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白花蛇舌草提取物对肝癌细胞JNK/p38MARK通路及细胞学行为的影响 被引量：5
1
作者 刘皎皎 李粉萍 +4 位作者 杨跃青 何瑾瑜 曹雪艳 薛敬东 叶苗青 《安徽医药》 CAS 2022年第8期1496-1500,I0001,共6页
目的研究白花蛇舌草提取物(HDE)对肝癌QGY细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法体外培养肝癌QGY细胞,分为对照组:RPMI-1640培养基培养;阳性对照组:全反式维甲酸(AT-RA)(5μmol/L);白花蛇舌草提取物(HDE)低、中、高... 目的研究白花蛇舌草提取物(HDE)对肝癌QGY细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法体外培养肝癌QGY细胞,分为对照组:RPMI-1640培养基培养;阳性对照组:全反式维甲酸(AT-RA)(5μmol/L);白花蛇舌草提取物(HDE)低、中、高剂量组:分别给予20、40、80 g/L HDE。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖能力,采用Hoechst33258荧光染色以及流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过蛋白质印迹法(Western blotting)检测增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase3)及JNK/p38MARK通路相关蛋白水平。结果24、48 h时QGY细胞增殖抑制率,与对照组[(16.56±3.15)%、(19.27±3.33)%]同时间点比较,20、40、80 g/L HDE组[24 h(33.37±11.36)%、(47.57±13.62)%、(59.37±16.95)%,48 h(36.56±10.03)%、(50.59±13.87)%、(63.61±16.99)%]、阳性对照组[(60.43±17.09)%、(64.63±17.15)%]均显著升高(P<0.05)。与对照组比较,20、40、80 g/L浓度HDE处理后QGY细胞凋亡率、Bax、caspase-3蛋白均显著升高(P<0.05),PCNA、Bcl-2蛋白、p-JNK/JNK、p-p38/p38表达降低(P<0.05),且均呈浓度依赖性,80 g/L HDE组细胞凋亡率、Bax、caspase-3、PCNA、Bcl-2蛋白、p-JNK/JNK、p-p38/p38表达与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论HDE可抑制肝癌QGY细胞增殖,促进QGY细胞凋亡,可能是通过抑制JNK/p38MARK通路活化进而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 白花蛇舌草提取物 肝肿瘤 c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶通路 qgy细胞株 增殖 凋亡
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塞来昔布诱导人肝癌细胞株QGY-7701凋亡的研究 被引量：8
2
作者 陈锦 孙彭利 《新乡医学院学报》 CAS 2011年第2期161-164,共4页
目的探讨塞来昔布体外诱导人肝癌细胞株QGY-7701凋亡的作用。方法设立空白对照组(培养液中不加任何药物)及塞来昔布5、25、50、100、150μmol.L-1 5个剂量组,作用时间分为24、48、72 h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察塞来昔布不同浓度... 目的探讨塞来昔布体外诱导人肝癌细胞株QGY-7701凋亡的作用。方法设立空白对照组(培养液中不加任何药物)及塞来昔布5、25、50、100、150μmol.L-1 5个剂量组,作用时间分为24、48、72 h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察塞来昔布不同浓度和作用时间对QGY-7701细胞生存率的影响,选择合适的作用时间和3个剂量再做其他凋亡方法的检测;采用Hoechst 33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学变化;采用双荧光染色(AnnexinV-EGFP/PI)流式细胞检测、末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记(TUNEL)检测、DNA含量分析(检测细胞周期)等方法多指标检测细胞凋亡率。结果通过Hoechst 33258染色可以从细胞形态上看出塞来昔布诱导QGY-7701细胞凋亡,而Annexin V-EGFP/PI流式细胞检测、TUNEL检测、细胞周期及MTT检测结果显示随着塞来昔布浓度升高和作用时间延长,凋亡率升高(P<0.05,P<0.01)。结论塞来昔布有诱导肝癌细胞QGY-7701凋亡,抑制其生长的作用,具有治疗肝癌的潜在功能。 展开更多
关键词 塞来昔布 人肝癌qgy-7701细胞 细胞凋亡
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双向电泳分析肝癌细胞线粒体的差异表达蛋白 被引量：5
3
作者 李兴 潘卫 +2 位作者 邱峰 田昆仑 邱宗荫 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1327-1331,共5页
