rRNA扩增直接检测结核分枝杆菌的临床应用价值探讨 被引量：11

1

作者 王易伟 钟敏 胡频频 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期543-544,共2页

关键词 临床应用价值 结核分枝杆菌 rna扩增 直接检测 早期诊断 抗酸染色 结核病 培养法

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激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用 被引量：4

2

作者 郝权 徐勇 +2 位作者 李文录 赵小鸽 刘文欣 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期864-867,共4页

目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与癌细胞进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(LCM)是不可缺少的。LCM与RNA线性扩增结合,目的是确定一条可行的技术路线,获取均质的、足量的RNA,以备进一步用于膀胱癌相关基因研究。... 目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与癌细胞进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(LCM)是不可缺少的。LCM与RNA线性扩增结合,目的是确定一条可行的技术路线,获取均质的、足量的RNA,以备进一步用于膀胱癌相关基因研究。方法采用LCM技术分别从正常膀胱黏膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及癌细胞,提取RNA,并对120ng上皮细胞RNA进行线性扩增,获得aRNA20μg。用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)验证扩增前、后RNA中βactin基因表达水平。结果对照实验Ⅰ证实LCM后RNA完整性较好;产物RNA扩增后获得片段大小为0.5～2.5kb的aRNA,且βactin表达完整。结论LCM结合RNA线性扩增技术获取均一的、足量的、完整性好的目的细胞RNA,能用于进一步研究。 展开更多

关键词 相关基因研究 扩增技术 膀胱移行细胞癌 膀胱移行上皮细胞 激光捕获显微切割技术 β-actin 基因差异表达分析 rna线性扩增 细胞rna 组织冰冻切片 聚合酶链反应 基因表达水平 rna扩增 LCM 问质细胞 技术路线 膀胱黏膜 对照实验

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RNA扩增的研究进展 被引量：3

3

作者 李轶女 胡英考 +1 位作者 张志芳 沈桂芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期907-914,共8页

RNA扩增是伴随着基因芯片技术的应用而发展起来的一项技术,但不仅仅应用于芯片杂交。文章对RNA扩增的技术方法进行了综述,重点介绍了mRNA的线性扩增、指数扩增以及两者相结合的扩增方法以及优缺点,对microRNA的扩增方法也作了介绍,并对... RNA扩增是伴随着基因芯片技术的应用而发展起来的一项技术,但不仅仅应用于芯片杂交。文章对RNA扩增的技术方法进行了综述,重点介绍了mRNA的线性扩增、指数扩增以及两者相结合的扩增方法以及优缺点,对microRNA的扩增方法也作了介绍,并对将来的发展作了展望。 展开更多

关键词 rna扩增 体外转录 聚合酶链式反应 基因芯片 小rna

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两种微量RNA扩增方法的比较研究 被引量：2

4

作者 陈林华 赵月娥 +1 位作者 陈晓燕 高英 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第4期391-396,共6页

本研究通过比较体外转录和单引物扩增这两种扩增微量RNA的不同方法,以寻找一种高效的扩增方法。我们用两种不同方法分别扩增小鼠大脑全皮层及第五皮层细胞的RNA,扩增的RNA合成cDNA后进行荧光定量PCR实验,根据PCR结果比较两种不同扩增方... 本研究通过比较体外转录和单引物扩增这两种扩增微量RNA的不同方法,以寻找一种高效的扩增方法。我们用两种不同方法分别扩增小鼠大脑全皮层及第五皮层细胞的RNA,扩增的RNA合成cDNA后进行荧光定量PCR实验,根据PCR结果比较两种不同扩增方法的效率。WT-ovation扩增RNA的效率约为IVT效率的2.8倍;IVT方法扩增后,基因D-C值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均存在正线性相关(P<0.05),即引物距离mRNA的3'端越近、mRNA越短,基因D-Ct值越低。而WT-ovation方法扩增后,基因D-Ct值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均不存在统计学相关性。与IVT方法相比,WT-ovation方法效率更高,扩增时受影响因素较少、更稳定。 展开更多

