期刊文献+
共找到15篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
锌指蛋白A20对人单核细胞LPS应答的影响 被引量:13
1
作者 吴丽娟 刘国栋 +2 位作者 陈伟 蒋建新 朱佩芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1388-1390,共3页
目的调查锌指蛋白A20表达对人单核细胞LPS应答的影响,探讨A20可能的炎症调控作用与机制及其潜在的临床应用价值。方法采用细胞转染技术制备锌指蛋白A20人单核细胞转基因细胞模型和基因沉默细胞模型,以LPS攻击细胞,用适时荧光定量PCR技... 目的调查锌指蛋白A20表达对人单核细胞LPS应答的影响,探讨A20可能的炎症调控作用与机制及其潜在的临床应用价值。方法采用细胞转染技术制备锌指蛋白A20人单核细胞转基因细胞模型和基因沉默细胞模型,以LPS攻击细胞,用适时荧光定量PCR技术测定锌指蛋白A20表达水平,用ELISA技术分析细胞核转录因子NF-κB活性及其依赖性炎性细胞因子TNF-α水平。结果锌指蛋白A20过表达组细胞遭受LPS攻击后其NF-κB活性和TNF-α水平明显低于LPS对照组(P<0.01),锌指蛋白A20基因表达抑制组细胞其NF-κB活性和TNF-α水平明显高于LPS对照组(P<0.01)。结论锌指蛋白A20对人单核细胞LPS应答具有明显的调节作用,可以明显降低炎症重要核转录因子活性和降低促炎细胞因子的表达。对脓毒症过度炎症反应实施干预具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 锌指蛋白A20 单核细胞 内毒素 rna干扰技术 NF-ΚB TNF-α
下载PDF
lncRNA NEAT1在鼻咽癌中的表达情况及其对鼻咽癌放疗敏感性的影响
2
作者 莫柒艳 黄欢 +6 位作者 张维明 韦志松 石丹丽 韩露 农思凯 韩宇源 林国享 《广西医学》 CAS 2024年第8期1217-1225,共9页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核旁斑富集转录本1(NEAT1)在鼻咽癌中的表达情况及其对鼻咽癌放疗敏感性的影响。方法(1)使用UALCAN数据库分析NEAT1在头颈部鳞状细胞癌中的表达情况及其与患者临床分期、预后的关系。(2)利用实时荧光定量... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核旁斑富集转录本1(NEAT1)在鼻咽癌中的表达情况及其对鼻咽癌放疗敏感性的影响。方法(1)使用UALCAN数据库分析NEAT1在头颈部鳞状细胞癌中的表达情况及其与患者临床分期、预后的关系。(2)利用实时荧光定量PCR检测鼻咽癌组织及正常鼻咽黏膜上皮、人永生化鼻咽上皮细胞NP-69及多株鼻咽癌细胞(CNE-1、CNE-2、CNE-2R、C666-1、C666-1R)中NEAT1的表达情况。(3)使用RNA干扰技术构建NEAT1沉默的CNE-2R细胞[NEAT1-短发夹RNA(shRNA)组],并设立对照组(未转染的CNE-2R细胞)、NEAT1-NC组(转染对照序列的CNE-2R细胞)。给予不同放射剂量X线照射后,检测3组CNE-2R细胞的存活率、凋亡率、克隆形成率及放射生物学参数。结果(1)NEAT1在头颈部鳞状细胞癌组织中呈高表达,且表达水平随着头颈部鳞状细胞癌分期的增加呈升高趋势(P<0.05),但不同NEAT1表达水平患者的总生存率差异无统计学意义(P>0.05)。(2)相较于正常鼻咽黏膜上皮组织,鼻咽癌组织中NEAT1表达上调(P<0.05)。相较于NP-69细胞,NEAT1在鼻咽癌细胞中的表达上调(P<0.05),其中CNE-2R细胞中的表达量最高(P<0.05);放射抗拒性细胞CNE-2R、C666-1R中NEAT1的表达量分别高于放疗敏感性细胞CNE-2、C666-1(P<0.05)。(3)在接受不同剂量X射线照射后,与对照组及NEAT1-NC组比较,NEAT1-shRNA组CNE-2R细胞存活率、克隆形成率及放射生物学参数降低,凋亡率升高(P<0.05),但对照组与NEAT1-NC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论lncRNA NEAT1在鼻咽癌组织和细胞中呈高表达,与肿瘤分期密切相关,沉默NEAT1的表达可增加鼻咽癌的放疗敏感性。 展开更多
关键词 鼻咽癌 放疗敏感性 长链非编码rna 核旁斑富集转录本1 rna干扰技术
下载PDF
RNA干扰技术及其应用研究 被引量:3
3
