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miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制 被引量:2
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作者 李曼妮 刘建平 +3 位作者 陶永胜 陈静波 陈馨馨 谭志琴 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第41期10-13,共4页
目的探讨miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法用Target scan human在线软件预测miR-185调控的靶基因;采用荧光素酶报告载体系统检测miR-185对M2型丙酮酸激酶(PKM2)3'UTR荧光酶活性的影响;蛋白质印迹法检测miR-185对PKM2... 目的探讨miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法用Target scan human在线软件预测miR-185调控的靶基因;采用荧光素酶报告载体系统检测miR-185对M2型丙酮酸激酶(PKM2)3'UTR荧光酶活性的影响;蛋白质印迹法检测miR-185对PKM2蛋白表达的影响。将肝癌HepG2细胞分为观察1组、对照1组、观察2组、对照2组、观察3组。观察1组转染miR-185 mimics,对照1组转染Scramble;观察2组转染PKM2-siRNA,对照2组转染Control-siRNA;观察3组转染miR-185 inhibitors与PKM2-siRNA。采用MTT法检测上述5组细胞增殖能力,采用Annexin V-FITC和PI染色法检测上述5组细胞凋亡率。结果在线预测软件发现miR-185与PKM2的3'UTR有共同的结合位点,荧光素酶报告载体系统显示在Hep G2细胞中miR-185能抑制Wild-PKM2报告质粒组荧光素酶的活性,Western blotting结果显示miR-185能下调Hep G2细胞中PKM2蛋白表达,证实PKM2是miR-185直接调控的靶基因;MTT结果显示,观察1组与观察2组Hep G2细胞OD值分别为0.446±0.034、0.472±0.028,与对照1组(0.649±0.041)和对照2组(0.610±0.023)相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。观察3组的OD值为0.606±0.016,与对照1组或对照2组相比,差异均无统计学意义;凋亡实验结果显示,观察1组与观察2组Hep G2细胞凋亡率分别为(29.13±2.04)%、(27.46±1.95)%,对照1组、对照2组分别为(8.76±0.53)%、(8.51±0.47)%,观察1组、观察2组与对照1组、对照2组比较,P均<0.05。观察3组的凋亡率为(9.47±0.61)%,与对照1组或对照2组相比,差异均无统计学意义。结论 miR-185可抑制人肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡;机制可能是通过下调PKM2表达实现。 展开更多
关键词 肝癌 微小 rna-185 M2 型丙酮酸激酶 细胞增殖 细胞凋亡
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lncRNA NRON靶向miR-185-5p调节乳腺癌细胞化疗耐药性的机制研究 被引量:9
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作者 汪伶俐 田武国 +1 位作者 赵健洁 罗东林 《疑难病杂志》 CAS 2022年第10期1088-1095,共8页
目的 探讨长链非编码RNA抑制因子活化T细胞(lncRNA NRON)对miR-185-5p的调控作用及其影响乳腺癌细胞增殖、凋亡及化疗耐药性的基因调控机制。方法 2020年8月—2021年12月于陆军军医大学大坪医院中心实验室进行实验。选取2016年7月—2020... 目的 探讨长链非编码RNA抑制因子活化T细胞(lncRNA NRON)对miR-185-5p的调控作用及其影响乳腺癌细胞增殖、凋亡及化疗耐药性的基因调控机制。方法 2020年8月—2021年12月于陆军军医大学大坪医院中心实验室进行实验。选取2016年7月—2020年7月于医院乳腺甲状腺外科行手术切除的乳腺癌患者26例的癌组织及癌旁组织样本,体外培养正常乳腺上皮细胞系(MCF10A)及乳腺癌细胞系(MCF7、MDA-231、T47D、SKBR3、ZR7530、BT549、HCC1937、BT474)。qRT-PCR法检测lncRNA NRON、miR-185-5p基因表达;双荧光素酶试验验证lncRNA NRON与miR-185-5p的靶向关系。将MCF7乳腺癌细胞分为阴性对照(NC)组、plasmid NRON组(转染lncRNA NRON过表达载体)、plasmid NRON+mimic NC组(转染plasmid NRON+mimic NC)、plasmid NRON+miR-185-5p mimic组(转染plasmid NRON+miR-185-5p模拟物),分别给予5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、紫杉醇(PTX)培养,CCK-8法检测细胞增殖情况(OD值)、半数抑制浓度(IC_(50))及耐药指数(R),流式细胞术检测细胞凋亡,Western-blot法检测胸苷酸合成酶(TS)表达,裸鼠荷瘤实验验证化疗效果(瘤体体积、ki67表达)。结果 乳腺癌组织中lncRNA NRON表达低于癌旁组织,miR-185-5p表达高于癌旁组织(P<0.05);乳腺癌细胞系中lncRNA NRON表达低于正常乳腺上皮细胞系,miR-185-5p表达高于正常乳腺上皮细胞系(P<0.05)。与NC组比较,plasmid NRON组MCF7细胞对5-FU、DDP、PTX的IC_(50)及R值降低(P<0.01);OD值降低,凋亡率及TS表达升高(P<0.01);裸鼠瘤体体积、ki67表达降低(P<0.01)。双荧光素酶试验显示,lncRNA NRON与miR-185-5p之间有靶向结合关系,lncRNA NRON可靶向下调miR-185-5p表达。与plasmid NRON组比较,plasmid NRON+miR-185-5p mimic组裸鼠瘤体体积升高(P<0.05),TS蛋白降低(P<0.05);而plasmid NRON组与plasmid NRON+mimic NC组比较上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 lncRNA NRON可通过靶向下调miR-185-5p降低乳腺癌细胞对化疗药 展开更多
关键词 乳腺癌 长链非编码rna抑制因子活化T细胞 微小rna-185-5p 化疗耐药性
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胃癌耐药细胞株SGC7901/阿霉素中miR-185的表达及对细胞多药耐药性的影响 被引量:6
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作者 李勇 檀碧波 +4 位作者 范立侨 赵群 王冬 刘羽 刘庆伟 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期2101-2104,共4页
