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双链RNA通过激活PKR/eIF2α通路抑制恶性胶质瘤生长和迁移
1
作者 燕群 卞莎莎 束敏峰 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期295-305,共11页
目的研究放疗模拟剂博来霉素(Zeocin)诱导的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)对PKR(double-stranded RNA-dependent protein kinase)通路激活和RNA m6A相关酶的影响,从而探索其抑制恶性胶质瘤生长和迁移的分子机制。方法通过划痕实... 目的研究放疗模拟剂博来霉素(Zeocin)诱导的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)对PKR(double-stranded RNA-dependent protein kinase)通路激活和RNA m6A相关酶的影响,从而探索其抑制恶性胶质瘤生长和迁移的分子机制。方法通过划痕实验、平板克隆形成实验、CCK8实验检测Zeocin处理后的恶性胶质瘤细胞生长和迁移情况;通过Western blot和RT-qPCR实验检测甲基修饰酶的mRNA表达水平;使用J2抗体检测Zeocin处理胶质瘤细胞后细胞内dsRNA的产生水平;利用Western blot实验检测相关甲基修饰酶的表达水平、双链RNA依赖的蛋白激酶R(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)及真核生物起始因子2α(eukaryotic initiating factor 2α,eIF2α)的磷酸化水平。结果放疗模拟剂Zeocin显著抑制恶性胶质瘤细胞的生长和迁移;Zeocin处理恶性胶质瘤细胞可产生内源的双链RNA增多;随着Zeocin浓度的增加,磷酸化的PKR与eIF2α水平均显著上升;Zeocin可以剂量依赖性下调胶质瘤细胞内总m6A水平;Zeocin可以选择性下调甲基化酶METTL14的蛋白水平;Zeocin对m6A相关酶的mRNA水平无影响。结论Zeocin可能通过下调恶性胶质瘤细胞中RNA的m6A水平,产生较多的dsRNA,进而激活PKR/eIF2α免疫调节通路,最终导致肿瘤生长抑制。 展开更多
关键词 胶质瘤 m6A甲基化 rna修饰 双链rna PKR
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MeRIP-qPCR技术检测RNA m^(6)A甲基化修饰对t(8;21)AML细胞中KDM4B基因表达的调控作用
2
作者 李雨晴 邵杨柳 +2 位作者 李梦月 王莉莉 高晓宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期382-388,共7页
目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t... 目的:通过MeRIP联合逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术,证明WTAP介导的RNA m^(6)A修饰对伴t(8;21)急性髓系白血病(AML)细胞中KDM4B基因的直接调控作用。方法:采用靶向WTAP或KDM4B基因的短发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体沉默t(8;21)AML细胞系Kasumi-1和SKNO-1中WTAP或KDM4B基因表达,以转染随机打乱序列(scramble)的shRNA的细胞为对照。用超纯RNA提取试剂盒(DNaseⅠ)提取细胞RNA,Magna MeRIP^(TM)m^(6)A Kit试剂盒富集甲基化修饰片段,并通过RT-qPCR检测m^(6)A甲基化修饰的RNA区域;采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)和逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测细胞中WTAP、KDM4B蛋白和mRNA的表达水平。采用克隆形成实验检测细胞体外克隆形成能力。结果:沉默Kasumi-1细胞中WTAP的表达后,m^(6)A甲基化修饰在KDM4B mRNA 3’UTR的富集程度显著下降(P<0.01),沉默Kasumi-1和SKNO-1细胞中WTAP的表达可显著抑制KDM4B蛋白(P<0.001)和mRNA表达水平(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)、细胞体外克隆形成能力下降(Kasumi-1:P<0.001;SKNO-1:P<0.01)。结论:t(8;21)AML细胞系中,WTAP通过调控KDM4B基因mRNA 3’UTR的m^(6)A修饰调控KDM4B的表达,沉默KDM4B表达可以抑制t(8;21)AML细胞增殖。 展开更多
