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miR-582-5p在唾液腺腺样囊性癌侵袭、转移中的作用 被引量:1
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作者 曾威 卢文辉 +1 位作者 张志利 赵小朋 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2016年第5期413-418,共6页
目的 :探讨micro RNA-582-5p(miR-582-5p)对唾液腺腺样囊性癌侵袭、转移能力的调控作用。方法 :通过q PCR验证腮腺腺样囊性癌与正常组织中miR-582-5p的表达水平差异,以唾液腺腺样囊性癌肺转移细胞株SACC-83为实验对象,通过脂质体介导,将... 目的 :探讨micro RNA-582-5p(miR-582-5p)对唾液腺腺样囊性癌侵袭、转移能力的调控作用。方法 :通过q PCR验证腮腺腺样囊性癌与正常组织中miR-582-5p的表达水平差异,以唾液腺腺样囊性癌肺转移细胞株SACC-83为实验对象,通过脂质体介导,将miR-582-5p的拟似物(miR-582-5p mimics)转染至SACC-83细胞,升高miR-582-5p的表达水平。采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测转染前、后SACC-83中miR-582-5p的表达变化,通过Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变,通过荧光素酶报告实验验证靶基因,Western印迹检测miR-582-5p的靶基因整合素FOXC1的表达变化,免疫组织化学检测FOXC1在癌与正常组织中的差异表达,应用SPSS 16.0软件包对所得数据进行t检验或单因素方差分析。结果:miR-582-5p在唾液腺腺样囊性癌组织中低表达,在正常组织中高表达。转染miR-582-5p mimics后的SACC-83中,miR-582-5p的表达显著上调(P<0.001),SACC-83细胞的侵袭迁移能力显著降低(P<0.001)。Western印迹检测结果显示,在SACC-83中升高miR-582-5p的表达水平后,FOXC1表达显著降低。FOXC1在唾液腺腺样囊性癌组织中高表达,在正常组织中低表达。结论 :低表达miR-582-5p有助于维持腺样囊性癌的侵袭、转移特性;调高其表达水平,能有效抑制SACC-83的侵袭、迁移能力。miR-582-5p可能通过调控其靶基因FOXC1的表达而发挥作用。 展开更多
关键词 MICRO rna-582-5p 唾液腺 腺样囊性癌 侵袭 转移
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长链非编码RNA SBF2-AS1靶向微RNA-582-5p调控AKT/FOXM1信号通路影响膀胱癌细胞增殖和凋亡的机制研究 被引量:6
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作者 栗恒 李宏彬 +2 位作者 廖科学 李斌 陆伟 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2019年第3期328-333,共6页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)SBF2-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和潜在的分子机制。方法噻唑蓝(MTT)测定膀胱癌细胞株增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双萤光素酶报告系统验证SBF2-AS1和微RAN(miR)-582-5p的... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)SBF2-AS1对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和潜在的分子机制。方法噻唑蓝(MTT)测定膀胱癌细胞株增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双萤光素酶报告系统验证SBF2-AS1和微RAN(miR)-582-5p的调控关系,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SBF2-AS1和miR-582-5p RNA的表达。结果与正常膀胱上皮细胞HUC组相比,膀胱癌细胞株T24、SW780和5637细胞中SBF2-AS1表达量显著升高(P<0.05),miR-582-5p的表达量却显著下降(P<0.05);抑制SBF2-AS1表达可以抑制T24细胞增殖、迁移和侵袭;双萤光素酶报告系统结果显示,SBF2-AS1靶向负向调控miR-582-5p的表达;过表达miR-582-5p可抑制膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和侵袭;抑制miR-582-5p表达逆转了沉默SBF2-AS1表达对膀胱癌T24细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论SBF2-AS1通过上调miR-582-5p表达抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 膀胱癌 SBF2-AS1 rna-582-5p 增殖 迁移 侵袭
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miR-582-5p靶向调控FOXO1对新生大鼠缺血缺氧性脑病神经元损伤的影响
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作者 颜海峰 吴小红 +2 位作者 林欲庆 霍开明 王莹莹 《天津医药》 CAS 2024年第4期356-361,共6页