目的检测miR-185在胃癌组织及细胞株中的表达,探讨miR-185在胃癌多药耐药性(MDR)发生机制中的作用。方法选取2014年3—5月于河北医科大学第四医院行胃癌切除术的20例患者胃癌及癌旁组织标本,荧光定量PCR技术检测胃癌及癌旁组织和人胃腺... 目的检测miR-185在胃癌组织及细胞株中的表达,探讨miR-185在胃癌多药耐药性(MDR)发生机制中的作用。方法选取2014年3—5月于河北医科大学第四医院行胃癌切除术的20例患者胃癌及癌旁组织标本,荧光定量PCR技术检测胃癌及癌旁组织和人胃腺癌细胞株SGC7901、正常胃上皮细胞株GES-1、耐阿霉素(ADR)的胃癌MDR细胞株SGC7901/ADR的miR-185表达水平。采用miR-185模拟物或无关对照序列转染细胞株SGC7901/ADR,检测其对化疗药物ADR、5-氟尿嘧啶(5-FU)、草酸铂(L-OHP)的敏感性,荧光定量PCR和Western blotting技术检测多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1、GST-π、LRP的mRNA及蛋白表达水平。结果癌旁组织和胃癌组织miR-185相对表达水平分别为(0.910±0.142)、(0.243±0.045),差异有统计学意义(t=20.025,P<0.001)。细胞株GES-1、SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平分别为(0.903±0.117)、(0.630±0.101)和(0.191±0.030),差异有统计学意义(F=46.850,P<0.001)。其中,细胞株SGC7901、SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于GES-1,细胞株SGC7901/ADR miR-185相对表达水平低于SGC7901(P<0.05)。ADR、5-FU和L-OHP对不同转染处理后的细胞株SGC7901/ADR抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,ADR、5-FU和L-OHP对miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR抑制率高于未转染和无关对照序列转染(P<0.05)。经不同转染处理后,细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-πmRNA和蛋白相对表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,miR-185模拟物转染的细胞株SGC7901/ADR多药耐药基因MDR1/P-gp、MRP-1和GST-πmRNA和蛋白相对表达水平低于未转染和无关对照序列转染(P<0.05)。结论胃癌细胞miR-185表达下调,通过上调miR-185的表达可提高胃癌细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能是miR-185调控部分多药耐药基因的表达。 展开更多
关键词 胃肿瘤 抗药性 肿瘤 rna-185 基因 MDR 体外研究
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抑制miR-185对人胃癌细胞株SGC7901药物敏感性影响的机制探讨 被引量:5
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作者 李勇 檀碧波 +4 位作者 赵群 范立侨 王冬 刘羽 刘庆伟 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第17期1347-1351,共5页
目的探讨微小RNA185(microRNA185,miR-185)对人胃癌细胞株SGC7901药物敏感性的影响及相关机制。方法选取2014-01-04-2014-05-20于河北医科大学第四医院住院手术,且经病理确诊的胃腺癌组织标本25例。蛋白质印迹技术检测胃癌组织、癌旁组... 目的探讨微小RNA185(microRNA185,miR-185)对人胃癌细胞株SGC7901药物敏感性的影响及相关机制。方法选取2014-01-04-2014-05-20于河北医科大学第四医院住院手术,且经病理确诊的胃腺癌组织标本25例。蛋白质印迹技术检测胃癌组织、癌旁组织及细胞株SGC7901、耐药细胞株SGC7901/ADR和胃上皮细胞株GES-1中miR-185的表达。将miR-185抑制物(Anti-miR-185)转染SGC7901;MTT法检测转染前后肿瘤细胞对化疗药物多柔比星(adriamycin,ADR)、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)的敏感性;荧光定量PCR和蛋白质印迹技术检测转染前后胃癌细胞多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)、多药耐药相关蛋白-1(multidrug resistance associated protein-1,MRP-1)、谷胱甘肽S-转移酶-π(glutathione S-transferase-π,GST-π)、拓扑异构酶-Ⅱ(topoisomerase-Ⅱ,TOPO-Ⅱ)和胸苷合成酶(thymidylate synthase,TS)的表达变化。结果miR-185在胃癌组织表达(0.243±0.045)低于癌旁组织(0.910±0.142),t=-22.389,P<0.001;miR-185在SGC7901中相对表达强度为0.630±0.101,在SGC7901/ADR为0.191±0.030,在GES-1中表达为0.903±0.117,三者比较miR-185在SGC7901/ADR中表达最低,P<0.001。Anti-miR-185转染后,SGC7901对ADR、5-FU和L-OHP的敏感性明显减弱,P值均<0.05。Anti-miR-185转染后,SGC7901中MDR1、MRP-1和GST-π水平均较转染前增高,P值均<0.05;而TOPO-Ⅱ和TS水平则无明显变化,P>0.05。结论抑制胃癌细胞中miR-185表达可上调多药耐药基因MDR1、MRP-1和GST-π表达,导致胃癌细胞耐药性增强。 展开更多
关键词 胃癌 微小rna-185 多药耐药性 体外药敏实验
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miR-185过表达对MPP+诱导帕金森病模型细胞损伤的影响及其机制 被引量:1
5
作者 刘啸 张磊 陶伟 《山东医药》 CAS 2024年第13期50-53,共4页
目的探讨miR-185过表达对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导帕金森病(PD)模型细胞损伤的影响及其机制。方法体外传代培养PC12细胞。取传3代、对数生长期PC12细胞,随机分为对照组、模型组、NC mimics组、miR-185 mimics组。模型组、NC mim... 目的探讨miR-185过表达对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导帕金森病(PD)模型细胞损伤的影响及其机制。方法体外传代培养PC12细胞。取传3代、对数生长期PC12细胞,随机分为对照组、模型组、NC mimics组、miR-185 mimics组。模型组、NC mimics组、miR-185 mimics组予1 mmol/L MPP+诱导PD细胞模型,对照组不予MPP+诱导。成模24 h,NC mimics组、miR-185 mimics组分别转染NC mimics、miR-185 mimics。取上述各组细胞,采用RT-qPCR法检测miR-185表达;采用CCK-8法检测培养24、48、72 h细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用ELISA法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),采用Western blotting法检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与对照组比较,模型组miR-185相对表达量及培养24、48、72 h细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高(P均<0.05);GSH、SOD含量降低,MDA含量升高(P均<0.05);Bcl-2蛋白相对表达量降低,Bax蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。与NC mimics组比较,miR-185 mimics组miR-185相对表达量及培养24、48、72 h细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低(P均<0.05);GSH、SOD含量升高,MDA含量降低(P均<0.05);Bcl-2蛋白相对表达量升高,Bax蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。而模型组与NC mimics组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论miR-185过表达能够促进PD细胞增殖并抑制其凋亡,具有明显的保护作用;减轻氧化应激损伤以及抑制Bax蛋白表达和促进Bcl-2蛋白表达可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 帕金森病 微小rna-185 细胞增殖 细胞凋亡 氧化应激
