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杜梨菌根苗几种培育方法的试验 被引量：19
1
作者 刘润进 高秋莲 +2 位作者 生兆江 韩殿一 姜德峰 《莱阳农学院学报》 1990年第4期298-300,共3页
以萌芽期和4叶期杜梨实生苗接种VA菌根,用不同方法培育梨树菌根苗。结果表明,营养钵砂培较简便、快速,而且成本低;黑塑管半水培和苗床土培成本高和优质菌根苗产量少,且二者培育周期长。苗木菌根化后能显著促进植株生长(如株高、叶面积等... 以萌芽期和4叶期杜梨实生苗接种VA菌根,用不同方法培育梨树菌根苗。结果表明,营养钵砂培较简便、快速,而且成本低;黑塑管半水培和苗床土培成本高和优质菌根苗产量少,且二者培育周期长。苗木菌根化后能显著促进植株生长(如株高、叶面积等)并可在大田干旱条件下提高苗木的移栽成活率。 展开更多
关键词 杜梨 VA菌根 育苗法
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中国北方野生杜梨分布现状及其形态多样性评价 被引量：22
2
作者 宗宇 孙萍 +1 位作者 牛庆丰 滕元文 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期918-923,I0002,共7页
【目的】为了解中国北方野生杜梨的分布现状并对其进行形态多样性评价，【方法】通过实地调查取样，测定了叶片和果实系列形态指标，评价了野生杜梨居群的龄级结构。【结果】野生杜梨在中国北方主要分布在（32．94～39．74）。N，（107... 【目的】为了解中国北方野生杜梨的分布现状并对其进行形态多样性评价，【方法】通过实地调查取样，测定了叶片和果实系列形态指标，评价了野生杜梨居群的龄级结构。【结果】野生杜梨在中国北方主要分布在（32．94～39．74）。N，（107．54～119．16）。E，海拔47～1545m内，有4个集中分布地域，分别为子午岭、伏牛山、太行山和蒙山。不同地域间野生杜梨的叶片、果实和居群龄级结构差异较大，叶片形态多样性以河南省境内野生杜梨最高，同时其单果质量显著大于其他地域．而甘肃华池和宁县野生杜梨果实的单果质量和横纵径最小。野生杜梨居群主要由胸径为2．5～22．5cm的幼树和立木组成。【结论】综合分析，伏牛山区的野生杜梨居群较之其他居群形态多样性丰富，龄级结构更加多样化；我们建议将资源富集和多样性丰富的华池、舞钢和泗水等地的野生杜梨进行重点保护。 展开更多
关键词 野生杜梨 分布现状 形态多样性
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杜梨叶绿体基因组分析 被引量：18
3
作者 李泳潭 张军 +3 位作者 黄亚丽 范建敏 张益文 左力辉 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1021-1032,共12页
利用高通量测序平台对杜梨(Pyrus betulaefolia)进行测序,并对其叶绿体全基因组序列的结构特征进行分析。结果表明,杜梨叶绿体基因组与大多数高等植物一样,具有典型的环状双链四分体结构。其叶绿体基因组大小为160 058 bp,共检测到61个... 利用高通量测序平台对杜梨(Pyrus betulaefolia)进行测序,并对其叶绿体全基因组序列的结构特征进行分析。结果表明,杜梨叶绿体基因组与大多数高等植物一样,具有典型的环状双链四分体结构。其叶绿体基因组大小为160 058 bp,共检测到61个SSR位点(58个单核苷酸重复和3个二核苷酸重复)和56个RNA编辑位点,这些RNA编辑位点均引起了氨基酸的变化。与砂梨(Pyruspyrifolia)、川梨(Pyrus pashia)和桃叶梨(Pyrus spinosa)的叶绿体基因组比较,其基因种类和数量都比较保守,表明了梨属植物进化的缓慢性。在4个梨属植物中共检测到351个SNP和217个InDel。 展开更多
关键词 杜梨 叶绿体基因组 CP-SSR
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盐胁迫条件下杜梨叶片差异表达基因qRT-PCR内参基因筛选 被引量：9
4
作者 张秋悦 刘昌来 +2 位作者 于晓晶 杨甲定 封超年 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1557-1570,共14页
