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神经元限制性沉默因子REST/NRSF参与调控癫痫作用及机制研究
1
作者 刘慧 于佰卉 +5 位作者 王雅琪 陈熠灵 程子豪 马佳蕊 康子硕 张凡 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1727-1734,共8页
目的探究神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)参与调控癫痫作用及分子机制。方法采用免疫组织化学染色、免疫荧光、Western blot和qPCR检测癫痫患者病灶组织和海人藻酸(kainic acid,KA)癫痫小鼠海马脑区REST/NRSF表达水平的变化;采用病毒注... 目的探究神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)参与调控癫痫作用及分子机制。方法采用免疫组织化学染色、免疫荧光、Western blot和qPCR检测癫痫患者病灶组织和海人藻酸(kainic acid,KA)癫痫小鼠海马脑区REST/NRSF表达水平的变化;采用病毒注射,脑电图记录和行为学方法检测在海马CA1区分别敲低或过表达REST/NRSF后对小鼠癫痫发作的影响。结果癫痫患者病灶REST/NRSF表达水平相对于脑外伤患者脑组织明显升高;KA模型组小鼠海马CA1区REST/NRSF蛋白和mRNA水平均明显升高,Kv7.2、Kv7.3钾通道mRNA表达水平明显下调;脑内注射NMDA兴奋海马脑区小鼠REST/NRSF表达水平明显上调;海马CA1区敲低REST/NRSF明显升高Kv7.2、Kv7.3钾通道mRNA表达水平,明显降低小鼠脑电图棘波、尖波发放频率以及癫痫发作等级;海马CA1区过表达REST/NRSF明显降低Kv7.2、Kv7.3钾通道mRNA表达水平,明显升高小鼠棘波、尖波发放频率,癫痫症状明显加重。结论小鼠海马脑区REST/NRSF通过转录调控Kv7.2、Kv7.3钾通道参与癫痫疾病发生发展。 展开更多
关键词 rest/nrsf 癫痫 海马 海人藻酸 Kv7 channel KCNQ gene
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REST在神经病理性疼痛中的研究进展 被引量：3
2
作者 王艺颖 梁策 +2 位作者 赵晨 张凡 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1652-1654,共3页
抑制元素1沉默转录因子/神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)是一种转录抑制因子,它是一种DNA锌指结合蛋白,通过与一些基因中的特异的作用元件(NRSE)相结合,可以使其序列中的组蛋白发生去乙酰化,通过表观遗传重构来沉默靶基因,从而抑制靶... 抑制元素1沉默转录因子/神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)是一种转录抑制因子,它是一种DNA锌指结合蛋白,通过与一些基因中的特异的作用元件(NRSE)相结合,可以使其序列中的组蛋白发生去乙酰化,通过表观遗传重构来沉默靶基因,从而抑制靶基因的转录。近年来有研究表明,REST/NRSF介导诱导的几种特定基因的转录抑制是神经病理性疼痛发生和发展过程中的重要组成部分。该文就REST/NRSF与神经病理性疼痛之间的相关研究作一综述。 展开更多
关键词 rest/nrsf 神经病理性疼痛 神经元 靶基因 转录 抑制
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REST/NRSF基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：2
3
作者 李宏图 施萍 庞希宁 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第32期6036-6040,共5页
背景:神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)能负向调控神经元及胰岛细胞分化相关基因的表达。目的:构建并筛选能高效沉默大鼠REST/NRSF基因的shRNA慢病毒载体。方法:针对REST/NRSF基因设计4组特异性siRNA靶点,合成靶序列的寡核苷酸序列,退... 背景:神经元限制性沉默因子(REST/NRSF)能负向调控神经元及胰岛细胞分化相关基因的表达。目的:构建并筛选能高效沉默大鼠REST/NRSF基因的shRNA慢病毒载体。方法:针对REST/NRSF基因设计4组特异性siRNA靶点,合成靶序列的寡核苷酸序列,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切后的pFU-GW-RNAi载体连接产生L-shREST/NRSF慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。包装产生慢病毒颗粒,随后将其感染大鼠骨髓间充质干细胞,采用Real-timePCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率。结果与结论:PCR和测序证实,构建出了REST/NRSFshRNA的慢病毒载体L-shREST/NRSF,并能稳定转染大鼠间充质干细胞,感染效率达100%。4组shRNA序列均有基因沉默效果,并以第3组shRN序列效果最为明显。结果表明,该慢病毒表达载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。 展开更多
关键词 慢病毒载体 rest/nrsf SHRNA 基因 骨髓间充质干细胞
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