产前诊断中常见染色体异常的快速诊断 被引量：14

1

作者 梁永昌 陈敏 +2 位作者 刘严德光 劳子僖 唐海燕 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期98-101,共4页

关键词 染色体异常 产前诊断 荧光多聚酶链反 应 荧光原位杂交

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应用QF-PCR技术对3075例常见染色体非整倍体快速产前诊断结果分析 被引量：10

2

作者 卢建 杜丽 +5 位作者 李海霞 何天文 兰菲菲 郭莉 傅文婷 尹爱华 《热带医学杂志》 CAS 2012年第9期1083-1085,1099,共4页

目的对3075例产前诊断标本进行常见染色体非整倍体快速产前诊断的结果进行回顾性分析,探讨分析荧光定量PCR(QF-PCR)在快速产前诊断常见染色体非整倍体中的临床应用价值。方法采用QF-PCR技术对样本进行21、18、13、X及Y染色体非整倍体诊... 目的对3075例产前诊断标本进行常见染色体非整倍体快速产前诊断的结果进行回顾性分析,探讨分析荧光定量PCR(QF-PCR)在快速产前诊断常见染色体非整倍体中的临床应用价值。方法采用QF-PCR技术对样本进行21、18、13、X及Y染色体非整倍体诊断,并与核型分析结果进行比较。结果 QF-PCR均正确检出38例21、18、13、X及Y染色体非整倍体,无假阳性结果;同时亦正确检出1例18-三体嵌合样本,但是漏诊了3例涉及21和性染色体异常的嵌合体。对于体外培养失败的样本,可将QF-PCR作为培养失败的样本一个补充。结论 QF-PCR技术能够在48～72h内快速、准确地诊断21、18、13、X及Y染色体非整倍体,此技术在快速产前诊断常见非整倍体方面具有重要临床实用价值,可弥补核型分析带来的不足,可以最大程度地缓解孕妇及其家人的焦虑。 展开更多

关键词 qf-pcr 产前诊断 非整倍体

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多重荧光定量PCR技术快速诊断21三体及18三体方法的建立及临床应用 被引量：10

3

作者 卢彦平 程静 +5 位作者 姜淑芳 张利文 高志英 韩冰 袁慧军 李亚里 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1141-1146,共6页

利用收集的20例21三体、3例18三体DNA样本及40例正常人DNA样本,选择多对21、18号染色体短串联重复序列分子标记,建立多重荧光定量PCR检测技术用于21三体、18三体的快速产前诊断;利用建立的方法对165例产前诊断病例及4例消化道畸形新生... 利用收集的20例21三体、3例18三体DNA样本及40例正常人DNA样本,选择多对21、18号染色体短串联重复序列分子标记,建立多重荧光定量PCR检测技术用于21三体、18三体的快速产前诊断;利用建立的方法对165例产前诊断病例及4例消化道畸形新生儿进行检测,并与核型分析结果相比较。169例病例中共诊断21三体4例,18三体1例,所有病例均在1～3d得到结果,无漏诊和误诊,并利用建立的多重荧光定量PCR技术为5例核型分析失败的病例提供了明确的产前诊断。对于同期B超检查胎儿结构异常的22例胎儿,则采用传统的核型分析,检出1例(45,X),1例(47,XXY)。结果表明建立的多重荧光定量PCR技术可快速、准确地诊断21三体和18三体,减轻核型分析需时过长给孕妇带来的焦虑,可用于血清学筛查21三体、18三体高风险者及高龄孕妇,也适用于对其他遗传性疾病如遗传性耳聋进行产前诊断时并行检测以排除21三体和18三体。多重荧光定量PCR技术结合传统核型分析可更好的满足产前诊断的临床需求。 展开更多

关键词 染色体异常 荧光定量pcr 短串联重复序列 产前诊断

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应用QF-PCR技术对胎儿常见非整倍染色体的快速诊断 被引量：8