关键词 rna扩增 IVT扩增 WT-ovation扩增 定量PCR

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生长分化因子15及其基因多态性与心血管疾病的关系研究 被引量：3

5

作者 周江 郭靖涛 王青雷 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1127-1129,共3页

生长分化因子15（GDF-15）又称为巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1）。是转化生长因子β（TGF—β）超家族的成员之一。最初是在其mRNA扩增的基础上克隆而来。TGF—β超家族目前有40多个成员，为具有半胱氨酸结构的一系列二聚体蛋白质，通常... 生长分化因子15（GDF-15）又称为巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1）。是转化生长因子β（TGF—β）超家族的成员之一。最初是在其mRNA扩增的基础上克隆而来。TGF—β超家族目前有40多个成员，为具有半胱氨酸结构的一系列二聚体蛋白质，通常被分为GDF家族、活化素、骨形成蛋白（BMP）家族、缪勒管抑制质、抑制素及TGF-β等6类。 展开更多

关键词 生长分化因子 心血管疾病 基因多态性 巨噬细胞抑制因子 转化生长因子Β TGF-Β 二聚体蛋白质 rna扩增

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内毒素血症大鼠心肌病理学及肌钙蛋白表达改变及其意义 被引量：2

6

作者 洪澄英 曹静 +5 位作者 杜玉洛 李威 彭全洲 刘晓娣 邢窕思 陈怀生 《分子影像学杂志》 2015年第3期190-192,共3页

目的探讨脓毒症大鼠心肌损伤病理学及肌钙蛋白的改变及其意义。方法将20只SD大鼠随机分为内毒素组与对照组各10只,前者经尾静脉注射内毒素7 mg/kg,对照组注射等量生理盐水;药物注射后24、48 h分别处死动物,心肌经过处理后,进行病理学镜... 目的探讨脓毒症大鼠心肌损伤病理学及肌钙蛋白的改变及其意义。方法将20只SD大鼠随机分为内毒素组与对照组各10只,前者经尾静脉注射内毒素7 mg/kg,对照组注射等量生理盐水;药物注射后24、48 h分别处死动物,心肌经过处理后,进行病理学镜下形态观察。并通过PCR方法检测心肌细胞c Tn I表达量。结果内毒素组大鼠24 h后心肌细胞缩小,心肌纤维转疏松,注射内毒素48 h后心肌细胞周围可见淋巴细胞增多,心肌细胞间隙可见血管扩张,内有红细胞。内毒素注射后24、48 h心肌细胞c Tn I表达量明显降低。结论内毒素血症可引起大鼠心肌细胞病理学改变及c Tn I表达降低,是脓毒症大鼠的重要病理生理学改变。 展开更多

关键词 内毒素 心肌损伤 肌钙蛋白 rna扩增 定量聚合酶链反应

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膜显色DNA芯片技术检测丙型肝炎病毒基因型及临床意义 被引量：1

7

作者 王永忠 毛红菊 +2 位作者 周国平 吴国祥 赵建龙 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期463-464,共2页

目的了解丙型肝炎病毒基因型分布及其临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)对89例抗HCV阳性血清进行HCVRNA扩增,再应用膜显色DNA芯片技术,对HCV进行基因分型,并对部分标本用基因测序法作对照。结果89份抗HCV阳性血清中,检测出HC... 目的了解丙型肝炎病毒基因型分布及其临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)对89例抗HCV阳性血清进行HCVRNA扩增,再应用膜显色DNA芯片技术,对HCV进行基因分型,并对部分标本用基因测序法作对照。结果89份抗HCV阳性血清中,检测出HCVRNA阳性73例。其中,HCV/1b型66例(90.4%),HCV/1a型1例(1.4%),2a型3例(4.1%),3b型3例(4.1%)。13例标本作基因测序分型对照,分型结果完全一致。15例献血员血清中未检出HCVRNA。结论HCV/1b型是江苏常州地区丙肝病毒优势株。膜显色DNA芯片可用于HCVRNA检测及基因分型检测,方法简便、快速、准确,适合临床推广应用及流行病学研究。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒基因型 临床意义 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 技术检测 显色 HCV阳性血清 DNA芯片技术 基因分型检测 流行病学研究 基因型分布 rna扩增 rna检测 方法应用 测序分型 分型结果 丙肝病毒 常州地区 推广应用

