百部生物碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用 被引量：16

1

作者 向娟 余平 +3 位作者 李明丹 张朝凤 许翔鸿 张勉 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期76-81,共6页

对叶百部总生物碱及其主要成分新对叶百部碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用进行研究,并采用细胞模型初步探讨其作用机制。实验分为假手术组、模型组、总碱组(60 mg/kg)和新对叶百部碱低、高(10、20 mg/kg)剂量组,泼尼松(6.67 mg/... 对叶百部总生物碱及其主要成分新对叶百部碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用进行研究,并采用细胞模型初步探讨其作用机制。实验分为假手术组、模型组、总碱组(60 mg/kg)和新对叶百部碱低、高(10、20 mg/kg)剂量组,泼尼松(6.67 mg/kg)为阳性对照药,以肺组织羟脯氨酸含量、TGF-β1水平、炎性水平、胶原沉积和α-SMA表达等为指标考察其抗肺纤维化效果。结果表明,总碱和新对叶百部碱均能显著改善模型小鼠的肺组织炎症和损伤,降低羟脯氨酸含量和胶原沉积;新对叶百部碱能显著降低模型小鼠肺组织α-SMA表达和TGF-β1水平。初步机制研究表明,新对叶百部碱能抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞中α-SMA的升高,表明抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化是其作用机制之一。 展开更多

关键词 对叶百部 总生物碱 新对叶百部碱 肺纤维化 肺成纤维细胞

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大黄素抑制肺成纤维细胞增殖及转分化和胶原蛋白合成 被引量：8

2

作者 刘理静 尹辉明 +3 位作者 贺兼斌 谢茂峰 王在岩 肖华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期921-925,共5页

目的探讨大黄素对肺成纤维细胞增殖、向肌纤维母细胞转化、胶原合成的影响及相关机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)和(0、10、20、40、80、160)μmol/L大黄素处理MRC-5人胚肺成纤维细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。根据细胞增殖实... 目的探讨大黄素对肺成纤维细胞增殖、向肌纤维母细胞转化、胶原合成的影响及相关机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)和(0、10、20、40、80、160)μmol/L大黄素处理MRC-5人胚肺成纤维细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。根据细胞增殖实验结果,以DMSO及(40、80)μmol/L大黄素分别培养MRC-5细胞48 h后,采用荧光实时定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA表达水平;Western blot法检测上述分子的蛋白水平。结果 MRC-5细胞增殖抑制率随着大黄素浓度的增加和处理时间的延长而逐渐增高。在处理48 h后,与对照组相比,(40、80)μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平均降低,而ADAMTS-1 mRNA与蛋白水平升高;与40μmol/L大黄素处理组比较,80μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达进一步下调,ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达进一步上调。结论大黄素可抑制肺成纤维细胞增殖及其向肌纤维母细胞转化,并通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1信号通路减少Col1、Col3合成。 展开更多

关键词 大黄素 肺成纤维细胞 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 去整合素样金属蛋白酶1(ADAMTS-1) 1型胶原蛋白(Col1) 3型胶原蛋白(Col3)

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γ射线对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响及其意义 被引量：5

3

作者 李杨 王德文 +5 位作者 宋良文 彭瑞云 高亚兵 崔雪梅 刘杰 马俊杰 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2004年第5期424-426,429,共4页

目的检测不同剂量γ射线照射对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响并探讨其意义。方法 :进行大鼠肺成纤维细胞的原代分离培养 ,应用 3,5和 8Gyγ射线照射 ,通过免疫组织化学、免疫印迹和免疫共沉淀等方法检测照射后Smad3,4和 7蛋白... 目的检测不同剂量γ射线照射对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响并探讨其意义。方法 :进行大鼠肺成纤维细胞的原代分离培养 ,应用 3,5和 8Gyγ射线照射 ,通过免疫组织化学、免疫印迹和免疫共沉淀等方法检测照射后Smad3,4和 7蛋白的表达部位和表达水平的变化及Smad3与Smad4相互作用的变化。结果 :3,5和8Gyγ射线照射后 ,Smad3,4和 7蛋白表达水平无显著改变 ,Smad3与Smad4复合物的形成增加 ,部分大鼠肺成纤维细胞中Smad3和Smad4主要表达于细胞核。结论 :一定剂量的γ射线能促进大鼠肺成纤维细胞中Smad3与Smad4的相互结合及核转位 ,对Smad通路具有活化作用。 展开更多