4

作者 张敏 徐两蒲 +6 位作者 黄海龙 王燕 林娜 陈雪美 陈梅环 王林铄 林元 《海峡预防医学杂志》 CAS 2017年第3期4-6,72,共4页

目的探讨多重荧光定量PCR(QF-PCR)技术在快速产前诊断常见非整倍染色体中的临床应用价值。方法应用QF-PCR技术快速诊断205例产前羊水标本中的13、18、21、X、Y染色体,并与常规核型分析结果对比。结果 205例产前诊断标本QF-PCR法共检出1... 目的探讨多重荧光定量PCR(QF-PCR)技术在快速产前诊断常见非整倍染色体中的临床应用价值。方法应用QF-PCR技术快速诊断205例产前羊水标本中的13、18、21、X、Y染色体,并与常规核型分析结果对比。结果 205例产前诊断标本QF-PCR法共检出17例非整倍染色体,其中10例21三体、3例18三体、1例13三体和3例性染色体异常,与染色体核型分析结果一致;另有1例平衡易位、1例嵌合体及3例倒位核型无法通过QFPCR检测出,两种方法一致性97.6%。结论QF-PCR作为一种快速诊断常见非整倍染色体技术,结果准确可靠,可在产前诊断应用中发挥重要作用。 展开更多

关键词 产前诊断 qf-pcr 核型 非整倍体

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应用QF-PCR和CNV-seq以及染色体核型分析检测羊水的染色体畸变及结果分析 被引量：7

5

作者 乔金平 胡文君 +7 位作者 陈薇 刘慧 张小鹏 代雅倩 彭丽朵 徐元宏 方慧琴 袁静 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第1期89-92,共4页

目的评价定量荧光PCR(QF-PCR)在染色体畸变中诊断的准确性,探讨QF-PCR、基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)和染色体核型分析(核型分析)这3种技术在染色体畸变的产前诊断中的应用价值以及多方法联合诊断的优势和必要性。方法采用QF-PCR检测... 目的评价定量荧光PCR(QF-PCR)在染色体畸变中诊断的准确性,探讨QF-PCR、基因组拷贝数变异测序(CNV-seq)和染色体核型分析(核型分析)这3种技术在染色体畸变的产前诊断中的应用价值以及多方法联合诊断的优势和必要性。方法采用QF-PCR检测106例产前筛查高风险孕妇的产前羊水的染色体畸变,同时使用CNV-seq(102例)及核型分析(4例)检测;统计QF-PCR与后两者之间的阳性符合率。结果在21、18、13、X、Y共5种染色体非整倍体检测方面,QF-PCR与CNV-seq及核型分析的阳性符合率均为100%。对于所有46条染色体畸变的检测,CNV-seq阳性但QF-PCR无法检出的共21例,其中20例微缺失或微重复均小于5 Mb,核型分析可能均无法检出。结论QF-PCR对5种染色体非整倍体的检测具有很高的准确性。QF-PCR结合CNV-seq,相互补充和印证,快速且覆盖面广,具有部分替代核型分析的潜力;多方法联合诊断对染色体畸变的检出具有很大的优势和必要性。 展开更多

关键词 qf-pcr CNV-seq 染色体核型分析 产前诊断 染色体畸变

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应用QF-PCR技术快速检测2275例胎儿常见染色体非整倍体结果分析 被引量：8

6

作者 李发涛 廖灿 +2 位作者 李焱 杨昕 易翠兴 《中国优生与遗传杂志》 2014年第3期39-41,共3页

目的评价定量荧光PCR(Quantitative fluorescent polymerase chain reaction,QF-PCR)技术在常见染色体非整倍体病诊断中的价值。方法对2275例因唐氏筛查高风险或高龄行介入性产前诊断的标本,用QF-PCR方法快速检测21、18、13、X、Y染色... 目的评价定量荧光PCR(Quantitative fluorescent polymerase chain reaction,QF-PCR)技术在常见染色体非整倍体病诊断中的价值。方法对2275例因唐氏筛查高风险或高龄行介入性产前诊断的标本,用QF-PCR方法快速检测21、18、13、X、Y染色体的数目,同时进行G显带染色体核型分析双盲检测。比较两种方法的检测结果,分析QF-PCR技术的敏感性和特异性。结果在2275例标本中,染色体核型分析检测到5种染色体非整倍体99例,其中非嵌合型非整倍体94例,嵌合型非整倍体5例;QF-PCR方法检测非嵌合型非整倍体与核型分析结果一致,QF-PCR检测2例嵌合型非整倍体,漏检3例嵌合型非整倍体。结论 QF-PCR技术对于21、18、13、X、Y染色体非嵌合型非整倍体异常的检测具有较好的敏感性和特异性,是一种简单、快速、可靠的染色体非整倍体分子诊断技术,可用于染色体非整倍体快速产前诊断。 展开更多