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核糖体RNA扩增与DNA扩增检测眼部沙眼衣原体感染的对比研究

8

作者 Yang JL 任喆（摘） 殷晓棠（校） 《国际眼科纵览》 2007年第4期286-287,共2页

沙眼仍是当今世界可预防盲的主要原因，世界卫生组织（WHO）计划于2020年全球范围内消灭沙眼，实现这一目标的主要措施之一是在沙眼流行区开展广泛的筛查和抗生素防治。目前，DNA扩增检测沙眼衣原体病原是评价治疗效果的主要手段。最近... 沙眼仍是当今世界可预防盲的主要原因，世界卫生组织（WHO）计划于2020年全球范围内消灭沙眼，实现这一目标的主要措施之一是在沙眼流行区开展广泛的筛查和抗生素防治。目前，DNA扩增检测沙眼衣原体病原是评价治疗效果的主要手段。最近一些学者提出核糖体RNA（rRNA）扩增比DNA扩增灵敏度更高，因就细菌而言，rRNA拷贝数较基因组DNA的拷贝数高达1万倍； 展开更多

关键词 沙眼衣原体感染 DNA扩增 核糖体 rna扩增 检测 世界卫生组织 rna拷贝数 眼部

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广谱细菌性病原体监测方法建立 被引量：1

9

作者 刘敏 赵卓 +4 位作者 姚文清 孙海波 毛玲玲 雷露 刘学升 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1074-1075,共2页

通过细菌的16S rRNA序列分析对细菌进行鉴定与分类是目前细菌鉴定最有效的方法之一,尤其适用于复杂疫情的快速筛查与检验[1]。但是,现有的16S rRNA扩增引物大多具有种属亲嗜性,在模板浓度较低时难以获得阳性扩增结果,

关键词 细菌性病原体 监测方法 rna扩增 广谱 细菌鉴定 序列分析 Rrna 快速筛查

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阿尔茨海默病的淀粉样β蛋白前体基因的表达研究

10

作者 江三多 林嗣萃 +6 位作者 张明园 钱伊萍 吴晓东 金通观 任大明 汤国梅 汪栋祥 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 2000年第2期70-72,共3页

目的　探讨阿尔茨海默病 (AD)与淀粉样 β蛋白前体 (APP)基因的 16和 17外显子表达之间的关系。方法　应用相对定量的竞争RNA扩增聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,测定 5 2例AD患者、2 8例血管性痴呆 (VD)患者及 6 0名健康老年人的外周血单... 目的　探讨阿尔茨海默病 (AD)与淀粉样 β蛋白前体 (APP)基因的 16和 17外显子表达之间的关系。方法　应用相对定量的竞争RNA扩增聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,测定 5 2例AD患者、2 8例血管性痴呆 (VD)患者及 6 0名健康老年人的外周血单核细胞中APP基因 16和 17外显子的表达量。结果　AD患者、VD患者及健康老年人每微克cDNA的APP基因的 16和 17外显因子表达量分别为 (4 0 5± 0 2 7)amol,(2 73± 0 33)amol和 (2 5 9± 0 2 7)amol,其中AD患者表达量高于健康老年人(t=3 79,P <0 0 1)和VD患者 (t=4 13,P <0 0 1)。结论　AD患者的外周血单核细胞中可能存在APP基因的 16和 17外显子过度表达的特异性。 展开更多

关键词 淀粉样Β蛋白前体 基因表达 早老性痴呆 rna扩增

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GAPDH mRNA在支气管肺泡灌洗液和血清中表达的差异