作者 陈若飞 《畜牧与饲料科学》 2009年第5期49-51,共3页
RNA干涉作用,是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象。是基因转录后沉默作用(PTGS)的重要机制之一。它能定向关闭生物体内某一基因,使其不发挥作用,同时不影响其他基因的功能,便于研究特定基因的功能。在后基因组时代的基因功能研... RNA干涉作用,是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象。是基因转录后沉默作用(PTGS)的重要机制之一。它能定向关闭生物体内某一基因,使其不发挥作用,同时不影响其他基因的功能,便于研究特定基因的功能。在后基因组时代的基因功能研究、基因治疗和药物开发中具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 rna干涉技术 基因转录后沉默 基因功能组应用
下载PDF
膜联蛋白A11对人胃癌细胞株SGC7901氟尿嘧啶耐药性的影响及机制 被引量:2
4
作者 贾楠 李勇 +4 位作者 赵一杰 赵群 范立侨 檀碧波 刘羽 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期610-613,共4页
目的观察膜联蛋白A11(ANXA11)对人胃癌细胞株SGC7901 5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性影响。方法检测人胃癌细胞株SCG7901、BGC823的ANXA11表达。将ANXA11-小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列瞬时转染入SGC7901细胞,应用细胞计数试剂盒(CC... 目的观察膜联蛋白A11(ANXA11)对人胃癌细胞株SGC7901 5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性影响。方法检测人胃癌细胞株SCG7901、BGC823的ANXA11表达。将ANXA11-小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列瞬时转染入SGC7901细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染后各组细胞对不同剂量5-Fu(1、10、20、40、80 μg/ml)的药物敏感性改变。应用流式细胞术检测不同处理组凋亡率,应用定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot检测胸腺嘧啶脱氧核苷合成酶(TS)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达的改变。结果ANXA11 mRNA及蛋白表达量在SGC7901中显著高于BGC823(t=3.212,P=0.033;t=-10.768,P=0.000)。转染组(转染ANXA11-siRNA)细胞的半数抑制剂量(IC50)及20%抑制剂量(IC20)值明显低于阴性、空白对照组(F=47.500,P=0.000;F=45.523,P=0.000)。转染组、联合组凋亡率较阴性(转染NS-siRNA)、空白对照组(转染Lipofectamine?2000)显著升高(F=117.525,P=0.000),且联合组凋亡率较转染组明显升高(t=9.004,P=0.000)。转染组及联合组ANXA11蛋白表达较阴性、空白对照组显著降低(F=118.403,P=0.000)。转染组及联合组bax的表达上调(F=35.608,P=0.000),而bcl-2、TS的表达降低(F=30.048,P=0.000;F=22.874,P=0.000)。结论抑制ANXA11表达能提高人胃癌细胞株SGC7901对5-Fu的敏感性,可能与抑制TS、bcl-2、上调bax的表达有关。 展开更多
关键词 膜联蛋白A11 胃癌 5-氟尿嘧啶 化疗耐药 rna干扰技术
原文传递
Caveolin-1对心脏HERG钾通道功能调控作用的研究 被引量:2
5
作者 马青艳 余宏 林吉进 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第12期1236-1240,共5页