背景与目的:线粒体在细胞凋亡中扮演关键的角色,对线粒体蛋白质组的研究可能有助于解释癌症的发生、早期诊断以及抗癌药物的研发。本研究对正常肝细胞L02线粒体、表阿霉素干预前后肝癌细胞QGY-7703线粒体进行二维电泳图谱的比较分析,筛... 背景与目的:线粒体在细胞凋亡中扮演关键的角色,对线粒体蛋白质组的研究可能有助于解释癌症的发生、早期诊断以及抗癌药物的研发。本研究对正常肝细胞L02线粒体、表阿霉素干预前后肝癌细胞QGY-7703线粒体进行二维电泳图谱的比较分析,筛选差异表达蛋白斑点。方法:运用蔗糖密度梯度的超离心方法分离纯化线粒体,双向凝胶电泳分离线粒体蛋白质,ImageMaster2D软件对所得图谱进行图像分析。结果:L02细胞线粒体、表阿霉素干预前QGY-7703细胞线粒体、表阿霉素干预后QGY-7703细胞线粒体三种标本超离心后,其纯化线粒体琥珀酸脱氢酶比活力分别提高13.8、11.8、10.2倍。L02细胞线粒体和表阿霉素干预前后QGY-7703细胞线粒体经双向凝胶电泳分辨出206、217、214个蛋白斑点,L02细胞与QGY-7703细胞比较筛选出49个差异表达蛋白斑点;表阿霉素干预前后的QGY-7703细胞进行比较,筛选到29个差异表达蛋白斑点。结论:运用超离心和双向电泳的方法成功筛选出一批在QGY-7703细胞线粒体中差异表达的蛋白斑点。 展开更多
关键词 肝肿瘤 qgy-7703细胞株 L02细胞株 双向电泳 线粒体 差异表达
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齐墩果酸抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导凋亡的作用研究 被引量：2
4
作者 黄开顺 朱链链 +2 位作者 刘丹 邹黎 陈志琼 《世界科技研究与发展》 CSCD 2011年第2期318-321,共4页
目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]i)关系。方法将浓度分别为40、80、100μg/ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24 h后,DAP1染色,以荧光显微镜观察细胞形态变化;以11组不同浓度齐墩果酸(5～400 μg/ml... 目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]i)关系。方法将浓度分别为40、80、100μg/ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24 h后,DAP1染色,以荧光显微镜观察细胞形态变化;以11组不同浓度齐墩果酸(5～400 μg/ml)作用QGY细胞24 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测QGY增殖情况;分别以不同浓度齐墩果酸(80、100、120 μg/ml)作用QGY细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率和[Ca^(2+)]i。结果细胞增殖被抑制并发生凋亡;不同浓度齐墩果酸能够抑制QGY细胞株增殖,且在5～120μg/mL范围内呈剂量依赖性,药物作用细胞24 h、48的IC_(50)分别为76.27μg/mL和66.56μg/mL;处理组细胞周期在S期产生阻滞、细胞内[Ca^(2+)]i较对照组显著增加,细胞凋亡率和[Ca^(2+)]i与药物浓度存依赖关系。结论齐墩果酸能够抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导其凋亡;诱导凋亡可能与细胞内[Ca^(2+)]i增加有关。 展开更多
关键词 齐墩果酸 肝癌细胞qgy 细胞周期 细胞凋亡 细胞内钙离子浓度
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QGY-7701肝癌细胞株中癌-睾丸抗原GAGE-1基因的表达 被引量：2
5
作者 农彩莲 李立志 +6 位作者 范蓉 何国珍 李中华 岑妍慧 黄荣师 陈青 赵飞兰 《广西医学》 CAS 2013年第5期521-523,共3页
目的研究癌-睾丸抗原GAGE-1基因mRNA在QGY-7701肝癌细胞株中的表达情况。方法运用反转录聚合酶链反应技术检测肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因mRNA的表达,并与正常肝组织比较。结果肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因呈阳性表达,正常肝组织... 目的研究癌-睾丸抗原GAGE-1基因mRNA在QGY-7701肝癌细胞株中的表达情况。方法运用反转录聚合酶链反应技术检测肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因mRNA的表达,并与正常肝组织比较。结果肝癌细胞株QGY-7701中GAGE-1基因呈阳性表达,正常肝组织中GAGE-1基因呈阴性表达。结论 GAGE-1基因具有作为诊断肝癌的分子标记和免疫治疗肝癌的特异性靶位的潜在价值。 展开更多
关键词 肝癌 癌-睾丸抗原 qgy-7701肝癌细胞株 GAGE-1基因 反转录聚合酶链反应
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三种鸡胚绒膜尿囊膜移植瘤模型对比分析
6
作者 费东亮 胡影 +1 位作者 岳金金 马鸣潇 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期47-51,共5页
目的通过比较三种不同癌细胞株在鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)上的生长情况,从中筛选最佳移植癌细胞株,建立移植瘤模型并观察生物学特性。方法分别将人肺癌A549株、舌鳞癌TCA8113株与人肝癌QGY7703株接种于7日... 目的通过比较三种不同癌细胞株在鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)上的生长情况,从中筛选最佳移植癌细胞株,建立移植瘤模型并观察生物学特性。方法分别将人肺癌A549株、舌鳞癌TCA8113株与人肝癌QGY7703株接种于7日龄鸡胚CAM上,对各自鸡胚成活率、瘤株成活、成瘤率和诱导血管生成情况等指标进行检测,并观察筛选移植瘤模型生长特性。结果与人肺癌A549株和肝癌QGY7703株接种组相比,舌鳞癌TCA8113株接种组成瘤率最高(P<0.05),为最佳移植癌细胞株,最佳接种癌细胞数量为8.0×106/个,接种后瘤体最佳生长周期为4~8 d,最佳实验时间为接种后第7天。结论筛选建立了舌鳞癌TCA-CAM移植瘤模型,为深入研究肿瘤生长生物学特性、血管生成机制、侵袭转移机制和筛选抗肿瘤药物提供了良好的实验动物模型。 展开更多
