病的主要因素,如何抑制微生物的生长是食品及医药领域的一个重要研究方向,因此,对抑菌物质抑菌机制的研究也已成为目前国内外研究的热点问题。利用转录组学技术可以从转录组水平上揭示各种抑菌... 微生物是导致食品腐败变质和引起食源性疾病的主要因素,如何抑制微生物的生长是食品及医药领域的一个重要研究方向,因此,对抑菌物质抑菌机制的研究也已成为目前国内外研究的热点问题。利用转录组学技术可以从转录组水平上揭示各种抑菌物质抑制微生物生长的分子机制。文中综述了转录组学主要的研究方法,介绍了目前应用最多的RNA测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)的技术特点以及转录组学在抑菌机制研究中的国内外研究现状。随着高通量测序技术的迅速发展,转录组学在抑菌机制研究中将具有更广阔的应用前景。 展开更多
关键词 微生物 转录组学 rna-seq技术 抑菌机制
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非小细胞肺癌并发肺栓塞患者差异基因lncRNA MALAT1的筛选与验证 被引量:1
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作者 牛海文 李宏 +2 位作者 何丽丽 唐乐 罗琴 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期718-726,共9页
目的 通过高通量测序(RNA-Seq)技术筛选非小细胞肺癌(NSCLC)并发肺血栓栓塞症(PTE)患者中差异基因表达谱,探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与NSCLC并发PTE疾病的关联性。方法 收集2020-01-01-2020-12-30就诊于... 目的 通过高通量测序(RNA-Seq)技术筛选非小细胞肺癌(NSCLC)并发肺血栓栓塞症(PTE)患者中差异基因表达谱,探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)与NSCLC并发PTE疾病的关联性。方法 收集2020-01-01-2020-12-30就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院确诊的NSCLC并发PTE患者、单纯NSCLC患者及同期门诊健康体检者的临床资料及其外周血样本各4例。(1)差异基因lncRNA MALAT1的筛选:NSCLC并发PTE患者、单纯NSCLC患者和健康体检者的外周血各4例,应用RNA-Seq行差异基因lncRNA表达谱测序,行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库分析差异基因相关的富集及信号通路。(2)对筛选出的lncRNA MALAT1差异表达的验证:上述3组各30例,应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测患者外周血MALAT1、缺氧反应诱导因子1α(HIF-1α)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)及活性氧(ROS)的表达水平,通过单因素方差分析、LSD-t检验比较组间差异,采用简单线性回归分析MALAT1表达水平与HIF-α、NOX4及ROS表达水平之间的相关性。结果 (1)NSCLC并发PTE患者对比单纯NSCLC患者,共筛选出727个差异表达长链非编码RNA(lncRNA),其中327个表达上调,400个表达下调;单纯NSCLC患者与健康对照组对比,共筛选出794个差异表达lncRNA,其中414个表达上调,380个表达下调。利用Excel 2019得到NSCLC并发PTE组对比单纯NSCLC组,以及单纯NSCLC组对比健康对照组患者共同的差异基因,分别为MERGE.7330.1、MALAT1、MERGE.9869.8、MERGE.11060.20、MERGE.32224.4、MERGE.27691.1、MERGE.8536.1、MERGE.3176.3等8个基因。进一步发现,共同参与的KEGG通路主要涉及HIF-1α信号通路、B细胞受体信号通路、系统性红斑狼疮等。(2)3组中MALAT1、HIF-1α、NOX4及ROS的表达水平有共同的规律,即由高到低依次为NSCLC并发PTE组、单纯NSCLC组及健康对照组,MALAT1测值分别为1.78±0.64、1.33±0. 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 肺栓塞 rna-seq技术 转移相关肺腺癌转录本1 相关性分析