11

作者 张钰 唐亮 毛旻 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期2088-2089,共2页

我国肺癌发病呈逐年上升趋势，目前比较成熟的基因检测是GAPDHmRNA的检测11]，我们采用实时定量PCR方法，针对GAPDHmRNA扩增测定间接反映总的游离RNA水平，建立一种新的游离RNA测定的方法，探讨通过肺泡灌洗液（BALF）和血清中的游离RN... 我国肺癌发病呈逐年上升趋势，目前比较成熟的基因检测是GAPDHmRNA的检测11]，我们采用实时定量PCR方法，针对GAPDHmRNA扩增测定间接反映总的游离RNA水平，建立一种新的游离RNA测定的方法，探讨通过肺泡灌洗液（BALF）和血清中的游离RNA测定，再结合细胞学检测结果，探讨是否能提高肺癌的诊断率。 展开更多

关键词 支气管肺泡灌洗液 血清 实时定量PCR方法 游离rna 基因检测 rna扩增 检测结果 测定

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HSPC016基因在凝集性生长人毛乳头细胞的表达

12

作者 杨卫兵 郝飞 +1 位作者 宋志强 杨希川 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期294-296,共3页

目的确定造血干细胞相关基因HSPC016的表达与毛乳头细胞凝集性生长的关系。方法对凝集性生长的人毛乳头细胞、非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞分别进行细胞内mRNA原位杂交;用RT-PCR从以上3组细胞总RNA扩增HSPC016基因。... 目的确定造血干细胞相关基因HSPC016的表达与毛乳头细胞凝集性生长的关系。方法对凝集性生长的人毛乳头细胞、非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞分别进行细胞内mRNA原位杂交;用RT-PCR从以上3组细胞总RNA扩增HSPC016基因。结果原位杂交发现HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞表达,而在非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞均不表达;RT-PCR可以从凝集性生长的人毛乳头细胞RNA中扩增到约200bp目的片段,而不能从非凝集性生长人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞中扩增到相应目的片段。结论HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞特异性表达,可能与毛乳头细胞的分化和功能状态有关。 展开更多

关键词 人毛乳头细胞 凝集性生长 6基因 人真皮成纤维细胞 mrna原位杂交 rna扩增 细胞rna 特异性表达 相关基因 细胞表达 功能状态 PCR 细胞内 组细胞 RT 片段

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全基因组表达谱芯片研究人着床前胚胎的发育

13

作者 王永卫 孙博文 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期716-721,共6页

人着床前胚胎发育的机制目前尚不明确,这是由于研究材料的缺乏以及相关技术困难所造成的。然而,人胚胎早期发育与干细胞研究、表观遗传和再生医学都是密切相关的。此外,人的着床前胚胎的正常发育也和辅助生殖的成功率有密切联系。本研... 人着床前胚胎发育的机制目前尚不明确,这是由于研究材料的缺乏以及相关技术困难所造成的。然而,人胚胎早期发育与干细胞研究、表观遗传和再生医学都是密切相关的。此外,人的着床前胚胎的正常发育也和辅助生殖的成功率有密切联系。本研究的对象是受精后第3天和第6天的人早期胚胎。利用RNA扩增技术,得到了单个胚胎的全基因组表达谱数据。通过比较这两个不同发育阶段的表达谱数据,我们发现了与滋养层形成密切相关的基因和信号通路的显著变化,这些变化与小鼠滋养层形成的关键基因和信号通路一致,提示人和小鼠在滋养层形成的分子机制上可能是保守的。 展开更多

关键词 人着床前胚胎 基因芯片 滋养层 rna扩增

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3种检测方法在儿童肺炎支原体感染诊断中的应用 被引量：13