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LncRNA ASB16-AS1调节miR-185-5p/TRAM2轴对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 靳瑞 焦合主 +1 位作者 黄颖 张敏 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第7期1432-1441,共10页
该文旨在探讨长链非编码RNA ASB16-AS1(LncRNA ASB16-AS1)靶向微小RNA-185-5p(miR-185-5p)/易位相关膜蛋白2(TRAM2)轴对口腔鳞状细胞癌(又称口腔鳞癌)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。体外培养人口腔鳞癌细胞SCC-9,将其分为对照组、sh-NC组... 该文旨在探讨长链非编码RNA ASB16-AS1(LncRNA ASB16-AS1)靶向微小RNA-185-5p(miR-185-5p)/易位相关膜蛋白2(TRAM2)轴对口腔鳞状细胞癌(又称口腔鳞癌)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。体外培养人口腔鳞癌细胞SCC-9,将其分为对照组、sh-NC组、sh-ASB16-AS1组、sh-ASB16-AS1+inhibitor NC组、sh-ASB16-AS1+miR-185-5p inhibitor组。用qRT-PCR法检测各组细胞LncRNA ASB16-AS1、miR-185-5p、TRAM2 mRNA表达水平;用CCK-8试剂盒检测SCC-9细胞增殖情况;用流式细胞术检测SCC-9细胞凋亡情况;用划痕实验检测SCC-9细胞迁移情况;用Transwell法检测SCC-9细胞侵袭情况;Western blot检测TRAM2蛋白表达水平。双荧光素酶报告实验验证LncRNA ASB16-AS1与miR-185-5p及miR-185-5p与TRAM2之间的靶向关系。与对照组和sh-NC组相比,sh-ASB16-AS1组中Lnc RNA ASB16-AS1、TRAM2 mRNA、TRAM2蛋白表达水平以及D值、划痕愈合率、细胞侵袭数降低,mi R-185-5p水平、细胞凋亡率升高(P<0.05);与sh-ASB16-AS1+inhibitor NC组相比,sh-ASB16-AS1+miR-185-5p inhibitor组中mi R-185-5p水平、细胞凋亡率降低,TRAM2 m RNA表达水平、TRAM2蛋白表达水平、D值、划痕愈合率、细胞侵袭数升高(P<0.05),而Lnc RNA ASB16-AS1水平无显著变化(P>0.05);生物学信息网站预测显示mi R-185-5p与Lnc RNA ASB16-AS1和TRAM2均存在靶向结合位点,且双荧光素酶报告基因实验证实LncRNA ASB16-AS1与miR-185-5p,以及miR-185-5p与TRAM2之间均存在靶向关系(P<0.05)。在口腔鳞癌细胞中Lnc RNA ASB16-AS1表达上调,抑制Lnc RNA ASB16-AS1的表达可靶向上调mi R-185-5p的表达,抑制TRAM2的表达,进而促进口腔鳞癌细胞凋亡,抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码rna ASB16-AS1 微小rna-185-5p/易位相关膜蛋白2 口腔鳞癌 增殖 迁移 侵袭
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SREBP-2沉默抑制衣霉素诱导的软骨细胞内质网应激 被引量:4
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作者 谢静 史栋梁 郭会卿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1291-1296,共6页
目的:探究固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)对衣霉素诱导的软骨细胞内质网应激(ERS)的影响。方法:分离人正常软骨细胞和骨关节炎(OA)软骨细胞培养,衣霉素和SREBP-2 siRNA分别处理正常软骨细胞。24 h后,实时荧光定量PCR检测对微小RNA-185(... 目的:探究固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)对衣霉素诱导的软骨细胞内质网应激(ERS)的影响。方法:分离人正常软骨细胞和骨关节炎(OA)软骨细胞培养,衣霉素和SREBP-2 siRNA分别处理正常软骨细胞。24 h后,实时荧光定量PCR检测对微小RNA-185(miR-185)表达的影响,流式细胞术检测对细胞凋亡的影响,Western blot法检测对SREBP-2、CHOP、p-e IF2α和ATF4等ERS相关蛋白,Bcl-2、Bax和caspase-3等凋亡相关蛋白水平的影响;caspase-3活性试剂盒检测对细胞caspase-3活性的影响。结果:与对照组相比,OA组和衣霉素组SREBP-2表达增加,miR-185表达降低(P<0.05)。SREBP-2 siRNA转染可明显阻断衣霉素引起的miR-185降低(P<0.05)。miR-185过表达能够下调SREBP-2蛋白水平(P<0.05)。与对照组相比,OA组和衣霉素组CHOP、pe IF2α和ATF4的蛋白水平明显上调,Bcl-2表达下调,Bax和caspase-3表达增加(P<0.05);SREBP-2沉默处理则显著逆转上述蛋白表达(P<0.05)。细胞凋亡率与上述细胞凋亡相关蛋白的变化趋势一致(P<0.05)。与衣霉素组相比,SREBP-2 siRNA转染明显下调caspase-3活性,miR-185抑制则明显逆转上述作用(P<0.05)。结论:SREBP-2沉默可通过上调miR-185抑制衣霉素诱导的软骨细胞ERS和细胞凋亡。 展开更多
关键词 固醇调节元件结合蛋白2 衣霉素 内质网应激 软骨细胞 微小rna-185
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循环长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18、微小RNA-185-5p水平与糖尿病肾脏疾病患者血管钙化的相关性分析 被引量:2
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作者 陆帅 张美峰 施德 《临床肾脏病杂志》 2023年第3期215-220,共6页