关键词 SMAD信号通路 肺成纤维细胞 转化生长因子Β 信号转导 肺纤维化 辐射剂量

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降钙素基因相关肽对肺纤维化大鼠肺组织eIF3a、p27表达的影响 被引量：6

4

作者 李先伟 左东泽 +1 位作者 沈媛媛 郝伟 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期16-21,共6页

目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对肺纤维化大鼠肺组织真核翻译起始因子3a(e IF3a)、p27表达的影响,探讨CGRP在肺纤维化中的作用及机制。方法:雄性SD大鼠,体重180~220 g,随机分为3组(n=8):对照组、博莱霉素组、博莱霉素+辣椒素组。采... 目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对肺纤维化大鼠肺组织真核翻译起始因子3a(e IF3a)、p27表达的影响,探讨CGRP在肺纤维化中的作用及机制。方法:雄性SD大鼠,体重180~220 g,随机分为3组(n=8):对照组、博莱霉素组、博莱霉素+辣椒素组。采用气管内注射博莱霉素(5 mg/kg)诱导肺纤维化大鼠模型。造模前4 d大鼠皮下注射辣椒素(Capsaicin)(50 mg/kg·d),造模后第28天处死动物,颈动脉采血ELISA法测定血浆CGRP含量。细胞实验分6组(n=9):Control组,转化生长因子-β1(TGF-β1)组,CGRP(1、10、100 nmol/L)组,CGRP8-37 1μmol/L和CGRP 100 nmol/L组。细胞用CGRP和(或)CGRP8-37预处理1 h,再用TGF-β1(5 ng/ml)处理48 h。5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)法检测细胞增殖。免疫组化、real-time PCR和(或)Western blot检测e IF3a、p27、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、collagenⅠm RNA及蛋白表达。结果:博莱霉素诱发肺纤维化动物肺组织e IF3a、α-SMA及Ⅰ胶原表达增高,CGRP及p27的表达明显降低。外源性CGRP可剂量依赖性的抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞增殖,明显抑制e IF3a、α-SMA、Ⅰ胶原的表达,上调p27的表达,这些作用可以被CGRP阻断剂CGRP8-37所取消。结论:CGRP在博莱霉素诱导的肺纤维化中起着重要作用,可能通过抑制e IF3a、上调p27的表达而抑制肺成纤维细胞的增殖,进而抑制肺纤维化的形成与发展。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 肺纤维化 肺成纤维细胞 eIF3a P27 大鼠

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H2S调节miR-21表达抑制内质网应激介导肺成纤维化细胞凋亡 被引量：6

5

作者 赵红 姚平波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1612-1616,共5页

目的:探讨H_2S是否可调节mi R-21表达抑制内质网应激介导肺成纤维细胞凋亡。方法:体外培养小鼠成纤维细胞(NIH3T3),随机分为对照组、TGF-β1组和Na HS干预组。采用CCK-8分别检测细胞增殖,流式细胞仪检测NIH3T3凋亡率; q RT-PCR法和Weste... 目的:探讨H_2S是否可调节mi R-21表达抑制内质网应激介导肺成纤维细胞凋亡。方法:体外培养小鼠成纤维细胞(NIH3T3),随机分为对照组、TGF-β1组和Na HS干预组。采用CCK-8分别检测细胞增殖,流式细胞仪检测NIH3T3凋亡率; q RT-PCR法和Western blot分别分析葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和caspase-12的表达;检测mi R-21是否参与H_2S抑制ERS介导的肺成纤维化细胞凋亡,将其随机分为3组:对照组、mi R-21激动剂(mi R-21 agomir)组和mi R-21拮抗剂(mi R-21 antagomir)组。mi R-21激动剂组和mi R-21拮抗剂组分别给予40μmol/L的Na HS预处理,再进行TGF-β1处理,检测GRP78、CHOP及caspase-12的表达。结果:与对照组比较,Na HS干预组小鼠肺成纤维化细胞的增殖率、细胞凋亡率、mi R-21蛋白及m RNA的表达均明显降低;与TGF-β1组比较,Na HS可明显降低内质网应激相关因子GRP78、CHOP及caspase-12蛋白和m RNA表达;与阴性对照组比较,mi R-21 agomir组GRP78、CHOP及caspase-12的蛋白及m RNA表达均显著升高。而与mi R-21 agomir组比较,mi R-21 antagomir组结果则与之相反。结论:H_2S可通过调节mi R-21的表达,调控TGF-β1诱导小鼠肺成纤维化细胞的ERS稳态减少细胞凋亡,发挥其内源性的保护作用。 展开更多