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风味甜瓜中柠檬酸代谢研究进展及RNA-seq技术应用现状 被引量:4
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作者 汤谧 刘晔 +5 位作者 任俭 张娜 曾红霞 程维舜 李煜华 孙玉宏 《长江蔬菜》 2016年第24期40-44,共5页
随着人们生活水平的提高,兼具品质、营养和健康特征的甜瓜新品种——风味甜瓜应运而生,探索适度的风味甜瓜糖酸比非常重要,而目前对甜瓜果实中主要有机酸成分柠檬酸的代谢机制尚不清晰,因此,综述了风味甜瓜果实柠檬酸代谢特性的研究进展... 随着人们生活水平的提高,兼具品质、营养和健康特征的甜瓜新品种——风味甜瓜应运而生,探索适度的风味甜瓜糖酸比非常重要,而目前对甜瓜果实中主要有机酸成分柠檬酸的代谢机制尚不清晰,因此,综述了风味甜瓜果实柠檬酸代谢特性的研究进展,并对利用RNA-seq技术分析甜瓜果实柠檬酸代谢关键基因的挖掘提出了一些展望。 展开更多
关键词 风味甜瓜 柠檬酸 rna-seq技术 基因挖掘 研究进展
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基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制
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作者 王建东 唐玉林 +5 位作者 王敏 张宝锁 杨富强 高海慧 于洋 郭延生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3519-3532,共14页
本试验旨在基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制,分析脾中与免疫相关差异表达基因的变化,为枸杞多糖拮抗雏鸡免疫抑制机制提供参考依据。将120只7日龄海兰褐蛋鸡随机分成3个组,分别为空白组(NC)、环磷酰胺组... 本试验旨在基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制,分析脾中与免疫相关差异表达基因的变化,为枸杞多糖拮抗雏鸡免疫抑制机制提供参考依据。将120只7日龄海兰褐蛋鸡随机分成3个组,分别为空白组(NC)、环磷酰胺组(CY)及枸杞多糖组(CYLbGp),CY和CYLbGp两组连续3 d每日胸肌注射80 mg·kg^(-1)环磷酰胺建立免疫抑制雏鸡模型,NC组肌注等体积生理盐水,CYLbGp组在模型建立后通过饮水的方式每天给予5 mg·kg^(-1)枸杞多糖,连续30 d。给药结束后,每组随机选取6只雏鸡采集脾,采用RNA-Seq技术检测3组在给予枸杞多糖后的差异表达基因。通过KEGG通路富集分析和蛋白质互作(PPI)网络分析,筛选关键差异基因和通路。结果表明,枸杞多糖干预后共有178个差异表达基因显著回调,显著富集在线粒体自噬-动物、趋化因子信号通路、C型凝集素受体信号通路、B细胞受体信号通路、血小板活化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性和Th1和Th2细胞分化等免疫相关通路上。PPI分析结果表明,磷酸肌醇3激酶调节亚基(PIK 3CD)、Janus激酶3(JAK 3)、GATA结合蛋白3(GATA 3)、低氧诱导因子(HIF 1A)、NK2同源异型框5(NKX 2-5)和肌醇多磷酸磷酸酶样1(INPPL 1)为其中的关键基因。RT-qPCR结果与转录组学数据变化趋势基本一致,进一步表明转录组数据有较高的可靠性。综上,枸杞多糖通过作用于PIK 3CD、JAK3、GATA3、HIF 1A、和INPPL 1等关键靶点,参与线粒体自噬、趋化因子信号通路、C型凝集素受体信号通路、B细胞受体信号通路、血小板活化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性、Th1和Th2细胞分化等信号通路的调控,进而起到缓解雏鸡免疫抑制的作用。 展开更多
关键词 rna-seq技术 免疫抑制 枸杞多糖 环磷酰胺
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枸杞转录组SSR分布特征分析及其与基因组SSR分布特征的比较 被引量:4
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作者 虞杭 张得芳 +1 位作者 樊光辉 王占林 《江苏农业科学》 2018年第14期24-27,共4页
