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转录组研究新技术:RNA-Seq及其应用 被引量:205
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作者 祁云霞 刘永斌 荣威恒 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1191-1202,共12页
转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生过程中的分子机理。RNA-Seq作为一种新的高效、快捷的转录组研究手段... 转录组是特定组织或细胞在某一发育阶段或功能状态下转录出来的所有RNA的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及疾病发生过程中的分子机理。RNA-Seq作为一种新的高效、快捷的转录组研究手段正在改变着人们对转录组的认识。RNA-Seq利用高通量测序技术对组织或细胞中所有RNA反转录而成的cDNA文库进行测序,通过统计相关读段(reads)数计算出不同RNA的表达量,发现新的转录本;如果有基因组参考序列,可以把转录本映射回基因组,确定转录本位置、剪切情况等更为全面的遗传信息,已广泛应用于生物学研究、医学研究、临床研究和药物研发等。文章主要介绍了RNA-Seq原理、技术特点及其应用,并就RNA-Seq技术面临的挑战和未来发展前景进行了讨论,为今后该技术的研究与应用提供参考。 展开更多
关键词 rna-seq 转录组 新一代测序技术
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Single-cell RNA-seq data analysis on the receptor ACE2 expression reveals the potential risk of different human organs vulnerable to 2019-nCoV infection 被引量:210
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作者 Xin Zou Ke Chen +3 位作者 Jiawei Zou Peiyi Han Jie Hao Zeguang Han 《Frontiers of Medicine》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期185-192,共8页
It has been known that,the novel coronavirus,2019-nCoV,which is considered similar to SARS-CoV,invades human cells via the receptor angiotensin converting enzyme II(ACE2).Moreover,lung cells that have ACE2 expression ... It has been known that,the novel coronavirus,2019-nCoV,which is considered similar to SARS-CoV,invades human cells via the receptor angiotensin converting enzyme II(ACE2).Moreover,lung cells that have ACE2 expression may be the main target cells during 2019-nCoV infection.However,some patients also exhibit non-respiratory symptoms,such as kidney failure,implying that 2019-nCoV could also invade other organs.To construct a risk map of different human organs,we analyzed the single-cell RNA sequencing(scRNA-seq)datasets derived from major human physiological systems,including the respiratory,cardiovascular,digestive,and urinary systems.Through scRNA-seq data analyses,we identified the organs at risk,such as lung,heart,esophagus,kidney,bladder,and ileum,and located specific cell types(i.e.,type II alveolar cells(AT2),myocardial cells,proximal tubule cells of the kidney,ileum and esophagus epithelial cells,and bladder urothelial cells),which are vulnerable to 2019-nCoV infection.Based on the findings,we constructed a risk map indicating the vulnerability of different organs to 2019-nCoV infection.This study may provide potential clues for further investigation of the pathogenesis and route of 2019-nCoV infection. 展开更多
关键词 2019-nCoV ACE2 single-cell rna-seq
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转录组测序技术的研究和应用进展 被引量:78
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作者 崔凯 吴伟伟 刁其玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1-9,共9页
转录组(Transcriptome)是指特定细胞或组织中全部转录产物,包括信使RNA,核糖体RNA、转运RNA以及非编码RNA。高通量测序技术的快速发展,为从整体水平系统地研究转录组学研究提供快捷可靠的平台。综述了当前主流的高通量测序技术及其在转... 转录组(Transcriptome)是指特定细胞或组织中全部转录产物,包括信使RNA,核糖体RNA、转运RNA以及非编码RNA。高通量测序技术的快速发展,为从整体水平系统地研究转录组学研究提供快捷可靠的平台。综述了当前主流的高通量测序技术及其在转录组学研究中的应用,并讨论了转录组数据分析中一些值得关注的问题,以及转录组测序技术在生物学研究中的应用方向。 展开更多