关键词 定量荧光pcr 非整倍体 产前诊断

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低比例DNA污染对地中海贫血基因检测结果的影响

7

作者 许晨霞 王德刚 +4 位作者 张艳芳 董兴盛 唐海深 梁睿 彭建明 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第3期409-412,421,共5页

目的 研究低比例DNA污染对地中海贫血基因检测结果判读的影响,以及荧光定量PCR(QF-PCR)技术的鉴定污染的能力。方法 2019年1月至2020年1月在中山市博爱医院进行地中海贫血基因检测的11 128名受检者中,选取其中7例确诊基因型分别为-a^(4.... 目的 研究低比例DNA污染对地中海贫血基因检测结果判读的影响,以及荧光定量PCR(QF-PCR)技术的鉴定污染的能力。方法 2019年1月至2020年1月在中山市博爱医院进行地中海贫血基因检测的11 128名受检者中,选取其中7例确诊基因型分别为-a^(4.2)/aa、-a3.7/--^(SEA)、aWSa/--^(SEA)、a^(CS)α/aa、βCD41-42/βN、a^(CS)a/aa β^(IVS-Ⅱ-654)/βN、a^(QS)a/aa的患者为研究对象,提取外周血DNA,建立污染模型。用QF-PCR技术检测低比例污染样本。分别用PCR-流式荧光杂交方法和Gap-PCR+反向点杂交法检测污染模型。结果 当DNA污染比例小于10%(2 ng/μL)时QF-PCR技术易漏检,而PCR-流式荧光杂交法能提示3.7缺失型(Gap-PCR不提示);反向点杂交膜条法能提示WS、QS突变型α地贫和17种突变型β地贫(PCR-流式荧光杂交法不提示)。结论 两种方法相比较PCR-流式荧光杂交法对检测3.7缺失型更加灵敏,反向点杂交膜条检测法对α、β点突变的检测灵敏度更高。 展开更多

关键词 地中海贫血 qf-pcr pcr-流式荧光杂交 Gap-pcr+反向点杂交

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QF-PCR技术在539例胎儿快速产前诊断中的应用 被引量：5

8

作者 罗海艳 刘艳秋 +1 位作者 邹永毅 陈佳 《江西医药》 CAS 2019年第10期1174-1177,共4页

目的使用定量荧光PCR(QF-PCR)技术对产前诊断样本排除母体细胞污染(MCC),同时行常见染色体非整倍体快速产前诊断。方法对539例因产前筛查异常而行产前诊断的样本通过短串联重复序列(STR)位点比对排除MCC以确保标本适用于后续产前检测,... 目的使用定量荧光PCR(QF-PCR)技术对产前诊断样本排除母体细胞污染(MCC),同时行常见染色体非整倍体快速产前诊断。方法对539例因产前筛查异常而行产前诊断的样本通过短串联重复序列(STR)位点比对排除MCC以确保标本适用于后续产前检测,同时对胎儿及对应孕妇样本行13,18,21,X,Y五条染色体非整倍体的快速诊断,并与核型分析结果进行比较。结果发现1例绒毛样本完全为母体组织,3例胎儿样本存在一定比例的MCC。发现胎儿染色体非整倍体数目异常样本共计20例(3.7%),其中21三体12例,18三体2例,13三体2例,XO单体2例,XYY1例,21三体嵌合体1例。孕妇染色体非整倍体数目异常样本2例,XXX1例,XO嵌合体1例。与染色体核型分析方法比较,有16例产前诊断样本的染色体结构异常QF-PCR未检出,有2例产前诊断样本由于QF-PCR试剂盒局限性无法判断,其余产前诊断样本检测结果一致。结论QF-PCR技术可排除产前诊断样本中的MCC,也能快速诊断常见染色体非整倍体的数目异常,具有简便快速、特异性高的优点。但该方法也具有其局限性,只能检出大于20%的嵌合体,也无法检出存在的染色体结构异常。 展开更多