为了准确评价盐胁迫下杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge.)目标基因表达量,筛选q RT-PCR适用内参基因。利用杜梨的全基因组注释信息和转录组测序数据,选择Actin2(Chr15.g01351)、EF1α-1(Chr3.g19898)、EF1α-2(Chr4.g38173)、EF2(Chr5.g06... 为了准确评价盐胁迫下杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge.)目标基因表达量,筛选q RT-PCR适用内参基因。利用杜梨的全基因组注释信息和转录组测序数据,选择Actin2(Chr15.g01351)、EF1α-1(Chr3.g19898)、EF1α-2(Chr4.g38173)、EF2(Chr5.g06899)、GAPDH-1(Chr16.g30426)、GAPDH-2(Chr13.g23532)、TUBB(Chr5.g06472)、UBQ(Chr4.g40121)等8个候选基因,设计Actin2、EF1α-1、EF1α-2A、EF1α-2B、EF2、GAPDH-1、GAPDH-2、TUBB-A、TUBB-B、UBQE等10对qRT-PCR引物。首先对10对引物的扩增效率进行了测定,再以200 mmol·L^(-1)的NaCl溶液对两个杜梨家系(盐城和连云港)幼苗进行0、24、48、72 h盐胁迫处理。提取叶片的总RNA,反转录合成cDNA,使用10对引物进行q RT-PCR扩增,根据扩增产物使用delta Ct、BestKeeper、geNorm和NormFinder等4种评价内参基因稳定性的方法,对10对引物扩增产物的稳定性进行分析,并使用RefFinder软件对4种评价方法进行综合分析,以确定最稳定内参基因及其引物。利用筛选出的2对最优内参基因引物对(TUBB-A和GAPDH-1)对1个可能参与杜梨盐胁迫响应的HKT基因(Chr16.g29024)的表达情况进行分析,8个候选内参基因的FPKM值(Fragments PerKilobase Million)都大于30,不同盐处理时间下的FPKM变异系数为0.087~0.260;10对荧光定量PCR引物的扩增效率在91.82%~112.99%之间,其中引物对TUBB-A和GAPDH-1的扩增效率最接近于100%;稳定性分析显示10对引物扩增产物的稳定性排序为GΑPDH-1、TUBB-Α、EF1α-1、TUBB-B、EF1α-2Α、EF2、UBQE、GΑPDH-2、Αctin2、EF1α-2B;不同引物对(TUBB-Α、TUBB-B和EF1α-2Α、EF1α-2B)对同一基因的扩增产物的稳定性存在明显差异;利用TUBB-A和GAPDH-1分析HKT基因的表达趋势没有差别。说明基因GΑPDH和TUBB适于作为杜梨盐胁迫下进行荧光定量PCR的内参基因,对应的GAPDH-1、TUBB-A引物对的扩增效果最好。 展开更多
关键词 杜梨 内参基因 实时荧光定量PCR分析 基因表达稳定性
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杜梨PbNHX1基因的克隆、表达分析及功能验证 被引量：9
5
作者 刘威 李慧 +2 位作者 蔺经 杨青松 常有宏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期137-146,共10页
【目的】克隆1个杜梨Na^+/H^+逆向转运蛋白基因PbNHX1,并对其序列特征、表达特点及功能进行研究。【方法】采用RT-PCR和PCR克隆PbNHX1的c DNA和DNA序列,利用生物信息学方法进行序列分析,定量PCR检测其在非生物胁迫下转录水平变化,酵母... 【目的】克隆1个杜梨Na^+/H^+逆向转运蛋白基因PbNHX1,并对其序列特征、表达特点及功能进行研究。【方法】采用RT-PCR和PCR克隆PbNHX1的c DNA和DNA序列,利用生物信息学方法进行序列分析,定量PCR检测其在非生物胁迫下转录水平变化,酵母互补试验检测PbNHX1基因的离子转运能力。【结果】杜梨PbNHX1基因c DNA编码区长1 704 bp,对应基因组DNA序列长3 594 bp,由13个外显子和12个内含子组成,编码蛋白含567个氨基酸。系统进化树显示,PbNHX1位于液泡膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白分支上,与杨树液泡膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白Pt NHX1.3基因亲缘关系较近。正常生长条件下,PbNHX1在杜梨叶片中表达量高于根。施加200 mmol·L-1Na Cl、10%(φ)PEG6000或100μmol·L-1ABA后,PbNHX1在叶片中的转录水平持续上升;其在根中的表达量先升后降,表达高峰依次出现在处理后6、3和6 h。PbNHX1的转入可恢复Na Cl、KCl和潮霉素B对nhx1缺失酵母菌株AXT3的生长抑制,转基因酵母细胞中Na^+和K^+含量显著增加。【结论】PbNHX1具有植物NHXs基因家族的固有特征,对盐碱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,转入该基因能够提高酵母nhx1缺失突变体AXT3对盐胁迫的耐受能力,部分恢复其对阳离子的转运功能,从而促进Na^+、K^+积累。 展开更多
