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碱性成纤维细胞生长因子调节Notch信号通路下游蛋白参与神经干细胞抗辐射损伤的实验研究 被引量:1
1
作者 苏静 肖颂华 刘军 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期875-877,共3页
目的 观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对辐射诱导的c17.2神经干细胞凋亡的影响,探讨Nocth信号通路下游蛋白Hes1,RBP-Jk表达与bFGF之间的关系.方法 MTT法检测细胞的活性;培养贴壁后的细胞利用直线加速器进行照射,5 min后分别加... 目的 观察外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对辐射诱导的c17.2神经干细胞凋亡的影响,探讨Nocth信号通路下游蛋白Hes1,RBP-Jk表达与bFGF之间的关系.方法 MTT法检测细胞的活性;培养贴壁后的细胞利用直线加速器进行照射,5 min后分别加入0 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml、80 ng/ml的bFGF,培养48 h后提取各组总蛋白,利用Western blot检测Hes1、RBP-JK蛋白含量的改变.结果 细胞照射后,照射组与对照组相比,细胞的生长受到明显的抑制,加入0 ng/ml bFGF组的OD值为(0.61±0.81), 80 ng/ml bFGF组的OD值为(1.21±1.01),对照组的OD值为(1.51±1.13),各照射组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),各照射组之间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示照射后的细胞随着bFGF浓度的增高,RBP-JK表达量逐渐降低,而Hes1的表达含量逐渐升高.结论 外源性bFGF对放射诱导的C17.2神经干细胞凋亡有抑制作用,bFGF调节Notch信号通路下游蛋白Hes1、RBP-JK的表达,抑制放射后神经干细胞的凋亡. 展开更多
关键词 HES1 rbpjk 碱性成纤维细胞生长因子 辐射损伤
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卵圆细胞对肝损伤的修复作用及机制 被引量:1
2
作者 姚树坤 杨志云 常丽丽 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第1期61-65,共5页
目的研究卵圆细胞在肝损伤中的修复作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法清洁级SD大鼠50只随机分为正常对照组(20只)和模型组(30只),两组均于实验第5周取肝组织进行常规病理、透射电镜,免疫组化检测波形蛋白(vimentin)和增殖细... 目的研究卵圆细胞在肝损伤中的修复作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法清洁级SD大鼠50只随机分为正常对照组(20只)和模型组(30只),两组均于实验第5周取肝组织进行常规病理、透射电镜,免疫组化检测波形蛋白(vimentin)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,半定量RT-PCR方法检测Notch1、RBP-Jκ、HES1mRNA表达。结果正常对照组大鼠肝组织学形态正常,偶见vimentin和PCNA阳性细胞,Notch1、RBP-Jκ、HES1mRNA低表达;模型组主要于汇管区发现大量卵圆细胞,电镜下可见卵圆细胞的特征性表现张力微丝和桥粒连接,免疫组化示vimentin和PCNA阳性细胞明显增加(P<0.01),Notch1、RBP-Jκ、HES1 mRNA表达显著上调(P<0.01)。结论卵圆细胞在肝损伤修复中可能发挥重要作用,其作用机制与Notch家族有关。 展开更多
关键词 干细胞 波形蛋白 rbp-jk 肝损伤
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Notch信号与卡波西肉瘤相关疱疹病毒关系的研究进展 被引量:2
3
作者 郑国霞 谭晓华 +1 位作者 齐燕 杨磊 《中国病毒病杂志》 CAS 2017年第5期394-398,共5页