关键词 MeRIP-qPCR 急性髓系白血病 t(8 21)染色体易位 KDM4B rna m^(6)A甲基化修饰
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养精种玉汤经FTO调控卵巢细胞自噬的机制研究 被引量：1
3
作者 李宛静 邓蒂斯 +2 位作者 汪景仪 张俊新 许金榜 《海峡药学》 2022年第10期1-4,共4页
目的研究养精种玉汤经FTO对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠细胞自噬的机制。方法正常SD雌性大鼠,雷公藤甲素制备DOR大鼠模型,设空白组、模型组、DHEA组、养精种玉汤低、中、高剂量组6组,每组各10只。ELISA检测血清E_(2)、FSH、AMH浓度;W... 目的研究养精种玉汤经FTO对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠细胞自噬的机制。方法正常SD雌性大鼠,雷公藤甲素制备DOR大鼠模型,设空白组、模型组、DHEA组、养精种玉汤低、中、高剂量组6组,每组各10只。ELISA检测血清E_(2)、FSH、AMH浓度;Western Blotting测定卵巢组织中FTO、ULK1、LC3BⅡ的蛋白表达量。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠E_(2)、AMH下降(P<0.05)而FSH上升(P<0.05),FTO、ULK1、LC3BⅡ表达水平均下调(P<0.05);(2)与模型组比较,中药高剂量组E_(2)、FSH显著升高(P<0.05),中药中剂量与低剂量组AMH显著升高(P<0.05),中药高剂量组和中剂量组FTO、ULK1、LC3B-Ⅱ蛋白相对表达显著升高(P<0.05),低剂量组及DHEA组ULK1蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论养精种玉汤能通过上调RNA-m6A甲基化修饰的脱甲基酶FTO的表达,启动卵巢细胞自噬,从而调节卵巢性激素水平,改善DOR模型大鼠的卵巢功能。 展开更多
关键词 养精种玉汤 rna-m6A甲基化修饰 脂肪含量和肥胖相关蛋白(FTO) 细胞自噬
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消化系统肿瘤m6A甲基化修饰对非编码RNA调控的研究进展
4
作者 李晓文 吴巍芸 《宁夏医科大学学报》 2023年第10期1047-1052,共6页
m6A甲基化修饰是哺乳动物中最丰富的RNA修饰方式,是表观遗传学重要的调控方法之一,通过添加、移除或者识别结合m6A位点,参与RNA合成与代谢过程,进而调控基因的表达。非编码RNA(ncRNA)是一类缺乏编码多肽或蛋白质能力的RNA,在肿瘤的发生... m6A甲基化修饰是哺乳动物中最丰富的RNA修饰方式,是表观遗传学重要的调控方法之一,通过添加、移除或者识别结合m6A位点,参与RNA合成与代谢过程,进而调控基因的表达。非编码RNA(ncRNA)是一类缺乏编码多肽或蛋白质能力的RNA,在肿瘤的发生和发展中发挥着重要作用,是癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、耐药等生物学特性的调节因子。越来越多的研究表明,m6A甲基化修饰可通过调控ncRNA参与肿瘤的发生和发展。本研究就消化系统肿瘤中m6A甲基化修饰对ncRNA表达调控的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 m6A甲基化修饰 非编码rna 消化系统肿瘤 调控机制
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m^(6)A甲基化在肺癌发生发展中调控机制的研究进展
5
作者 郑楷 郭晓阳 +1 位作者 吴旺 李标 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第17期1353-1360,共8页
N6-甲基腺嘌呤修饰(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是真核细胞中最常见的RNA修饰形式之一,属于表观遗传学修饰的范畴,涉及多种肿瘤的发生和发展。肺癌是全球癌症死亡率最高的恶性肿瘤之一,其发病机制复杂,且早期诊断困难,治疗手段有限。... N6-甲基腺嘌呤修饰(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是真核细胞中最常见的RNA修饰形式之一,属于表观遗传学修饰的范畴,涉及多种肿瘤的发生和发展。肺癌是全球癌症死亡率最高的恶性肿瘤之一,其发病机制复杂,且早期诊断困难,治疗手段有限。m^(6)A修饰在肺癌中发挥重要作用,相关分子的表达异常导致m^(6)A修饰的失调,从而影响到肺癌的发展。这一现象提示m^(6)A修饰相关分子可能成为肺癌治疗的潜在靶点或诊断标志物。因此,本文综述了m^(6A)修饰在肺癌发生发展过程中的作用,探讨了其与肺癌细胞生物行为及微环境的关系,并讨论了m^(6)A修饰与肺癌相关信号通路之间的相互作用,为深入理解m^(6)A甲基化在肺癌发生和发展中的作用提供了宝贵的参考,对于开发新的诊断和治疗策略具有重要意义。 展开更多