关键词 杜梨 PbNHX1基因 序列特征 表达特点 酵母互补
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核黄素对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响 被引量：8
6
作者 韩金龙 李慧 +2 位作者 蔺经 杨青松 常有宏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期893-898,共6页
为探讨外源核黄素对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响,以梨砧木杜梨幼苗为供试材料,在水培条件下,研究了外源施加不同浓度核黄素对200 mmol/L Na Cl胁迫下其叶片抗氧化酶活性、活性氧产生、膜质过氧化和抗氧化物质含量的影响。结果显示... 为探讨外源核黄素对盐胁迫下杜梨叶片抗氧化系统的影响,以梨砧木杜梨幼苗为供试材料,在水培条件下,研究了外源施加不同浓度核黄素对200 mmol/L Na Cl胁迫下其叶片抗氧化酶活性、活性氧产生、膜质过氧化和抗氧化物质含量的影响。结果显示:Na Cl胁迫3 d后,杜梨叶片中超氧化物歧化酶(SOD)活性减弱,过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性增强,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(As A)合成下降,活性氧(O2·-、H2O2)和丙二醛(MDA)大量积累。施加外源核黄素能增强Na Cl胁迫下杜梨叶片中SOD、POD、CAT、GR、GSH-Px和APX的活性,提高GSH和As A的含量,减少O2·-和H2O2的产生,降低脂质过氧化程度,有效缓解盐胁迫对杜梨叶片的过氧化伤害,其中以10μmol/L浓度的核黄素处理效果最为显著。 展开更多
关键词 杜梨 核黄素 盐胁迫 过氧化作用 抗氧化酶
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杜梨嫩枝扦插影响因素探究 被引量：2
7
作者 王艺衡 李金斗 +6 位作者 李涛 庄梦弟 王鹏飞 张海霞 马辉 张玉星 许建锋 《中国果树》 北大核心 2023年第3期29-34,共6页
为探究杜梨嫩枝扦插的影响因素,筛选出最佳扦插方法,提高其扦插成活率,以杜梨嫩枝为试材,采用单因素试验设计筛选最优插条来源、新梢部段、插条长度和扦插基质,正交试验设计筛选最佳扦插生长调节剂配比。结果表明:连栋温室中采集的杜梨... 为探究杜梨嫩枝扦插的影响因素,筛选出最佳扦插方法,提高其扦插成活率,以杜梨嫩枝为试材,采用单因素试验设计筛选最优插条来源、新梢部段、插条长度和扦插基质,正交试验设计筛选最佳扦插生长调节剂配比。结果表明:连栋温室中采集的杜梨新梢中部段、长10~15 cm的插条更适合杜梨嫩枝扦插;IBA对扦插生根的影响大于NAA和IAA,IBA主要影响生根率和平均根数,NAA和IAA主要影响平均根长;基质湿度和基质配比是影响扦插成活的2个重要因素,其中基质湿度对嫩枝扦插的影响大于基质配比。综上,以长10~15 cm的温室杜梨新梢中部段为插条,在100 mg/L IBA+40 mg/L NAA+10 mg/L IAA中浸泡1 h,再插入河沙∶珍珠岩∶草炭土=1∶2∶2的半干湿基质中,扦插生根率可达70%。 展开更多
关键词 杜梨 嫩枝扦插 生根率
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缺铁胁迫对杜梨幼苗生理及铁吸收和转运相关基因表达的影响 被引量：6
8
作者 谢昶琰 金昕 +4 位作者 李岩 石晓倩 刘慧冉 徐阳春 董彩霞 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期465-473,共9页