卡波西肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)是卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma,KS)等肿瘤的病因。一系列研究显示KSHV病毒基因与Notch信号通路分子的交互作用在调控KSHV复制以及促进肿瘤发生中发挥了重... 卡波西肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)是卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma,KS)等肿瘤的病因。一系列研究显示KSHV病毒基因与Notch信号通路分子的交互作用在调控KSHV复制以及促进肿瘤发生中发挥了重要作用。Notch信号传导通路由配体、受体、转录因子、效应分子等组成,相邻细胞间通过Notch信号调节细胞分化、增殖和凋亡、器官形成和形态发生等过程。本文就KSHV对Notch信号的调控以及Notch信号在KSHV复制及肿瘤形成中的作用作一综述。 展开更多
关键词 卡波西肉瘤相关疱疹病毒 NOTCH信号通路 复制调控 重组信号序列结合蛋白J KAPPA 内皮细胞间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition EndMT)
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核基质MINT N端片段(365~1084aa)相互作用蛋白的筛选及鉴定
4
作者 秦红 孙强 +3 位作者 周鹏 李军锋 韩骅 罗晓星 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第1期1-3,共3页
目的 :确定核蛋白MINT(Msx2 interactingnucleartargetProtein)的功能及作用机制 .方法 :利用酵母双杂交的方法 ,以MINTN端第 36 5~ 1 0 84位氨基酸 (MINT F2 )为诱饵用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎 9日的cDNA文库 .用诱饵质粒和文库先... 目的 :确定核蛋白MINT(Msx2 interactingnucleartargetProtein)的功能及作用机制 .方法 :利用酵母双杂交的方法 ,以MINTN端第 36 5~ 1 0 84位氨基酸 (MINT F2 )为诱饵用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎 9日的cDNA文库 .用诱饵质粒和文库先后转化酵母宿主后 ,对 1 .0× 1 0 8个酵母克隆进行营养筛选和 β 半乳糖苷酶筛选 ,获得 1 2 8个阳性克隆 .并提取质粒进行酶切鉴定 ,将获得的 4个非重复克隆并进行序列分析 .结果 :筛选出 4个与MINT F2相互作用的蛋白 ,它们分别是 :6 7ku层黏连蛋白受体 ,,2个 1 6S核糖体RNA ,精氨酰 tRNA合成酶 .结论 :成功筛选出与MINT F2相互作用的蛋白 。 展开更多
关键词 核蛋白MINT MSX2 rbpjk NOTCH信号途径 酵母双杂交
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基于Notch1-RBP-Jk/Msx2信号通路探讨大黄酸对糖尿病肾病主动脉钙化的作用及机制研究 被引量:5
5
作者 段晓星 常永丽 +1 位作者 张国光 潘雪 《临床肾脏病杂志》 2020年第1期51-56,共6页
目的基于人跨膜受体蛋白Notch-1通路(Notch1-recombining binding protein suppressor of hairless,Notch1-RBP-Jk)/相互作用蛋白Msx2(Msx2-interacting nuclear target protein,Msx2)信号通路,探讨大黄酸对糖尿病肾病主动脉钙化的控制... 目的基于人跨膜受体蛋白Notch-1通路(Notch1-recombining binding protein suppressor of hairless,Notch1-RBP-Jk)/相互作用蛋白Msx2(Msx2-interacting nuclear target protein,Msx2)信号通路,探讨大黄酸对糖尿病肾病主动脉钙化的控制作用。方法取32只大鼠建立糖尿病肾病主动脉钙化模型并随机分为4组(模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),另取8只正常大鼠记为正常对照组,其中低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予50 mg/kg、100 mg/kg、150 mg/kg剂量的大黄酸灌胃,模型对照组和正常对照组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,持续4周。对比干预前后肾功能变化;干预后将各组大鼠处死,取腹主动脉观察其钙化情况;取腹主动脉组织检测钙含量;采用实时聚合酶链反应检测各组腹主动脉组织Notch1、RBP-JK、Msx2、α-肌动蛋白(α-smooth muscle aorta,α-SMA)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)的信使核糖核酸(mRNA)表达;采用蛋白质免疫印迹法检测腹主动脉组织Notch1、RBP-JK、Msx2、α-SMA、Runx2蛋白表达。