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植物组织RNA提取的难点及对策 被引量：320
1
作者 李宏 王新力 《生物技术通报》 CAS CSCD 1999年第1期36-39,共4页
酚类化合物、多糖、蛋白质和未知次级代谢产物是影响植物组织ＲＮＡ提取的几个主要干扰因素。本文对它们在植物ＲＮＡ提取过程中的干扰作用、现象以及消除它们的一些方法进行了综述。
关键词 rna提取 植物组织 影响因素
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一种有效的花瓣总RNA的提取方法 被引量：55
2
作者 孟丽 周琳 +1 位作者 张明姝 戴思兰 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第1期38-40,共3页
利用CTAB法以富含花青素类物质的紫蓝色花瓣为材料提取总RNA，经紫外光谱分析A260/A280比值为1．9—2．0，A260/A230比值约为2．0；电泳检测到了28S、18S和5SrRNA清晰的条带；通过RT—PCR扩增出了目的基因的cDNA片段，说明分离的总RNA... 利用CTAB法以富含花青素类物质的紫蓝色花瓣为材料提取总RNA，经紫外光谱分析A260/A280比值为1．9—2．0，A260/A230比值约为2．0；电泳检测到了28S、18S和5SrRNA清晰的条带；通过RT—PCR扩增出了目的基因的cDNA片段，说明分离的总RNA能去除色素干扰，纯度和反转录活性较高符合RNA相关实验的要求，是一种经济、有效的花瓣总RNA的提取方法。 展开更多
关键词 花瓣 rna提取 CTAB RT-PCR
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用CTAB-PVP法提取棉花各组织总RNA的研究 被引量：43
3
作者 刘洋 何心尧 +2 位作者 马红波 吴泳历 杨佑明 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期53-56,共4页
针对棉花组织总RNA难以提取、不同组织的提取方法难以统一的问题，借鉴Jaakola等的越橘果实总RNA提取方法（即CTAB-PVP法），对棉花组织总RNA的提取效果进行了分析。实验结果表明：得到的棉花纤维、胚珠、叶片、胚根、花瓣、下胚轴和花... 针对棉花组织总RNA难以提取、不同组织的提取方法难以统一的问题，借鉴Jaakola等的越橘果实总RNA提取方法（即CTAB-PVP法），对棉花组织总RNA的提取效果进行了分析。实验结果表明：得到的棉花纤维、胚珠、叶片、胚根、花瓣、下胚轴和花药各组织的RNA完整性好，其D260／D280比值为1．7～2．0，产率30～180pg／g（鲜质量）；用开花后15d纤维的RNA为材料进行反转录，再利用RT-PCR和3’RACE技术进行克隆，各获得1个大小为542和712bp的cDNA克隆，经序列分析鉴定，这2个片段分别编码棉花微管结合蛋白和微丝结合蛋白。 展开更多
关键词 棉花 rna提取 CTAB-PVP
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一种RNA提取试剂盒——TRIZOL的使用方法初探 被引量：42
4
作者 于寒松 彭帅 +1 位作者 谢远红 胡耀辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期39-42,共4页
以酿酒酵母为原料,利用TRIZOL试剂快速提取法,得到的总RNA不完整,只有5srRNA一条条带,经过对该试剂盒的改进后提取的总RNA呈现28srRNA,18srRNA和5srRNA三条清晰的条带,很少有降解,其A260/A280值可达1.946,A260/A230值为2.070,具有很高... 以酿酒酵母为原料,利用TRIZOL试剂快速提取法,得到的总RNA不完整,只有5srRNA一条条带,经过对该试剂盒的改进后提取的总RNA呈现28srRNA,18srRNA和5srRNA三条清晰的条带,很少有降解,其A260/A280值可达1.946,A260/A230值为2.070,具有很高的纯度。 展开更多
关键词 TRIZOL 酵母 rna提取
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富含多糖和次生物质的芒果子叶总RNA的提取 被引量：39
5
作者 肖洁凝 黄学林 +2 位作者 黎茵 黄霞 李筱菊 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第11期83-86,共4页