[目的]本文旨在探讨缺铁胁迫下杜梨幼苗铁素吸收与转运相关生理生化特性和相关基因时空表达的差异,为解决梨树生产中极易产生的缺铁黄化问题提供理论依据。[方法]以杜梨幼苗为试材,采用全根及分根水培法,设置正常供铁(40μmol·L^(-... [目的]本文旨在探讨缺铁胁迫下杜梨幼苗铁素吸收与转运相关生理生化特性和相关基因时空表达的差异,为解决梨树生产中极易产生的缺铁黄化问题提供理论依据。[方法]以杜梨幼苗为试材,采用全根及分根水培法,设置正常供铁(40μmol·L^(-1) FeNa-EDTA,简写为+Fe)及缺铁(0μmol·L^(-1) FeNa-EDTA,简写为-Fe)、分根供铁(1/2根供40μmol·L^(-1) FeNa-EDTA、1/2根供0μmol·L^(-1) FeNa-EDTA,简写为+Fe SR和-Fe SR)处理,研究铁素对杜梨幼苗的根系形态、质外体铁、有机酸含量等及相关基因表达的影响。[结果]处理12 d时,-Fe、+Fe SR和-Fe SR处理的总根长分别是相应处理0 d的1.76、3.02和3.20倍;不同铁处理根际pH值随时间的上升趋势均比+Fe处理缓慢;Fe^(3+)还原酶活性随不同铁处理时间先增强后下降;缺铁处理下根和叶中有机酸含量始终高于正常供铁处理。缺铁处理下铁吸收和转运相关基因表达显著上调,并随时间呈不同的变化规律,其中根系IRT1、FRO2、HA7基因2 d即显著上调表达,NRAMP1在中、后期(6 d)显著上调表达;CS1、CS2和NAS1在根系和叶片均表达,而NAS2和FRD3仅在根系表达;YSL3仅在叶中表达,且在8 d时显著上调表达。[结论]缺铁胁迫显著改变杜梨的根系形态,根系铁吸收相关的基因表达加强,根系还原能力提高;同时,调控有机酸类物质合成和转运的基因也上调表达,有利于促进铁螯合物由根系向地上部转运。 展开更多
关键词 杜梨 缺铁胁迫 根系 分根 基因表达
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接种土著和外源AM真菌对杜梨抗旱性的影响及其适应机制
9
作者 栗晗 江尚焘 +7 位作者 彭海英 李培根 顾长宜 张金莲 陈廷速 徐阳春 沈其荣 董彩霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期159-172,共14页
【目的】丛枝菌根(AM)真菌可改善植物生长,提高抗环境胁迫能力。筛选对梨苗具有抵御干旱胁迫的AM真菌,为梨菌根化育苗提供理论依据与技术途径。【方法】采用盆栽试验及高通量测序技术,对杜梨苗分别接种梨土著AM真菌层状近明球囊霉(Claro... 【目的】丛枝菌根(AM)真菌可改善植物生长,提高抗环境胁迫能力。筛选对梨苗具有抵御干旱胁迫的AM真菌,为梨菌根化育苗提供理论依据与技术途径。【方法】采用盆栽试验及高通量测序技术,对杜梨苗分别接种梨土著AM真菌层状近明球囊霉(Claroideoglomus lamellosum,Cl)和外源菌株摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae,Fm)、根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices,Ri)及蜜色无梗囊霉(Acaulospora mellea,Am),探究干旱胁迫下单接种土著、外源菌株及混合接种(Mix)处理对杜梨幼苗生长的影响,分析干旱0、3和6周Mix处理下根系及根际土AM真菌群落变化。【结果】正常水分和干旱处理下,单接种梨土著菌株Cl、外源菌株Ri及Mix处理均显著提高株高、茎粗、叶面积、叶片相对含水量,干重增加35.26%—52.20%;地上部磷、钾、钙、镁等元素吸收增强,尤其增加磷的吸收,菌根磷吸收效应最高达1.0以上,而单接种外源菌株Am效果次之,正常供水条件下Fm抑制杜梨幼苗生长。回归性分析表明,菌根生长效应和元素吸收随侵染强度的增加而增加。干旱胁迫下,接种AM真菌显著降低杜梨幼苗叶片丙二醛含量,抗氧化酶活性和脯氨酸含量均有不同程度提高。测序结果显示,与正常水分相比,干旱胁迫下杜梨幼苗根系及根际土AM真菌群落结构发生显著改变,其中外源菌株Ri均占主导,Cl、Am丰度次之,Fm丰度最低,且随干旱胁迫程度增加,根内Ri的丰度显著上升。【结论】接种不同AM真菌对杜梨幼苗具有不同的生长效应,其中梨土著菌株Cl和外源菌株Ri表现出较强的促生和抗旱能力。AM真菌群落中Ri丰度的提高是杜梨幼苗适应干旱胁迫的重要途径。 展开更多
关键词 干旱胁迫 杜梨 丛枝菌根真菌 促生 群落结构
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起苗时间对杜梨生长的影响 被引量：6
10
作者 李银芳 黄子蔚 +1 位作者 王东 热普开提 《干旱区研究》 CSCD 2003年第4期300-302,共3页
对定植的杜梨 (PyrusbetulaefoliaBge .)苗进行了假植苗和随栽随起苗的成活率、新梢生长量、叶片生长状况和蒸腾速率、气孔阻抗、叶温、叶温与气温差日变化的测定。结果表明 ,随栽随起苗的成活率和生长状况与各项生理指标均好于假植苗... 对定植的杜梨 (PyrusbetulaefoliaBge .)苗进行了假植苗和随栽随起苗的成活率、新梢生长量、叶片生长状况和蒸腾速率、气孔阻抗、叶温、叶温与气温差日变化的测定。结果表明 ,随栽随起苗的成活率和生长状况与各项生理指标均好于假植苗。揭示了影响树木生长的水分生理状况和过程。提出了生产中要提倡采用随栽随起苗 ,或应尽量接近随栽随起的时间。 展开更多