关键词 转录组 rna-seq 二代测序 三代测序 单细胞转录组
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非模式生物转录组研究 被引量:77
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作者 刘红亮 郑丽明 +2 位作者 刘青青 权富生 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期955-970,共16页
转录组代表细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts),反映不同生命阶段、不同组织类型、不同生理状态以及不同环境条件下表达的基因。转录组研究可以从整体水平上反映细胞中基因表达情况及其调控规律。非模式生物(Non-model organ... 转录组代表细胞或组织内全部的RNA转录本(RNA transcripts),反映不同生命阶段、不同组织类型、不同生理状态以及不同环境条件下表达的基因。转录组研究可以从整体水平上反映细胞中基因表达情况及其调控规律。非模式生物(Non-model organism)具有许多模式生物不具备的特征,其转录组研究对解决基因进化、遗传育种以及生态等诸多方面的问题具有重要意义。但由于非模式生物缺乏参考基因组信息,传统的转录组研究方法操作复杂,实验周期长,花费大,使得其转录组研究进展缓慢。新一代高通量RNA测序技术(RNA-seq)完全改变了转录组学的研究模式,迅速成为研究非模式生物转录组的先进技术。文章详细论述了近年来利用RNA-seq技术进行非模式生物转录组研究的进展情况,从样品准备、高通量DNA测序以及生物信息学分析等方面介绍了利用RNA-seq技术研究非模式生物转录组的一般流程及方法,并对其中有待进一步研究的问题进行了展望。 展开更多
关键词 转录组 非模式生物 rna-seq
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转录组与RNA-Seq技术 被引量:60
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作者 张春兰 秦孜娟 +2 位作者 王桂芝 纪志宾 王建民 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期51-56,共6页
转录组是特定细胞或组织在特定时间或状态下转录出来的所有RNA的集合。通过对转录组的研究可以揭示生物体的基因表达、研究结构变异及发现新基因等。转录组分析的研究方法、研究平台发生着日新月异的变化,同时生物信息学分析的内容也在... 转录组是特定细胞或组织在特定时间或状态下转录出来的所有RNA的集合。通过对转录组的研究可以揭示生物体的基因表达、研究结构变异及发现新基因等。转录组分析的研究方法、研究平台发生着日新月异的变化,同时生物信息学分析的内容也在逐渐完善。RNA-Seq作为一种新的转录组研究手段,利用新一代测序技术能够更为快速、准确地为人们提供更多的生物体转录信息。主要比较近年来转录组研究的几种方法和几种RNA-Seq的研究平台,并着重介绍RNA-Seq的原理、用途、步骤和生物信息学分析等及在相关领域的应用等内容,为相关的研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 转录组 rna-seq 新一代测序技术
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樟树5种化学类型叶片转录组分析 被引量:47
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作者 江香梅 伍艳芳 +2 位作者 肖复明 熊振宇 徐海宁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期58-68,共11页
樟树(Cinnamomum camphora)是樟科植物的一个代表种,具有材用、药用、香料、油用和生态环境建设等多种用途。叶精油中富含利用价值极高的樟脑、芳樟醇、1,8-桉叶油素、异-橙花叔醇和右旋龙脑等萜类化合物。依据叶精油中主要成分的种类... 樟树(Cinnamomum camphora)是樟科植物的一个代表种,具有材用、药用、香料、油用和生态环境建设等多种用途。叶精油中富含利用价值极高的樟脑、芳樟醇、1,8-桉叶油素、异-橙花叔醇和右旋龙脑等萜类化合物。依据叶精油中主要成分的种类和含量,可将樟树划分为脑樟、芳樟、油樟、异樟、龙脑樟5种化学类型。文章采用Illumina HiSeq?2000高通量测序技术,对5种化学类型叶片转录组进行测序,对测序得到的所有Unigene进行GO(Gene Ontology)、COG(Clusters of Orthologous Groups)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分类,给出功能注释和Pathway注释,并预测Unigene蛋白编码区(Coding sequence,CDS)。De novo组装共获得156 278个Unigene,序列平均长度584 bp,N50(覆盖50%所有核苷酸的最大Unigene长度)为1 023bp。通过与其他核酸、蛋白数据库的Blast搜索比对,共有55 955条Unigene获得了基因注释,占所有Unigene的35.80%。其中,有24 717条Unigene得到GO注释,有21 806条Unigene得到COG注释。KEGG pathways分析结果表明,共有3 350条基因(10.19%)注释到次生代谢生物合成途径,其中参与单萜、二萜、倍半萜和萜类骨架合成的Unigene有424个。在单萜合成的代谢通路中,有9条Unigene可能编码芳樟醇合成酶基因,且表达分析结果显示,芳樟醇合成酶基因在芳樟化学类型中优势表达,在油樟化学类型中表达水平较低。这些注释信息的完成为樟树功能基因及相关候选基因的发掘提供了基础数据和重要依据。 展开更多
关键词 樟树 rna-seq 基因注释 功能分类 CDS预测
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基于RNA-Seq技术的连翘转录组组装与分析及SSR分子标记的开发 被引量:47
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作者 王兴春 谭河林 +3 位作者 陈钊 孟令芝 王文斌 范圣此 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第3期301-310,共10页