目的既往研究发现caveolin-1参与了多种心脏离子通道的调控作用,但对心脏HERG钾通道是否具有调控作用,则未见报道。研究caveolin-1对心脏HERG钾通道功能的调控作用。方法①基因转染:应用Lipofectamine 2000将pcDNA3.0-caveolin-1质粒和p... 目的既往研究发现caveolin-1参与了多种心脏离子通道的调控作用,但对心脏HERG钾通道是否具有调控作用,则未见报道。研究caveolin-1对心脏HERG钾通道功能的调控作用。方法①基因转染:应用Lipofectamine 2000将pcDNA3.0-caveolin-1质粒和pcDNA3.0-herg转染HEK293细胞,通过G418筛选获得稳定表达细胞株;②脂筏破坏:通过在培养液中加入10mmol/L的甲基-β-环糊精,去除HEK293/HERG细胞膜上的脂筏;③Caveolin-1表达抑制:应用siRNA转染HEK293/HERG细胞抑制caveolin-1表达;④Caveolin-1过度表达:将pcDNA3.0-herg转染HEK293/caveolin-1细胞株,获得caveolin-1过度表达的HEK293/HERG细胞;⑤应用膜片钳技术记录经不同处理后的HERG通道电流。结果①细胞膜脂筏破坏与caveolin-1表达抑制均能显著增大HERG钾通道电流幅度和显著加速尾电流去激活速率;②Caveolin-1过度表达则显著减小了HERG通道电流的振幅并显著缓慢了尾电流的去激活速率。结论 Caveolin-1对心脏HERG钾通道的功能具有负性调控作用。 展开更多
关键词 HERG钾通道 CAVEOLIN-1 rna干扰 脂筏 膜片钳技术
下载PDF
调控细胞分裂周期蛋白6对人类乳头瘤病毒16阳性宫颈癌细胞Caski增殖和凋亡的影响 被引量:1
6
作者 马聪 韩玉斌 +1 位作者 陈云卿 郭文涛 《广西医学》 CAS 2021年第11期1335-1339,共5页
目的探讨调控细胞分裂周期蛋白6(CDC6)对人类乳头瘤病毒(HPV)16阳性宫颈癌细胞Caski增殖和凋亡的影响。方法检测HPV阴性的宫颈癌C33-A细胞株、HPV16阳性的宫颈癌Caski细胞株和SiHa细胞株、HPV18阳性的宫颈癌HeLa细胞株中CDC6蛋白及mRNA... 目的探讨调控细胞分裂周期蛋白6(CDC6)对人类乳头瘤病毒(HPV)16阳性宫颈癌细胞Caski增殖和凋亡的影响。方法检测HPV阴性的宫颈癌C33-A细胞株、HPV16阳性的宫颈癌Caski细胞株和SiHa细胞株、HPV18阳性的宫颈癌HeLa细胞株中CDC6蛋白及mRNA的表达水平。将CDC6小干扰RNA(siRNA)-1、siRNA-2、siRNA-NC分别转染入宫颈癌Caski细胞(分别设为CDC6 siRNA-1组、CDC6 siRNA-2组、siRNA-NC组),并设立空白对照组,24 h和48 h后分别检测各组CDC6 mRNA和蛋白的表达水平,筛选出最佳的siRNA序列。转染后,检测最佳siRNA序列的CDC6 siRNA组、siRNA-NC组、空白对照组的细胞增殖能力、细胞周期及细胞凋亡率。结果(1)Caski细胞、HeLa细胞、SiHa细胞、C33-A细胞的CDC6 mRNA的相对表达量依次降低;C33-A细胞CDC6蛋白的相对表达量低于其他3种细胞,Caski细胞和HeLa细胞CDC6蛋白的相对表达量均高于SiHa细胞(均P<0.05)。(2)CDC6 siRNA-1组CDC6 mRNA及蛋白相对表达量低于CDC6 siRNA-2、siRNA-NC组与空白对照组(均P<0.05),故选用siRNA-1序列进行后续研究。(3)转染48 h后,与siRNA-NC组与空白对照组比较,CDC6 siRNA-1组的细胞增殖能力降低,细胞凋亡率增加,细胞G 1期变长、G 2期缩短(均P<0.05)。结论沉默CDC6能够有效干扰HPV16阳性宫颈癌Caski细胞的增殖,靶向抑制CDC6有望成为早期治疗宫颈癌的新途径。 展开更多
关键词 宫颈癌 细胞分裂周期蛋白6 人类乳头瘤病毒16 CASKI细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 rna干扰技术
下载PDF
RNA干扰Stat3基因对EC-1细胞侵袭转移和增殖能力的影响
7
作者 轩小燕 李珊珊 +5 位作者 郑献召 李娜 王丰 高远 张红燕 闫爱华 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2009年第7期606-609,共4页