目的分析血清循环长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(long non-coding RNA human leucocyte antigen complex group 18,LncRNA HCG18)、微小RNA-185-5p(microRNA-185-5p,miR-185-5p)水平与糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,D... 目的分析血清循环长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(long non-coding RNA human leucocyte antigen complex group 18,LncRNA HCG18)、微小RNA-185-5p(microRNA-185-5p,miR-185-5p)水平与糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者血管钙化的相关性。方法选取2018年10月至2021年9月于上海健康医学院附属崇明医院就诊的DKD患者145例,男性73例,女性72例,依据患者血管钙化情况分为钙化组70例,其中男性38例,女性32例,年龄范围46~78岁,年龄(57.14±14.27)岁;未钙化组75例,其中男性35例,女性40例,年龄范围44~77岁,年龄(59.47±15.06)岁。另选同期健康体检者70名为对照组。荧光定量PCR法检测血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平;采用全自动生化分析仪测定血钙、血磷、血肌酐(serum creatinine,Scr)水平;采用酶标仪测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、超敏C反应蛋白(high-sensitivity c-reactive protein,hs-CRP)及甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)水平;Pearson法分析DKD合并血管钙化患者血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平与血管钙化相关指标的相关性及血清LncRNA HCG18与miR-185-5p的相关性;受试者工作特征曲线分析血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平对DKD合并血管钙化的诊断价值。结果钙化组、未钙化组血清LncRNA HCG18、血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均高于对照组(P<0.05),血清miR-185-5p水平低于对照组(P<0.05);钙化组血清LncRNA HCG18、血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均高于未钙化组(P<0.05),血清miR-185-5p水平低于未钙化组(P<0.05)。DKD合并血管钙化患者血清LncRNA HCG18与miR-185-5p呈负相关(P<0.05),血清LncRNA HCG18与血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均呈正相关(P<0.05),血清miR-185-5p与血钙、血磷、Scr、ALP、hs-CRP及PTH均呈负相关(P<0.05)。血清LncRNA HCG18、miR-185-5p水平及二者联合诊断DKD合并血管钙化的曲线下面积分别为0.820、0.758、0.880。结论DKD血管钙化患者血清LncRNA HCG18呈 展开更多
关键词 长链非编码rna 人类白细胞抗原复合体18 微小rna-185-5p 糖尿病肾脏疾病 血管钙化
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血清长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18、微小RNA-185-5p水平与老年2型糖尿病周围神经病变的关系
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作者 刘宁 付燕 +1 位作者 朱晓娟 张婷 《中国临床医生杂志》 2024年第8期918-922,共5页
目的探究血清长链非编码RNA(LncRNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)及微小RNA-185-5p水平与老年2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)的关系及其预测价值评估。方法以2020年3月至2021年8月保定市第一中心医院收治的老年T2DM患者为研究对象... 目的探究血清长链非编码RNA(LncRNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)及微小RNA-185-5p水平与老年2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)的关系及其预测价值评估。方法以2020年3月至2021年8月保定市第一中心医院收治的老年T2DM患者为研究对象,选择其中发生周围神经病变的75例患者为DPN组,选择未发生周围神经病变的82例患者为非DPN组。血清LncRNA HCG18、miR-185-5p的水平通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)进行检测;相关性通过Pearson法进行分析;T2DM合并DPN的影响因素通过多因素logistic回归进行分析;受试者操作特征曲线分析血清LncRNA HCG18、miR-185-5p对T2DM患者发生DPN的诊断价值。结果DPN组患者血清LncRNA HCG18水平高于非DPN组,血清miR-185-5p水平低于非DPN组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。DPN组患者血清LncRNA HCG18与miR-185-5p水平呈显著负相关(r=-0.407,P<0.001)。多因素logistic回归分析显示,LncRNA HCG18、miR-185-5p为T2DM合并DPN发生的影响因素(P<0.05)。血清LncRNA HCG18、miR-185-5p对T2DM患者发生DPN预测的曲线下面积分别为0.841(95%CI 0.775~0.906)、0.857(95%CI 0.793~0.922)。结论老年DPN患者血清LncRNA HCG18水平升高,miR-185-5p水平降低,对老年T2DM患者发生DPN有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 长链非编码rna 人类白细胞抗原复合体18 微小rna-185-5p 老年2型糖尿病周围神经病变
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miRNA-185-5p通过靶向YWHAZ对人非小细胞肺癌细胞A549恶性生物学行为的影响 被引量:3
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作者 李奇炯 颜伏归 《重庆医学》 CAS 2022年第15期2525-2531,共7页
目的探讨微RNA(miRNA)-185-5p通过调控酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(YWHAZ)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549增殖、侵袭凋亡和上皮间质转化的影响。方法获取GSE152702数据集,识别在NSCLC患者和健康者血液中差异性表达的miRNA,收... 目的探讨微RNA(miRNA)-185-5p通过调控酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(YWHAZ)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549增殖、侵袭凋亡和上皮间质转化的影响。方法获取GSE152702数据集,识别在NSCLC患者和健康者血液中差异性表达的miRNA,收集2018年7月至2019年9月在浙江大学附属第二医院确诊为NSCLC患者的癌组织及癌旁组织,使用RT-qPCR法检测miRNA-185-5p在NSCLC癌组织和细胞系中的表达情况。