关键词 鸡胚绒毛尿囊膜 移植瘤 A549细胞株 TCA8113细胞株 qgy7703细胞株
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人肝癌细胞株QGY-7701蛋白质组学研究技术及二维电泳图谱的建立 被引量：2
7
作者 袁拥华 李伟 +4 位作者 杨晓兰 李龙江 汤为学 黄开顺 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第12期1233-1236,共4页
目的:建立人肝癌细胞株QGY-7701蛋白质组学研究技术。方法:利用两种不同的裂解液提取细胞蛋白,进行双向电泳,经PDQuest软件分析与比较后,挑选匹配良好的10个蛋白点,进行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的鉴定。结果:... 目的:建立人肝癌细胞株QGY-7701蛋白质组学研究技术。方法:利用两种不同的裂解液提取细胞蛋白,进行双向电泳,经PDQuest软件分析与比较后,挑选匹配良好的10个蛋白点,进行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的鉴定。结果:建立了稳定的人肝癌细胞株QGY-7701的双向电泳图谱,裂解液Ⅱ比裂解液Ⅰ提取的蛋白质量多25%,2-DE胶上蛋白点数多32%,从10个候选蛋向中鉴定出9个有意义的蛋白(P<0.05)。结论:初步建立了人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质组学研究技术,为进一步开展药物蛋白质组学研究奠定基础。 展开更多
关键词 人肝癌细胞株qgy-7701 蛋白质组学 双向电泳
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德氮吡格对人肝癌细胞株QGY-7701蛋白表达的影响 被引量：2
8
作者 袁拥华 李伟 +4 位作者 杨晓兰 李龙江 谷容 汤为学 余瑜 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期463-464,共2页
德氯吡格（TNBG）为本室开发研制的具有创新构型的抗肿瘤药物。在荷瘤动物实验中照示：TNBG具有较好的抗肿瘤作用，处理组较对照组的生存时间明显延长。TNBG不良反应较小，与常用抗癌药物相比基本无交叉耐药性，评且通过影响脂代谢引起... 德氯吡格（TNBG）为本室开发研制的具有创新构型的抗肿瘤药物。在荷瘤动物实验中照示：TNBG具有较好的抗肿瘤作用，处理组较对照组的生存时间明显延长。TNBG不良反应较小，与常用抗癌药物相比基本无交叉耐药性，评且通过影响脂代谢引起肿瘤细胞内大量脂滴聚积，产生抗肿瘤效应。在TNBG基因实验中， 展开更多
关键词 药物筛选试验 抗肿瘤 蛋白质组 德氮吡格 人肝癌细胞株qgy 7701
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稳定表达RFX6基因肝癌细胞株的建立
9
作者 王莉 黄品助 +3 位作者 邱际亮 廖亚帝 李斌奎 元云飞 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第13期968-971,共4页
目的:建立稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株。方法:构建人源RFX6基因的重组质粒(pLNCX2-RFX6),pVSV-G质粒分别与pLNCX2-RFX6和空载体pLNCX2共转染至GP2-293细胞中进行包装,并用包装的逆转录病毒感染人肝癌QGY-7703细胞株,G418筛选出阳性克... 目的:建立稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株。方法:构建人源RFX6基因的重组质粒(pLNCX2-RFX6),pVSV-G质粒分别与pLNCX2-RFX6和空载体pLNCX2共转染至GP2-293细胞中进行包装,并用包装的逆转录病毒感染人肝癌QGY-7703细胞株,G418筛选出阳性克隆。RT-PCR和蛋白质印迹法验证稳定细胞株RFX6基因表达情况。采用Image J软件进行灰度值分析比较两株细胞系的差异。结果:在QGY-7703-pLNCX2-RFX6和QGY-7703-pLNCX2细胞中,RFX6/18SmRNA电泳条带灰度比值分别为5.044 0±1.384 0和0.357 2±0.407 9,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/18S是QGY-7703-pLNCX2细胞的14.1倍,差异有统计学意义,t=4.143,P<0.05;而在两细胞株中,RFX6/GAPDH的蛋白质印迹条带灰度值分别为1.391 4±0.141 3和0.127 8±0.037 3,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/GAPDH是QGY-7703-pLNCX2细胞的10.9倍,差异有统计学意义,t=14.966,P<0.05。结论:成功构建稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株,为研究RFX6基因在肝癌细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 肝肿瘤 RFX6 逆转录病毒 稳定细胞株 肝癌细胞qgy-7703 印迹法 蛋白质
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