目的:构建针对信号转导子和转录激活子3(Stat3)基因的siRNA表达载体,研究Stat3基因沉默对人食管鳞癌EC-1细胞侵袭转移及增殖的影响.方法:构建pSUPER-EG-FP-Stat3siRNA表达载体,转染EC-1细胞,RT-PCR,Western Blot检测Stat3的表达;Boyden-... 目的:构建针对信号转导子和转录激活子3(Stat3)基因的siRNA表达载体,研究Stat3基因沉默对人食管鳞癌EC-1细胞侵袭转移及增殖的影响.方法:构建pSUPER-EG-FP-Stat3siRNA表达载体,转染EC-1细胞,RT-PCR,Western Blot检测Stat3的表达;Boyden-chamber体外侵袭实验检测siRNA对细胞侵袭转移能力的影响,MTT法检测siRNA对细胞增殖能力的作用.结果:酶切和测序证实pSUPER-EGFP-Stat3siRNA表达载体构建成功;RT-PCR,Western Blot结果表明,siRNA能有效地降解EC-1细胞中Stat3基因的mRNA,下调Stat3蛋白的表达;转染siRNA后,与对照组相比,EC-1细胞侵袭转移和增殖能力明显下降.结论:成功构建针对Stat3基因的siRNA表达载体,可有效沉默Stat3基因在食管鳞癌EC-1细胞中的表达,抑制EC-1细胞的侵袭转移及增殖能力,可为食管癌的基因治疗提供理论依据. 展开更多
关键词 STAT3基因 rna干扰 EC-1细胞 肿瘤转移 鳞状细胞 食管肿瘤
下载PDF
葡萄糖转运蛋白5低表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响及其可能机制 被引量:1
8
作者 沈朝 刘树江 +2 位作者 苑萌萌 吴文杰 李志强 《广西医学》 CAS 2021年第4期459-463,483,共6页
目的分析抑制葡萄糖转运蛋白5(Glut5)的表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响,并基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨其可能的作用机制。方法取对数生长期的MG-63细胞分为Con组、NC组和短发夹RNA(shRNA)-Glut5组。Con组未... 目的分析抑制葡萄糖转运蛋白5(Glut5)的表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响,并基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨其可能的作用机制。方法取对数生长期的MG-63细胞分为Con组、NC组和短发夹RNA(shRNA)-Glut5组。Con组未进行基因干扰,NC组和shRNA-Glut5组则采用RNA干扰技术将杂序的shRNA、shRNA-Glut5分别转染至MG-63细胞。转染48 h后,检测3组细胞的增殖能力、细胞克隆数和迁移能力,以及细胞中Glut5、β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和基质金属蛋白酶3(MMP3)的mRNA和蛋白的表达水平。结果与其他两组比较,shRNA-Glut5组MG-63细胞的增殖和迁移能力下降,细胞克隆数减少,Glut5、β-连环蛋白、cyclinD1和MMP3的mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。结论下调Glut5基因表达可以抑制骨肉瘤MG-63细胞系的增殖、克隆形成和迁移能力,Wnt/β-连环蛋白信号通路可能参与调控该过程。 展开更多
关键词 骨肉瘤 MG-63细胞系 葡萄糖转运蛋白5 Wnt/β-连环蛋白信号通路 细胞克隆 细胞迁移 rna干扰技术
下载PDF
银中杨DREB2A基因RNA干扰载体构建及转化农杆菌的研究 被引量:1
9
作者 王磊 迟晓娟 +3 位作者 张闯 杨微 宋黎黎 李海燕 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期254-257,270,共5页
应用Gateway技术体系替代传统载体构建方法,构建了银中杨(Populus albaxp)DREB2A基因的RNA干扰载体,并将其转入根癌农杆菌EHA105中。该RNAi表达载体的构建对进一步研究杨树DREB2A转录因子基因的功能具有重要意义。
关键词 rna干扰载体 GATEWAY技术 杨树DREB2A基因
下载PDF
Regulation Mechanism of HBV cccDNA
10
作者 Jun Cheng Min Quan +2 位作者 Min Li Shun-ai Liu Qi Wang 《国际感染病学(电子版)》 CAS 2012年第2期65-73,共9页