采用脂质体转染法,分别将miRNA-NC、miRNA-185-5p模拟物、miRNA-185-5p抑制剂和miRNA-185-5p模拟物+pcDNA3.0-YWHAZ转染至人NSCLC细胞A549中,Transwell实验检测各组A549细胞的侵袭能力,CCK-8实验检测各组A549细胞的增殖能力,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)检测各组A549细胞的凋亡率,Western blot实验检测各组细胞中YWHAZ和上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达情况。检索StarBase、Targetscan和Human protein Atlas数据库,韦恩图绘制与miRNA-185-5p含潜在互补结合位点及与NSCLC患者预后不良有关的基因。检索GEPIA数据库识别YWHAZ表达与肺鳞癌、肺腺癌患者预后的关系。生物学信息技术预测和双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-185-5p和YWHAZ之间的关系。结果GSE152702数据集显示miRNA-185-5p在NSCLC患者中明显下调,miRNA-185-5p在NSCLC癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。miRNA-185-5p在NSCLC细胞株中的表达水平低于正常人肺上皮细胞株(P<0.05),与miRNA-NC组比较,miRNA-185-5p模拟物组miRNA-185-5p表达水平明显升高(P<0.05),YWHAZ表达水平明显降低(P<0.01),miRNA-185-5p抑制剂组中miRNA-185-5p表达水平明显降低(P<0.05),YWHAZ表达水平明显升高(P<0.01)。过表达miRNA-185-5p能明显抑制A549细胞增殖、侵袭和上皮间质转化,并促进细胞凋亡(P<0.05)。GEPIA数据库显示,YWHAZ在肺鳞癌和肺腺癌患者中明显上调,且与患者预后不良有关。YWHAZ可与miRNA-185-5p靶向 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 rna-185-5p 侵袭 上皮间质转化 酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白
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奥沙利铂调控微小RNA-185-5p的表达抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究 被引量:2
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作者 朱顺 熊非 +1 位作者 肖静 孙利萍 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第21期2559-2563,共5页
目的研究奥沙利铂通过调控微小RNA-185-5p(miR-185-5p)的表达对结肠癌细胞增殖,迁移和侵袭的抑制作用。方法HCT-116细胞随机分为7组:空白对照组(常规RPMI 1640培养基)、低,中,高剂量组(4.0,8.0和16.0μg·mL^(-1)的奥沙利铂)和阳性... 目的研究奥沙利铂通过调控微小RNA-185-5p(miR-185-5p)的表达对结肠癌细胞增殖,迁移和侵袭的抑制作用。方法HCT-116细胞随机分为7组:空白对照组(常规RPMI 1640培养基)、低,中,高剂量组(4.0,8.0和16.0μg·mL^(-1)的奥沙利铂)和阳性药对照组(20μg·mL^(-1)的伊立替康)、奥沙利铂+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC+8.0μg·mL^(-1)奥沙利铂)和奥沙利铂+anti-miR-185-5p组(转染anti-miR-185-5p+8.0μg·mL^(-1)奥沙利铂)。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖率;Transwell分析检测细胞侵袭和迁移;蛋白质印迹法检测各组细胞的蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-185-5p的表达。结果空白对照组、高剂量组,奥沙利铂+anti-miR-NC组和奥沙利铂+anti-miR-185-5p组细胞中miR-185-5p的相对表达水平分别为1.00±0.07,2.78±0.21,1.00±0.09和0.42±0.05。空白对照组、高剂量组,阳性对照组,奥沙利铂+anti-miR-NC组和奥沙利铂+anti-miR-185-5p组细胞增殖率分别为(100.00±2.60)%,(37.39±1.61)%,(58.43±1.30)%,(54.60±2.37)%和(94.01±3.93)%;细胞迁移数量分别为(228.11±12.85),(107.40±3.77),(114.21±5.88),(144.20±8.12)和(219.18±4.28)个;细胞侵袭数量分别为(167.31±5.07),(76.03±2.51),(99.12±1.32),(92.24±4.54)和(152.16±5.33)个;Cyclin D1蛋白表达水平分别为0.91±0.09,0.42±0.05,0.45±0.03,0.48±0.05和0.88±0.08;基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白表达水平分别为0.82±0.06,0.41±0.04,0.40±0.04,0.41±0.04和0.81±0.08,以上指标,高剂量组、阳性对照组与空白对照组比较,奥沙利铂+anti-miR-NC组与奥沙利铂+anti-miR-185-5p组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论奥沙利铂可通过促进miR-185-5p的表达,对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭起到抑制作用。 展开更多
关键词 奥沙利铂 微小rna-185-5p 结肠癌 增殖 迁移 侵袭
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lncRNA-PCAT6通过调控miR-185/SIX1轴对肺癌A549细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响
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作者 王华丽 农开旭 +2 位作者 程守斌 秦篙 许振胜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期2840-2846,共7页
目的:探讨长链非编码RNA-PCAT6(lncRNA-PCAT6)对肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)和化疗敏感性的影响,以及对微小RNA-185(miR-185)/SIX1轴的调控作用。方法:取A549细胞,分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒(PCAT6-Si)组、不含lncRNA-PCA... 目的:探讨长链非编码RNA-PCAT6(lncRNA-PCAT6)对肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)和化疗敏感性的影响,以及对微小RNA-185(miR-185)/SIX1轴的调控作用。方法:取A549细胞,分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒(PCAT6-Si)组、不含lncRNA-PCAT6-Si的空病毒载体(eGFP-Si-1)组、miR-185低表达腺病毒(miR-185-Si)组、不含miR-185-Si的空病毒载体(eGFP-Si-2)组、PCAT6-Si与miR-185-Si共转染(PCAT6-Si+miR-185-Si)组。