连翘既是传统的中药材,又是优良的城市绿化树种,具有重要的经济价值和生态价值.但是连翘基因资料非常匮乏,限制了其分子生物学和基因功能的研究.本研究以连翘根、茎、叶、花和果实等器官的混合样品作为材料,利用Illumina Hi SeqTM 2500... 连翘既是传统的中药材,又是优良的城市绿化树种,具有重要的经济价值和生态价值.但是连翘基因资料非常匮乏,限制了其分子生物学和基因功能的研究.本研究以连翘根、茎、叶、花和果实等器官的混合样品作为材料,利用Illumina Hi SeqTM 2500测序平台对其进行转录组测序.共获得23164327条干净数据(clean reads),总碱基数为4678791021 bp.Clean reads经de novo组装后获得45112条unigenes.进一步利用五大公共数据库进行同源比对,注释了28699条unigenes.其中,473个基因参与了连翘次生物质的合成和代谢,包括81个与苯丙氨酸和苯丙烷代谢相关的基因.对这81个基因的分析表明,有4个基因编码苯丙氨酸脱氨酶,1个基因编码肉桂酸4-羟化酶,2个基因编码4-香豆酰:辅酶A连接酶.这3个酶催化了连翘中主要药用活性物质苯乙醇苷和木脂素前体肉桂酸衍生物的生物合成.此外,还发现了2个松脂醇-落叶松树脂醇还原酶和1个开环异落叶松脂醇脱氢酶编码基因,这2个酶是木脂素合成的关键酶.最后,分析了长度在1 kb以上的12721个unigenes的基因结构,检测到3199个SSR位点,并对其中40个位点进行了验证.本研究不仅为连翘基因克隆和分子生物学研究提供了丰富的基础数据信息,而且为连翘遗传多样性研究、指纹图谱构建和分子标记辅助选育奠定了分子基础. 展开更多
关键词 rna-seq 转录组 次生代谢 苯乙醇苷 木脂素 SSR分子标记 连翘
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Overexpression of the maize GRF10, an endogenous truncated growth-regulating factor protein, leads to reduction in leaf size and plant height 被引量:36
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作者 Lei Wu Dengfeng Zhang +3 位作者 Ming Xue Jianjun Qian Yan He Shoucai Wang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2014年第11期1053-1063,共11页
It has long been thought that growth‐regulating factors(GRFs) gene family members act as transcriptional activators to play important roles in multiple plant developmental processes. However, the recent characteriz... It has long been thought that growth‐regulating factors(GRFs) gene family members act as transcriptional activators to play important roles in multiple plant developmental processes. However, the recent characterization of Arabidopsis GRF7 showed that it functions as a transcriptional repressor of osmotic stress‐responsive genes. This highlights the complex and diverse mechanisms by which different GRF members use to take action. In this study, the maize(Zea mays L.) GRF10 was functionally characterized to improve this concept. The deduced ZmGRF10 protein retains the N‐terminal QLQ and WRC domains, the characteristic regions as protein‐interacting and DNA‐binding domains, respectively. However,it lacks nearly the entire C‐terminal domain, the regions executing transactivation activity. Consistently, ZmGRF10 protein maintains the ability to interact with GRF‐interacting factors(GIFs) proteins, but lacks transactivation activity.Overexpression of ZmGRF10 in maize led to a reduction in leaf size and plant height through decreasing cell proliferation,whereas the yield‐related traits were not affected. Transcriptome analysis revealed that multiple biological pathways were affected by ZmGRF10 overexpression, including a few transcriptional regulatory genes, which have been demonstrated to have important roles in controlling plant growth and development. We propose that ZmGRF10 aids in fine‐tuning the homeostasis of the GRF‐GIF complex in the regulation of cell proliferation. 展开更多
关键词 GIF growth-regulating factor maize overexpression rna-seq transcriptional activator