Covalently closed circular(ccc)DNA of hepatitis B virus(HBV)existed in the nuclei of HBV infected hepatocytes with a half-life time of 14.3 years in a mathmatic model.Viral protein feedback regulation in HBV life cycl... Covalently closed circular(ccc)DNA of hepatitis B virus(HBV)existed in the nuclei of HBV infected hepatocytes with a half-life time of 14.3 years in a mathmatic model.Viral protein feedback regulation in HBV life cycle to maintain vital viral replication is an important mechanism.Interleukin-6,epithelial growth factor,heme oxygenase-1,histones,and hepatocyte nuclear factors are demonstrated as the key regulators for HBV life cycle.CpG island structure and methylation status are involved in the regulation of HBV DNA replication.Nucleos(t)ide analogues are widely used in the clinical practice for the treatment of chronic hepatitis B patients,although no evidence indicating a direct inhibiton of HBV cccDNA.In the future,along with the study of HBV life cycle,new drugs including RNA interference technique,will pave the way to eliminate the HBV cccDNA from infected hepatocytes resulting final cure of chronic hepatitis B. 展开更多
关键词 Hepatitis B virus(HBV) Covalently closed circular(ccc) DNA HBV life cycle CpG island structure rna interference technique
下载PDF
RNAi技术沉默HIF-1α基因表达的研究进展 被引量:1
11
作者 刘俊 常炜 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第13期2587-2589,2600,共4页
缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是一种缺氧诱导的最关键的转录因子,参与细胞的生长、分化和凋亡的调节。在人类实体肿瘤中普遍存在HIF-1α的过表达,并与肿瘤的侵袭、转移、耐药及预后差有关。RNAi干扰技术可敲除目的基因,导致基因功能缺失... 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是一种缺氧诱导的最关键的转录因子,参与细胞的生长、分化和凋亡的调节。在人类实体肿瘤中普遍存在HIF-1α的过表达,并与肿瘤的侵袭、转移、耐药及预后差有关。RNAi干扰技术可敲除目的基因,导致基因功能缺失性变化,已被广泛应用于生命科学研究的各个领域,包括HIF-1α基因功能的研究。各种不同的RNAi技术能有效的特异性地敲除HIF-1α基因的表达,在非肿瘤细胞和肿瘤细胞的HIF-1α基因功能的研究上均有很好的应用,成为研究HIF-1α基因功能的重要的方法之一。 展开更多
关键词 HIF-1Α rnaI技术
原文传递
RNAi阻断人膀胱癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3的表达研究
12
作者 杨为民 蔡建良 +2 位作者 叶章群 杜广辉 胡志全 《临床外科杂志》 2006年第6期366-368,403,共4页