目的 探讨微小RNA-582-5p(miR-582-5p)靶向调控叉头框转录因子1(FOXO1)对新生大鼠缺血缺氧性脑病(HIE)神经元损伤的影响。方法 90只新生大鼠按照随机数字表法均分为对照(NC)组、模型(HIE)组、miRNA对照(LV-miRNA-NC)组、miR-582-5p过表... 目的 探讨微小RNA-582-5p(miR-582-5p)靶向调控叉头框转录因子1(FOXO1)对新生大鼠缺血缺氧性脑病(HIE)神经元损伤的影响。方法 90只新生大鼠按照随机数字表法均分为对照(NC)组、模型(HIE)组、miRNA对照(LV-miRNA-NC)组、miR-582-5p过表达(LV-miR-582-5p)组、miR-582-5p过表达+mRNA对照(LV-miR-582-5p+LV-NC)组、miR-582-5p过表达+FOXO1过表达(LV-miR-582-5p+LV-FOXO1)组。除NC组外的各组大鼠建立HIE模型,对大鼠进行神经功能缺损评分,TTC染色测定脑梗死体积,Real-time PCR检测miR-582-5p和FOXO1表达,双萤光素酶报告基因实验检测miR-582-5p和FOXO1靶向关系,HE染色观察海马组织病理变化,TUNEL和Neu N荧光双标共定位检测海马组织神经元凋亡,免疫组化染色检测FOXO1、胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达。结果miR-582-5p和FOXO1具有靶向关系,与NC组比较,HIE组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、FOXO1表达、神经元凋亡率、FOXO1、Caspase-3蛋白表达增加,miR-582-5p表达降低,海马组织出现病理损伤(P<0.05);与LVmiRNA-NC组比较,LV-miR-582-5p组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、FOXO1表达、神经元凋亡率、FOXO1、Caspase-3蛋白表达降低,miR-582-5p表达增加,海马组织病理损伤好转(P<0.05);LV-FOXO1可以逆转LV-miR-582-5p对于HIE大鼠神经元损伤的保护作用。结论 miR-582-5p可以直接靶向负调控FOXO1表达,减少HIE新生大鼠神经元凋亡,对神经损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血 创伤 神经系统 叉头框蛋白O1 微小rna-582-5p
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miR-582-5p靶向PDCD10对胃癌细胞迁移、侵袭及凋亡的影响 被引量:4
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作者 翟宏芳 刘丽丽 +2 位作者 刘爱娟 李青科 胡万宁 《山东医药》 CAS 2020年第28期37-40,44,共5页
目的探讨微小RNA(miR)-582-5p靶向程序性细胞死亡因子10(PDCD10)对胃癌细胞迁移、侵袭、凋亡的影响。方法常规培养人正常胃黏膜上皮细胞株(GES-1)、胃癌细胞系(HGC-27、MKN74、NUGC-4),用qPCR法检测细胞中miR-582-5p表达,筛选miR-582-5... 目的探讨微小RNA(miR)-582-5p靶向程序性细胞死亡因子10(PDCD10)对胃癌细胞迁移、侵袭、凋亡的影响。方法常规培养人正常胃黏膜上皮细胞株(GES-1)、胃癌细胞系(HGC-27、MKN74、NUGC-4),用qPCR法检测细胞中miR-582-5p表达,筛选miR-582-5p表达最低的HGC-27作为实验细胞。将对数生长期的HGC-27随机分为8组,各组采用脂质体转染法分别转染miR-582-5p模拟物(使miR-582-5p过表达)、miR-582-5p抑制剂(使miR-582-5p低表达)、miR-582-5p模拟物阴性对照miR-NC、miR-582-5p抑制剂阴性对照anti-miR-NC、PDCD10小干扰RNA si-PDCD10(使PDCD10低表达)、PDCD10小干扰RNA阴性对照si-NC、PDCD10过表达载体pcDNA-PDCD10(使PDCD10过表达)、过表达载体阴性对照pcDNA-NC。用qPCR法检测细胞内miR-582-5p、PDCD10 mRNA表达,证实转染成功。用Western blotting法检测细胞内PDCD10、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白表达,用流式细胞术测算细胞凋亡率,用Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力,用双荧光素酶报告基因检测法验证miR-582-5p与PDCD10的靶向调控关系。结果与miR-NC组比较,miR-582-5p组Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量高,MMP2、MMP9蛋白相对表达量低,细胞凋亡率高,细胞迁移数、侵袭数少(P均<0.05)。与si-NC组比较,Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量低,MMP2、MMP9蛋白相对表达量高,细胞凋亡率低,细胞迁移数、侵袭数多(P均<0.05)。miR-582-5p与PDCD10的3′UTR存在靶向结合位点。miR-582-5p与WT-PDCD10报告质粒共转染HGC-27后的荧光素酶活性低于miR-NC与WT-PDCD10报告质粒共转染(P<0.05);miR-582-5p或miR-NC与MUT-PDCD10报告质粒共转染HGC-27后的荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。与miR-NC组比较,miR-582-5p组PDCD10蛋白相对表达量低(P<0.05);与anti-miR-NC组比较,anti-miR-582-5p组PDCD10蛋白相对表达量高(P<0.05)。与miR-582-5p+pcDNA-NC组比较,miR-582-5p+pcDNA-PDC 展开更多
关键词 胃癌 微小rna-582-5p 程序性细胞死亡因子10 细胞迁移 细胞侵袭 细胞凋亡