关键词 qf-pcr 母体细胞污染 STR 快速产前诊断

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定量荧光聚合酶链式反应在流产组织染色体畸变分析中的诊断价值

9

作者 陈宏健 冯桂 王菲 《安徽医药》 CAS 2024年第10期2009-2017,共9页

目的评估在以拷贝数变异测序(CNV-seq)为主要遗传学检测手段对流产组织进行染色体畸变分析中辅以定量荧光聚合酶链式反应(QF-PCR)检测的诊断价值。方法采用QF-PCR及CNV-seq技术同时检测2021年9月至2022年11月海口市妇幼保健院收集的110... 目的评估在以拷贝数变异测序(CNV-seq)为主要遗传学检测手段对流产组织进行染色体畸变分析中辅以定量荧光聚合酶链式反应(QF-PCR)检测的诊断价值。方法采用QF-PCR及CNV-seq技术同时检测2021年9月至2022年11月海口市妇幼保健院收集的110例流产组织样本。此外,QF-PCR技术将额外检测50例健康人群外周血样本进行数据补充。QF-PCR体系为自建体系,在13、18、21、性染色体共选择17个位点并将其分为两组。Panel A组由D13S796、D13S256、D18S386、D18S535、D21S11、D21S1446、DXS6809、HPRT构成;Panel B组由D13S371、D13S634、D18S51、D18S535、D18S819、D21S1409、D21S1412、DYS218、DXS981、AMEL构成。分析QF-PCR在判别13、18、21、性染色体非整倍体时与CNV-seq结论一致性、QF-PCR为CNV-seq进行母源污染鉴定能力,以及QF-PCR进行13、18、21、性染色体非整倍体的分型能力。结果对110例流产组织进行检测,两种方法结论一致例数占比为93.6%。其中QF-PCR避免了5例CNV-seq自身局限性造成的不准确结论,2例为QF-PCR的检测失败。在母源细胞污染鉴定能力上,15个短串联重复序列的观察杂合度、期望杂合度与个体识别能力值范围分别为0.737~0.950、0.593~0.941、0.817~0.975;D13、D18、D21与DX的累积He依次为0.9999、0.9998、0.9998与0.9985,累积个体识别能力大于0.999999999999999999999999999999;自建的QF-PCR方法在分型能力上表现良好,其干扰因素影响较小。结论QF-PCR联合CNV-seq检测可能成为未来孕早期流产组织遗传学分析的主要方法。它不仅能够降低CNV-seq的误诊率、鉴别母体细胞污染。采用自建QF-PCR体系还能够显著降低联合检测成本。 展开更多

关键词 染色体畸变 流产 自然 高通量核苷酸序列分析 定量荧光聚合酶链式反应 拷贝数变异测序 流产组织

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基于染色体短串联重复序列的荧光定量PCR技术在产前诊断中的实际应用

10

作者 林孟思 朱庆文 +3 位作者 崔爱民 卞文君 王婧 仇嘉颖 《中国产前诊断杂志（电子版）》 2023年第4期46-54,共9页

目的本研究旨在探讨基于染色体短串联重复序列(short tandem repeat,STR)的荧光定量PCR(quantitative fluorescence PCR,QF-PCR)在产前诊断中的应用潜力及其价值。方法通过基于STR的QF-PCR技术结合染色体核型分析技术和染色体微阵列分... 目的本研究旨在探讨基于染色体短串联重复序列(short tandem repeat,STR)的荧光定量PCR(quantitative fluorescence PCR,QF-PCR)在产前诊断中的应用潜力及其价值。方法通过基于STR的QF-PCR技术结合染色体核型分析技术和染色体微阵列分析技术(chromosomal microarray analysis,CMA),我们对635例产前筛查异常的羊水样本进行了筛查,从而有效地排除了母源细胞污染(maternal cell contamination,MCC)(>20%),为后续的产前检测提供了可靠的依据。此外,为了快速诊断胎儿及其相应的孕妇样本,我们检测了包括13、18、21、X、Y在内的五条染色体,并将其与核型分析的结果进行比较。结果通过QF-PCR检测,在635例样本中,发现了3例母源污染,1例三倍体,1例与母亲的亲缘关系不符,12例21三体,6例18三体,1例13三体。除此之外,还有10例性染色体异常和1例21三体嵌合。与CMA结果比较,QF-PCR检测结果均符合试剂盒的检测范围。值得一提的是,QF-PCR检测还额外的发现了5例母亲的性染色体异常,同时若在试剂盒检测范围内发现了三体还可以结合亲本的STR分型结果分析额外染色体的亲本来源并且推测异常染色体减数分裂不分离发生时期。结论基于STR位点的QF-PCR技术是一种快速检测方法,不仅适用于非整倍体倍型的检测,还可用于母源细胞污染检测、亲缘溯源检测以及染色体嵌合体的检测,同时还可以检测染色体三体的亲本来源。QF-PCR技术在产前诊断中具有广泛的应用前景,可以为医生和家庭提供更准确、更可靠的诊断结果。 展开更多

