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黄芪多糖配伍小檗碱对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积的调控作用
1
作者 雷文静 毛竹君 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期6080-6083,共4页
目的:探讨黄芪多糖(AP)联合小檗碱(BBR)对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积的调控作用。方法:将RIN-m5f细胞分成对照组、模型组和AP-BBR组。高浓度葡萄糖与棕榈酸诱导RIN-m5f细胞建立高糖高脂(HFHS)细胞模型。对照组细胞常规培养,不做任何干预;... 目的:探讨黄芪多糖(AP)联合小檗碱(BBR)对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积的调控作用。方法:将RIN-m5f细胞分成对照组、模型组和AP-BBR组。高浓度葡萄糖与棕榈酸诱导RIN-m5f细胞建立高糖高脂(HFHS)细胞模型。对照组细胞常规培养,不做任何干预;模型组进行HFHS细胞造模;AP-BBR组进行造模,经AP与BBR按质量比为1∶1混匀后干预24 h。采用油红O染色法检测脂肪变性程度,CCK8法检测RIN-m5f细胞活力;流式细胞术检测RIN-m5f细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,模型组细胞脂滴明显增多,细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与模型组比较,AP-BBR组细胞脂滴明显减少,细胞存活率显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:AP-BBR对胰腺RIN-m5f细胞脂质沉积有改善作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 小檗碱 配伍 2型糖尿病 胰腺 rin-m5f细胞 脂质沉积
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黄刺多糖工艺优化及其对过氧化氢损伤的胰岛β细胞的保护作用 被引量：1
2
作者 邓永蓉 韩丽娟 +3 位作者 岳庆明 漆莹 马娜娜 赵玉欣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期146-156,共11页
为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)对H_(2)O_(2)诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用,以黄刺浆果为原料,通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体... 为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)对H_(2)O_(2)诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用,以黄刺浆果为原料,通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体积排阻色谱、离子色谱、扫描电镜及刚果红实验对BDPs理化性质进行分析,以H_(2)O_(2)诱导RIN-m5F细胞建立氧化应激损伤模型,通过CCK-8法测定细胞存活率,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量探讨BDPs对氧化损伤细胞的保护作用。结果表明,当加酶量为1.25%(质量分数),酶解时间57 min,酶解温度45℃,超声波功率164 W时,黄刺多糖提取得率为(3.478±0.075)%,与预测值3.451%相近。此外,BDPs的重均分子质量为10.2 kDa,主要由岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸以及葡萄糖醛酸组成(摩尔比为1∶42.2∶32.6∶11.8∶4.4∶56.1∶5.1∶1.8)。刚果红实验结果表明,BDPs具有三螺旋结构。细胞实验结果表明,H_(2)O_(2)能够导致RIN-m5F细胞的氧化损伤,与模型组相比,经0.0625~0.5 mg/mL的BDPs干预后的细胞存活率增加(P<0.05),ROS、MDA水平呈下降趋势。BDPs能够提高细胞SOD、CAT活性,并且呈一定量效关系。综上所述,BDPs在一定剂量范围内可以提高细胞存活率,对H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤具有保护作用,研究结果可为黄刺多糖功能研究提供参考。 展开更多
关键词 黄刺多糖 抗氧化 rin-m5f细胞 氧化应激
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PARP-1抑制剂在游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡中的作用 被引量：1
3
作者 潘玉琴 曾庆娣 +3 位作者 许向红 何帮顺 毛晓明 王书奎 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期291-295,326,共6页