通过Illumina Hi Seq 2500高通量测序平台,利用RNA-Seq技术对青杞1号品种整体转录活动进行检测,并对得到的序列采用生物信息学手段进行拼接后查找SSR,然后与基因组SSR进行比较。结果显示,转录组共获得5 411个重复单元长度为2~6碱基的微... 通过Illumina Hi Seq 2500高通量测序平台,利用RNA-Seq技术对青杞1号品种整体转录活动进行检测,并对得到的序列采用生物信息学手段进行拼接后查找SSR,然后与基因组SSR进行比较。结果显示,转录组共获得5 411个重复单元长度为2~6碱基的微卫星重复序列,2碱基重复的微卫星最为丰富,共2 666个,占49.27%,其中AG/CT基序的重复数量最多;3碱基重复类型有2 609个,占重复序列总数的48.22%;4碱基重复118个,5碱基重复10个,6碱基重复8个,分别占重复序列总数的2.18%、0.18%、0.15%。而基因组共获得14 733个重复单元为2~6碱基的微卫星重复序列,3碱基重复的微卫星最为丰富,共9 799个,占66.51%,其中GTT/CAA基序的数量最多。青杞1号转录组SSR与基因SSR在重复序列分布上存在显著差异。 展开更多
关键词 枸杞 rna-seq技术 转录组 微卫星 遗传图谱
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基于RNA-Seq对柯乐猪正常和异常乳腺差异基因的挖掘研究
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作者 王春源 向进 +3 位作者 吴燕 谭元成 杨酸 张依裕 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期166-175,共10页
本研究旨在获取母猪异常和正常乳腺组织的差异表达基因。选择乳腺发育正常和异常的经产柯乐猪各3头,利用RNA-seq对正常和异常乳腺组织的差异基因进行筛选和生物信息学分析,结果显示:正常与异常乳腺相比较共筛选出1847个差异基因,其中上... 本研究旨在获取母猪异常和正常乳腺组织的差异表达基因。选择乳腺发育正常和异常的经产柯乐猪各3头,利用RNA-seq对正常和异常乳腺组织的差异基因进行筛选和生物信息学分析,结果显示:正常与异常乳腺相比较共筛选出1847个差异基因,其中上调基因767个,下调基因1080个;GO富集分析显示,生物学过程(Biological Process)差异表达基因主要富集在细胞过程(Cellular Process)和生物调节(Biological Regulation),细胞组分(CellularComponent)差异表达基因主要富集在细胞(Cell)、细胞部分(Cell Part)和膜(Membrane),分子功能(MolecularFunction)差异基因主要集中在粘合剂(Binding)和催化活性(Catalytic Activity)方面;KEGG富集分析显示,差异表达基因主要富集在神经活性配体-受体相互作用通路,其次为细胞因子与细胞因子受体的相互作用以及PI3K-Akt信号通路;上调的差异表达基因主要富集在细胞因子与细胞因子受体的相互作用,其次为神经活性配体-受体相互作用通路;下调的差异表达基因主要富集在人乳头瘤病毒感染和神经活性配体-受体相互作用信号通路,其次为PI3K-Akt信号通路和细胞周期等通路。在可变剪接分析中,正常发育乳腺组织的所有可变剪接事件多于发育不良的,A3SS和RI差异可变剪接事件都是上调,而SE、A5SS和MXE差异可变剪接事件中大部分下调。本研究通过对差异基因及其信号通路的功能注释分析,发现乳腺发育显著相关的193个差异基因,主要富集在细胞周期、Th1和Th2细胞的分化、PI3K-Akt信号通路和焦点粘连等信号通路,绘制了193个差异基因的网络互作图,筛选出关联度前10位的差异基因为CDC6、F2、E2F1、DRD2、KNG1、GHRL、LEP、IFNG、FN1、PPARG,且关联度最高的CDC6可调节多个信号通路。研究结果为进一步阐述哺乳动物乳腺发育的调控机制提供了一定的科学依据。 展开更多
关键词 柯乐猪 rna-seq技术 乳腺发育 差异基因
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不同养殖密度西伯利亚杂交鲟幼鱼转录组分析 被引量:2
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作者 王子予 程超 +4 位作者 朱敏杰 肖敏 查云飞 简少卿 赵大显 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期422-434,共13页