关键词 m^(6)A甲基化 肺癌 rna修饰 信号通路 细胞生物行为
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N6-甲基腺苷甲基化修饰在脓毒症急性肺损伤中的研究进展
6
作者 李建龙 梁群 +2 位作者 潘郭海容 付晨菲 杨洋 《中国急救医学》 CAS CSCD 2024年第11期1007-1012,F0003,共7页
脓毒症作为一种由病原微生物引起的全身性炎症反应综合征,常导致多器官功能障碍,其中肺是最易受影响的靶器官,急性肺损伤(ALI)的发病率和病死率均较高。N6-甲基腺苷(m6A)作为最常见的信使RNA(mRNA)修饰,通过甲基转移酶、去甲基转移酶和... 脓毒症作为一种由病原微生物引起的全身性炎症反应综合征,常导致多器官功能障碍,其中肺是最易受影响的靶器官,急性肺损伤(ALI)的发病率和病死率均较高。N6-甲基腺苷(m6A)作为最常见的信使RNA(mRNA)修饰,通过甲基转移酶、去甲基转移酶和甲基化识别蛋白的调控,影响基因表达、mRNA稳定性和翻译效率。研究表明,m6A修饰在脓毒症诱导的ALI中发挥重要作用,特别是甲基转移酶3(METTL3)等关键酶的表达变化与ALI的病理过程密切相关。相关分子的表达异常,常导致m6A修饰失调,从而影响ALI发展。这一现象提示,m6A修饰相关分子可能成为脓毒症ALI治疗的潜在靶点或诊断标志物。本研究对m6A修饰在脓毒症ALI发生、发展过程中的作用进行综述,为深入理解m6A甲基化在脓毒症ALI中的作用提供全面视角,为优化治疗策略和新药物的研发提供新思路。 展开更多
关键词 N6-甲基腺苷(m6A)甲基化 脓毒症急性肺损伤 rna修饰
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m^(6)A甲基化酶METTL3和WTAP在牦牛组织及脂肪细胞中的表达 被引量：2
7
作者 张永峰 顾亚荣 +1 位作者 马兰花 阎萍 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期161-170,共10页
本研究旨在探究m^(6)A RNA甲基化酶METTL3和WTAP在牦牛(Bos grunniens)不同组织、前体脂肪细胞增殖与分化过程中的表达模式和前体脂肪细胞分化过程mRNA m^(6)A的变化水平。采用qRT-PCR检测牦牛皮下脂肪、肌肉、心、肝、脾、肺、肾和皮... 本研究旨在探究m^(6)A RNA甲基化酶METTL3和WTAP在牦牛(Bos grunniens)不同组织、前体脂肪细胞增殖与分化过程中的表达模式和前体脂肪细胞分化过程mRNA m^(6)A的变化水平。采用qRT-PCR检测牦牛皮下脂肪、肌肉、心、肝、脾、肺、肾和皮下脂肪不同时期(18和30月龄)METTL3及WTAP的mRNA表达水平。应用I型胶原酶消化法获取牦牛前体脂肪细胞,油红O染色和脂肪分化标志基因的检测建立牦牛前体脂肪细胞分化模型,以及qRTPCR检测前体脂肪细胞增殖分化阶段METTL3和WTAP的mRNA表达水平。结果表明,肝脏组织中METTL3表达最高(P<0.05),皮下脂肪组织表达量最低(P<0.05);WTAP在皮下脂肪组织中的表达最为丰富,脾脏中的表达量最低(P<0.05)。30月龄皮下脂肪组织中METTL3和WTAP mRNA表达量高于18月龄。前体脂肪细胞诱导分化12 d时,细胞中出现多而密的脂环,脂肪细胞分化特异性标志基因FABP4、C/EBPα和PPARγ第12天的表达量显著高于第0天(P<0.05)。METTL3和WTAP的表达量在细胞增殖阶段(24、48和72 h)呈现“下降-上升”的表达趋势(P<0.05)。在牦牛前体脂肪细胞分化阶段(0、4、8和12 d),METTL3表达量呈现“上升-下降-上升”的趋势,WTAP呈现“上升-下降”的趋势。细胞分化阶段mRNA m^(6)A水平呈现逐渐上升的趋势,在分化12 d时细胞内RNA的m^(6)A丰度最高(P<0.05)。本研究获得METTL3和WTAP在牦牛不同组织和前体脂肪细胞增殖分化阶段的变化规律及细胞分化过程中mRNA m^(6)A水平变化,初步揭示WTAP和METTL3对牦牛脂代谢具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 牦牛 m^(6)A rna甲基化修饰 METTL3 WTAP 组织表达 前体脂肪细胞 脂肪细胞增殖与分化
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m^6A-RNA甲基化在正常造血和急性髓系白血病中的研究进展
8
作者 张津京 李艳 张蕊 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第9期1568-1571,共4页