结果与模型对照组比较,3剂量组干预后肾功能指标均改善,腹主动脉钙化情况均减轻,腹主动脉组织钙含量减少,且3剂量组Notch1、RBP-JK、Msx2、Runx2 mRNA和蛋白表达均下降,α-SMA mRNA和蛋白表达升高。在3个剂量组中,高剂量组各项指标改善情况均为最佳。结论大黄酸能够保护糖尿病主动脉钙化大鼠的肾功能,减轻钙化,推测其作用机制与下调Notch1、RBP-JK、Msx2、Runx2 mRNA和蛋白表达,上调α-SMA mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 大黄酸 Notch1-rbp-jk/Msx2信号通路 糖尿病肾病 主动脉钙化
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骨保护素参与高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化调节的机制初探 被引量:1
6
作者 窦建新 孙丽萍 +3 位作者 刘长山 王秀军 明义 苏亮 《天津医药》 CAS 北大核心 2020年第5期380-384,共5页
目的以β-磷酸甘油诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化模型为研究对象,初步探讨骨保护素(OPG)干预对VSMC钙化的影响及机制。方法体外分离培养大鼠主动脉VSMC。PBS为对照组,以10 mmol/Lβ-磷酸甘油诱导钙化10 d为钙化对照组,β-磷酸甘油... 目的以β-磷酸甘油诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化模型为研究对象,初步探讨骨保护素(OPG)干预对VSMC钙化的影响及机制。方法体外分离培养大鼠主动脉VSMC。PBS为对照组,以10 mmol/Lβ-磷酸甘油诱导钙化10 d为钙化对照组,β-磷酸甘油诱导钙化同时予以剂量梯度(1、4、8μg/L)的OPG干预为OPG干预组。茜素红染色检测各组钙化结节形成情况。邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙沉积含量。比色法测定碱性磷酸酶(ALP)活性。免疫蛋白印迹(Western blot)检测各组Notch1/RBP-JK通路蛋白的表达。结果茜素红染色显示,与钙化对照组比较,OPG干预组大鼠VSMC钙化结节明显减少,OPG干预组的钙含量、ALP活性均明显下降(均P<0.05),且有剂量依赖性。Westernblot结果显示,与钙化对照组比较,OPG干预组的Notch1、RBP-JK、Jagged1、Msx2蛋白表达水平明显下降(均P<0.05)。结论OPG可能通过下调Notch1/RBP-JK通路蛋白表达,参与大鼠VSMC钙化过程调节。 展开更多
关键词 骨保护素 肌细胞 平滑肌 血管钙化 受体 Notch1 Notch1/rbp-jk通路
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小鼠骨髓基质细胞Kusa-A1成骨分化中CBF1的作用 被引量:1
7
作者 王胜朝 KAWASHIMA Nobuyuki +4 位作者 SAKAMOTO Kei KATSUBE Ken-Ichi SHINDO Kentaro SUDA Hideaki 史俊南 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第4期409-414,共6页
目的揭示CBF1在骨髓基质细胞Kusa-A1成骨分化过程中的作用。方法采用基因转染法建立CBF1稳定过表达细胞系Kusa-A1/CBF1,检测其成骨活性。指标包括细胞钙沉积能力、碱性磷酸酶活性、体外钙化结节(CN)形成、实时PCR测定细胞骨钙素(OC)和... 目的揭示CBF1在骨髓基质细胞Kusa-A1成骨分化过程中的作用。方法采用基因转染法建立CBF1稳定过表达细胞系Kusa-A1/CBF1,检测其成骨活性。指标包括细胞钙沉积能力、碱性磷酸酶活性、体外钙化结节(CN)形成、实时PCR测定细胞骨钙素(OC)和骨桥蛋白(OPN)基因表达、蛋白印迹检测细胞RANKL蛋白。最后用报告基因法检测CBF1对HES1启动子活性的影响。结果经RT-PCR和Western blot鉴定,Kusa-A1/CBF1细胞建立成功。与对照细胞系Kusa-A1/host相比,Kusa-A1/CBF1细胞的钙沉积能力、CN形成能力均显著提高;Kusa-A1/CBF1细胞OC和OPN基因表达和RANKL蛋白水平明显高于对照细胞。瞬时转染Notch的细胞内结构域NICD促进HES1的启动子活性,这一作用被CBF1强烈抑制。结论CBF1可以促进Kusa-A1的成骨分化,该作用至少部分是通过影响Notch信号实现的。 展开更多
关键词 转录调控因子CBF1(rbp-jk) 骨髓基质细胞 成骨分化 NOTCH信号
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