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基于RNA-Seq高通量测序技术的牦牛卵巢转录组研究:进一步完善牦牛基因结构及挖掘与繁殖相关新基因 被引量:34
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作者 兰道亮 熊显荣 +5 位作者 位艳丽 徐通 钟金城 字向东 王永 李键 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2014年第3期307-317,共11页
RNA—Seq作为近年来新发展起来的高通量转录组测序技术,为大规模转录组学研究提供了一种全新的且更为有效的方法.目前该技术已广泛应用于转录组学中多方面的研究,尤其近年来,该技术在进一步完善基因结构信息及挖掘新转录本及新基因... RNA—Seq作为近年来新发展起来的高通量转录组测序技术,为大规模转录组学研究提供了一种全新的且更为有效的方法.目前该技术已广泛应用于转录组学中多方面的研究,尤其近年来,该技术在进一步完善基因结构信息及挖掘新转录本及新基因方面的功能也逐渐受到关注.本研究以牦牛卵巢组织作为研究对象,应用RNA.Seq技术对其进行高通量转录组测序分析,经测序后得到了一个包含26826516条过滤后测序读数,4828772880bp的卵巢测序文库,比对分析显示,有16992条牦牛基因发生表达,其中3734条基因存在不同类型的可变剪接.功能分析表明,这些表达基因涉及多种GO分类及KEGG通路.进一步分析转录组数据发现,共有7340个基因的5’或3’端在原有基因组的位置基础上发生了延伸,同时还发现了6321个新转录本,定位回基因组预测显示,外显子数量为1~84个,其中2267个新转录本预测具有编码蛋白的能力.比对分析显示,共有1200~4993条新转录本分别与Nt数据库、Nr数据库及SwissProt数据库中的基因比对上,其中与牛相似性基因最多(41.4%),其次为野牦牛(33.0%)、绵羊(6.3%)、人类(2.8%)及小鼠(1.6%)等其他物种.进一步对新转录本进行GO分类注释,结果显示,与繁殖发育相关的GO分类占有较大比例,其中繁殖类别(reproduction)所涉及的新转录本最多.本研究结果为描绘牦牛卵巢正常转录组图谱及进一步探析牦牛繁殖性能提供了基础,同时证实RNA.Seq高通量转录组技术在完善基因结构及挖掘新转录本及新基因方面的具有强大的优势,为进一步完善牦牛基因组结构信息及挖掘潜在的新基因提供了丰富数据. 展开更多
关键词 牦牛 卵巢 转录组 rnaseq 基因结构 新基因
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基于新一代高通量测序的环境微生物转录组学研究进展 被引量:29
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作者 蔡元锋 贾仲君 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期401-410,共10页
环境微生物转录组学是一门新兴学科,它以复杂环境样品中的微生物mRNA为研究对象,利用近年兴起的RNA-Seq高通量测序技术,在整体水平上对环境微生物的基因表达水平和调控规律进行研究。本文概述了环境微生物转录组研究从样品的采集保存、... 环境微生物转录组学是一门新兴学科,它以复杂环境样品中的微生物mRNA为研究对象,利用近年兴起的RNA-Seq高通量测序技术,在整体水平上对环境微生物的基因表达水平和调控规律进行研究。本文概述了环境微生物转录组研究从样品的采集保存、RNA提取、mRNA的富集、cDNA合成直到高通量测序及数据分析的基本流程。总结了该技术面临的主要瓶颈:环境样品mRNA含量低、腐植酸等干扰杂质多、rRNA去除程度有限。针对RNA的提取、纯化以及mRNA的富集这些重点步骤,详细阐述了近年来在提高mRNA的得率与纯度上的方法学进展。重点介绍了高通量测序数据的处理及分析方法,从测序数据的质量控制、序列组装、rRNA的鉴定及去除、功能基因注释及分类到差异表达基因的鉴定。最后总结了近年来环境微生物转录组学在新基因的发现、不同环境条件下微生物的基因表达及调控规律研究、有机物的代谢路径分析等3个主要研究领域的广泛应用。随着测序技术及生物信息学分析工具的发展进步,环境微生物转录组学将具有更广阔的应用前景。 展开更多
关键词 转录组学 rnaseq 高通量测序 环境微生物学
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转录组测序的发展和应用 被引量:28
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作者 王楚彪 卢万鸿 +1 位作者 林彦 罗建中 《桉树科技》 2018年第4期20-26,共7页
转录组学研究是近年来分子生物学研究的热门,而转录组测序是其核心技术。分子测序技术经历了第一代到第三代的发展,取得长足进步,通量和准确性不断提高,现在应用最广的是二代测序技术,它主要有Roche/454、ABI/Solid、Illumina/Solexa三... 转录组学研究是近年来分子生物学研究的热门,而转录组测序是其核心技术。分子测序技术经历了第一代到第三代的发展,取得长足进步,通量和准确性不断提高,现在应用最广的是二代测序技术,它主要有Roche/454、ABI/Solid、Illumina/Solexa三种测序平台,各有利弊。转录组测序历经基因芯片技术、基因表达系列分析技术、大规模平行测序技术和RNA-Seq技术,目前最活跃的RNA-Seq技术是基于二代测序技术。转录组测序的应用在基因表达水平分析和差异表达分析、新基因的挖掘、寻找单核苷酸多态性及应用、基因功能注释都有所体现。转录组测序和应用是活跃的研究课题,将迅速发展,并在生物研究中起到愈发重要的作用。 展开更多
关键词 转录组 测序技术 高通量 rna-seq
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基于转录组信息的黑果枸杞MYB转录因子家族分析 被引量:28
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作者 严莉 王翠平 +2 位作者 陈建伟 乔改霞 李健 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期3991-4002,共12页