关键词 硫化氢 肺成纤维化细胞 MICRORNA-21 内质网应激 凋亡

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JNK信号通路在TGF-β_1诱导肺间质成纤维细胞基质分泌中的作用 被引量：3

6

作者 许烨 祁娟 曾玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2007年第6期484-487,共4页

目的:探讨C-Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase,JNK)、P38信号通路的激活在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导人肺间质成纤维细胞基质分泌中的作用及意义。方法:将肺间质成纤维细胞株分为TGF-β1组、TGF-β1+SB203580组、TGF-... 目的:探讨C-Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase,JNK)、P38信号通路的激活在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导人肺间质成纤维细胞基质分泌中的作用及意义。方法:将肺间质成纤维细胞株分为TGF-β1组、TGF-β1+SB203580组、TGF-β1+DMSO组、TGF-β1+SB600125组、正常对照组。采用免疫印迹法(Western blot)测定总JNK(T-JNK)、磷酸化JNK(p*-JNK)、总P38(T-P38)、磷酸化38(p*-P38)、纤维连接蛋白(FN)、层连粘蛋白(LN)水平的表达变化,采用3H-thymidine incorporation(3H-TdR)检测细胞增殖水平。结果:正常体外培养的肺间质成纤维细胞经TGF-β1刺激后p*-JNK水平显著升高,p*-P38蛋白表达无明显变化;FN、LN蛋白表达水平在TGF-β1诱导48 h后表达显著升高,JNK的特异性化学抑制剂SB600125可以减少p*-JNK、FN、LN蛋白表达水平和细胞增殖水平,P38的特异性化学抑制剂SB203580对上述指标表达无影响。结论:JNK信号通路在TGF-β1诱导的肺间质成纤维细胞分泌基质过程中被激活,并且参与TGF-β1诱导的肺间质成纤维细胞分泌基质过程。 展开更多

关键词 JNK P38 转化生长因子Β1 肺间质成纤维细胞

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膜联蛋白A1促进肺成纤维细胞炎症反应及胶原合成的研究 被引量：4

7

作者 蔡欣 李炎玉 +2 位作者 苏国媚 吕秋荣 赖天文 《中华全科医学》 2021年第11期1807-1810,1900,共5页

目的探讨膜联蛋白A1(Annexin A1)对肺成纤维细胞炎症反应、增殖及胶原沉积的作用。方法分离小鼠原代肺成纤维细胞,利用不同浓度的Annexin A1干预肺成纤维细胞24 h或48 h后,检测炎症因子、细胞增殖及胶原沉积表达。将C57/BL6小鼠分为对... 目的探讨膜联蛋白A1(Annexin A1)对肺成纤维细胞炎症反应、增殖及胶原沉积的作用。方法分离小鼠原代肺成纤维细胞,利用不同浓度的Annexin A1干预肺成纤维细胞24 h或48 h后,检测炎症因子、细胞增殖及胶原沉积表达。将C57/BL6小鼠分为对照组、Annexin A1干预组,每组6~8只。Annexin A1干预组每只小鼠气管滴注1μg/50μL Annexin A1重组因子,对照组每只小鼠气道滴注50μL生理盐水,连续干预7 d后取检。检测肺组织炎症因子、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)及气道平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与对照组比较,Annexin A1能促进肺成纤维细胞分泌IL-6、IL-8等炎症因子(均P<0.05),促进成纤维细胞的增殖,CollagenⅢ合成和α-SMA表达增加(均P<0.05)。与对照组小鼠比较,Annexin A1干预组小鼠的肺泡灌洗液细胞总数[(2.91±0.26)×10^(4)/mL vs.(7.03±0.48)×10^(4)/mL,t=7.432,P=0.008]及中性粒细胞数目明显升高[(0.12±0.04)×10^(4)/mL vs.(1.01±0.05)×10^(4)/mL,t=13.810,P<0.001],炎症因子、胶原沉积及平滑肌表达也显著增加(均P<0.05)。结论 Annexin A1具有诱导肺成纤维细胞的炎症反应、增殖及胶原沉积作用,提示可能在气道重构发病中起重要作用。 展开更多