关键词 杜梨 香梨 砧木 假植苗 起苗时间 生长 成活率 生长量 蒸腾速率
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发根农杆菌介导的杜梨毛状根遗传转化方法 被引量：3
11
作者 郝紫微 戴雨沁 +1 位作者 张绍铃 王鹏 《湖北农业科学》 2021年第1期151-154,159,共5页
以杜梨(Pyrus betulaefolia)为研究材料,利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)开发了一种简单、快速、高效的杜梨毛状根遗传转化方法。将含有mCherry基因的表达载体pROK2导入发根农杆菌K599,侵染杜梨幼苗,通过注射烟草叶片、常规PC... 以杜梨(Pyrus betulaefolia)为研究材料,利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)开发了一种简单、快速、高效的杜梨毛状根遗传转化方法。将含有mCherry基因的表达载体pROK2导入发根农杆菌K599,侵染杜梨幼苗,通过注射烟草叶片、常规PCR及体视显微镜观察,检测转化效率。结果表明,利用侵染烟草叶片瞬时表达的方法,证明mCherry可以正常表达;发根农杆菌侵染40株杜梨后,再生毛状根植株为34株,再生率达85%,通过PCR鉴定,转基因毛状根长势良好且鉴定为阳性的植株有6株,阳性率达到17.6%;经体视显微镜观察,可以在转基因根中直接观察到mCherry的红色荧光。通过发根农杆菌直接侵染杜梨苗的方法,成功实现了外源基因在杜梨新生不定根中的表达,操作简便,转化率高,周期较短,为梨树基因功能研究和遗传改良提供了新型工具,为提高梨树遗传转化成功率奠定了基础。 展开更多
关键词 杜梨(pyrus betulaefolia) 发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes) 毛状根 遗传转化
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杜梨NHX基因家族的鉴定及其在非生物胁迫下的表达分析 被引量：5
12
作者 王影 李慧 +3 位作者 蔺经 杨青松 张绍铃 常有宏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期825-836,共12页
[目的]NHX基因亚家族为钠氢逆转运体,具有Na^+/H^+ exchange(PF00999)蛋白结构域,广泛存在于多种物种中,主要参与植物响应盐胁迫过程离子平衡的重建。分析鉴定杜梨中NHX基因及其耐盐机制有助于实际生产中更为有效地利用这一砧木资源。[... [目的]NHX基因亚家族为钠氢逆转运体,具有Na^+/H^+ exchange(PF00999)蛋白结构域,广泛存在于多种物种中,主要参与植物响应盐胁迫过程离子平衡的重建。分析鉴定杜梨中NHX基因及其耐盐机制有助于实际生产中更为有效地利用这一砧木资源。[方法]结合已公布的梨基因组数据以及拟南芥相关数据,通过生物信息学手段,鉴定杜梨NHX基因家族成员;通过MEGA7.0软件进行序列比对以及进化分析;通过在线工具Pfam、SMART以及GSDS进行基因结构分析;通过定量PCR技术分析非生物胁迫下基因在不同组织中的表达特征;应用火焰石墨炉原子吸收光谱仪测定NaCl胁迫下杜梨不同组织中Na^+与K^+含量。[结果]成功鉴定出16个候选基因,其中有4个基因属于NHX亚家族,4个基因属于CHX亚家族,8个基因属于KEA亚家族。预测的候选基因均含有Na^+/H^+ exchange功能域;NaCl胁迫下,预测的16个基因在叶片中的表达差异大,但在8h以后均为负调控;在茎中,PEG6000处理下,PbNHX1的表达量显著增高,且高于同一时期NaCl胁迫下的表达水平,仅在48h时低于同一时期NaCl胁迫下的表达水平;在根中,基因PbN-HX12、PbNHX13、PbNHX14和PbNHX15在NaCl胁迫和PEG6000处理下在任何时间段均为负调控。[结论]在盐胁迫过程中,与拟南芥NHX基因进化关系最近的PbNHX1和PbNHX11呈现出负调控模式,与拟南芥KEA基因进化关系相近的PbNHX10和PbNHX7可能参与K^+的运输。 展开更多
关键词 杜梨 NHX基因家族 非生物胁迫 实时定量PCR
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杜梨两个种源无性系抗寒性选优 被引量：4