为了提取芒果子叶总RNA ,去除次生物质和多糖等杂质的严重干扰 ,采用了正交试验快速优化提取方法。实验证明 70 %的丙酮能有效地去除大部分杂质 ,提取过程一天内可完成 ,RNA含量可达 67 7μg g·FW ,A2 60 A2 80 比值为 1 95 ,RN... 为了提取芒果子叶总RNA ,去除次生物质和多糖等杂质的严重干扰 ,采用了正交试验快速优化提取方法。实验证明 70 %的丙酮能有效地去除大部分杂质 ,提取过程一天内可完成 ,RNA含量可达 67 7μg g·FW ,A2 60 A2 80 比值为 1 95 ,RNA的纯度及质量适合后续反应。 展开更多
关键词 芒果 子叶 rna提取 正交试验 次生物质
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富含多糖猕猴桃果实组织中总RNA提取方法的改进 被引量：32
6
作者 陈昆松 徐昌杰 +1 位作者 张上隆 GavinS.Ross 《植物生理学通讯》 CSCD 1998年第5期371-373,共3页
关键词 猕猴桃 果实组织 rna提取 提取方法
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改良CTAB法提取核桃总RNA试验 被引量：36
7
作者 刘晓菊 洪海波 +2 位作者 李敏 刘媛 杨克强 《山东农业科学》 2008年第1期97-99,共3页
从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB... 从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。 展开更多
关键词 核桃嫩叶 rna提取 次生代谢物 改良CTAB法
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百合叶片总RNA提取方法比较及优化 被引量：41
8
作者 尹慧 陈莉 +2 位作者 李晓艳 陈秋明 义鸣放 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期41-45,共5页
为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等... 为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5。RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。 展开更多
关键词 百合 叶片 rna提取 CTAB改进法 多糖 RT-PCR
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一种简单有效的植物RNA提取方法 被引量：34
9
作者 张容 郑彦峰 +2 位作者 吴瑶 王胜华 陈放 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期583-586,共4页
在提取缓冲液中加入皂土有效地去除了蛋白质并抑制RNAse,建立了一种高效的植物RNA提取方法。以麻疯树幼叶为材料,分别用TRIZOL,异硫氰酸胍法,SDS-KAc法和新创皂土法提取总RNA进行比较和验证,琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析结果表明,只有... 在提取缓冲液中加入皂土有效地去除了蛋白质并抑制RNAse,建立了一种高效的植物RNA提取方法。以麻疯树幼叶为材料,分别用TRIZOL,异硫氰酸胍法,SDS-KAc法和新创皂土法提取总RNA进行比较和验证,琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析结果表明,只有皂土法能提出质量高,完整性好的RNA。进一步以皂土法提取的18SrRNA为模板的RT-PCR结果分析表明,用该法提取的RNA能用于分子克隆与基因表达分析等后继分子生物学实验。该方法简便,快速,不失为一种经济高效的RNA提取方法。 展开更多
关键词 皂土 rna提取 麻疯树
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一种从香蕉果实提取高质量RNA的方法 被引量：33
10
作者 庄军平 苏菁 陈维信 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第1期143-146,共4页