关键词 膜联蛋白A1 肺成纤维细胞 肺纤维化

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乳酸-转化生长因子-β1途径促进肺成纤维细胞活化介导机械通气相关性肺纤维化的机制研究 被引量：4

8

作者 胡钺 梅舒雅 +5 位作者 徐侨翌 胡晓婷 邢顺鹏 皋源 何征宇 李雯 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2021年第3期227-233,共7页

目的探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制,明确乳酸-转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)途径在该过程中的作用。方法①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和机械通气组(MV组),每... 目的探讨机械通气促进肺成纤维细胞活化及肺纤维化的机制,明确乳酸-转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)途径在该过程中的作用。方法①将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和机械通气组(MV组),每组12只,其中Sham组仅行麻醉插管处理并保持自主呼吸,MV组采用20 ml/kg潮气量和70次/min通气频率行单次2 h机械通气,观察7 d后取材。采用H-E染色、Masson染色观察肺组织的损伤程度和纤维化程度,采用Western blot法检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白α1链(collagen typeⅠalpha 1 chain,COL1A1)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和TGF-β1的蛋白表达情况,采用比色法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)和血清的乳酸浓度。②将人胚肺成纤维细胞MRC-5采用随机数字表法分为4组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、1 mmol/L乳酸组(Lac1组)、10 mmol/L乳酸组(Lac_(10)组)和20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组),于乳酸刺激MRC-5细胞24 h后采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量,同时采用细胞免疫荧光观察α-SMA的表达情况;于乳酸刺激MRC-5细胞72 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况,并通过ELISA法检测细胞培养上清液Ⅰ型前胶原羧基肽(procollagen type I carboxyl peptide,PICP)的含量变化。③另取MRC-5细胞采用随机数字表法分为3组(每组3个孔):PBS对照组(Con组)、20 mmol/L乳酸组(Lac_(20)组)和20 mmol/L乳酸+TGF-β1受体抑制剂(SB431542)组(Lac_(20)+SB组),处理24 h后采用Western blot法检测不同分组细胞COL1A1和α-SMA的表达情况。结果①与Sham组比较,MV组小鼠肺泡间隔增厚、胶原蛋白沉积、肺纤维化程度加重,伴有COL1A1、α-SMA和TGF-β1表达水平升高(P<0.05),血清和BALF乳酸浓度升高(P<0.05)。②与Con组比较,Lac_(10)组和Lac_(20)组细胞培养上清液中TGF-β1、PICP含量升高(P<0.05),细胞中COL1A1和α-SMA表达水� 展开更多

关键词 乳酸 转化生长因子-Β1 机械通气 肺成纤维细胞 肺纤维化

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肺纤方对VEGFR2介导的肺成纤维细胞α-SMA、ColⅠ表达的影响 被引量：3

9

作者 顾潇枫 焦扬 +4 位作者 张晓梅 孟丽红 董环 于小林 刘彧杉 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期5460-5464,共5页