RT-qPCR法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;Transwell法测定细胞侵袭、迁移能力;免疫荧光检测EMT标志物N-cadherin阳性表达;Western blot法测定SIX1、EMT标志蛋白E-cadherin、Vimentin及N-cadherin表达。取A549细胞系及其顺铂耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR及Western blot法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达。取A549/DDP转染PCAT6-Si与miR-185-Si,并分为A549组、A549/DDP组、PCAT6-Si组、miR-185-Si组、PCAT6-Si+miR-185-Si、eGFP-Si-1组、eGFP-Si-2组;RT-qPCR检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;CCK-8法检测各组细胞半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI);Western blot法检测SIX1、耐药相关蛋白P-gp表达;裸鼠荷瘤试验验证PCAT6对A549/DDP细胞化疗敏感性的作用。双荧光素酶试验验证PCAT6与miR-185之间的靶向关系。结果:与A549细胞相比,A549/DDP细胞IC50及RI、lncRNA-PCAT6、SIX1及P-gp表达升高(P<0.05),miR-185表达降低(P<0.05)。敲低A549细胞中lncRNA-PCAT6表达后,miR-185表达升高,SIX1蛋白表达降低,细胞侵袭、迁移能力及EMT进程降低,IC50及RI降低、肿瘤体积减小,且各指标变化差异显著(P<0.05)。敲低miR-185可逆转lncRNA-PCAT6的上述作用。双荧光素酶报告试验证实lncRNAPCAT6与miR-185之间有靶向负调控作用。结论:肺癌A549细胞中lncRNA-PCAT6低表达可靶向上调miR-185,下调SIX1,抑制EMT进程,增强对DDP化疗的敏感性。 展开更多
关键词 长链非编码rna-PCAT6 微小rna-185 肺癌A549细胞 化疗敏感性
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肾透明细胞癌组织中miRNA-185水平的变化及其意义 被引量:1
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作者 杨宇 徐仁芳 +1 位作者 何小舟 徐海燕 《实用临床医学(江西)》 CAS 2010年第11期3-6,共4页
目的探讨肾透明细胞癌组织中微小RNA-185(miRNA-185)水平的变化及其意义。方法提取22例手术患者肾癌组织和癌旁正常组织中的miRNAs,用RT-PCR的方法初步检测miRNA-185在肾癌组织和癌旁正常组织中的表达情况。采用Real-time PCR的方法定... 目的探讨肾透明细胞癌组织中微小RNA-185(miRNA-185)水平的变化及其意义。方法提取22例手术患者肾癌组织和癌旁正常组织中的miRNAs,用RT-PCR的方法初步检测miRNA-185在肾癌组织和癌旁正常组织中的表达情况。采用Real-time PCR的方法定量分析miRNA-185在肾癌组织及癌旁正常组织中的表达情况。结果电泳结果显示,miRNA-185和U6 RNA均呈单一条带,其所处的位置及其在正常组织和癌组织中的表达情况符合前期的预计。Real-time PCR结果显示,miRNA-185在肾癌组组织中呈高表达,较癌旁组组织平均升高5.14倍。22例标本中有17例(77%)肾癌组组织中miRNA-185阳性表达率为77.3%(17/22),明显高于癌旁组的22.7%(5/22)(P<0.05)。G1期的4例肾癌标本均较相应的癌旁正常组织呈现低表达,高表达的则离散分布在G2和G3期。相关性分析结果显示,miRNA-185在肾透明细胞癌组织中的相对表达量与肾癌病理学分期呈正相关(r=0.58,P<0.05)。结论 miRNA-185在肾癌组织中呈显著高表达,提示其与肾透明细胞癌的发生与演进有关,有望成为指导肾透明细胞癌诊断、治疗、预后的新靶点。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 微小rna-185 荧光定量PCR 表达
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循环微小RNA-185在骨肉瘤中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 孙建广 皮国富 +3 位作者 李峰 黄世磊 罗成汉 韩钰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期761-763,共3页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-185在骨肉瘤患者中的表达,探讨其在骨肉瘤诊断及预后中的价值。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测54对骨肉瘤患者和健康对照者(性别和年龄匹配)的miR-185表达。根据miR-185的中位数(2.38... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-185在骨肉瘤患者中的表达,探讨其在骨肉瘤诊断及预后中的价值。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测54对骨肉瘤患者和健康对照者(性别和年龄匹配)的miR-185表达。根据miR-185的中位数(2.381),将所有患者分为两组:高miR-185表达组(21)和低miR-185表达组(33)。然后分析miR-185表达与患者临床病理因素的相关性。血清样本在郑州大学第一附属医院2012年1月1日至2014年12月份从接受手术但未接受化学疗法或放射疗法的患者中收集,并分析miR-185表达与骨肉瘤患者的临床病理特征和总体生存率的关系。使用Manne WhitneyU检验比较骨肉瘤患者和正常对照组血清miR-185水平的差异。对数秩检验和Kaplan-Meier方法评估骨肉瘤患者的总体生存率。采用Cox回归和多因素分析评估预后价值。结果与正常对照组比较,骨肉瘤患者血清中的miR-185表达显著降低(U=373.000,P<0.05),差异有统计学意义。miR-185的低表达与较大的肿瘤体积(直径<5 cm比直径≥5 cm的miR-185:3.100±0.359比1.806±0.226,P<0.01),较高的TNM分期(一、二期比三、四期的miR-185:2.986±1.562比1.566±1.305,P<0.01)和远处转移(未转移比转移的miR-185:3.014±1.660比1.590±1.148,P<0.01)密切相关,差异有统计学意义。Kaplan-Meier曲线生存分析和对数秩检验显示,miR-185的低表达与骨肉瘤患者的总生存率降低有关。此外,多变量分析表明,miR-185表达降低是骨肉瘤患者总体生存的独立预后生物标志物(P<0.01),差异有统计学意义。结论血清miR-185可作为一种肿瘤抑制因子,有助于骨肉瘤患者的诊断、预后。 展开更多
关键词 骨肉瘤 微小rna-185 诊断 预后 生物标志物
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shRNA干扰长链非编码RNA UCA1对结肠癌细胞体外生长、运动能力及移植肿瘤形成的影响
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作者 赵涛 王群茹 +1 位作者 钟景页 黄琪 《医学分子生物学杂志》 CAS 2020年第5期372-379,共8页