从香蕉果实在中分离高质量的RNA是从分子水平上研究香蕉果实成熟软化过程中相关基因表达的重要前提。实验表明,用已报道的相关RNA的提取方法,即便利用已报道的从其它果实中成功提取出高质量RNA的方法,也不能从香蕉果实中分离出高质量的... 从香蕉果实在中分离高质量的RNA是从分子水平上研究香蕉果实成熟软化过程中相关基因表达的重要前提。实验表明,用已报道的相关RNA的提取方法,即便利用已报道的从其它果实中成功提取出高质量RNA的方法,也不能从香蕉果实中分离出高质量的RNA。这主要是由于香蕉果实富含多糖、多酚和一些其它次生代谢物,在RNA提取过程中这些物质会与RNA共同沉淀,从而影响RNA的产量和质量。到目前尚无商业化的RNA抽提试剂盒适用于香蕉果实RNA的提取。因此,探索出从香蕉果实中提取高质量RNA的方法就具有十分重要的意义。本文所报道的RNA提取的简便方法,可从以香蕉果肉和果皮中成功提取高质量的RNA,产量可达48￣72μg·g-1·FW-1,且整个提取过程可在一天完成;通过测定其A240/260和A260/280的比值表明,该该方法可有效降低RNA提取过程中多糖、酚类物质和其它次级代谢物以及蛋白质的污染,提取方法所提取的RNA纯度较高;在1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色后结果表明RNA在整个的提取过程中结构完整,未发生明显降解;利用RT-PCR技术,从所提RNA中成功克隆出了β-半乳糖苷酶基因cDNA片段,这表明其质量完全可满足进一步分子生物学研究的要求。 展开更多
关键词 香蕉果实 rna提取
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银杏RNA的提取 被引量：33
11
作者 程水源 陈昆松 +1 位作者 杜何为 许文平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期428-429,共2页
采用CTAB法提取银杏叶的RNA,结果表明:抽提的RNA经电泳检测,可见28SrRNA和18SrRNA两条主带;紫外吸收值测量,A260/A280接近2.0;反转录合成的cDNA经RAPD扩增,出现清晰的条带,这些说明提取的RNA纯度高,质量好。此方法简便易行,成本也较低,... 采用CTAB法提取银杏叶的RNA,结果表明:抽提的RNA经电泳检测,可见28SrRNA和18SrRNA两条主带;紫外吸收值测量,A260/A280接近2.0;反转录合成的cDNA经RAPD扩增,出现清晰的条带,这些说明提取的RNA纯度高,质量好。此方法简便易行,成本也较低,适合于富含多糖、多酚植物材料的RNA提取。 展开更多
关键词 银杏叶 rna提取 CTAB
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提取高质量茶树总RNA的方法研究 被引量：28
12
作者 史成颖 宛晓春 +1 位作者 江昌俊 孙俊 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期360-363,共4页
由于茶树富含多糖、多酚,从茶苗组织中尤其是从茶苗的根中提取高质量的RNA较为困难,试用了多种方法都未能获得高质量的RNA。为此,作者借鉴多年生的草本植物RNA提取方法—CTAB法,并在此基础上进行了改进,首次提取茶苗嫩根中的总RNA。电... 由于茶树富含多糖、多酚,从茶苗组织中尤其是从茶苗的根中提取高质量的RNA较为困难,试用了多种方法都未能获得高质量的RNA。为此,作者借鉴多年生的草本植物RNA提取方法—CTAB法,并在此基础上进行了改进,首次提取茶苗嫩根中的总RNA。电泳检测显示,该方法提取的总RNA 28S和18S条带清晰且28S较18S条带亮,紫外光谱分析显示A260/A280的比值为1.93。用于RT-PCR反应,成功克隆了492 bp的谷氨酰胺合成酶基因片段。说明用该方法提取的RNA纯度和完整性好。试用该方法从营养成分丰富的茶籽胚中提取总RNA,效果同样很好。 展开更多
关键词 茶树 嫩根 rna提取 CTAB
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一种广泛适用的RNA提取方法 被引量：34
13
作者 淳俊 郑彦峰 +1 位作者 王胜华 陈放 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第5期591-597,共7页