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血清miR-181c-5p和miR-582-5p水平在老年急性缺血性脑卒中早期诊断中的应用
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作者 李秋茹 贺玉婷 +2 位作者 李雪茹 龙秀英 李光宗 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2023年第8期827-832,共6页
目的探讨血清miR-181c-5p、miR-582-5p在老年急性缺血性脑卒中(AIS)早期诊断中的应用。方法选取2019年3月至2021年3月成都市第六人民医院神经内科治疗的89例老年AIS患者为AIS组,根据NIHSS评分将患者分为重度组24例、中度组34例、轻度组3... 目的探讨血清miR-181c-5p、miR-582-5p在老年急性缺血性脑卒中(AIS)早期诊断中的应用。方法选取2019年3月至2021年3月成都市第六人民医院神经内科治疗的89例老年AIS患者为AIS组,根据NIHSS评分将患者分为重度组24例、中度组34例、轻度组31例。另选取同期到本院就诊并确诊为无神经功能障碍、无梗死病灶的一般脑血管疾病患者60例为对照组。采用qRT-PCR检测血清miR-181c-5p、miR-582-5p表达水平;Spearman法分析老年AIS患者血清miR-181c-5p、miR-582-5p水平与NIHSS评分的相关性;Logistic回归分析老年AIS发生的影响因素;ROC曲线分析血清miR-181c-5p、miR-582-5p水平对老年AIS的诊断价值。结果与对照组相比,AIS组血清miR-181c-5p显著升高(P<0.05),血清miR-582-5p显著降低(P<0.05)。老年AIS患者血清miR-181c-5p水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.676,P<0.001),血清miR-582-5p水平与NIHSS评分呈负相关(r=-0.656,P<0.001);随病情程度增加,血清miR-181c-5p水平逐渐升高,miR-582-5p水平逐渐降低(P<0.05)。miR-181c-5p是影响老年AIS发生的危险因素,miR-582-5p是保护因素(P<0.05)。血清miR-181c-5p、miR-582-5p以及两者联合诊断老年AIS的AUC分别为0.893、0.803、0.938,联合诊断的敏感度为88.80%,特异性为85.00%,两者联合优于血清miR-181c-5p、miR-582-5p各自单独诊断(P=0.022、P<0.001)。结论老年AIS患者血清miR-181c-5p水平上调,miR-582-5p水平下调,为早期诊断老年AIS及判断病情严重程度的标志物,两者联合诊断老年AIS具有较高效能。 展开更多
关键词 miR-181c-5p miR-582-5p 急性缺血性脑卒中 早期诊断
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干扰LncRNA表达减轻非小细胞肺癌细胞对紫杉醇耐药的机制研究
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作者 靳义 康聪 +3 位作者 贺平 王丁丁 杨海龙 陈晓伟 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第12期1460-1467,共8页
目的研究干扰长链非编码RNA烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(LncRNA NNT-AS1)表达减轻非小细胞肺癌(NSCLC)细胞对紫杉醇(TAX)耐药的机制。方法构建NSCLC TAX耐药细胞系(A549/TAX),检测正常、亲本、耐药细胞中LncRNA NNT-AS1的表达情况,并验... 目的研究干扰长链非编码RNA烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(LncRNA NNT-AS1)表达减轻非小细胞肺癌(NSCLC)细胞对紫杉醇(TAX)耐药的机制。方法构建NSCLC TAX耐药细胞系(A549/TAX),检测正常、亲本、耐药细胞中LncRNA NNT-AS1的表达情况,并验证miR-582-5p与LncRNA NNT-AS1、HMGB2的靶向关系;体外培养A549/TAX细胞,观察单独干扰LncRNA NNT-AS1或同时干扰LncRNA NNT-AS1、miR-582-5p对细胞中LncRNA NNT-AS1、miR-582-5p、HMGB2 mRNA及其蛋白表达以及细胞活力、克隆形成、凋亡的影响;通过裸鼠成瘤实验观察干扰LncRNA NNT-AS1对肿瘤生长及肿瘤组织中miR-582-5p、HMGB2 mRNA及其蛋白表达的影响。结果与正常细胞比较,LncRNA NNT-AS1在亲本、耐药细胞中均呈高表达(P<0.05),且有递增趋势。经验证,miR-582-5p与LncRNA NNT-AS1、HMGB2均存在靶向关系。干扰LncRNA NNT-AS1表达后,A549/TAX细胞中LncRNA NNT-AS1、HMGB2 mRNA及其蛋白的表达水平以及细胞活力、克隆形成数均显著降低,而miR-582-5p的表达水平、细胞凋亡率均显著升高(P<0.05);同时干扰miR-582-5p表达可使上述改变得以逆转(P<0.05)。干扰肿瘤细胞中LncRNA NNT-AS1的表达后,荷瘤裸鼠的肿瘤体积和肿瘤质量均显著降低,miR-582-5p的表达水平显著升高,HMGB2 mRNA及其蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论干扰LncRNA NNT-AS1的表达可靶向上调miR-582-5p的表达并下调HMGB2的表达,进而减轻NSCLC TAX化疗耐药。 展开更多
关键词 长链非编码rna烟酰胺核苷酸转氢酶反义rna1 rna-582-5p 高迁移率族蛋白2 化疗耐药 紫杉醇 非小细胞肺癌
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