目的研究shRNA干扰LncRNA尿路上皮癌抗原1(UCA1)对结肠癌细胞的体外生长、运动能力及移植瘤形成的影响.方法qRT-PCR检测UCA1、miR-185-5p表达情况;双荧光素酶报告实验检测靶向关系;Brdu染色检测细胞生长,Tranwell试验和细胞免疫荧光检... 目的研究shRNA干扰LncRNA尿路上皮癌抗原1(UCA1)对结肠癌细胞的体外生长、运动能力及移植瘤形成的影响.方法qRT-PCR检测UCA1、miR-185-5p表达情况;双荧光素酶报告实验检测靶向关系;Brdu染色检测细胞生长,Tranwell试验和细胞免疫荧光检测细胞运动;Western印迹检测Ki67、VEGF、MAPKAPK2、p-MAPKAPK2、HSP27、p-HSP27表达;皮下注射SW480细胞构建移植瘤模型,检测肿瘤重量、存活率、UCA1、miR-185相对表达量、Ki67、VEGF阳性表达率.结果UCA1在结肠癌细胞中高表达,miR-185-5p低表达(P<0.05);UCA1表靶向下调miR-185-5p;sh-UCA1能够显著抑制SW480细胞生长、运动、p38 MAPK通路蛋白表达(均P<0.05);与control组裸鼠比较,sh-UCA1组裸鼠瘤体重量、存活率、Ki67和VEGF蛋白阳性表达均显著降低(均P<0.05).结论UCA1可能通过靶向下调miR-185-5p激活p38 MAPK信号通路促进结肠癌SW480细胞系的细胞生长、运动能力,并促进体内肿瘤形成. 展开更多
关键词 结肠癌 尿路上皮癌抗原1 微小rna-185-5p 短发夹rna
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转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶表达变化 被引量:2
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作者 石宇雄 郭智维 +1 位作者 缪莉 谭志琴 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第35期39-41,共3页
目的观察转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达变化。方法培养人胃腺癌MGC-803细胞,将其分为观察组1、对照组1、观察组2、对照组2,观察组1转染miR-185类似物,对照组1转染无关序列,观察组2转染PKM2... 目的观察转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力及M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达变化。方法培养人胃腺癌MGC-803细胞,将其分为观察组1、对照组1、观察组2、对照组2,观察组1转染miR-185类似物,对照组1转染无关序列,观察组2转染PKM2小RNA干扰,对照组2转染RNA干扰无关序列,48 h后收集观察组1和对照组1细胞,用Western blotting法检测PKM2蛋白,用实时荧光定量PCR法检测PKM2 mRNA;将四组细胞继续培养24、48、72、96 h,采用MTT法测量各组在570 nm波长处的OD值。结果细胞培养48、72、96h时,OD值观察组1较对照组1低(P均<0.05),观察组2较对照组2低(P均<0.05)。观察组1、对照组1人胃腺癌MGC-803细胞PKM2蛋白相对表达量分别为0.522±0.065、0.937±0.111,PKM2 mRNA相对表达量分别为0.584±0.037、1.046±0.058,两组比较,P<0.05或<0.01。结论转染miR-185类似物的人胃腺癌MGC-803细胞增殖能力下降、PKM2表达降低,miR-185的这一作用是通过下调PKM2实现的。 展开更多
关键词 微小rna-185类似物 基因转染 胃癌 人胃腺癌MGC-803细胞 M2型丙酮酸激酶 细胞增殖
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微RNA-582-5p与音猬因子在结直肠癌病理诊断和预后评估中的价值
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作者 孙志涛 姜辉 +6 位作者 张宝玉 高晶晶 肖伟 周国庆 宋东旭 张亚玲 马红艳 《安徽医药》 CAS 2023年第11期2269-2274,I0003,共7页
目的探讨微RNA-582-5p(miR-582-5p)和音猬因子(SHH)在结直肠癌病人病理诊断和预后评估中的价值。方法选择2017年6月至2018年12月沧州市人民医院收治的125例结直肠癌病人及97例结直肠息肉病人作为观察对象,收集癌旁组织、结直肠息肉组织... 目的探讨微RNA-582-5p(miR-582-5p)和音猬因子(SHH)在结直肠癌病人病理诊断和预后评估中的价值。方法选择2017年6月至2018年12月沧州市人民医院收治的125例结直肠癌病人及97例结直肠息肉病人作为观察对象,收集癌旁组织、结直肠息肉组织、结直肠癌组织标本,实时萤光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各标本中miR-582-5p、SHH mRNA表达水平,免疫组织化学法检测SHH蛋白表达,Pearson法分析结直肠癌组织中miR-582-5p与SHH mRNA表达水平的相关性,双萤光素酶报告基因实验验证miR-582-5p和SHH的靶向关系,受试者操作特征(ROC)曲线分析miR-582-5p、SHH mRNA对结直肠癌的诊断价值。结果在癌旁组织、结直肠息肉组织、结直肠癌组织中miR-582-5p表达水平[(1.05±0.15)、(0.83±0.12)、(0.65±0.09)]依次降低(P<0.05),SHH mRNA表达水平[(1.03±0.12)、(1.78±0.34)、(2.47±0.41)]及蛋白阳性表达率依次升高(P<0.05);相关性分析显示,结直肠癌组织中miR-582-5p与SHH mRNA表达呈负相关性(r=−0.63,P<0.05),双萤光素酶报告基因实验结果证实miR-582-5p和SHH存在靶向关系;miR-582-5p在肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管侵犯和有淋巴转移的结直肠癌组织中表达水平显著低于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管侵犯和无淋巴转移结直肠癌组织中的表达水平(P<0.05),SHH在肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管侵犯和有淋巴转移的结直肠癌组织中阳性表达率显著高于于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管侵犯和无淋巴转移结直肠癌组织中的阳性表达率(P<0.05);miR-582-5p、SHH mRNA联合诊断结直肠癌的AUC为0.92,95%CI:(0.88,0.95),P<0.05,灵敏度为86.40%,特异度85.57%;miR-582-5p低表达和SHH阳性表达病人无进展生存期和总生存期显著低于miR-582-5p高表达和SHH阴性表达病人(P<0.05)。结论结直肠癌组织中miR-582-5p低表达、SHH高表达,且与结直肠癌病人临床病理特征和预后有关,对结直肠癌的病理诊断和预后评� 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 rna-185-5p 音猬因子 病理诊断 预后
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胃癌组织中miR-185检测的临床价值及与Vav3-Rac1通路的关系 被引量:1
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作者 檀碧波 李勇 +2 位作者 范立侨 刘艳丽 刘庆伟 《河北医药》 CAS 2017年第17期2565-2568,2572,共5页