【目的】阐明养殖密度对西伯利亚杂交鲟(西伯利亚鲟Acipenser baerii♀×施氏鲟Acipenser schrenckii♂)生长性能的影响机制,获得最适宜的养殖密度,为该品种健康养殖提供理论数据。【方法】选取规格一致、健康无病的初始体质量为(7.... 【目的】阐明养殖密度对西伯利亚杂交鲟(西伯利亚鲟Acipenser baerii♀×施氏鲟Acipenser schrenckii♂)生长性能的影响机制,获得最适宜的养殖密度,为该品种健康养殖提供理论数据。【方法】选取规格一致、健康无病的初始体质量为(7.89±1.45)g的西伯利亚杂交鲟幼鱼,设置低密度组(LD,0.465 kg/m2)、中密度组(MD,0.694 kg/m2)和高密度组(HD,0.930 kg/m2)3个不同的养殖密度进行为期90 d的生产试验,每个密度设置3个重复,每个重复组取1肌肉组织共9个样品进行RNA-seq测序和生物信息学分析。【结果】共得到60.70 Gb Clean Data,各样品的Clean Data均达到6.30 Gb,Q20和Q30碱基百分比在97.45%和93.42%以上;将小体鲟(Acipenser ruthenus)的基因组作为参考基因组进行比对,比对效率在72.64%~74.38%,发掘15549个新基因;将新基因进行注释发现,12636个新基因得到注释,2913个新基因未得到注释;进一步对3个密度组两两比较进行差异表达基因分析,共得到611个非冗余差异表达基因(DEGs),其中LD vs HD和LD vs MD比较组有33个共同DEGs,LD vs HD和MD vs HD比较组有40个共同DEGs,LD vs MD和MD vs HD比较组有31个共同DEGs,只有1个DEG是3个比较组共有;GO功能富集分析发现,这些DEGs主要富集在GTPase活性的增加、肌球蛋白复合物、肌动蛋白结合、ATP结合以及锌离子结合等二级节点中。在此基础上,通过人工筛选与生长应激相关的二级节点,获得了27条与生长应激相关的差异基因,其中包括调控生长轴GH/IGF的生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子1和2(IGF-1、IGF-2)。选取9条表达差异倍数大的基因进行qRT-PCR验证发现,其mRNA表达趋势均与转录组分析中的表达趋势一致。【结论】不同养殖密度条件下,西伯利亚杂交鲟幼鱼生长、应激等相关基因的表达模式发生显著变化。 展开更多
关键词 西伯利亚杂交鲟 幼鱼 rna-seq技术 养殖密度 转录组分析
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RNA-Seq技术在瘤胃微生物研究中的应用进展 被引量:3
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作者 廖奇 刘旭川 +5 位作者 李清 樊月圆 张春勇 杨舒黎 毛华明 冷静 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1061-1067,共7页
反刍动物瘤胃内多种多样的微生物组成一个复杂的微生态系统,它们在瘤胃内物质消化过程中发挥重要作用。RNA-Seq技术的出现为反刍动物瘤胃微生物的研究提供了前所未有的机遇。本文主要从新一代高通量测序技术出发,阐述RNA-Seq技术在瘤胃... 反刍动物瘤胃内多种多样的微生物组成一个复杂的微生态系统,它们在瘤胃内物质消化过程中发挥重要作用。RNA-Seq技术的出现为反刍动物瘤胃微生物的研究提供了前所未有的机遇。本文主要从新一代高通量测序技术出发,阐述RNA-Seq技术在瘤胃微生物代谢酶特性、瘤胃微生物的多样性、瘤胃微生物新功能基因方面的应用,以期为瘤胃微生物的研究提供参考。 展开更多
关键词 rna-seq技术 瘤胃微生物 多样性 新功能基因
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基于RNA-Seq技术的塔里木马鹿毛色相关差异表达基因筛选及初步分析 被引量:3
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作者 苏比奴尔·艾力 塔依尔江·麦麦提 +1 位作者 布威海丽且姆·阿巴拜科日 马合木提·哈力克 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2413-2424,共12页