关键词 qf-pcr STR位点 产前诊断 母源污染 三体

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EB病毒感染用两种检测方法结果分析 被引量：4

11

作者 赵凯丽 周贺 +2 位作者 王芳 林牧 龚亚东 《中国社区医师》 2016年第30期127-128,共2页

目的:探讨ELISA法和QF-PCR法在诊断儿童EB病毒感染中的临床意义。方法:采用ELISA法和QF-PCR法检测150例疑似EBV感染患儿EBV-IgM抗体与EBV-DNA,并对检测数据进行统计学分析。结果:150例受检感染患儿中,ELISA法检测EBV-IgM抗体检出阳性50... 目的:探讨ELISA法和QF-PCR法在诊断儿童EB病毒感染中的临床意义。方法:采用ELISA法和QF-PCR法检测150例疑似EBV感染患儿EBV-IgM抗体与EBV-DNA,并对检测数据进行统计学分析。结果:150例受检感染患儿中,ELISA法检测EBV-IgM抗体检出阳性50例(33.33%),QF-PCR法检测咽拭子样本EBV-DNA阳性78例(52.00%),QF-PCR法检测全血样本EBV-DNA阳性69例(46.00%),两组数据间比较,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。≤7d血清EBV-IgM与QF-PCR全血标本检测阳性结果比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血清学检查和QF-PCR法检测EB病毒符合率是一致的,且FQ-PCR灵敏度更高,联合检测更有意义。 展开更多

关键词 EB病毒感染 ELISA qf-pcr

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FISH和QF-PCR在胎儿染色体疾病的快速产前诊断中的应用研究 被引量：4

12

作者 刘翠翠 俞冬熠 王修海 《中国优生与遗传杂志》 2013年第5期40-42,共3页

目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和荧光定量PCR(quantitative fluorescentpolymerase chain reaction,QF-PCR)在染色体异常快速产前诊断中的临床应用价值。方法已确诊的羊水培养染色体核型分析样本22例... 目的探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和荧光定量PCR(quantitative fluorescentpolymerase chain reaction,QF-PCR)在染色体异常快速产前诊断中的临床应用价值。方法已确诊的羊水培养染色体核型分析样本22例,其中包括21三体、18三体、13三体、47,XXY、45,X各2例,47,XXX 1例,嵌合体45,X[16]/46,XY[84]1例,正常男性和女性胎儿标本各5例。取其羊水或脐血,针对21、18、13、X、Y染色体,同时进行FISH和QF-PCR检测,并与染色体核型分析结果比较。结果与核型分析结果相比:除嵌合体外FISH和QF-PCR结果符合率为100%;FISH嵌合体结果为45,X[23]/46,XY[77];QF-PCR荧光峰图AMXY位点X、Y峰面积比为1.66,其余3个STR位点为单峰。结论两种方法均可以应用于常见染色体13、18、21、X和Y非整倍体的快速产前诊断。 展开更多