【目的】MYB基因家族是植物中最大的一类转录因子家族,广泛参与植物的生长发育和代谢调控过程。目前仍没有针对枸杞等木本作物MYB转录因子家族的系统分析。基于转录组数据鉴定分析黑果枸杞MYB基因家族,可为该类基因生物学功能和代谢调... 【目的】MYB基因家族是植物中最大的一类转录因子家族,广泛参与植物的生长发育和代谢调控过程。目前仍没有针对枸杞等木本作物MYB转录因子家族的系统分析。基于转录组数据鉴定分析黑果枸杞MYB基因家族,可为该类基因生物学功能和代谢调控机制的研究提供参考。【方法】基于黑果枸杞转录组测序(RNA-Seq)数据,利用NR、NT、Swiss-Prot和PFAM 4个数据库和NCBI网站,对黑果枸杞MYB基因进行筛选注释;利用Web Logo3、Prot Comp 9.0、MEGA5.0软件进行保守结构域、亚细胞定位和系统进化等生物信息学分析。基于转录组数据分析MYB基因在黑果枸杞果实不同发育期的差异表达模式,并采用荧光定量PCR方法进行验证。【结果】基于转录组测序数据,注释得到83个黑果枸杞MYB类转录因子基因,根据结构特性将其分为4大类:R2R3-MYB、1R-MYB、3R-MYB和4R-MYB。结构域分析表明:R2R3-MYB类转录因子的R2 MYB基序中包含3个极度保守的色氨酸残基,R3 MYB基序中的第一个色氨酸残基被疏水氨基酸替代。比较分析黑果枸杞MYB家族和拟南芥MYB家族共同构建的进化树发现,黑果枸杞的MYB家族在进化上包括3个大类,6个亚类。亚细胞定位预测结果显示,44个MYB转录因子定位于细胞质中,37个定位于细胞核中。基于转录组数据的MYB差异表达模式分析表明,黑果枸杞MYB基因可能参与了果实不同发育时期花青素变化的调控;基于荧光定量PCR的差异表达数据进一步验证了部分MYB转录因子在果实不同发育时期的花青素合成中可能起到调控作用。【结论】黑果枸杞MYB基因家族注释得到83个黑果枸杞MYB类转录因子基因,为进一步研究MYB家族的基因结构和生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 黑果枸杞 转录组测序 MYB家族 分层聚类分析 表达模式
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榧树转录组SSR信息分析及其分子标记开发 被引量:27
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作者 张敏 周彩红 +2 位作者 陈焘 戴文圣 张迟 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1258-1265,共8页
【目的】基于‘细榧’(Torreya grandis‘Xifei’)和‘圆榧’(T.grandis‘Dielsii’)种子转录组数据,开发SSR分子标记,为榧属植物遗传多样性研究奠定基础。【方法】利用MISA软件对筛选得到的1 kb以上的Unigene做SSR分析,利用Primer 3.0... 【目的】基于‘细榧’(Torreya grandis‘Xifei’)和‘圆榧’(T.grandis‘Dielsii’)种子转录组数据,开发SSR分子标记,为榧属植物遗传多样性研究奠定基础。【方法】利用MISA软件对筛选得到的1 kb以上的Unigene做SSR分析,利用Primer 3.0设计引物,随机选择49对引物进行多态性扩增。【结果】在22 976条评估数目中,包含SSR位点5 458个,共鉴定出6种类型的SSR。单核苷酸重复、三核苷酸重复和二核苷酸重复分别占SSR总数的64.9%、18.56%和14.77%。对5 458个SSR位点设计出4 633对SSR引物,随机选择49对在10份榧属植物中进行多态性扩增,其中16对引物表现出多态性,各个位点的等位基因数为2~6个,平均等位基因数3个,多态信息含量PIC、观测杂合度Ho、期望杂合度He的平均值分别是0.464 4、0.283 7和0.500 6。【结论】榧树转录组测序数据能够提供丰富的SSR位点,用于快速高效地开发SSR引物。所开发的引物能为榧树遗传多样性研究、品种指纹图谱构建和分子标记辅助选择育种提供标记选择。 展开更多
关键词 榧树 转录组 SSR
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番茄转录组学研究进展 被引量:26
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作者 刘冠 赵婷婷 +4 位作者 杨欢欢 张冬野 姜景彬 李景富 许向阳 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2802-2807,共6页
番茄是一种世界范围内种植的蔬菜作物,随着番茄基因组测序的大规模完成,转录组学在番茄研究中发挥着无可替代的作用。转录组学作为功能基因组学的代表,在植物抗病、抗逆的过程中有着诸多应用。转录组学的研究可以从整体的水平上反映出... 番茄是一种世界范围内种植的蔬菜作物,随着番茄基因组测序的大规模完成,转录组学在番茄研究中发挥着无可替代的作用。转录组学作为功能基因组学的代表,在植物抗病、抗逆的过程中有着诸多应用。转录组学的研究可以从整体的水平上反映出细胞中基因的表达情况及其调控规律。本综述主要介绍了转录组学的主要技术及其原理,同时结合转录组学在番茄中的一些应用来展开,为研究番茄复杂的农艺性状的分子机制、不同的发育阶段基因表达调控网络等提供理论依据。 展开更多
关键词 番茄 转录组学 rna测序
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胁迫意大利蜜蜂幼虫肠道的球囊菌的转录组分析 被引量:25
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作者 陈大福 郭睿 +9 位作者 熊翠玲 梁勤 郑燕珍 徐细建 黄枳腱 张曌楠 张璐 李汶东 童新宇 席伟军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期401-411,共11页
【目的】本研究旨在通过趋势分析对胁迫意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称意蜂)幼虫肠道的球囊菌Ascosphaera apis的差异表达基因(DEGs)进行转录组分析。【方法】将纯化的球囊菌孢子配制为1×107孢子/m L的饲料饲喂意蜂3日... 【目的】本研究旨在通过趋势分析对胁迫意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称意蜂)幼虫肠道的球囊菌Ascosphaera apis的差异表达基因(DEGs)进行转录组分析。【方法】将纯化的球囊菌孢子配制为1×107孢子/m L的饲料饲喂意蜂3日龄幼虫,利用Illumina Hi Seq 2500平台对球囊菌胁迫的意蜂幼虫肠道c DNA进行测序,将过滤得到的有效读段(clean reads)映射(mapping)到核糖体数据库及意蜂参考基因组,最后将未映射上的reads映射到本课题组组装并注释的球囊菌参考转录组。利用STEM软件对DEGs进行趋势分析。利用WEGO软件对显著表达模式中的DEGs进行GO富集分析。利用Blastall对显著表达模式中的DEGs进行KEGG代谢通路富集分析。