14

作者 奚卫 张颐豪 +1 位作者 赵荣平 魏清 《检验医学》 CAS 2019年第10期941-943,共3页

目的探讨支原体肺炎患儿不同检测方法的肺炎支原体(MP)阳性检出率,为有效诊断儿童MP感染提供依据。方法选取疑似MP感染患儿460例,分别采用被动颗粒凝集法、RNA恒温扩增法和间接免疫荧光法分别检测MP混合抗体、MP RNA和抗MP-IgM抗体。以... 目的探讨支原体肺炎患儿不同检测方法的肺炎支原体(MP)阳性检出率,为有效诊断儿童MP感染提供依据。方法选取疑似MP感染患儿460例,分别采用被动颗粒凝集法、RNA恒温扩增法和间接免疫荧光法分别检测MP混合抗体、MP RNA和抗MP-IgM抗体。以临床诊断为标准,分析3种方法的检测性能。结果 460例疑似MP感染患儿中有124例被临床确诊为支原体肺炎。以临床诊断为判断标准,患儿MP混合抗体滴度1∶80、1∶160、1∶320、1∶640和1∶1 280对应的MP阳性率分别为21.7%、28.2%、44.8%、52.7%和66.6%。被动颗粒凝集法的敏感性和特异性分别为83.1%和71.4%,RNA恒温扩增法的敏感性和特异性分别为91.1%和90.9%,间接免疫荧光法的敏感性和特异性分别为85.5%和83.3%。将124例支原体肺炎患儿按年龄分为<3岁(56例)、4~6岁(43例)及7~12岁(25例),4~6岁患儿MP RNA阳性率明显高于<3岁患儿及7~12岁患儿(P<0.05);按性别分组,男童组与女童组之间MP RNA阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。患儿夏季和秋季的MP RNA阳性率明显高于春季和冬季(P<0.01)。结论被动颗粒凝集法MP混合抗体滴度≥1:320的检测效能较高,可用于辅助诊断MP感染。3种方法中RNA恒温扩增法的敏感性和特异性最高。 展开更多

关键词 肺炎支原体 被动颗粒凝集法 间接免疫荧光法 rna恒温扩增法 儿童 支原体肺炎

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RNA恒温扩增法在肺炎支原体检测中的应用 被引量：12

15

作者 周杰 张莉 +3 位作者 张鲍虎 黄伟忠 徐康立 张扬 《海南医学》 CAS 2017年第9期1433-1435,共3页

目的探讨RNA恒温扩增法检测肺炎支原体的可行性及其应用价值。方法采集2016年5~7月在我院住院治疗的200例患急性呼吸道感染儿童咽拭子,分别用RNA恒温扩增法和PCR荧光探针法进行肺炎支原体检测,分别计算两种检测方法的检出率,根据公式计... 目的探讨RNA恒温扩增法检测肺炎支原体的可行性及其应用价值。方法采集2016年5~7月在我院住院治疗的200例患急性呼吸道感染儿童咽拭子,分别用RNA恒温扩增法和PCR荧光探针法进行肺炎支原体检测,分别计算两种检测方法的检出率,根据公式计算灵敏度和特异性,并进行统计学分析。结果 RNA恒温扩增法检出肺炎支原体17例,检出率为8.5%,PCR荧光探针法检出肺炎支原体18例,检出率为9.0%,两种方法的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05);RNA恒温扩增法与PCR荧光探针法相比灵敏度为88.9%、特异度为99.5%。结论 RNA恒温扩增法与PCR荧光探针法检出率相当,具有较高的灵敏度和特异度,可以作为一种新的方法用于肺炎支原体临床检测。 展开更多

关键词 rna恒温扩增法 PCR荧光探针法 肺炎支原体

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鼻咽癌组织的显微切割及其RNA线性扩增 被引量：8

16

作者 周艳宏 曾朝阳 +12 位作者 熊炜 罗晓敏 李小玲 范松青 张文玲 刘华英 李征 杨一新 武明花 唐珂 曹利 沈守荣 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期463-467,共5页

