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RNA结合蛋白PUM2在骨关节炎软骨细胞凋亡中的作用机制研究
1
作者 王度 刘巍 +2 位作者 贾说 杨璞 方红育 《解剖科学进展》 CAS 2023年第6期603-606,610,共5页
目的 研究PUM2在骨关节炎中的表达情况及其参与调控软骨细胞凋亡的作用机制。方法 软骨细胞系C28/I2利用IL-1β诱导模拟软骨细胞损伤,构建沉默PUM2(转染lenti-si-PUM2)和过表达PUM2(转染lenti-PUM2)C28/I2细胞系,real-time PCR检测C28/I... 目的 研究PUM2在骨关节炎中的表达情况及其参与调控软骨细胞凋亡的作用机制。方法 软骨细胞系C28/I2利用IL-1β诱导模拟软骨细胞损伤,构建沉默PUM2(转染lenti-si-PUM2)和过表达PUM2(转染lenti-PUM2)C28/I2细胞系,real-time PCR检测C28/I2细胞PUM2和FOXO3的mRNA表达,Western blot检测C28/I2细胞PUM2和FOXO3的蛋白表达;MTT检测C28/I2细胞的活力,流式细胞术检测C28/I2细胞的凋亡,RNA pull-down检测PUM2和FOXO3的相互作用。结果 过表达PUM2促进软骨细胞的凋亡,降低细胞活性;IL-1β处理显著促进PUM2的表达,而抑制PUM2的表达则逆转了IL-1β引起的细胞凋亡增加,增加了细胞活性;PUM2能够与FOXO3 3′-UTR结合,负调控FOXO3的表达;IL-1β处理条件下,干扰FOXO3衰减Lenti-si-PUM2的促细胞活性作用,逆转Lenti-si-PUM2引起的细胞凋亡抑制作用,过表达FOXO3可缓解PUM2引起的细胞凋亡。结论 PUM2负调控FOXO3的表达,介导由IL-1β处理引起的软骨细胞活性降低及凋亡增加。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 凋亡 pum2
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Pumilio1/Pumilio2双基因条件性敲除小鼠模型的建立及基因型鉴定 被引量：1
2
作者 杨定 张诗坤 徐宇君 《实验动物科学》 2017年第2期7-10,共4页
目的建立及鉴定Pumilio1/Pumilio2(Pum1和Pum2)双基因条件性敲除的小鼠模型,为进一步研究PUF家族在哺乳动物精子发生中的生物学功能奠定基础。方法将构建的Pum1条件性敲除和Pum2条件性敲除的两个品系小鼠进行交配并繁殖,最终繁殖成功的... 目的建立及鉴定Pumilio1/Pumilio2(Pum1和Pum2)双基因条件性敲除的小鼠模型,为进一步研究PUF家族在哺乳动物精子发生中的生物学功能奠定基础。方法将构建的Pum1条件性敲除和Pum2条件性敲除的两个品系小鼠进行交配并繁殖,最终繁殖成功的子代小仔Pum1和Pum2两个基因均为纯合子。对子代以剪趾方式进行编号,提取子代小鼠脚趾或鼠尾基因组DNA,用PCR法和琼脂糖凝胶电泳鉴定基因型。结果 Pum1和Pum2双基因条件性敲除的小鼠模型繁殖成功,同时获得更多PUF家族双基因条件性敲除的小鼠。结论成功建立了Pum1和Pum2双基因条件性敲除的小鼠模型;正确的交配繁殖策略和鉴定方法是获得PUF家族双基因条件性敲除小鼠的有效途径。 展开更多
关键词 pum1 pum2 条件性敲除 小鼠 基因型鉴定
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