目的:探讨PARP-1抑制剂3-氨基苯酰胺(3-Aminobenzamide,3-AB)在游离脂肪酸棕榈酸诱发的胰岛细胞凋亡和坏死中的作用。方法:常规培养RIN-m5F细胞株,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察棕榈酸和PARP-1抑制剂3-AB作用后细胞的增殖情况,并... 目的:探讨PARP-1抑制剂3-氨基苯酰胺(3-Aminobenzamide,3-AB)在游离脂肪酸棕榈酸诱发的胰岛细胞凋亡和坏死中的作用。方法:常规培养RIN-m5F细胞株,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察棕榈酸和PARP-1抑制剂3-AB作用后细胞的增殖情况,并用流式细胞术及TUNEL法分析细胞凋亡和坏死。结果:棕榈酸明显抑制RIN-m5F细胞的增殖(P<0.01);低浓度3-AB与棕榈酸共同孵育24h后细胞的凋亡率和坏死率显著低于棕榈酸单独培养(P<0.01);高浓度3-AB与棕榈酸共同孵育后较棕榈酸单独培养时细胞凋亡率显著性增强(P<0.01)。结论:低浓度3-AB能有效抑制棕榈酸所诱导的胰岛细胞株RIN-m5F细胞坏死,缓解细胞凋亡;而高浓度3-AB则促进细胞凋亡。进一步说明了3-AB在棕榈酸所诱导的胰岛细胞凋亡过程中具有双重作用,此可为2型糖尿病的治疗提供一个新的靶点。 展开更多
关键词 PARP-1 3-氨基苯酰胺 棕榈酸 rin-m5f细胞 2型糖尿病
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4-苯基丁酸对棕榈酸诱导的胰岛β细胞内质网应激的效应 被引量：1
4
作者 于平 孙琦 +2 位作者 潘慧 安芳 朱惠娟 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第14期2004-2006,共3页
目的探讨4-苯基丁酸(4-PBA)对棕榈酸诱导的大鼠RIN-m5F细胞内质网应激(ERS)的效应。方法大鼠RIN-m5F细胞用基础培养基孵育24 h,转为无糖1640培养基,孵育24 h,加入1 mmol/L棕榈酸及不同浓度4-PBA共孵育24 h。QT-PCR(实时荧光定量聚合酶... 目的探讨4-苯基丁酸(4-PBA)对棕榈酸诱导的大鼠RIN-m5F细胞内质网应激(ERS)的效应。方法大鼠RIN-m5F细胞用基础培养基孵育24 h,转为无糖1640培养基,孵育24 h,加入1 mmol/L棕榈酸及不同浓度4-PBA共孵育24 h。QT-PCR(实时荧光定量聚合酶链反应)检测4-PBA处理前后ERS相关因子GRP78、CHOP及caspase3mRNA的表达变化。蛋白免疫印迹方法(Western blotting)测定相应蛋白的表达水平。结果棕榈酸刺激后细胞内GRP78、CHOP及caspase3 mRNA表达水平增加。10 mmol/L 4-PBA处理后,CHOP、caspase3表达量降低;蛋白免疫印迹结果显示,棕榈酸刺激后CHOP、caspase3蛋白表达增加,10 mmol/L4-PBA处理后表达降低。结论 4-PBA可能通过CHOP途径减轻RIN-m5F细胞的ERS,对细胞凋亡具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 内质网应激 4-苯基丁酸 rin-m5f细胞 实时荧光定量聚合酶链反应 蛋白免疫印迹
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细柱五加叶中凹脉鹅掌柴酸通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号保护胰岛β细胞研究
5
作者 鲁曼霞 杨阳 +2 位作者 卢茂芳 罗姣 刘向前 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1008-1014,共7页
目的基于通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路,研究细柱五加叶(Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith)中凹脉鹅掌柴酸(impressic acid)的胰岛β细胞保护作用。方法运用炎症细胞因子IL-1β和IFN-γ诱导RIN-m5F细胞建立2型糖尿病细胞模型;采... 目的基于通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路,研究细柱五加叶(Acanthopanax gracilistylus W.W.Smith)中凹脉鹅掌柴酸(impressic acid)的胰岛β细胞保护作用。方法运用炎症细胞因子IL-1β和IFN-γ诱导RIN-m5F细胞建立2型糖尿病细胞模型;采用MTT法对细胞毒性进行评价;采用ELISA法测胰岛素分泌评价胰岛细胞功能;采用Griess法测定导致胰岛β细胞的凋亡的关键物质一氧化氮(NO)水平;采用Caspase-3活性检测法检测Caspase-3水平;检测细胞内活性氧物质(reactive oxygen species,ROS)水平;并采用Western blot法检测相关蛋白(iNOS、NF-κB)的表达。结果细柱五加叶中提取的凹脉鹅掌柴酸(5~20μmol·L^(-1))无细胞毒性,并且能够通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路以浓度依赖的方式恢复细胞因子IL-1β和IFN-γ诱导RIN-m5F细胞凋亡、下调NF-κB表达,下调iNOS表达,降低NO水平,抑制细胞凋亡剪切酶Caspase-3活性,下调活性氧物质ROS水平保护胰岛素β细胞。结论凹脉鹅掌柴酸(5~20μmol·L^(-1))能够通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号通路对胰岛β细胞起到保护作用,从而抗2型糖尿病进展。 展开更多