旨在基于RNA-Seq技术对塔里木马鹿毛色相关基因进行筛选及分析。采用Illumina Hi Seq TM2000测序平台对塔里木马鹿和天山马鹿的皮肤组织进行转录组测序,所得序列经质控、组装后比对到NR、Swiss-Prot、COG、KOG、KEGG、GO和Pfam数据库中... 旨在基于RNA-Seq技术对塔里木马鹿毛色相关基因进行筛选及分析。采用Illumina Hi Seq TM2000测序平台对塔里木马鹿和天山马鹿的皮肤组织进行转录组测序,所得序列经质控、组装后比对到NR、Swiss-Prot、COG、KOG、KEGG、GO和Pfam数据库中注释,并对差异表达基因进行筛选、功能注释和富集分析。结果表明,测序获得25 038个有注释信息的Unigenes,比对分析显示,塔里木马鹿与天山马鹿有922个差异表达基因,其中上调表达基因495个,下调表达基因427个;GO功能富集分析结果显示,568个差异表达基因富集到61个GO条目上,分别参与了生物学过程、细胞组分及分子功能;KEGG代谢通路富集分析发现,在差异表达基因中富集最显著的代谢通路是ECM-受体相互作用。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析与塔里木马鹿毛色相关的7个候选基因的转录水平变化来验证转录组测序结果的准确性和可靠性,这些基因的表达趋势与转录组测序结果相一致。ECM-受体相互作用、蛋白质消化与吸收、PI3K-Akt信号通路及与黑色素合成相关的酪氨酸等通路可能与塔里木马鹿的毛色有关;候选基因MITF、Ggt1、VDR、PTPRF、CIITA、ARPC5L、POMC等可能在塔里木马鹿毛色形成过程中发挥重要作用。本研究结果为今后塔里木马鹿毛色相关基因的分子调控机制方面及挖掘潜在的新基因提供了丰富的试验数据。 展开更多
关键词 塔里木马鹿 rna-seq技术 毛色 差异表达基因 QRT-PCR
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基于转录组测序挖掘小麦叶片抗旱相关基因 被引量:2
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作者 曾倩倩 刘岩 +1 位作者 朱墨 邱宗波 《广东农业科学》 CAS 2022年第2期1-8,共8页
【目的】通过转录组测序分析干旱胁迫的小麦,以期挖掘小麦响应干旱胁迫的关键基因。【方法】采用高通量Illumina Hiseq 2500测序平台对郑麦366号正常生长与自然干旱处理进行测序,并对测序数据进行分析,筛选响应干旱胁迫的关键基因。【... 【目的】通过转录组测序分析干旱胁迫的小麦,以期挖掘小麦响应干旱胁迫的关键基因。【方法】采用高通量Illumina Hiseq 2500测序平台对郑麦366号正常生长与自然干旱处理进行测序,并对测序数据进行分析,筛选响应干旱胁迫的关键基因。【结果】两组样品中分别获得45471018、45133470个clean read片段,包含6.82 Gb、6.39 Gb碱基信息,拼接组装后,得到188334个转录本和119588个Unigenes。通过筛选共获得1207个DEGs,其中752个上调,455个下调。GO功能富集分析显示,上调的DEGs主要富集在水解酶活性、催化活性、代谢过程、甘油代谢过程、膜和细胞部分等;下调的DEGs富集在细胞器、细胞和氧化还原酶活性的最多。KEGG途径富集分析发现,DEGs显著富集于淀粉和蔗糖代谢、卟啉和叶绿素代谢、光合作用-天线蛋白、光合作用、苯丙烷生物合成、乙醛酸和二羧酸代谢、甘油磷脂代谢、氨基酸代谢和光合生物中的碳固定等代谢通路。5个抗氧化酶基因的qRT-PCR结果与RNA-Seq测序结果变化趋势相一致。【结论】利用转录组测序技术获得了大量小麦抗旱相关基因,为深入研究小麦响应干旱胁迫的分子机制提供更多的基因遗传资源。 展开更多
关键词 小麦 干旱胁迫 rna-seq技术 GO功能富集 KEGG代谢通路
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一种基于Gamma模型的RNA-seq数据分析方法 被引量:2
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作者 张礼 刘学军 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期465-474,共10页