从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,... 从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,显微切割技术来获得高纯度鼻咽癌细胞,利用RNA线性扩增技术得到cDNA微阵列实验所需RNA.结果表明:利用RNAlater技术可以很好地保持组织RNA的稳定,通过优化显微切割和RNA线性扩增的条件获得了cDNA微阵列实验所需的高纯度、高质量RNA. 展开更多

关键词 rnalater技术 手工显微切割 rna线性扩增技术 CDNA微阵列

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基于RNA恒温扩增技术诊断的儿童肺炎支原体脑炎临床特征分析 被引量：11

17

作者 郑萍 张建昭 +5 位作者 董静静 冯硕 赵汉青 李冠男 孙红妹 陈倩 《中国医刊》 CAS 2020年第1期72-76,共5页

目的分析基于RNA恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT)诊断的儿童肺炎支原体脑炎(Mycoplasma pneumoniae encephalitis,MPIE)的临床特征。方法选取2017年6月1日至2018年5月31日在首都儿科研究所神经内科住院治疗... 目的分析基于RNA恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT)诊断的儿童肺炎支原体脑炎(Mycoplasma pneumoniae encephalitis,MPIE)的临床特征。方法选取2017年6月1日至2018年5月31日在首都儿科研究所神经内科住院治疗的临床符合脑炎/脑膜炎的患儿,应用SAT检测其脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)RNA,同时检测血清的MP抗体(MP-IgG、MP-IgM)及CSF中的其他病原,分析CSFMP-RNA阳性诊断MPIE患儿的临床特征、脑电图及影像学特点。结果入组的177例脑炎/脑膜炎患儿中CSFMP-RNA阳性诊断MPIE为22例(12.43%)。其中神经系统症状包括意识障碍(68.18%)、抽搐(45.45%)、头痛(22.73%)、癫痫持续状态(18.18%)、精神行为异常(9.09%)、脑膜刺激症状(9.09%)、小脑共济失调(9.09%)、偏瘫(9.09%)、视力模糊(4.55%);CSF白细胞升高者5例,细胞计数(23~226)×10^6/L;CSF轻度蛋白升高者2例(分别为4800mg/L、7503mg/L);脑电图异常者12例,头颅影像学异常者7例。MPIE患儿经阿奇霉素抗MP感染治疗均见效,仅1例遗留反复抽搐发作,余21例无神经系统后遗症。结论 MP是儿童脑炎/脑膜炎的常见病因之一,儿童MPIE神经系统症状各异,其CSF、脑电图及神经影像学无特异性。早期诊断及治疗有助于改善患儿预后。 展开更多

关键词 肺炎支原体 脑炎 rna恒温扩增技术 儿童

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基于RNA恒温扩增技术分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体感染的流行病学特点 被引量：9

18

作者 王朝 王维 +4 位作者 郭伟 吕玲 李维超 李会强 林书祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期223-228,共6页

目的分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体(MP)感染的流行病学特点,探讨RNA恒温扩增技术(SAT)在MP检测中的应用。方法收集2016年5月-2018年5月在天津市儿童医院住院的1 782例呼吸道感染患儿的MP-RNA检测结果和其他临床资料,进行回... 目的分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体(MP)感染的流行病学特点,探讨RNA恒温扩增技术(SAT)在MP检测中的应用。方法收集2016年5月-2018年5月在天津市儿童医院住院的1 782例呼吸道感染患儿的MP-RNA检测结果和其他临床资料,进行回顾性分析。结果 2016年5月-2018年5月天津市儿童医院呼吸道感染住院儿童MP总检出率为39.79%,男性患儿MP检出率为36.62%,女性为43.63%,女性患儿平均年龄及MP检出率均高于男性(χ~2=9.04,P<0.05)。MP感染见于各年龄组住院儿童,新生儿与婴儿组、幼儿组、学龄前期组和学龄期组患儿的MP检出率分别为9.76%、26.28%、48.08%和63.51%。MP感染全年可见,春夏秋冬四季检出率分别为23.15%、31.65%、59.50%和44.73%,秋冬季MP检出率高于春夏季(χ~2=114.70,P<0.05)。肺泡灌洗液、痰液、咽拭子和胸腹水的MP-RNA阳性率分别为77.89%、20.38%、32.15%和27.27%。MP-RNA与MP-DNA检测结果存在差异(P<0.05)。结论天津地区呼吸道感染住院儿童中,女性患儿MP检出率高于男性,总的MP检出率随着患儿年龄的增大而增高,MP检出率秋季最高,肺泡灌洗液MP-RNA阳性率明显高于其他标本类型。RNA恒温扩增技术适用于MP感染早期诊断和病情监测。 展开更多