关键词 染色体 FISH qf-pcr 产前诊断

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染色体异常疾病产前分子诊断方法的研究 被引量：3

13

作者 山丹 孙敏 +1 位作者 张为远 李坚 《中国优生与遗传杂志》 2007年第9期34-36,22,共4页

目的应用基因组学的相关技术QF-PCR,进行染色体异常疾病的产前诊断。方法取孕妇羊水5m l提取胎儿基因组DNA,利用染色体上特异的一些短的串联重复序列（STR）作为检测位点,挑取几个杂合度和特异性高的位点设计引物并标记上荧光,通过PCR... 目的应用基因组学的相关技术QF-PCR,进行染色体异常疾病的产前诊断。方法取孕妇羊水5m l提取胎儿基因组DNA,利用染色体上特异的一些短的串联重复序列（STR）作为检测位点,挑取几个杂合度和特异性高的位点设计引物并标记上荧光,通过PCR扩增后将PCR产物在测序仪上进行检测,然后通过分析这些位点的拷贝数来判断检测样品的染色体数目是否正常。结果21三体胎儿PCR产物呈现现的峰图与正常胎儿的有所不同。结论应用QF-PCR方法产前诊断DS等染色体数目异常的优点在于：①对于染色体非整倍体的敏感性、准确率高,几乎无假阳性和假阴性。②取材少,0.5～3m l羊水即可以用于诊断。③操作简单、方便,结果分析实现自动化,省时省力,24～48h就可以得出结果,适于大规模产前诊断。 展开更多

关键词 染色体 基因组 qf-pcr STR

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应用STR-荧光定量PCR行产前唐氏综合征诊断的初步研究 被引量：3

14

作者 张静 霍满鹏 +2 位作者 慕明涛 刘俊俊 赵君梅 《中国优生与遗传杂志》 2013年第12期39-40,11,共3页

目的建立快速高效的产前诊断唐氏综合征的方法。方法选取21号染色体上唐氏综合征关键区域内的4个串联重复序列(STR)(D21S1413,D21S1414,D21S1446,D21S1437)作为遗传标记,采用荧光定量PCR扩增技术(QFPCR)及片段分析技术来检测178例羊水标... 目的建立快速高效的产前诊断唐氏综合征的方法。方法选取21号染色体上唐氏综合征关键区域内的4个串联重复序列(STR)(D21S1413,D21S1414,D21S1446,D21S1437)作为遗传标记,采用荧光定量PCR扩增技术(QFPCR)及片段分析技术来检测178例羊水标本,并与羊水标本的染色体核型分析结果相比对,评价QF-PCR方法的特异性和灵敏度。结果所有178例羊水标本中经核型分析证实有19例为21三体,另有2例为性染色体数目异常,19例唐氏综合征样本均可由QF-PCR法扩增检出。19例唐氏综合症样本,采用4对STR引物同时检测,阳性诊断率达100%。结论基于STR的QF-PCR技术具有简单、快速及准确等优点,对唐氏综合征大规模的产前基因诊断具有很好的临床价值。 展开更多

关键词 STR qf—pcr 唐氏综合征 产前诊断

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QF-PCR快速产前诊断染色体非整倍体应用研究 被引量：4

15

作者 梁丽 廖灿 《中国优生与遗传杂志》 2011年第11期5-7,共3页

本文归纳了QF-PCR在产前快速诊断染色体非整倍体方面应用的准确性、可行性;指出了此方法在产前诊断中应用的优越性及局限性;讨论了此方法是否能够取代传统的核型分析;在此基础上,提出了QF-PCR在产前诊断方面的应用策略,并对其在我国的... 本文归纳了QF-PCR在产前快速诊断染色体非整倍体方面应用的准确性、可行性;指出了此方法在产前诊断中应用的优越性及局限性;讨论了此方法是否能够取代传统的核型分析;在此基础上,提出了QF-PCR在产前诊断方面的应用策略,并对其在我国的应用前景进行了展望。 展开更多

关键词 qf—pcr STR 产前诊断 非整倍体

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QF-PCR检测性染色体不同的同卵双胎一例分析 被引量：2