关键词 凹脉鹅掌柴酸 rin-m5f细胞 一氧化氮 caspase-3 活性氧 Nf-κB-iNOS-NO
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豆芋异黄酮的制备及其对RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1
6
作者 邓珂 陈镠 +5 位作者 杨良缘 胡钰 许光治 张有做 王艳 倪勤学 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第19期200-207,共8页
以豆芋(Apios americana Medik.)为原料,采用乙醇热回流提取、乙酸乙酯萃取,以异黄酮质量浓度为指标,优化大孔树脂富集工艺,并对得到的豆芋异黄酮(记为AI-3)抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制能力及对胰岛瘤细胞RIN-m5F氧化损伤的保护作用... 以豆芋(Apios americana Medik.)为原料,采用乙醇热回流提取、乙酸乙酯萃取,以异黄酮质量浓度为指标,优化大孔树脂富集工艺,并对得到的豆芋异黄酮(记为AI-3)抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制能力及对胰岛瘤细胞RIN-m5F氧化损伤的保护作用进行探究。结果:优化的D101型大孔树脂富集工艺为:上样质量浓度1.5 mg/m L,体积分数80%乙醇溶液(p H 6)洗脱,洗脱体积80 m L(4倍柱体积),所得AI-3得率为0.44%(占豆芋干基质量),异黄酮质量分数50.83%;AI-3对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基的半抑制质量浓度分别为19.51、3.40 μg/m L,铁离子还原抗氧化能力为387.83 μmol/mg,对α-葡萄糖苷酶活力的半抑制质量浓度为235.97 μg/m L;AI-3在0~300 μg/m L范围内,RIN-m5F细胞存活率同空白对照组相比无显著差异(P>0.05),且25~300 μg/m L时可极显著提高RIN-m5F氧化损伤细胞的存活率(P<0.01),300 μg/m L时细胞存活率达84.19%,高于阳性对照组。结论:D101型大孔树脂可有效富集豆芋异黄酮,所得AI-3具有较强的抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性及RIN-m5F细胞氧化损伤保护作用。研究结果为开发预防糖尿病等代谢综合征功能性食品提供了理论依据。 展开更多
关键词 豆芋异黄酮 大孔树脂富集 抗氧化 α-葡萄糖苷酶抑制 rin-m5f细胞保护
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稳定表达RFP-GFP-LC3的大鼠胰岛β细胞株的构建
7
作者 周佳丽 吴艳阳 +3 位作者 罗玉霜 袁玉菊 刘明俊 刘东波 《生命科学研究》 CAS CSCD 2019年第2期87-91,共5页
为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血... 为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降, P62蛋白表达量以及S6K磷酸化水平降低,加入10μmol/L氯喹部分抑制自噬后, GFP/RFP荧光点比值回升。以上结果表明稳定表达RFP-GFP-LC3的RIN-m5f构建成功,并能够以简单的检测方式准确表达自噬全过程,为自噬在糖尿病药物机理方面的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 糖尿病:自噬 慢病毒转染 rin-m5f细胞株
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黄刺多糖中单糖含量与体外降血糖活性相关性分析
8
作者 岳庆明 韩丽娟 +2 位作者 邓永蓉 马娜娜 赵玉欣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期122-133,共12页