13
作者 孙彦珍 《山西林业科技》 2017年第4期19-21,共3页
笔者以树液流动期前的杜梨叶芽为试验材料,测定其相对电导率、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量3项生理指标,对各项指标测定值进行综合分析,综合评定各无性系的抗寒性。结果表明:不同种源杜梨的抗寒性有显著差异,同一种源不同无性系之间的... 笔者以树液流动期前的杜梨叶芽为试验材料,测定其相对电导率、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量3项生理指标,对各项指标测定值进行综合分析,综合评定各无性系的抗寒性。结果表明:不同种源杜梨的抗寒性有显著差异,同一种源不同无性系之间的抗寒性也存在较明显差异。泗交杜梨抗寒性整体优于历山杜梨,抗寒性最优良的品系是S1,S4,S9,L3,S10,抗寒性最差的品系是L9,L7,L8,L6. 展开更多
关键词 杜梨 电导率 可溶性蛋白 可溶性糖 抗寒性
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杜梨子叶离体再生体系的建立 被引量：4
14
作者 林静 李疆 +1 位作者 田嘉 孙瑶 《中国农学通报》 2015年第19期41-47,共7页
为梨树品种改良、遗传转化及功能验证奠定基础,以杜梨(Pyrus betulaefolia)子叶外植体为试验材料,研究了基本培养基、植物生长调节剂、暗培养时间、碳源、外植体等因素对其再生能力的影响,筛选出适合杜梨不定芽分化的培养及生根培养条件... 为梨树品种改良、遗传转化及功能验证奠定基础,以杜梨(Pyrus betulaefolia)子叶外植体为试验材料,研究了基本培养基、植物生长调节剂、暗培养时间、碳源、外植体等因素对其再生能力的影响,筛选出适合杜梨不定芽分化的培养及生根培养条件,建立杜梨子叶的再生体系。结果表明,子叶诱导不定芽生长最佳培养基为NN69+6-BA 5 mg/L+IBA 0.05 mg/L+蔗糖35 g/L,再生频率为100%;出芽后最佳继代培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,平均再生芽数4.84;诱导不定芽生根最佳培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L,生根率为80%。通过上述条件的优化,建立了杜梨子叶高效的再生体系。 展开更多
关键词 杜梨 子叶 不定芽 再生体系
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秋水仙素对杜梨四倍体的诱导及鉴定
15
作者 路斌 徐宁伟 +4 位作者 李娟娟 王琦 栗浩 于晓跃 路丙社 《河北科技师范学院学报》 CAS 2023年第4期37-42,共6页
为探明秋水仙素诱导杜梨四倍体的最佳处理组合,本次试验以杜梨萌动种子为材料,研究了不同质量分数秋水仙素处理对杜梨种子的诱变效应,对诱变植株进行了倍性鉴定。结果表明:经质量分数0.5%秋水仙素处理48 h的杜梨种子诱导效果最佳,诱导率... 为探明秋水仙素诱导杜梨四倍体的最佳处理组合,本次试验以杜梨萌动种子为材料,研究了不同质量分数秋水仙素处理对杜梨种子的诱变效应,对诱变植株进行了倍性鉴定。结果表明:经质量分数0.5%秋水仙素处理48 h的杜梨种子诱导效果最佳,诱导率为26.67%。四倍体诱变株染色体数4n=68条,是二倍体植株(2n=34)的2倍;流式细胞仪进一步检测表明,四倍体诱变株叶片细胞DNA数量是二倍体植株的2倍。杜梨四倍体呈现有植株矮化、节间缩短、叶片变大等表型特征,还表现出叶绿素质量分数提高、净光合速率增大等生理特性。 展开更多
关键词 秋水仙素 杜梨 四倍体 倍性鉴定
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全基因组DNA甲基化和转录组联合分析鉴定杜梨耐盐相关转录因子
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作者 李慧 张雨峰 +3 位作者 李晓刚 王中华 蔺经 常有宏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1377-1390,I0004-I0007,共18页