16

作者 汤雪薇 李发涛 +4 位作者 李焱 陆琰 杨昕 易翠兴 廖灿 《中国优生与遗传杂志》 2015年第5期27-28,共2页

目的探讨同卵双胎染色体异常产前检测的最适样本类型及同卵双胎的发生机制。方法对1例因唐氏筛查高风险的双胎妊娠孕妇行羊膜腔穿刺取羊水样本,用定量荧光PCR(quantitative fluorescent PCR,QF-PCR)检测常见染色体非整倍体,核型分析方... 目的探讨同卵双胎染色体异常产前检测的最适样本类型及同卵双胎的发生机制。方法对1例因唐氏筛查高风险的双胎妊娠孕妇行羊膜腔穿刺取羊水样本,用定量荧光PCR(quantitative fluorescent PCR,QF-PCR)检测常见染色体非整倍体,核型分析方法检测染色体病。结果 QF-PCR提示双胎为同卵双胎,胎儿A性染色体为:XY,胎儿B性染色体为:XO;染色体核型分析结果显示胎儿A为:46,XY,胎儿B为:45,XO。两种检测方法均未检测到任何一胎羊水样本有:46,XY/45,XO嵌合现象。结论在产前诊断中,羊水样本比绒毛及脐血样本更适合用于同卵双胎胎儿的染色体检测。胚胎发育早期部分细胞染色体分离错误导致胚胎出现两个染色体不同的细胞系可能是同卵双胎发生的重要原因。 展开更多

关键词 同卵双胎 性染色体异常 产前诊断 qf-pcr

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新型冠状病毒4种荧光定量PCR检测试剂的检测性能分析 被引量：3

17

作者 宋月娟 杨淑娟 +6 位作者 马腾 孙纬华 李兵 曹晶晶 郭晓宇 宋薇 哈小琴 《西南国防医药》 CAS 2020年第12期1073-1076,共4页

目的对临床常用4种新型冠状病毒核酸检测试剂进行性能验证,评价其临床应用价值。方法在AB7500荧光定量PCR仪上对分子实验室所用的4家厂商提供的新型冠状病毒核酸检测试剂(标为A、B、C、D)进行性能验证,样品来源于上海市临床检验中心提... 目的对临床常用4种新型冠状病毒核酸检测试剂进行性能验证,评价其临床应用价值。方法在AB7500荧光定量PCR仪上对分子实验室所用的4家厂商提供的新型冠状病毒核酸检测试剂(标为A、B、C、D)进行性能验证,样品来源于上海市临床检验中心提供的新型冠状病毒核酸检测能力验证样品和广州邦德胜生物科技新型冠状病毒室内质控品,验证其正确度、批内重复性、检测灵敏度等。结果 4种新型冠状病毒核酸检测试剂正确度都为100%,具有较高批内重复性和检测灵敏度;Ct值统计分析发现C试剂对于2012号能力验证样品的检测结果 Ct值接近临界范围,平行检测并计算其Ct值的CV%,结果没有显著性差异。结论应用于新型冠状病毒核酸检测的4种检测试剂,对于ORF1ab和N基因的检测结果具有较高正确度、批内重复性、检测灵敏度, C试剂对于弱阳性标本的具有较低的检测敏感度。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 检测试剂 性能分析 荧光定量pcr

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TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测土拉弗朗西斯菌 被引量：3

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作者 赵素慧 王春晖 +6 位作者 周莹 韦耀 韩桂圆 钮红岺 赵卫 张其威 万成松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期602-606,共5页

目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制... 目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制作定量标准曲线,并以合成fopA基因为模板,PF、PR为引物,研究其灵敏度、特异性和准确性。结果构建了含fopA基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在103～107拷贝数之间有较好的线性关系。灵敏度试验表明,该方法可检测到30.6个拷贝数的重组质粒,比普通PCR灵敏度高;特异性试验表明,能选择性检测土拉弗朗西斯菌,而与其他病原菌无交叉反应,与普通菌落PCR结果一致;重复性试验表明,拷贝数为3.06×106样品5次平行试验,标准差为0.201,变异系数为0.88%。结论本研究建立了TaqMan探针QF-PCR快速检测技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可用于快速、实时、定量检测土拉弗朗西斯菌,为快速检测生物战剂级微生物建立了一种人工合成特异基因TaqMan探针实时荧光定量PCR新方法。 展开更多

关键词 土拉弗朗西斯菌 TAQMAN探针 fopA基因 荧光定量pcr

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荧光定量PCR检测脊肌萎缩症家系中的SMN1基因 被引量：3