目的:通过血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)介导肺成纤维细胞的活化增殖模型,探究肺纤方治疗肺间质纤维化的作用机制。方法:体外分离培养肺成纤维细胞,将肺成纤维细胞分为空白组,模型组,肺纤方高、中、低剂量(100、25、6.25mg/L)组和泼尼... 目的:通过血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)介导肺成纤维细胞的活化增殖模型,探究肺纤方治疗肺间质纤维化的作用机制。方法:体外分离培养肺成纤维细胞,将肺成纤维细胞分为空白组,模型组,肺纤方高、中、低剂量(100、25、6.25mg/L)组和泼尼松(50mg/L)组,通过RT-PCR法和Western blot法检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。结果:肺纤方高、中剂量可上调α-SMA mRNA表达(P<0.01),下调α-SMA蛋白表达(P<0.05,P<0.01);肺纤方可明显下调ColⅠmRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论:肺纤方具有明显的抗纤维化作用,其机制可能与抑制肺成纤维细胞的增殖、分化和减少胶原蛋白的沉积有关。 展开更多

关键词 肺纤方 肺纤维化 血管内皮生长因子受体2 肺成纤维细胞 胶原沉积

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纤维连接蛋白对大鼠肺成纤维细胞纤维连接蛋白和整合素α_5β_1表达的影响 被引量：1

10

作者 吴浩 许祖德 +3 位作者 张月娥 张秀荣 张锦生 查锡良 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第4期241-244,共4页

目的　研究纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)及其受体整合素α5β1在肺纤维化中的作用。方法　应用Northern印迹杂交和免疫细胞化学技术。结果　经FN作用 2h ,肺成纤维细胞α5β1和FNmRNA的杂交信号均增强 ,6h达最高值 ;FN作用 6、1 2、2... 目的　研究纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)及其受体整合素α5β1在肺纤维化中的作用。方法　应用Northern印迹杂交和免疫细胞化学技术。结果　经FN作用 2h ,肺成纤维细胞α5β1和FNmRNA的杂交信号均增强 ,6h达最高值 ;FN作用 6、1 2、2 4h ,免疫细胞化学染色显示整合素α5β1、FN蛋白的表达增强 ;经α5单克隆抗体预作用 ,FN作用组的肺成纤维细胞整合素α5β1和FN蛋白表达减弱 ,其抑制作用依次分别在 6h(α5β1)、1 2h(FN)最明显。结论　FN能直接刺激肺成纤维细胞合成FN或通过上调整合素α5β1的表达来促进自身合成FN。 展开更多

关键词 纤维连接蛋白 整合素Α5Β1 肺纤维化

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泛素-蛋白酶体抑制剂对大鼠肺成纤维细胞凋亡和增殖的影响 被引量：2

11

作者 莫平征 叶燕青 韩晓 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第5期581-584,F0003,共5页

目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肺成纤维细胞凋亡和增殖的影响,并初步探索其机制。方法:18只SD大鼠随机分成模型组(n=9)与对照组(n=9),模型组气管内一次性注入博莱霉素(5mg/kg),对照组气管内注入等量无菌生理盐水,分别于7,28,... 目的:探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠肺成纤维细胞凋亡和增殖的影响,并初步探索其机制。方法:18只SD大鼠随机分成模型组(n=9)与对照组(n=9),模型组气管内一次性注入博莱霉素(5mg/kg),对照组气管内注入等量无菌生理盐水,分别于7,28,45d每组处死动物3只,提取成纤维细胞进行培养并用相同浓度的MG-132(1.0μmol/L)对成纤维细胞干预24h,应用MTT比色法检测细胞增殖情况,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用免疫组化技术半定量观察成纤维细胞α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和NF-κB的表达情况。①MG-132对模型组成纤维细胞的抑制和促凋亡的作用强于对照组成纤维细胞(P<0.05),其中,对7d模型组成纤维细胞的促凋亡作用最强;②MG-132干预后,模型组成纤维细胞α-SMA和NF-κB的表达逐渐减少,但仍高于对照组成纤维细胞(P<0.05)。结论:泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对肺成纤维细胞有抑制和促凋亡作用,可能与减少肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化及抑制NF-κB的表达有关。 展开更多

关键词 泛素蛋白酶体抑制剂 肺成纤维细胞 凋亡 增殖

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过氯酸铵对大鼠肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞影响的研究 被引量：2

