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含RGD肽基因导入系统介导TGF-β1基因转染对兔骨髓基质干细胞增殖和体外诱导成骨的影响 被引量：4
1
作者 潘海涛 郑启新 +2 位作者 郭晓东 刘勇 宋玉林 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期596-601,共6页
目的探讨一种新型靶向性非病毒载体—含RGD肽K16GRGDSPC(记作K16-RGD)介导外源基因转染骨髓基质干细胞(BMSCs)的可行性,观察转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染对BMSCs的增殖和体外诱导成骨的影响。方法固相合成法合成K16-RGD,以其为载... 目的探讨一种新型靶向性非病毒载体—含RGD肽K16GRGDSPC(记作K16-RGD)介导外源基因转染骨髓基质干细胞(BMSCs)的可行性,观察转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染对BMSCs的增殖和体外诱导成骨的影响。方法固相合成法合成K16-RGD,以其为载体将转化生长因子β1质粒pcDNA3-TGF-β1导入兔BMSCs,以导入空载体pcDNA3作为对照,G418筛选得到阳性细胞集落(分别命名为BMSCs-TGF-β1和BMSCs-pcDNA3),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1基因的表达;采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)和流式细胞仪(FCM)检测细胞体外增殖活性,并进行成骨诱导扩增,检测转基因细胞经成骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙蛋白(OCN)含量、核心结合因子a1(Cbfa1)的表达、矿化(钙结节形成)情况。以经诱导的BMSCs-pcDNA3和未转染BMSCs作为对照。结果RT-PCR显示转基因细胞能高表达TGF-β1,BMSCs-TGF-β1的体外增殖活性明显高于对照组(P<0.01);BMSCs-TGF-β1经成骨诱导后表达的成骨特征性表型(ALP、OCN、Cbfa1的表达和矿化)与对照组有显著的差异(P<0.01)。结论含RGD肽K16-RGD可以作为一种较理想的新型基因转移载体介导外源基因转染BMSCs;TGF-β1可以作为骨组织工程种子细胞BMSCs向成骨细胞定向分化的理想调控因子之一。 展开更多
关键词 含rgd肽 TGF-Β1基因 体外诱导
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