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作者 任晨春 郭东花 +8 位作者 梁玥宏 王文靖 田秀英 崔洪艳 陈成彬 王玲红 杨微微 张海霞 李晓旭 《职业与健康》 CAS 2019年第13期1765-1769,共5页

目的 SMN1基因的第7、8外显子(E7、E8)与脊肌萎缩症(SMA)的发生密切相关,探讨荧光定量PCR(QF-PCR)方法应用于检测SMN1基因E7、E8的可行性,建立一种准确、简便、快速、高通量、费用低廉并且适合在国内广泛开展的诊断方法。方法 2014年12... 目的 SMN1基因的第7、8外显子(E7、E8)与脊肌萎缩症(SMA)的发生密切相关,探讨荧光定量PCR(QF-PCR)方法应用于检测SMN1基因E7、E8的可行性,建立一种准确、简便、快速、高通量、费用低廉并且适合在国内广泛开展的诊断方法。方法 2014年12月—2017年10月,对5个有SMA确诊病例的家系用QF-PCR法检测其成员SMN1基因E7、E8缺失情况,同时采用多重连接探针扩增法(MLPA)法进行验证,确认QF-PCR技术检测该基因改变的准确度和灵敏性。结果临床确诊为SMA的5例患儿经QF-PCR方法检测后,SMN1的E7、E8均表现为纯合缺失的有4例,余1例表现为SMN1 E7纯合缺失,E8杂合缺失。对5例患儿父母进行检测,SMN1 E7、E8纯合缺失的4例患儿父母均为相同基因型,即存在SMN1E7、E8均是杂合缺失。对表现为SMN1 E7纯合缺失、E8杂合缺失患儿的父母检测后发现,患儿母亲的基因型同时存在SMN1 E7、E8的杂合缺失,患儿父亲仅表现为SMN1基因E7的杂合缺失,E8无缺失改变,结果与MLPA法检测相一致。结论 QF-PCR法作为一种检测方法,可以用于SMA患者的初步诊断并在大规模人群中开展携带者筛查。QF-PCR法较其他检测方法,具有简单快速、成本低廉、检测结果准确可靠等优势。 展开更多

关键词 脊肌萎缩症 荧光定量聚合酶链式反应 SMN1基因

原文传递

QF-PCR技术中短串联重复序列杂合度分析及与染色体核型结果的比较研究

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作者 许晨霞 王德刚 +2 位作者 张艳芳 郑国兵 彭建明 《中国当代医药》 CAS 2022年第11期12-15,F0003,共5页

目的使用QF-PCR技术对产前样本进行快速诊断,分析多重短串联重复序列(STR)标记杂合度以及三体峰型,为QF-PCR试剂盒STR位点的设计提供研究基础。方法选取2020年9月至2021年7月在中山市博爱医院产前诊断中心进行介入性产前诊断的525例样... 目的使用QF-PCR技术对产前样本进行快速诊断,分析多重短串联重复序列(STR)标记杂合度以及三体峰型,为QF-PCR试剂盒STR位点的设计提供研究基础。方法选取2020年9月至2021年7月在中山市博爱医院产前诊断中心进行介入性产前诊断的525例样本作为研究对象,运用QF-PCR技术对13、18、21及性染色体非整倍体进行快速诊断,使用GeneMapper 5.0软件查看并记录STR分型结果图。结果13、18、21及X染色体的STR标记中杂合度最高分别为D13S742、D18S386、D21S1414、DXS8377;杂合度最低的分别为D13S628、D18S391、D21S1433、DXS981。QF-PCR技术发现异常样本共计31例(5.9%),其中三体型27例(21三体19例,18三体6例,13三体2例),X单体1例,染色体其他异常3例;检测到18和21三体中均有4例STR标记为2∶1或者1∶2的双峰;STR位点均为单峰2例,STR位点仅一个双峰23例。结论与传统染色体核型分析比较,QF-PCR技术能更快速诊断常见染色体非整倍体的数目异常,具有简便快速、特异性高的优点。在设计QF-PCR试剂盒时需要选择D13S742、D18S386、D21S1414等杂合度高的STR位点。 展开更多

关键词 qf-pcr 短串联重复序列分型 染色体核型 杂合度 快速产前诊断

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