最后,通过对随机选取的6个DEGs进行RT-q PCR分析,对RNA-seq数据进行验证。【结果】球囊菌胁迫意蜂幼虫肠道样品的Illumina测序共得到球囊菌的25 454 076条原始读段(raw reads),经过滤得到24 909 820条clean reads,Q30均在93.46%以上。趋势分析结果显示,19 893个DEGs聚类为8个表达模式,其中有12 151个DEGs聚类为3个表现为显著上调趋势的表达模式。GO富集分析结果显示,表现上调趋势的DEGs富集在40个GO term,富集基因数最多的为细胞进程(cellular process)(2 601 unigenes),其次为代谢进程(metabolic process)(2 553 unigenes)和细胞(cell)(2 522unigenes)。KEGG代谢通路富集分析结果显示,上调趋势中的DEGs富集在119个代谢通路上,其中富集基因数最多的是核糖体(ribosome)(213 unigenes),其次为氨基酸生物合成(biosynthesis of amino acids)(154 unigenes)和内质网蛋白加工(protein processing in endoplasmic reticulum)(130unigenes)。共有48个DEGs富集在MAPK信号通路上,聚类分析结果显示,这些DEGs随着胁迫时间的延长表达水平逐渐增强。RT-q PCR结果显示,6个DEGs的表达水平变化趋势与RNA-seq数据一致,证明了本研究中的转录组数据真实可靠。【结论】本研� 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 球囊菌 幼虫肠道 rna-seq 转录组 差异表达基因
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转录组平台技术及其在代谢工程中的应用 被引量:23
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作者 史硕博 陈涛 赵学明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1187-1198,共12页
组学技术在系统水平上对细胞代谢进行全面的分析,极大地促进了代谢工程的发展和应用。全基因组水平的转录分析可以使研究者更加精确地评估细胞表型,加深对细胞代谢的理解。而且转录组分析也有助于研究者鉴定菌种改良的目标基因,加速对... 组学技术在系统水平上对细胞代谢进行全面的分析,极大地促进了代谢工程的发展和应用。全基因组水平的转录分析可以使研究者更加精确地评估细胞表型,加深对细胞代谢的理解。而且转录组分析也有助于研究者鉴定菌种改良的目标基因,加速对微生物细胞工厂的合理设计及构建。文中介绍了3种主要转录组平台技术的原理,并总结了转录组学在代谢工程领域中应用的最新进展和未来发展趋势。 展开更多
关键词 转录组 代谢工程 基因芯片 SERIAL analysis of gene expression(SAGE) massively parallel signature sequencing(MPSS) rna-seq
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Characterizing and annotating the genome using RNA-seq data 被引量:24
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作者 Geng Chen Tieliu Shi Leming Shi 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期116-125,共10页
Bioinformatics methods for various RNA-seq data analyses are in fast evolution with the improvement of sequencing technologies. However, many challenges still exist in how to efficiently process the RNA-seq data to ob... Bioinformatics methods for various RNA-seq data analyses are in fast evolution with the improvement of sequencing technologies. However, many challenges still exist in how to efficiently process the RNA-seq data to obtain accurate and comprehensive results. Here we reviewed the strategies for improving diverse transcriptomic studies and the annotation of genetic variants based on RNA-seq data. Mapping RNA-seq reads to the genome and transcriptome represent two distinct methods for quantifying the expression of genes/transcripts. Besides the known genes annotated in current databases, many novel genes/transcripts(especially those long noncoding RNAs) still can be identified on the reference genome using RNA-seq. Moreover, owing to the incompleteness of current reference genomes, some novel genes are missing from them. Genome-guided and de novo transcriptome reconstruction are two effective and complementary strategies for identifying those novel genes/transcripts on or beyond the reference genome. In addition, integrating the genes of distinct databases to conduct transcriptomics and genetics studies can improve the results of corresponding analyses. 展开更多