【目的】鉴定不同杜梨株系根中响应盐胁迫信号的相关转录因子,分析盐胁迫下基因序列DNA甲基化变化与基因表达改变之间的关系,探讨参与调控不同杜梨株系耐盐能力的转录因子成员。【方法】以杜梨耐盐株系和普通株系为试材,在苗期使用200 m... 【目的】鉴定不同杜梨株系根中响应盐胁迫信号的相关转录因子,分析盐胁迫下基因序列DNA甲基化变化与基因表达改变之间的关系,探讨参与调控不同杜梨株系耐盐能力的转录因子成员。【方法】以杜梨耐盐株系和普通株系为试材,在苗期使用200 mmol·L^(-1) NaCl对90日龄组培生根苗进行水培处理,以Hoagland营养液为对照。利用火焰石墨炉原子吸收光谱仪测定钠离子含量;利用全基因组DNA甲基化和转录组测序技术从表观遗传修饰和转录调控水平对盐胁迫下转录因子进行生物信息学分析;最后用McrBC-PCR和qPCR对差异转录因子进行验证。【结果】外源NaCl处理24 h后,杜梨植株中钠离子含量显著增加,其中耐盐株系的增加幅度比普通株系小,为普通株系钠含量的73.1%,但根中积累的钠是普通株系含量的1.1倍;杜梨根中检测到69类共2682个转录因子的表达,盐胁迫后243个转录因子在两个株系中都发生了差异表达,包括AP2/ERF(37个)、bHLH(19个)、bZIP(7个)、HD-Zip(10个)、MYB(30个)、NAC(18个)、WRKY(8个)和ZFP(23个)等家族成员;盐胁迫后,耐盐株系基因组中转录因子甲基化水平下降,而普通株系转录因子甲基化水平上升,其发生DNA差异甲基化区域主要在基因启动子位置,差异甲基化类型主要为mCHH,占mCG、mCHG、mCHH三种类型总和的93%以上。AP2/ERF、bHLH、DREB、GRAS、GT因子、HB Zip、MYB、NAC、Trihelix和Zinc finger ZFP家族的23个转录因子响应盐胁迫表达量上调而甲基化水平降低,可能参与调节钠在根中的吸收和积累。对部分候选基因的表达模式和启动子区域分别进行实时荧光定量(qPCR)和甲基化依赖型限制性内切酶PCR(McrBC-PCR),验证了生物信息学分析结果。【结论】盐胁迫后在两个杜梨株系根中均差异表达的转录因子数目为243个,其中8个转录因子(PbERF2、PbGT3、PbZAT10.1、PbSCL33、PbDREB1、PbZAT10.2、PbERF53、PbNAC72)DNA序 展开更多
关键词 杜梨 盐胁迫 转录因子 DNA甲基化 转录组
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继代培养次数对杜梨生根能力和叶形态及其激素水平的影响 被引量：3
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作者 罗嘉亮 李凡 +2 位作者 李俊豪 郝瑞杰 李六林 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期304-310,共7页
为了探索杜梨组培复幼变化规律,对10年生杜梨进行连续继代培养,统计不同继代次数杜梨丛生芽繁殖系数和生根率,观察记录叶片形态变化并测定内源激素含量。结果表明:(1)通过连续继代培养,杜梨丛生芽生根率由0提升到66.70%,繁殖系数由第1代... 为了探索杜梨组培复幼变化规律,对10年生杜梨进行连续继代培养,统计不同继代次数杜梨丛生芽繁殖系数和生根率,观察记录叶片形态变化并测定内源激素含量。结果表明:(1)通过连续继代培养,杜梨丛生芽生根率由0提升到66.70%,繁殖系数由第1代的2.13提升到第10代的4.20。(2)叶片在继代第3次时出现裂刻且随后裂刻程度逐代加深;在继代过程中,丛生芽叶面积和叶脉数显著降低,叶周长和叶形指数呈先下降后上升的变化趋势。(3)丛生芽叶片内源IAA含量在继代第6次时达到46.39 ng·g-1,且显著高于初代丛生芽;随着继代次数的增加,叶片内源ZR呈先上升后下降的变化趋势,内源GA3含量没有发生显著性变化,而内源ABA含量逐渐降低;叶片IAA/ABA和IAA/ZR的值随着继代次数的增加而增加。(4)丛生芽叶片ABA含量和IAA/ZR与其生根率分别呈显著负相关和显著正相关关系,叶片裂刻数和IAA/ABA与生根率均呈现极显著正相关关系,而叶脉数与生根率则呈现极显著负相关关系。研究认为,连续继代培养可显著提高杜梨丛生芽的生根能力,并且与丛生芽叶形和激素含量及其比值有密切的关系,该研究结果为难生根植物无性繁殖以及树木复幼提供了重要技术借鉴。 展开更多
关键词 杜梨 复幼 继代培养 生根能力 叶片形态 内源激素
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不同培养和储藏条件对北美豆梨、我国杜梨花粉萌发的影响
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作者 邓伟 王一菲 +2 位作者 李泽根 路丙社 路斌 《河北科技师范学院学报》 CAS 2022年第4期13-18,共6页
