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利用RNA干扰效应阻抑鼻咽癌细胞bcl-xL基因表达和诱导癌细胞凋亡的研究 被引量：6
1
作者 李继霞 周克元 +3 位作者 蔡康荣 梁统 唐旭东 张月飞 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期347-351,共5页
目的研究RNA干扰(RNA interference)效应对人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE-2Z bcl-xL基因表达的抑制作用及其对CNE-2Z细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用.方法使用美国Ambion公司提供的网上设计软件设计针对人bcl-xL基因的小干扰RNA(siRNA)序列... 目的研究RNA干扰(RNA interference)效应对人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE-2Z bcl-xL基因表达的抑制作用及其对CNE-2Z细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用.方法使用美国Ambion公司提供的网上设计软件设计针对人bcl-xL基因的小干扰RNA(siRNA)序列,体外转录试剂盒合成siRNA;荧光素标记试剂盒标记siRNA;脂质体法将siRNA转入CNE-2Z细胞株.荧光显微镜下观察siRNA的转染效率;RT-PCR法半定量检测siRNA对bcl-xL基因表达的抑制作用;噻唑蓝法检测siRNA对细胞生长增殖抑制作用;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用.结果荧光显微镜下荧光素标记的siRNA转染组可见到细胞内清晰的绿色荧光,而在未转染siRNA对照组未见;各siRNA转染组bcl-xL mRNA表达水平有不同程度的下调,下调范围在10%～70%之间,而在未转染对照组内bcl-xL mRNA表达水平无明显改变;细胞生长增殖抑制率在一定范围内具有剂量依赖性(剂量增加,抑制率增高)和时间依赖性;各浓度siRNA4转染组可不同程度诱导CNE-2Z细胞凋亡.结论体外转录合成的siRNA能特异有效地下调bcl-xL基因的表达,不同序列特异性的siRNA下调bcl-xL基因表达的能力不同;瞬时转染bcl-xL siRNA4能有效抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导其凋亡;siRNA不仅为基因组功能分析提供了强有力的工具,而且为抗鼻咽癌基因治疗提供了新的思路. 展开更多
关键词 rna干扰效应 鼻咽癌 肿瘤细胞 BCL-XL 基因表达 细胞凋亡
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