关键词 rna-seq genome-guided transcriptome reconstruction de novo assembly long noncoding rna genetic variants
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RNA-Seq analysis of yak ovary: improving yak gene structure information and mining reproduction-related genes 被引量:24
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作者 LAN DaoLiang XIONG XianRong +5 位作者 WEI YanLi XU Tong ZHONG JinCheng ZHI XiangDong WANG Yong LI Jian 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2014年第9期925-935,共11页
RNA-Seq, a high-throughput (HT) sequencing technique, has been used effectively in large-scale transcriptomic studies, and is particularly useful for improving gene structure information and mining of new genes. In ... RNA-Seq, a high-throughput (HT) sequencing technique, has been used effectively in large-scale transcriptomic studies, and is particularly useful for improving gene structure information and mining of new genes. In this study, RNA-Seq HT technology was employed to analyze the transcriptome of yak ovary. After lllurrlina-Solexa deep sequencing, 26826516 clean reads with a total of 4828772880 bp were obtained from the ovary library. Alignment analysis showed that 16992 yak genes mapped to the yak genome and 3734 of these genes were involved in alternative splicing. Gene structure refinement analysis showed that 7340 genes that were annotated in the yak genome could be extended at the 5' or 3' ends based on the alignments been the transcripts and the genome sequence. Novel transcript prediction analysis identified 6321 new transcripts with lengths ranging from 180 to 14884 bp, and 2267 of them were predicted to code proteins. BLAST analysis of the new transcripts showed that 1200-4933 mapped to the non-redundant (nr), nucleotide (nt) and/or SwissProt sequence databases. Comparative statistical analysis of the new mapped transcripts showed that the majority of them were similar to genes in Bos taurus (41.4%), Bos grunniens mutus (33.0%), Ovis aries (6.3%), Homo sapiens (2.8%), Mus musculus (1.6%) and other species. Functional analy- sis showed that these expressed genes were involved in various Gene Ontology (GO) categories and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathways. GO analysis of the new transcripts found that the largest proportion of them was associated with reproduction. The results of this study will provide a basis for describing the normal transcriptome map of yak ovary and for future studies on yak breeding performance. Moreover, the results confirmed that RNA-Seq HT technology is highly ad- vantageous in improving gene structure information and mining of new genes, as well as in providing valuable data to expand the yak genome information. 展开更多
关键词 YAK OVARY TRANSCRIPTOME rna-seq improvement of gene structure REPRODUCTION
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Infection of Ustilaginoidea virens intercepts rice seed formation but activates grain-filling-related genes 被引量:23