为探明北美豆梨和杜梨花粉萌发的适宜条件和最佳液体培养基组分,以北美豆梨‘克利夫兰’‘三体’和我国的杜梨花粉为材料进行了培养温度,蔗糖、H_(3)BO_(3)和Ca(NO_(3))_(2)质量浓度以及贮藏方式对花粉萌发影响的试验,利用L_(16)(4^(3)... 为探明北美豆梨和杜梨花粉萌发的适宜条件和最佳液体培养基组分,以北美豆梨‘克利夫兰’‘三体’和我国的杜梨花粉为材料进行了培养温度,蔗糖、H_(3)BO_(3)和Ca(NO_(3))_(2)质量浓度以及贮藏方式对花粉萌发影响的试验,利用L_(16)(4^(3))正交试验设计对液体培养基组分进行了筛选优化。结果表明:杜梨及北美豆梨花粉萌发的适宜温度为25℃,蔗糖质量浓度为150 g·L^(-1);适宜杜梨、‘克利夫兰’和‘三体’花粉萌发的H3BO3质量浓度分别为50,100,50 mg·L^(-1),Ca(NO_(3))_(2)质量浓度分别为50,100,50 mg·L^(-1);-20℃和-40℃冷冻贮藏是3种花粉保存的最佳方式;杜梨、‘克利夫兰’和‘三体’花粉萌发的最适液体培养基分别为:150 g·L^(-1)蔗糖+100 mg·L^(-1)Ca(NO_(3))_(2)+50 mg·L^(-1)H_(3)BO_(3),100 g·L^(-1)蔗糖+100 mg·L^(-1)Ca(NO_(3))_(2)+150 mg·L^(-1)H_(3)BO_(3),130 g·L^(-1)蔗糖+50 mg·L^(-1)Ca(NO_(3))_(2)+150 mg·L^(-1)H3BO3。 展开更多
关键词 杜梨 北美豆梨 花粉 贮藏方式 萌发率
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山东省杜梨古树资源调查与保护利用 被引量：2
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作者 张林 程甜甜 +2 位作者 王峰 孙忠奎 乔谦 《安徽农业科学》 CAS 2021年第10期115-118,共4页
为了查清山东省杜梨古树资源状况,采用资料收集和现场调查的方法,对山东省内杜梨古树的数量、分布、生长现状等进行了调查。结果表明:山东省现存杜梨古树37株,其中一级古树有3株,二级古树5株,三级古树29株,树龄最大的达900年。杜梨古树... 为了查清山东省杜梨古树资源状况,采用资料收集和现场调查的方法,对山东省内杜梨古树的数量、分布、生长现状等进行了调查。结果表明:山东省现存杜梨古树37株,其中一级古树有3株,二级古树5株,三级古树29株,树龄最大的达900年。杜梨古树多人为栽植,零星分布,主要分布在鲁西南、鲁西北的平原地带和地势较为平坦的胶东丘陵区,涉及全省10个地市,25个县、区。目前山东省杜梨古树整体生长状况不容乐观,16株古树遭受不同程度的病虫害,2株死亡,3株被砍伐。建议在今后古树保护中加强宣传、落实杜梨古树挂牌保护和管护责任制工作、针对性制订杜梨古树保护措施和科学利用杜梨古树资源。 展开更多
关键词 杜梨 古树 种质资源 山东省
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杜梨生长期叶片、新梢和根中矿质营养含量的变化 被引量：2
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作者 宗宇 宋健坤 +1 位作者 赵娜娜 王然 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2011年第4期279-283,共5页
以杜梨(Pyrus betulaefolia Bge.)为试材,研究了生长期内矿质营养(N、P、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Mn和Zn)在叶片、新梢和根中的含量变化。结果表明,杜梨叶片、新梢和根中各矿质营养含量差异较大,且表现出明显不同的变化动态。除Fe外,N、P、K... 以杜梨(Pyrus betulaefolia Bge.)为试材,研究了生长期内矿质营养(N、P、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Mn和Zn)在叶片、新梢和根中的含量变化。结果表明,杜梨叶片、新梢和根中各矿质营养含量差异较大,且表现出明显不同的变化动态。除Fe外,N、P、K、Ca、Mg、Cu、Mn和Zn 8种元素在叶片中的含量均高于根;根中N、P、K、Ca、Mg、Cu、Mn和Zn元素在7月2日均有一个峰值,而叶片中仅有K同期出现峰值,P、Cu同期为含量较低点;新梢中P、K、Cu、Zn 4种元素含量与叶片中的含量相近,且变化趋势相似,新梢中Fe的含量在整个生长期始终低于根中的含量。 展开更多
关键词 杜梨 叶片 新梢 根 矿质营养
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