分离提取高质量的RNA是基因表达、调控与基因工程等研究的基础,而RNase、多糖及多酚类物质严重干扰RNA的分离提取过程.现利用硅藻土对RNase的吸附性,结合PVP、高盐及乙二醇丁醚沉淀等处理,建立了一种广泛适用的RNA提取方法.在富含多糖... 分离提取高质量的RNA是基因表达、调控与基因工程等研究的基础,而RNase、多糖及多酚类物质严重干扰RNA的分离提取过程.现利用硅藻土对RNase的吸附性,结合PVP、高盐及乙二醇丁醚沉淀等处理,建立了一种广泛适用的RNA提取方法.在富含多糖的玉米胚乳,富含RNase的动物肝脏,多酚多油脂的银杏、麻疯树以及木霉、酵母等10多种RNA提取困难的动、植物与微生物材料中都提取出完整性好,得率高的RNA.RT-PCR实验表明,提取的RNA能够用于后续的分子生物学研究.硅藻土-苯酚法提取RNA的得率是异硫氰酸胍法的3倍多.此外,将分离提取的总RNA经过LiCl与PEG8000加NaCl沉淀步骤有效地去除了大片段RNA,以水稻Osa-mir-156的成熟序列设计特异引物做茎环RT-PCR,结果证明,富集得到的小RNA可以用于miRNA克隆等后续实验. 展开更多
关键词 硅藻土 rna提取 小rna 乙二醇丁醚
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棉花幼苗根总RNA提取的改进热酚法 被引量：29
14
作者 王友华 卢孟柱 段留生 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期723-726,共4页
获得高质量的植物总RNA比较困难,RNA的提取方法会因植物材料的不同而又有较大差异.棉花幼根含有大量多酚、多糖、单宁和其它多种次生代谢物,因此RNA提取难度较大.本文报道了棉花根样的高效获取方法和经研究改进的棉根RNA热酚提取法,该... 获得高质量的植物总RNA比较困难,RNA的提取方法会因植物材料的不同而又有较大差异.棉花幼根含有大量多酚、多糖、单宁和其它多种次生代谢物,因此RNA提取难度较大.本文报道了棉花根样的高效获取方法和经研究改进的棉根RNA热酚提取法,该法可获得高质量棉根总RNA,并能成功进行反转录,制备cDNA. 展开更多
关键词 棉花 根 rna提取 热酚法 改进
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烟草不同组织总RNA的提取方法初探 被引量：30
15
作者 丁福章 李继新 +1 位作者 袁有波 雷波 《中国农学通报》 CSCD 2007年第12期98-101,共4页
【研究目的】寻找烟草各个组织总RNA最佳的提取方法。【方法】以烟草K326的根、茎、叶、蕾、花和种子为材料,分别采用试剂盒法、Trizol法和CTAB法提取烟草6个组织总RNA进行对比。【结果】烟草不同组织总RNA提取方法有所不同,试剂盒法和T... 【研究目的】寻找烟草各个组织总RNA最佳的提取方法。【方法】以烟草K326的根、茎、叶、蕾、花和种子为材料,分别采用试剂盒法、Trizol法和CTAB法提取烟草6个组织总RNA进行对比。【结果】烟草不同组织总RNA提取方法有所不同,试剂盒法和Trizol法只能提取出根、茎、叶、蕾和花的总RNA,而不能提取种子总RNA;CTAB法能提取出6个组织的RNA。3种方法提取的RNA质量好,均能满足RT-PCR以及后续实验的要求。【结论】试剂盒法较Trizol法和CTAB法简单、快捷,适合于烟草除种子以外其余组织总RNA快速提取,CTAB法适合烟草所有组织总RNA提取。 展开更多
关键词 烟草 CTAB法 TRIZOL法 试剂盒法 rna提取
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丝状真菌深黄被孢霉RNA的提取方法 被引量：27
16
作者 李明春 王俊琦 邢来君 《菌物系统》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期108-111,共4页
本文在一步法的基础上，提出了一种适合于富含RNase和多糖的丝状真菌的RNA提取方法。该方法可得到完整、均一的RNA样品，且简化了操作，同时建立起一套快速有效的RNA样品质量检验的方法。
关键词 rna提取 丝状真菌 深黄被孢霉
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香蕉果实RNA提取方法的改进和比较 被引量：30
17
作者 李燕强 金志强 徐碧玉 《福建热作科技》 2005年第2期37-39,43,共4页
通过对几种不同的香蕉果实RNA提取方法的改进和比较,发现CTAB法是最有效、最简单和最经济的方法之一。该方法提取出来的RNA可以用来做cDNA合成和建立文库等分子生物学操作。