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作者 Jing Fan Xiao-Yi Guo +9 位作者 Liang Li Fu Huang Wen-Xian Sun Yan Li Yan-Yan Huang Yong-Ju Xu Jun Shi Yang Lei Ai-Ping Zheng Wen-Ming Wang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2015年第6期577-590,共14页
Rice false smut has become an increasingly serious disease in rice (Oryza sativa L.) production worldwide. The typical feature of this disease is that the fungal pathogen Ustilaginoidea virens (Uv) specifical y in... Rice false smut has become an increasingly serious disease in rice (Oryza sativa L.) production worldwide. The typical feature of this disease is that the fungal pathogen Ustilaginoidea virens (Uv) specifical y infects rice flower and forms false smut bal , the ustiloxin-containing bal-like fungal colony, of which the size is usual y several times larger than that of a mature rice seed. However, the underlying mechanisms of Uv-rice interac-tion are poorly understood. Here, we applied time-course microscopic and transcriptional approaches to investigate rice responses to Uv infection. The results demonstrated that the flower-opening process and expression of associated transcription factors, including ARF6 and ARF8, were inhibited in Uv-infected spikelets. The ovaries in infected spikelets were interrupted in fertilization and thus were unable to set seeds. However, a number of grain-fil ing-related genes, including seed storage protein genes, starch anabolism genes and endosperm-specific transcription factors (RISBZ1 and RPBF), were highly transcribed as if the ovaries were fertilized. In addition, critical defense-related genes like NPR1 and PR1 were downregulated by;Uv infection. Our data imply that Uv may hijack host nutrient reservoir by activation of the grain-fil ing network because of growth and formation of false smut bal s. 展开更多
关键词 Flower-infecting grain filling MICROSCOPY rice false smut rna-seq
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基于RNA-seq测序数据鉴定和分析猪基因组可变剪接事件 被引量:21
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作者 冉茂良 陈斌 +3 位作者 李智 董莲花 贺长青 柳小春 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2016年第3期274-284,共11页
可变剪接作为一种增加基因组和蛋白质组多样性的重要机制,广泛发生于真核生物基因转录的过程中.本文采用Illumina Hiseq 2500测序平台对猪睾丸组织4个不同发育时期(60胚龄、90胚龄、30日龄和180日龄)进行转录组测序,以猪基因组数据为参... 可变剪接作为一种增加基因组和蛋白质组多样性的重要机制,广泛发生于真核生物基因转录的过程中.本文采用Illumina Hiseq 2500测序平台对猪睾丸组织4个不同发育时期(60胚龄、90胚龄、30日龄和180日龄)进行转录组测序,以猪基因组数据为参考,鉴定和分析了猪基因组可变剪接事件.从猪基因组中鉴定出20398个基因(80.6%)对应的92738个可变剪接事件.在不同的可变剪接类型中,以第一个外显子可变剪切(alternative 5′first exon,TSS)、最后一个外显子可变剪切(alternative 3′last exon,TTS)、单外显子跳跃(skipped exon,SKIP)和可变5′或3′端剪切(alternative exon ends,AE)4种类型为主,分别占所有可变剪接事件的41.0%,32.9%,7.6%和7.4%.GO功能富集分析显示,发生可变剪接的基因主要富集于物质合成、物质结合及酶活性相关的GO项中,而各发育时期特异的可变剪接基因与发育时期的生理状态密切相关,60胚龄时主要与酶活性和组织形成相关,30日龄时主要与抗环境应激和离子通道活性相关,180日龄时则主要与循环系统相关.此外,在筛选出64个与睾丸素代谢相关的基因中,63个基因发生可变剪接,且以TSS和TTS为主,表明这两种可变剪接类型与睾丸素合成和分泌密切相关.通过对猪基因组可变剪接的分析,为深入研究可变剪接生物学功能及进一步开展分子育种工作提供理论依据. 展开更多
关键词 可变剪接 睾丸素 rna-seq
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