关键词 肺炎支原体检测 rna恒温扩增技术 流行病学分析 儿童

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显微切割结合RNA线性扩增技术的应用 被引量：7

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作者 韩为农 李虹 +2 位作者 王爽 周文 姚开泰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1022-1025,共4页

背景与目的:当对无间质细胞混杂的肿瘤细胞进行选择性分析时,显微切割技术是不可缺少的,然而,从显微切割所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文的目的是寻找一特异方法,将鼻咽癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其扩增,以备进一步... 背景与目的:当对无间质细胞混杂的肿瘤细胞进行选择性分析时,显微切割技术是不可缺少的,然而,从显微切割所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文的目的是寻找一特异方法,将鼻咽癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其扩增,以备进一步研究。方法:采用显微切割技术从鼻咽癌组织冰冻切片中获取鼻咽癌细胞,提取RNA并对微量RNA进行体外转录,然后,用RT-PCR分别验证扩增RNA的β-actin和GADPH基因表达水平。结果:从鼻咽癌组织中获取了20000～40000个细胞,抽提RNA,扩增后获得了片断大小为0.5～2.5kb的RNA,在β-actin、GADPH表达完整。结论:显微切割结合RNA线性扩增技术能成功地获取较为单一的鼻咽癌细胞,扩增后的RNA完整性较好,能运用于进一步研究中。 展开更多

关键词 显微切割 rna线性扩增 RT-PCR方法 鼻咽肿瘤

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肺炎支原体RNA恒温扩增技术和血清抗体法在儿童肺炎支原体检测中的比较 被引量：8

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作者 王紫荆 赵云 +9 位作者 胡小林 方剑 尹清金 侯晓华 谢屹峰 谢光莉 马云驰 庄琴 谢巧林 周晓玲 《实用医院临床杂志》 2019年第5期255-257,共3页

目的评价肺炎支原体RNA恒温扩增法在儿童肺炎支原体感染病原学检测中的价值。方法选取2017年3月至2018年12月在我院住院治疗的儿童肺炎患儿2647例,入院当天采集患儿的咽拭子和静脉血,分别采用RNA恒温扩增法和血清学抗体法进行肺炎支原... 目的评价肺炎支原体RNA恒温扩增法在儿童肺炎支原体感染病原学检测中的价值。方法选取2017年3月至2018年12月在我院住院治疗的儿童肺炎患儿2647例,入院当天采集患儿的咽拭子和静脉血,分别采用RNA恒温扩增法和血清学抗体法进行肺炎支原体病原检测,计算两种检测方法的检出率,并进行统计学分析。结果RNA恒温扩增法检出肺炎支原体284例,检出率10.73%,血清学抗体法检出肺炎支原体212例,检出率8.01%,两种方法检出率比较差异有统计学意义(P<0.05);病程≤7天组,RNA恒温扩增法检出肺炎支原体199例,检出率11%,血清学抗体法检出肺炎支原体137例,检出率7.57%,差异有统计学意义(P<0.05);病程>7天组,RNA恒温扩增法检出肺炎支原体85例,检出率10.14%,血清学抗体法检出肺炎支原体75例,检出率8.95%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺炎支原体RNA恒温扩增法可以作为一种新的方法用于肺炎支原体感染的早期临床检测,值得临床大力推广应用。 展开更多

关键词 肺炎支原体 rna恒温扩增技术 血清抗体 儿童肺炎

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