随着下一代高通量的DNA测序技术的飞速发展,RNA-seq测序技术已成为转录组分析的标准技术.RNA-seq技术产生海量的测序数据,为生物信息学带来新机遇的同时也带来了巨大的挑战.RNA-seq技术中最为基本的应用是计算基因和转录本的表达水平,... 随着下一代高通量的DNA测序技术的飞速发展,RNA-seq测序技术已成为转录组分析的标准技术.RNA-seq技术产生海量的测序数据,为生物信息学带来新机遇的同时也带来了巨大的挑战.RNA-seq技术中最为基本的应用是计算基因和转录本的表达水平,而读段在基因参考序列上非均匀分布以及多源映射为准确计算基因及转录本表达水平带来了挑战.本文首先设计出一种类似基因芯片的虚拟探针数据格式,基于此数据格式提出一种基于Gamma分布的双层概率模型(GamSeq)模拟读段数据的产生,并结合已知的基因和转录本注释信息,计算出基因和转录本表达水平.本文将GamSeq方法应用到多个数据集上,并与目前最流行的方法进行对比,实验结果显示GamSeq方法能够较为准确地计算基因和转录本表达水平. 展开更多
关键词 rna-seq技术 基因表达 转录本表达 虚拟探针 Gamma模型
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高通量测序解析驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的潜在分子机制
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作者 廖峰 樊雨梅 +2 位作者 帖航 赵海晴 苏宁 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第6期358-364,共7页
探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路。通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测... 探讨驴骨胶原蛋白对成纤维细胞(NHDFs细胞)增殖、迁移和Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响以及可能的作用通路。通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法和划痕实验,研究驴骨胶蛋白对成纤维细胞增殖和迁移的影响,并利用转录组测序技术(RNA-seq)分析驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞的差异表达基因。结果表明,驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞无毒性,且在0.16~5.0 g/mL内对NHDFs细胞有一定的促生长作用。0.75~1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白能够促进NHDFs细胞增殖,且驴骨胶原蛋白对NHDFs细胞增殖的影响呈现剂量依赖关系。1.50 g/mL的驴骨胶原蛋白可显著促进NHDFs细胞迁移和Ⅰ胶原蛋白的分泌。驴骨胶原蛋白作用于成纤维细胞后,共筛选出384个差异表达基因,其中172个基因上调,212个基因下调。GO功能富集分析结果表明,差异表达基因与中性粒细胞趋化性、中性粒细胞迁移、粒细胞趋化性等有关;KEGG通路富集分析表明,差异基因参与细胞因子-细胞因子受体相互作用、化学致癌、IL-17和TNF等重要生物学通路。推测,驴骨胶原蛋白可能通过IL-17和TNF-α介导CXCL趋化因子发挥促进皮肤伤口愈合的作用。本文明确了驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的效果,填补驴骨胶原蛋白促进伤口愈合的研究空白,为驴骨胶原蛋白高值转化提供了思路。 展开更多
关键词 驴骨胶原蛋白 伤口愈合 NHDFs细胞 Ⅰ型胶原蛋白 rna-seq技术
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关于广西麻鸡肌肉组织中表达差异基因筛选 被引量:1
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作者 陈婷 卢晟盛 +3 位作者 杨丽丽 李添宝 张敏 江明生 《畜禽业》 2022年第7期5-7,共3页
为寻找影响广西麻鸡不同生长时期,胸肌和腿肌组织间的差异基因和相关信号通路,以120日龄的广西雌性麻鸡胸肌和腿肌为研究对象,利用RNA-Seq技术对广西麻鸡不同生长时期胸肌和腿肌组织中差异表达基因进行筛选。转录组测序使用illumina Nov... 为寻找影响广西麻鸡不同生长时期,胸肌和腿肌组织间的差异基因和相关信号通路,以120日龄的广西雌性麻鸡胸肌和腿肌为研究对象,利用RNA-Seq技术对广西麻鸡不同生长时期胸肌和腿肌组织中差异表达基因进行筛选。转录组测序使用illumina Novaseq^(TM) 6000测序,生物学重复3次,以P<0.05为标准筛选差异表达基因,结果发现,肌肉组织中有1953个差异基因,其中上调基因1415个,下调基因538个。通过对KEGG(P<0.05)通路分析发现,MAPK信号通路、粘着斑、PPAR信号通路和心肌细胞的肾上腺素能信号参与整个发育阶段;GO功能富集分析发现,在生物过程(BP),FHL、RBP7、MYBPC1、MUSTN1、TGF-β3、MY01C、IGF2和ADAM12对广西麻鸡的生长调控影响较大。 展开更多