基于糖脂毒性(glucolipotoxicity,GLTy)诱导的RIN-m5F胰岛细胞模型及α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性共同探究不同产地黄刺多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)降血糖活性,以期探究其单糖含量与降血糖活性之间的相关性。以青... 基于糖脂毒性(glucolipotoxicity,GLTy)诱导的RIN-m5F胰岛细胞模型及α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性共同探究不同产地黄刺多糖(Berberi dasystachya polysaccharides,BDPs)降血糖活性,以期探究其单糖含量与降血糖活性之间的相关性。以青海省5个地区黄刺浆果为原料,采用超声辅助热水浸提法提取5种不同产地BDPs(Ⅰ~Ⅴ),明确BDPs化学组成及初级结构,探讨BDPs体外降血糖活性及对GLTy损伤的胰岛细胞的保护作用,揭示BDPs单糖含量与降血糖活性之间的相关性。结果表明,不同产地BDPs均是由β-糖苷键连接且具有吡喃糖环骨架构型的不具备三螺旋构象的杂多糖,在200℃以下表现出优良的热稳定性。另外不同产地BDPs单糖组成及分子质量存在较大差异。不同产地BDPs均展现了良好的体外降血糖活性,其中BDPs-I对α-淀粉酶具有显著的抑制效果,抑制率高达67.41%(P<0.05)。此外,不同产地BDPs对GLTy诱导的RIN-m5F胰岛细胞具有良好的保护作用,其中BDPs-I具有最优的细胞增殖活性,可有效清除活性氧水平,显著降低肿瘤坏死因子-α含量。最后,通过相关性分析发现葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等单糖与α-淀粉酶抑制率呈现较强的正相关关系,甘露糖与活性氧之间存在较强的负相关性。本研究为黄刺浆果资源在降血糖活性方面的利用及开发提供一定理论依据。 展开更多
关键词 黄刺多糖 单糖 rin-m5f胰岛细胞 体外降血糖活性 糖脂毒性 相关性分析
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VGLUT2基因表达下调对大鼠胰岛β细胞RIN-5F线粒体功能的影响 被引量：1
9
作者 王树文 李涛 +3 位作者 林鸿程 何德 林荣文 陈远寿 《临床和实验医学杂志》 2017年第10期937-939,共3页
目的探讨囊泡膜谷氨酸转运体2(VGLUT2)基因表达与大鼠胰岛β细胞RIN-5F线粒体功能之间的关系。方法体外培养大鼠胰岛β细胞RIN-5F,分为空白组(blank组)、LipofectamineTM2000组(Lip2000组)、ControlsiRNA组(采用40 nM的siRNA+Lip2000处... 目的探讨囊泡膜谷氨酸转运体2(VGLUT2)基因表达与大鼠胰岛β细胞RIN-5F线粒体功能之间的关系。方法体外培养大鼠胰岛β细胞RIN-5F,分为空白组(blank组)、LipofectamineTM2000组(Lip2000组)、ControlsiRNA组(采用40 nM的siRNA+Lip2000处理)和VGLUT2-siRNA组(采用40 nM的VGLUT2-siRNA+Lip2000处理)。采用VGLUT2-siRNA干扰RIN-5F的VGLUT2基因表达,利用流式细胞技术和Western blot法分别检测大鼠胰岛β细胞RIN-5F线粒体膜电位与Casepase3表达在VGLUT2基因表达下调前后的变化。结果大鼠胰岛β细胞RIN-5F受VGLUT2-siRNA干扰后,与Blank组和Control-siRNA组比较,VGLUT2-siRNA组VGLUT2 mRNA表达下调显著(P<0.05);VGLUT2-siRNA组RIN-5F线粒体膜电位下降较Control-siRNA组明显(88.3%vs.28.3%,P<0.01);VGLUT2-siRNA组的Caspase-3表达较Blank组和Control-siRNA组均明显上调(P<0.05)。结论VGLUT2参与胰岛β细胞RIN-5F线粒体膜电位的调控以及Caspase-3的表达。 展开更多
关键词 糖尿病 rin-5f细胞 囊泡谷氨酸转运体2 线粒体膜电位 Caspase-3
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聚(ADP-核糖)聚合酶1在游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡中的作用
10
作者 潘玉琴 毛晓明 +2 位作者 何帮顺 许向红 王书奎 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期704-706,共3页
目的研究RIN-m5F胰岛细胞在游离脂肪酸(FFA)作用下聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP-1)基因的表达。方法细胞经FFA处理后,检测其胰岛素分泌水平、细胞内PARP-1 mRNA和蛋白的表达以及细胞凋亡。结果经软脂酸(PA)处理后细胞胰岛素分泌水平明显降... 目的研究RIN-m5F胰岛细胞在游离脂肪酸(FFA)作用下聚(ADP-核糖)聚合酶1(PARP-1)基因的表达。方法细胞经FFA处理后,检测其胰岛素分泌水平、细胞内PARP-1 mRNA和蛋白的表达以及细胞凋亡。结果经软脂酸(PA)处理后细胞胰岛素分泌水平明显降低(P<0.01),而油酸(OA)明显抑制了PA对胰岛细胞功能的影响;细胞经PA处理后,PARP-1表达显著升高(P<0.01);而PA+OA组PARP-1表达较PA组明显降低(P<0.01)。结论不饱和脂肪酸OA在适当条件下能抑制饱和脂肪酸PA所诱导的RIN-m5F胰岛细胞功能损伤及凋亡,此过程可能与PARP-1的表达密切相关。 展开更多
关键词 聚(ADP-核糖)聚合酶1 rin—m5f胰岛细胞 游离脂肪酸
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