目的探讨胃癌及癌旁正常胃黏膜中微小RNA145(miR-185)、Vav3、Rac1基因的表达情况及关系。方法荧光实时定量PCR技术检测100例胃癌组织及80例癌旁正常胃黏膜中miR-185、Vav3、Rac1基因mRNA的表达情况。比较胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中这... 目的探讨胃癌及癌旁正常胃黏膜中微小RNA145(miR-185)、Vav3、Rac1基因的表达情况及关系。方法荧光实时定量PCR技术检测100例胃癌组织及80例癌旁正常胃黏膜中miR-185、Vav3、Rac1基因mRNA的表达情况。比较胃癌及癌旁正常胃黏膜组织中这3种基因mRNA的表达差异;绘制受试者工作曲线(ROC曲线);分析miR-185、Vav3、Rac1基因mRNA表达与患者生物学特征的关系;分析胃癌组织中miR-185与Vav3、Rac1的关系。结果胃癌组织中miR-185的表达低于癌旁正常胃黏膜组织,而Vav3、Rac1的mRNA表达则明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05)。miR-185、Vav3、Rac1的ROC曲线最佳cut-off值分别为0.3440、0.3346、0.2944。miR-185的表达与胃癌的浸润深度、分化及淋巴结转移有关;Vav3、Rac1的表达与胃癌的分化及淋巴结转移有关(P<0.05)。Spearman相关分析显示,在胃癌组织中miR-185与Vav3、Rac1存在负相关,Vav3与Rac1存在正相关(P<0.05)。结论胃癌组织中miR-185表达明显降低且与胃癌的生物学特征有关,miR-185可能通过抑制Vav3-Rac1通路而参与了胃癌进展的调控过程。 展开更多
关键词 微小rna-185 胃肿瘤 Vav3 RAC1 生物学特征
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皮肤恶性黑色素瘤组织中微小RNA-185-5p、SOX13的表达及临床意义
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作者 陈华 严旭 宋树玲 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第8期54-59,共6页
目的检测微小RNA-185-5p(miR-185-5p)和SOX13在皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法选择行手术治疗的61例CMM患者为观察对象(CMM组),另外,选择61例同时期诊断为皮肤良性色素痣的患者组织标本为对照组。根据mi... 目的检测微小RNA-185-5p(miR-185-5p)和SOX13在皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法选择行手术治疗的61例CMM患者为观察对象(CMM组),另外,选择61例同时期诊断为皮肤良性色素痣的患者组织标本为对照组。根据miR-185-5p在CMM组织中表达水平,将CMM患者分为miR-185-5p高表达组(miR-185-5p表达水平≥0.47)31例和miR-185-5p低表达组(miR-185-5p表达水平<0.47)30例。根据SOX13蛋白在CMM组织中的表达结果,将CMM患者分为SOX13阳性表达组36例和SOX13阴性表达组25例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测CMM组织与色素痣组织中miR-185-5p、SOX13 mRNA的表达水平,采用免疫组织化学法检测SOX13蛋白表达水平,采用Pearson法分析CMM组织中miR-185-5p与SOX13 mRNA表达水平的相关性,采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-185-5p、SOX13表达与CMM患者生存率的关系,采用Cox回归模型分析CMM患者的预后影响因素。结果CMM组织中,miR-185-5p表达水平为(0.47±0.08),低于色素痣组织的(1.01±0.13),差异有统计学意义(t=27.630,P<0.05);CMM组织中SOX13 mRNA的表达水平为(2.32±0.51),高于色素痣组织的(1.05±0.11),差异有统计学意义(t=19.012,P<0.05);CMM组织中SOX13蛋白阳性表达率(59.02%)高于色素痣组织(13.11%),差异有统计学意义(P<0.05);CMM组织中miR-185-5p与SOX13 mRNA的表达呈负相关(r=-0.635,P<0.05);CMM组织中,miR-185-5p、SOX13表达与浸润程度和淋巴结转移有关(P<0.05);miR-185-5p高表达组3年生存率高于miR-185-5p低表达组,差异有统计学意义(χ^(2)=5.871,P=0.015);SOX13阳性表达组3年生存率低于SOX13阴性表达组(χ^(2)=5.030,P=0.020);淋巴结转移、SOX13是CMM患者不良预后的独立危险因素,而miR-185-5p是CMM患者不良预后的保护因素(P<0.05)。结论CMM组织中miR-185-5p呈低表达,SOX13呈高表达,且两者的表达与CMM患者淋巴结转移等临床病理特征和预后有关,或可作为CMM潜在的预 展开更多
关键词 微小rna-185-5p SOX13 皮肤恶性黑色素瘤 预后 危险因素 病理特征
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lncRNAFOXD2-AS1靶向miR-185/SIX1轴对子宫内膜癌细胞增殖迁移及顺铂敏感性的影响 被引量:1
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作者 吴天玉 刘湘鄂 许海 《中国实验诊断学》 2021年第8期1206-1210,共5页
目的探讨长链非编码RNA FOXD2-AS1是否通过靶向微小RNA-185/SIX1轴影响子宫内膜癌细胞增殖迁移及顺铂敏感性。方法体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1-B(HEC-1-B组)和正常子宫内膜细胞HESC(HESC组),构建子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞(HEC-1-B... 目的探讨长链非编码RNA FOXD2-AS1是否通过靶向微小RNA-185/SIX1轴影响子宫内膜癌细胞增殖迁移及顺铂敏感性。方法体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1-B(HEC-1-B组)和正常子宫内膜细胞HESC(HESC组),构建子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞(HEC-1-B/DDP组)。qRT-PCR检测细胞中FOXD2-AS1、miR-185和SIX1表达水平,MTT法检测各组细胞活性及子宫内膜癌细胞对顺铂药物的敏感性,Transwell检测各组细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测细胞中SIX1蛋白表达水平。结果与HESC组相比,HEC-1-B组、HEC-1-B/DDP组细胞中FOXD2-AS1表达依次升高(P<0.05);与si-con组相比,si-FOXD2-AS1组HEC-1-B细胞FOXD2-AS1表达、迁移、侵袭显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05);与si-con组相比,si-FOXD2-AS1组miR-185表达显著升高(P<0.05);与pcDNA组相比,pcDNA-FOXD2-AS1组miR-185表达显著降低(P<0.05);与miR-con组相比,miR-185-5p组HEC-1-B细胞中miR-185表达、细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞迁移、侵袭数、SIX1蛋白表达显著降低(P<0.05);与HEC-1-B/DDP组相比,si-FOXD2-AS1组、miR-185-5p组细胞RI值显著降低(P<0.05)。结论FOXD2-AS1可以通过调控miR-185/SIX1轴促进子宫内膜癌细胞增殖迁移,减弱细胞对顺铂敏感性。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 增殖 迁移 顺铂敏感性 长链非编码rna FOXD2-AS1 微小rna185/肌腱同源盒1蛋白
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