目的探讨RNA干扰技术阻断人膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3(hyaluronicacidsynthase3,HAS3)的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法设计、体外化学合成HAS3mRNA序列特异性、非特异性小干涉双链RNA(smallin... 目的探讨RNA干扰技术阻断人膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞内透明质酸合成酶3(hyaluronicacidsynthase3,HAS3)的表达与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法设计、体外化学合成HAS3mRNA序列特异性、非特异性小干涉双链RNA(smallinterferencingRNA,siRNA),分别与脂质体LipofectamineTM2000结合后转染体外培养的人膀胱移行细胞癌组织中的成纤维细胞。实验分为A、B、C、D四组:孵育48h后,取各组细胞培养液进行放免法透明质酸浓度测定、免疫细胞化学染色了解透明质酸的合成、RT-PCR法检测HAS3mRNA的表达。结果与A组相比,D组细胞HAS3mRNA表达减少了78.2%,HA染色明显变淡,细胞培养液中HA浓度下降了60.3%(P<0.01);B、C组mRNA表达分别减少了4.7%、5.4%,HA染色几乎无变化,HA浓度分别下降了5.2%、5.8%(P>0.05)。结论RNA干扰技术可以显著地减少膀胱移行细胞癌组织中成纤维细胞的HAS3的表达,从而大幅度地降低该细胞内透明质酸的合成。 展开更多
关键词 rna干扰技术 膀胱移行细胞癌 成纤维细胞 透明质酸合成酶3
下载PDF
Split-GFP双分子荧光互补技术在鸡MSTN基因RNAi检测中的应用
13
作者 杨磊 朱正 +4 位作者 王博永 梁谦学 吴文德 李恭贺 郑喜邦 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2444-2453,共10页
【目的】以Split-GFP双荧光互补技术检测鸡肌肉生长抑制素基因(MSTN)RNA干涉(RNAi)效果,并与其他常用检测方法比较,以验证Split-GFP双分子荧光互补技术在RNAi效果评估中的有效性和可行性。【方法】将合成的3个shRNA慢病毒载体(shRNA-a、... 【目的】以Split-GFP双荧光互补技术检测鸡肌肉生长抑制素基因(MSTN)RNA干涉(RNAi)效果,并与其他常用检测方法比较,以验证Split-GFP双分子荧光互补技术在RNAi效果评估中的有效性和可行性。【方法】将合成的3个shRNA慢病毒载体(shRNA-a、shRNA-b和shRNA-c)分别转染稳定表达GFP11-MSTN融合蛋白的HEK 293TGFP11-MSTN细胞,经实时荧光定量PCR筛选出最佳shRNA慢病毒载体并包装为慢病毒,然后以慢病毒感染HEK 293TGFP11-MSTN细胞,采用潮霉素B筛选mCherry阳性(mCherry+)细胞,再以实时荧光定量PCR和Western blotting检测RNAi效果;得到的mCherry+细胞再转染pcDNA3.1(+)-GFP1-10质粒,通过荧光显微镜观察和流式细胞术评估RNAi效果。【结果】3个shRNA慢病毒载体对MSTN基因表达均有极显著的抑制作用(P<0.01,下同),其中又以Anti-MSTN shRNA-a慢病毒载体的干涉效果最佳。Anti-MSTN shRNA-a慢病毒感染HEK 293TGFP11-MSTN细胞的最适MOI=3,该条件下MSTN基因相对表达量及GFP11-MSTN融合蛋白表达量均受到抑制;得到的mCherry+细胞再转染pcDNA3.1(+)-GFP1-10质粒,荧光显微镜观察和流式细胞术检测结果表明,GFP+细胞数量明显减少,GFP+细胞百分率由31.1%降至11.5%。Split-GFP检测结果与实时荧光定量PCR及Western blotting检测结果相符,说明Anti-MSTN shRNA-a慢病毒能有效抑制GFP11-MSTN融合蛋白表达,发挥了RNAi作用。【结论】以Anti-MSTN shRNA-a慢病毒对MSTN基因的干涉效果最佳,其感染HEK 293TGFP11-MSTN细胞后MSTN基因表达极显著下调,且再转染pcDNA3.1(+)-GFP1-10质粒后细胞中的GFP+细胞百分率明显下降,与实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果相符,证实Slipt-GFP双分子荧光互补技术是一种可靠的可视化RNAi检测方法。 展开更多