m^6A-RNA甲基化是一种类似于DNA甲基化或组蛋白修饰的表观遗传修饰方式。是由甲基化转移酶、去甲基转移酶和相关阅读蛋白共同调节的一种动态可逆的生物学过程,可以对mRNA产生不同的生物学作用,包括mRNA剪切、出核、降解、影响mRNA稳定... m^6A-RNA甲基化是一种类似于DNA甲基化或组蛋白修饰的表观遗传修饰方式。是由甲基化转移酶、去甲基转移酶和相关阅读蛋白共同调节的一种动态可逆的生物学过程,可以对mRNA产生不同的生物学作用,包括mRNA剪切、出核、降解、影响mRNA稳定性和翻译效率等。越来越多的研究表明m^6A-RNA甲基化在正常造血和急性髓系白血病中发挥重要的调控作用。本文就m^6A-RNA甲基化在正常造血和AML中的研究进展作一综述,旨在从表观转录组学层面深入了解AML的发病机制,为探索AML靶向治疗药物提供一种新的研究策略。 展开更多
关键词 m^6A-rna甲基化 表观遗传修饰 急性髓系白血病
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m6A相关长链非编码RNA在黑色素瘤患者预后中的作用研究
9
作者 张玉艳 黄亚鹏 +3 位作者 陈倩梅 龙惠 黄久遂 朱慧兰 《今日药学》 CAS 2022年第6期453-461,共9页
目的探讨N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰相关的长链非编码RNA(lncRNA)在黑色素瘤预后中的作用以及可能的机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载黑色素瘤患者的测序和临床数据并进行整合,利用皮尔逊相关系数分析获得与m6A甲基化修饰... 目的探讨N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰相关的长链非编码RNA(lncRNA)在黑色素瘤预后中的作用以及可能的机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载黑色素瘤患者的测序和临床数据并进行整合,利用皮尔逊相关系数分析获得与m6A甲基化修饰酶相关的lncRNA,并基于这些lncRNA在肿瘤患者中的表达通过一致性聚类分析确定黑色素瘤患者的不同分子亚型,进一步分析患者亚型之间肿瘤微环境的差异分布,筛选存在预后价值的lncRNA并进行基因评分(gene score=∑PC1i+∑PC2i),进而分析高/低评分患者之间的差异表达基因与分子通路。结果通过获取的468例黑色素瘤患者的基因测序结果和临床数据,筛选出453个与m6A甲基化修饰酶相关的lncRNA,并基于这些lncRNA在肿瘤患者中确定出两种分子亚型—cluster1与clueter2,其中cluster1的预后明显差于cluster2(P<0.001),而且亚型之间的肿瘤微环境存在明显差异,其中M2型巨噬细胞和滤泡辅助性T细胞在cluster1中表达明显高于cluster2(P<0.05),而静息性NK杀伤细胞、激活的记忆CD4T细胞及M1型巨噬细胞在cluster1中表达明显低于cluster2(P<0.05)。同时获得85个存在预测预后价值的m6A-lncRNA(P<0.05),基因评分高的情况下黑色素瘤患者预后更佳,且高评分患者中的浸润性免疫细胞更为活跃,对于应用PD1与CTLA4免疫抑制剂治疗的应答率更高,此外,高/低评分患者间存在大量差异表达基因,并富集在T细胞激活等免疫细胞调控通路。结论本研究显示m6A甲基转移酶相关lncRNAs与黑色素瘤的预后密切相关,m6A-lncRNAs可能在黑色素瘤肿瘤微环境分布中发挥着一定的调控功能,并可有效预测其对PD1与CTLA4免疫抑制剂治疗反应。 展开更多
关键词 黑色素瘤 N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰 长链非编码rna 免疫调节 基因评分
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m6A RNA甲基化修饰调控非小细胞肺癌作用机制的研究进展
10
作者 韩阳 姜靖洁 +3 位作者 桑舒柳 甘姗珊 毕凌 龚亚斌 《上海中医药大学学报》 CAS 2023年第4期83-89,共7页
N6-甲基腺苷(m6A)修饰是真核细胞RNA中普遍存在的一种动态可逆的化学修饰,可以调控各种RNA(包括lncRNA、mRNA、snRNA、rRNA和tRNA)的剪切、代谢、翻译和稳定性等。m6A能促进肿瘤细胞的生长增殖,并对放疗及化疗产生一定的抵抗作用,故以m6... N6-甲基腺苷(m6A)修饰是真核细胞RNA中普遍存在的一种动态可逆的化学修饰,可以调控各种RNA(包括lncRNA、mRNA、snRNA、rRNA和tRNA)的剪切、代谢、翻译和稳定性等。m6A能促进肿瘤细胞的生长增殖,并对放疗及化疗产生一定的抵抗作用,故以m6A为靶点进行靶向治疗可能成为一种新的癌症治疗方法。通过综述m6A RNA甲基化修饰参与非小细胞肺癌(NSCLC)的增殖、侵袭和转移、耐药、不良预后,以及中医药通过调控m6A RNA甲基化修饰抑制NSCLC等,为NSCLC的发病机制探讨及临床治疗提供新的理论依据和应对策略。 展开更多
关键词 m6A rna甲基化修饰 非小细胞肺癌 肿瘤增殖 靶向耐药 中药干预 综述
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