关键词 香蕉果实 rna提取 多酚 多糖
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富含多糖和次生代谢产物的白桦成熟叶中总RNA的提取 被引量：31
18
作者 曾凡锁 南楠 詹亚光 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期913-916,共4页
分别采用CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法和缓冲液冰浴-CTAB法从转基因白桦成熟叶中提取总RNA,并对琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析进行比较。结果表明,缓冲液冰浴-CTAB法提取的总RNA纯度高、完整性好且得率高.应用此法提取的总RNA能够满足RT... 分别采用CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法和缓冲液冰浴-CTAB法从转基因白桦成熟叶中提取总RNA,并对琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析进行比较。结果表明,缓冲液冰浴-CTAB法提取的总RNA纯度高、完整性好且得率高.应用此法提取的总RNA能够满足RT-PCR和Northern杂交分析要求。 展开更多
关键词 白桦 成熟叶片 rna提取
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一种适合于成熟脐橙果皮和果肉的RNA提取方法(英文) 被引量：28
19
作者 刘永忠 刘庆 +1 位作者 陶能国 邓秀新 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期300-304,共5页
研究了一种适合脐橙果实成熟过程中有效的RNA提取方法。结果表明利用该方法从不同成熟时期果实的果皮和果肉中提取的RNA可以有效用于RT-PC,cDNA-AFLP和RNA杂交。其A260/A230的比值超过2.0,A260/A280的比值在1.65-1.92的范围之间。另外... 研究了一种适合脐橙果实成熟过程中有效的RNA提取方法。结果表明利用该方法从不同成熟时期果实的果皮和果肉中提取的RNA可以有效用于RT-PC,cDNA-AFLP和RNA杂交。其A260/A230的比值超过2.0,A260/A280的比值在1.65-1.92的范围之间。另外该方法也证明可以广泛用于柑橘叶片,未成熟的幼果,枳壳幼苗和柑橘愈伤组织的RNA提取,是一种安全、方便和适用性较广的RNA提取方法。 展开更多
关键词 柑橘 果实 rna提取
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杏叶片与果实总RNA提取方法研究 被引量：28
20
作者 李晓颖 曹雪 +1 位作者 房经贵 章镇 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第2期152-156,共5页
以杏叶片及幼果为材料,分别从操作耗时、RNA质量和产量等方面比较了CTAB法、改良CTAB法、Trizol法、SDS-苯酚法和改良SDS法5种不同的RNA提取方法。结果表明:5种方法均能从幼嫩叶片中提取到总RNA;经电泳检测,28S rRNA和18S rRNA两条主带... 以杏叶片及幼果为材料,分别从操作耗时、RNA质量和产量等方面比较了CTAB法、改良CTAB法、Trizol法、SDS-苯酚法和改良SDS法5种不同的RNA提取方法。结果表明:5种方法均能从幼嫩叶片中提取到总RNA;经电泳检测,28S rRNA和18S rRNA两条主带清晰,A260/A280均大于1.8;其中以Trizol法提取效果最佳,改良CTAB法次之,产量分别达到了839.25μg/g和395.21μg/g。在果实RNA提取过程中,改良SDS法以及改良CTAB法能有效减少果实RNA的提取中酚类物质和多糖等杂质的影响,获得质量较高的RNA,二者产量分别为352.65μg/g和361.95μg/g。每种方法提取的叶片和果实的RNA经反转录后形成cDNA,并进行RT-PCR扩增,成功扩出看家基因泛素蛋白UBQ片段,说明了RNA质量能够满足文库构建、基因克隆等研究需要。 展开更多
关键词 杏 果实 rna提取 RT-PCR
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