关键词 广西麻鸡 rna-seq技术 胸肌 腿肌 差异表达基因
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基于RNA-seq技术的罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)不同组织转录组比较分析 被引量:1
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作者 李喜莲 顾志敏 +5 位作者 慎佩晶 徐洋 张宇飞 高强 程海华 陈雪峰 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期231-241,共11页
罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是我国重要的淡水虾养殖品种,为探讨罗氏沼虾不同组织基因表达差异,本研究使用Illumina Hiseq平台分析了罗氏沼虾的7个组织(眼柄、肝脏、卵巢、鳃、心脏、肌肉、精巢)转录组,质控后获得高质量的clea... 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是我国重要的淡水虾养殖品种,为探讨罗氏沼虾不同组织基因表达差异,本研究使用Illumina Hiseq平台分析了罗氏沼虾的7个组织(眼柄、肝脏、卵巢、鳃、心脏、肌肉、精巢)转录组,质控后获得高质量的clean reads 36325476、56796932、36328098、51370140、45010606、43240160、42404294条,共计46.2 Gb的clean reads数据。测序结果经denovo组装共获得95220个Unigenes,每个Unigenes的平均长度为1064.9bp。经过生物信息学方法与五个数据库(NR,GO,COG,KEGG,SWSS-PRO)比对,共注释到20368个Unigenes。其中GO功能注释将Unigenes分为生物过程、细胞组分和分子功能3个大类50个分支;在与COG数据库比对中,共有15798条比对到了同源序列,且一共被分为25类;KEGG代谢通路包括6大类33个小类,可将Unigenes映射到330条代谢通路中。分子标记筛选后获得37751个潜在SSR位点,共发现3228575个SNP位点。本研究通过对罗氏沼虾7个不同组织进行转录组测序,数据组装及功能注释,为进一步深入挖掘和开发利用罗氏沼虾功能基因提供参考。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 转录组 rna-seq技术 不同组织 功能基因 比较分析
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小麦Brock抗白粉菌侵染早期防御应答基因分析 被引量:1
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作者 张露露 卞云迪 +3 位作者 张驰 刘晓颖 范宝莉 王振英 《天津师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第3期40-46,共7页
为了探究小麦对禾本科布氏白粉菌的防御机制,以强抗白粉病小麦品种Brock为研究对象,利用RNA-seq技术分析了白粉菌侵染早期Brock中的应答基因,共鉴定出4625个差异表达基因(DEGs).利用KEGG分析重点注释了小麦与白粉菌互作的20条主要途径,... 为了探究小麦对禾本科布氏白粉菌的防御机制,以强抗白粉病小麦品种Brock为研究对象,利用RNA-seq技术分析了白粉菌侵染早期Brock中的应答基因,共鉴定出4625个差异表达基因(DEGs).利用KEGG分析重点注释了小麦与白粉菌互作的20条主要途径,通过qRT-PCR技术检测了来自不同途径的9个差异表达基因.其中,PR1和RPM1基因的表达量变化明显.这2个基因是PTI和ETI反应的重要参与基因,PR1表达量在2 hpi时显著升高,RPM1基因表达量在12 hpi时显著升高.以上结果说明白粉菌侵染早期(2 hpi和12 hpi),小麦通过PTI和ETI的协同作用抵抗白粉菌侵染. 展开更多
