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腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用
被引量：
2
1
作者
何峰
李帅
+3 位作者
朱霞霞
杨吉成
盛伟华
缪竞诚
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期953-960,共8页
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用Q...
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用QBI-293A细胞进行包装扩增和检测效价。将Ad.RGD、Ad.RGD-ING4、Ad.RGD-P53、Ad.RGD-ING4-P53分别感染A549细胞后,流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549细胞的感染效率。Western blotting检测A549和PC-9细胞中ING4或/和P53蛋白的表达。MTT法检测A549细胞生长,流式细胞仪检测各组A549和PC-9细胞的凋亡率。real-time PCR检测A549细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX及BCL-2 mRNA的表达水平。结果 PCR和酶切鉴定结果表明：成功构建了pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后经效价检测可达1×109~1×1010pfu/m L;各组重组腺病毒感染A549细胞后,感染效率可达90%~95%。Western blotting检测结果表明ING4或/和P53蛋白可在A549和PC-9细胞中成功表达。MTT法检测发现ING4或/和P53单双基因重组腺病毒均能明显抑制A549细胞生长,流式细胞仪检测表明ING4或/和P53基因表达均可诱导A549和PC-9细胞凋亡,且Ad.RGD-ING4-P53双基因重组腺病毒组较Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组更为明显（P〈0.05）。real-time PCR检测表明腺病毒介导的ING4或/和P53基因表达能够上调A549细胞内Caspase-3、BAX mRNA表达,下调BCL-2 mRNA的表达,且双基因组较单基因组更为明显（P〈0.05）。结论成功构建了Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53重组腺病毒。各重组腺病毒目的基因表达均能明显抑制人肺腺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,且双基因组较单基因组效果更优,其分子机制可能与细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX表达上调及BCL-2表达下调有关。
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关键词
rgd
腺病毒
ING4基因
P53基因
人肺
腺
癌细胞
下载PDF
职称材料
RGD肽与肿瘤治疗研究进展
被引量：
4
2
作者
刘俭
郭顺星
唐建国
《国外医学（肿瘤学分册）》
2003年第3期193-197,共5页
天然RGD肽与其整合素受体介导的细胞与细胞及细胞外基质的粘附是细胞迁移和识别的重要基础和途径 ,与许多生物过程密切相关。目前关于RGD肽的研究已从抗血小板凝聚作用侧重到抑制肿瘤细胞粘附、抗癌细胞转移和抗肿瘤新血管生成等方面。...
天然RGD肽与其整合素受体介导的细胞与细胞及细胞外基质的粘附是细胞迁移和识别的重要基础和途径 ,与许多生物过程密切相关。目前关于RGD肽的研究已从抗血小板凝聚作用侧重到抑制肿瘤细胞粘附、抗癌细胞转移和抗肿瘤新血管生成等方面。研究证明 ,整合素家族中αυβ3与细胞粘附和新生血管形成的关系最为密切 ,而其配体RGD肽对肿瘤血管内皮细胞的粘附和迁移有明显的抑制作用 ;RGD肽还可诱导肿瘤细胞中caspase 3和caspase 7表达的增高 ,从而促进肿瘤细胞的凋亡。遗传修饰腺病毒连接上RGD肽 ,可提高对肿瘤细胞的选择性 ,使腺病毒有可能在临床上成为基因治疗的理想载体。RGD肽与肿瘤治疗之间关系的探索为人类彻底根治肿瘤带来了希望 ,是近年来肿瘤治疗研究领域的热点。
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关键词
肿瘤治疗
rgd
肽
整合素受体
基因治疗
rgd
-
腺病毒
载体
下载PDF
职称材料
题名
腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用
被引量：
2
1
作者
何峰
李帅
朱霞霞
杨吉成
盛伟华
缪竞诚
机构
苏州大学医学部细胞教研室
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期953-960,共8页
基金
国家自然科学基金(81001016)~~
文摘
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用QBI-293A细胞进行包装扩增和检测效价。将Ad.RGD、Ad.RGD-ING4、Ad.RGD-P53、Ad.RGD-ING4-P53分别感染A549细胞后,流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549细胞的感染效率。Western blotting检测A549和PC-9细胞中ING4或/和P53蛋白的表达。MTT法检测A549细胞生长,流式细胞仪检测各组A549和PC-9细胞的凋亡率。real-time PCR检测A549细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX及BCL-2 mRNA的表达水平。结果 PCR和酶切鉴定结果表明：成功构建了pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后经效价检测可达1×109~1×1010pfu/m L;各组重组腺病毒感染A549细胞后,感染效率可达90%~95%。Western blotting检测结果表明ING4或/和P53蛋白可在A549和PC-9细胞中成功表达。MTT法检测发现ING4或/和P53单双基因重组腺病毒均能明显抑制A549细胞生长,流式细胞仪检测表明ING4或/和P53基因表达均可诱导A549和PC-9细胞凋亡,且Ad.RGD-ING4-P53双基因重组腺病毒组较Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组更为明显（P〈0.05）。real-time PCR检测表明腺病毒介导的ING4或/和P53基因表达能够上调A549细胞内Caspase-3、BAX mRNA表达,下调BCL-2 mRNA的表达,且双基因组较单基因组更为明显（P〈0.05）。结论成功构建了Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53重组腺病毒。各重组腺病毒目的基因表达均能明显抑制人肺腺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,且双基因组较单基因组效果更优,其分子机制可能与细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX表达上调及BCL-2表达下调有关。
关键词
rgd
腺病毒
ING4基因
P53基因
人肺
腺
癌细胞
Keywords
rgd
adenovirus
ING4 gene
P53 gene
human lung adenocarcinoma cell
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
RGD肽与肿瘤治疗研究进展
被引量：
4
2
作者
刘俭
郭顺星
唐建国
机构
中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所
北京大学生命科学院蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室
出处
《国外医学（肿瘤学分册）》
2003年第3期193-197,共5页
文摘
天然RGD肽与其整合素受体介导的细胞与细胞及细胞外基质的粘附是细胞迁移和识别的重要基础和途径 ,与许多生物过程密切相关。目前关于RGD肽的研究已从抗血小板凝聚作用侧重到抑制肿瘤细胞粘附、抗癌细胞转移和抗肿瘤新血管生成等方面。研究证明 ,整合素家族中αυβ3与细胞粘附和新生血管形成的关系最为密切 ,而其配体RGD肽对肿瘤血管内皮细胞的粘附和迁移有明显的抑制作用 ;RGD肽还可诱导肿瘤细胞中caspase 3和caspase 7表达的增高 ,从而促进肿瘤细胞的凋亡。遗传修饰腺病毒连接上RGD肽 ,可提高对肿瘤细胞的选择性 ,使腺病毒有可能在临床上成为基因治疗的理想载体。RGD肽与肿瘤治疗之间关系的探索为人类彻底根治肿瘤带来了希望 ,是近年来肿瘤治疗研究领域的热点。
关键词
肿瘤治疗
rgd
肽
整合素受体
基因治疗
rgd
-
腺病毒
载体
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用
何峰
李帅
朱霞霞
杨吉成
盛伟华
缪竞诚
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
下载PDF
职称材料
2
RGD肽与肿瘤治疗研究进展
刘俭
郭顺星
唐建国
《国外医学（肿瘤学分册）》
2003
4
下载PDF
职称材料
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