关键词 肌肉生长抑制素(MSTN) rna干涉(rnai) shrna 慢病毒 Split-GFP双分子荧光互补技术
下载PDF
Twist-siRNA对SGC7901胃癌细胞上皮间质转化过程及顺铂耐药性的影响 被引量:2
14
作者 杨晓瑞 王江 +4 位作者 张玮 刘凡凡 丁孝良 张凯 何勐 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期3666-3669,3678,共5页
目的观察应用小干扰RNA(siRNA)技术沉默上皮间质转化因子(Twist)对SGC7901胃癌细胞上皮间质转化(EMT)过程及顺铂耐药性的影响。方法以脂质体转染法将Twist-siRNA、对照siRNA转染至SGC7901细胞,设为siRNA组和N-siRNA组,对照组未给予任何... 目的观察应用小干扰RNA(siRNA)技术沉默上皮间质转化因子(Twist)对SGC7901胃癌细胞上皮间质转化(EMT)过程及顺铂耐药性的影响。方法以脂质体转染法将Twist-siRNA、对照siRNA转染至SGC7901细胞,设为siRNA组和N-siRNA组,对照组未给予任何处理,检测各组Twist mRNA和蛋白表达情况及细胞增殖、迁移、侵袭情况。测定不同浓度顺铂(6.25×10-2,0.125,0.25,0.50,1.00 mg·L^-1)对细胞的生长抑制率及顺铂对细胞的半数抑制浓度(IC50)。以0.50 mg·L^-1顺铂干预SGC7901细胞为顺铂组,以0.50 mg·L^-1顺铂干预稳定转染Twist-siRNA的SGC7901细胞为siRNA+顺铂组,检测各组上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vinentin)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)mRNA和蛋白及磷酸化AKT(pAKT)蛋白表达情况。结果 siRNA组Twist mRNA及蛋白相对表达量、MTT实验不同时刻OD值均低于对照组和N-siRNA组(均P<0.05)。siRNA组、对照组和N-siRNA组的迁移率分别为(68.11±6.42)%,(82.16±6.65)%和(85.50±6.25)%;穿膜细胞数分别为(46.67±4.64),(127.67±9.39)和(131.33±8.96)个;顺铂对细胞的IC50值分别为(0.19±0.01),(0.50±0.05)和(0.51±0.05)mg·L^-1,siRNA组均显著低于对照组和N-siRNA组(均P<0.05)。siRNA组、顺铂组、siRNA+顺铂组E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组;siRNA组、顺铂组、siRNA+顺铂组Vinentin、PI3K mRNA和蛋白相对表达量及pAKT/AKT均低于对照组(均P<0.05);与siRNA组、顺铂组比较,siRNA+顺铂组E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均升高,Vinentin、PI3K mRNA和蛋白相对表达量及pAKT/AKT均降低(均P<0.05)。结论 Twist-siRNA可阻断SGC7901胃癌细胞EMT过程,降低细胞对顺铂的耐药性,可能与上调E-cadherin mRNA和蛋白表达,下调Vinentin、PI3K mRNA和蛋白表达,抑制AKT磷酸化相关。 展开更多
关键词 胃癌 小干扰rna技术 上皮间质转化因子 上皮间质转化 顺铂耐药性
原文传递
在哺乳细胞中构建不同MicroRNA载体的研究
15
作者 曾洁琼 王峰尖 +1 位作者 潘坤 向波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期25-27,共3页
RNA干扰技术是分子生物学研究的热点,同时也是有效阐明基因功能的有力工具。利用载体表达的小干扰RNA在疾病的治疗研究中意义更为重要。针对RNA干扰技术的发展,构建载体的研究及其应用前景作了简单概述,对如何在哺乳动物中构建不同micro... RNA干扰技术是分子生物学研究的热点,同时也是有效阐明基因功能的有力工具。利用载体表达的小干扰RNA在疾病的治疗研究中意义更为重要。针对RNA干扰技术的发展,构建载体的研究及其应用前景作了简单概述,对如何在哺乳动物中构建不同microRNA载体作了详细报道。 展开更多
关键词 分子生物学 rna干扰技术 基因 疾病的治疗
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部