关键词 白粉病 rna-seq技术 抗病小麦Brock 防御应答
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基于RNA-Seq技术挖掘贵州白山羊公羊背最长肌生长发育下调基因 被引量:1
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作者 安清明 王星 +2 位作者 吴震洋 孟金柱 赵园园 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1848-1856,共9页
旨在探讨性别对贵州白山羊肌肉生长和肉品质影响的分子遗传机制,筛选出公羊背最长肌生长发育相关的下调基因。本研究采集6只同等饲养水平条件下、2周岁龄贵州白山羊背最长肌(公、母羊各3只),然后基于RNA-Seq技术分析背最长肌RNA表达情况... 旨在探讨性别对贵州白山羊肌肉生长和肉品质影响的分子遗传机制,筛选出公羊背最长肌生长发育相关的下调基因。本研究采集6只同等饲养水平条件下、2周岁龄贵州白山羊背最长肌(公、母羊各3只),然后基于RNA-Seq技术分析背最长肌RNA表达情况,筛选出差异表达下调基因,并进行GO和KEGG信号通路分析,最后选取4个差异表达下调基因进行RT-PCR验证。结果显示,在所有山羊背最长肌样本中共检测到25089个有效基因(FPKM≥1,P<0.05),共筛选出514个在公羊背最长肌中显著下调的基因,其中100个为新注释到的关联基因。对获得的514个差异表达基因mRNA进行GO功能富集分析,可主要分为生物学过程和细胞组分两大类,包含21个亚类。KEGG信号通路分析发现被注释的差异基因共参与145条信号通路,其中参与核糖体信号通路的基因最为富集,共有27个基因被注释到对应的25个核糖体蛋白上。对选取的4个差异表达下调候选基因KLF11、TNS1、SIK2和IGF1R进行验证,RT-PCR结果表明4个候选基因的mRNA表达趋势与RNA-Seq检测结果一致,且差异均比较显著(P<0.05),与测序结果一致,表明RNA-Seq测序结果可靠。综上,本研究基于RNA-Seq技术共获得贵州白山羊公羊背最长肌下调基因514个,其中100个为新发掘基因,参与核糖体信号通路的基因最为富集。初步认为筛选获得的基因可作为探究贵州白山羊肌肉生长发育的候选基因,对贵州白山羊肌肉生长发育的分子改良提供了依据。 展开更多
关键词 贵州白山羊 rna-seq技术 背最长肌 生长发育 候选基因
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藏药细果角茴香转录组SSR分布特征分析 被引量:1
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作者 张晶 文怀秀 +3 位作者 王卫东 邵赟 梅丽娟 陶燕铎 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第18期6105-6110,共6页
为探究藏药细果角茴香转录组中简单重复序列位点信息,本研究利用Illumina HiSeqTM 2500高通量测序平台,RNA-Seq测序技术对藏药细果角茴香植株进行测序,并采用生物信息学MISA数据分析进行拼接后查找SSR位点。细果角茴香转录组测序共获得2... 为探究藏药细果角茴香转录组中简单重复序列位点信息,本研究利用Illumina HiSeqTM 2500高通量测序平台,RNA-Seq测序技术对藏药细果角茴香植株进行测序,并采用生物信息学MISA数据分析进行拼接后查找SSR位点。细果角茴香转录组测序共获得27979个重复单元长度为2~6个碱基的微卫星重复序列,总的SSR碱基数为142108085 bp,平均每3.1 kb出现1个SSR位点。细果角茴香SSR中主要重复单元类型为三碱基,占SSR总数的68.34%,在统计的213种重复类型中(AAG/CTT)n所占比例最高为(7773,27.78%),其次是(AG/CT)n(4735,16.92%)和(ATC/ATG)n(2420,8.65%),藏药细果角茴香转录组中SSR位点分布频率较高,重复单元类型丰富。研究首次基于细果角茴香转录组高通量测序数据开发了SSR分子标记,为细果角茴香遗传连锁图谱、DNA指纹图谱、遗传多样性评价、种植资源收集与鉴定和分子标记辅助育种等工作提供了科学基础。 展开更多
关键词 细果角茴香 rna-seq技术 转录组 SSR标记 生物信息
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