12

作者 宋明芬 彭开良 王翀 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期72-75,共4页

目的　通过探讨过氯酸铵 (AP)对大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)损伤及对肺成纤维细胞 (FB)增殖的影响 ,研究AP的致肺纤维化作用。方法　用AP浓度分别为 0 5 ,1 0 ,2 0mg/ml和SiO2 浓度为 0 1mg/ml的培养液培养AM ,对照组采用RPMI16 4 0培养... 目的　通过探讨过氯酸铵 (AP)对大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)损伤及对肺成纤维细胞 (FB)增殖的影响 ,研究AP的致肺纤维化作用。方法　用AP浓度分别为 0 5 ,1 0 ,2 0mg/ml和SiO2 浓度为 0 1mg/ml的培养液培养AM ,对照组采用RPMI16 4 0培养液培养 ,2 4h后收集培养上清液 ,分别检测AM内MDA含量、GSH Px活力以及上清液中LDH活力。并用AM上清液培养FB ,检测FB增殖活力和FB内羟脯氨酸含量。结果　 1 0 ,2 0mg/mlAP组及SiO2 组MDA含量 (2 2 1,2 5 8,2 32nmol/ml)均比对照组 (1 97nmol/ml)增加 ,差异有显著性或非常显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;2 0mg/mlAP组及SiO2 组GSH Px活力 (2 9 4 7,30 79U/ 10 6AM )比对照组 (2 6 70U/ 10 6AM )明显增强 ,差异有显著或非常显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;0 5 ,1 0 ,2 0mg/mlAP组和SiO2 组LDH活力 (15 1 0 3,2 5 2 31,4 4 6 5 0 ,5 83 88U/ 10 6AM )均明显高于对照组 (77 0 6U/ 10 6AM ,P <0 0 5或P <0 0 1) ,且随AP染毒剂量的增加而升高。SiO2 组AM上清液使FB羟脯氨酸含量 (0 90 0 μg/ml)及增殖活力 (0 16 5 )明显高于对照组 (0 379μg/ml,0 138,P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　AP对肺泡巨噬细胞具有一定的细胞毒作用 。 展开更多

关键词 过氯酸铵 肺泡巨噬细胞 肺成纤维细胞

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AcSDKP经由PDGF介导的细胞外信号调节激酶1/2的调节通路在大鼠矽肺纤维化形成中的作用 被引量：2

13

作者 罗玲 杨奕 +4 位作者 徐洪 李倩 张丽娟 魏中秋 杨方 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期106-110,F0003,共6页

探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型... 探讨抗纤维化短肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)经由血小板源性生长因子(PDGF)介导的细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的调节通路在矽肺纤维化形成中的作用。采用一次性支气管内灌注二氧化硅(SiO2)粉尘制作矽肺大鼠模型,将其分为对照组(4周组和8周组)、矽肺模型组(4周和8周组)、AcSDKP治疗组(抗纤维化治疗组和预防治疗组)。采用贴块法进行肺成纤维细胞的原代和传代培养。HE染色观察肺组织形态学变化,Western blot法检测肺组织、肺成纤维组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白和ERK1/2及磷酸化-ERK1/2蛋白的表达以及肺组织PDGF及其受体蛋白的表达。与对照比较,矽肺大鼠肺内PDGF及其受体蛋白、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白以及磷酸化-ERK1/2蛋白表达均增强,而AcSDKP治疗组则见上述蛋白表达减弱;在培养的肺成纤维细胞,PDGF能够刺激其Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,同时上调磷酸化-ERK1/2蛋白的表达,而AcSDKP则显示出与PD98059(细胞外信号调节激酶通路特异性抑制剂)相同的作用,即能够抑制PDGF刺激成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达和上调磷酸化-ERK1/2蛋白表达。提示AcSDKP可能通过阻断PDGF介导的ERK1/2信号转导通路抑制矽肺纤维化的形成与发展。 展开更多

关键词 N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP) 血小板源性生长因子(PDGF) 肺成纤维细胞 细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2) 矽肺

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雌二醇对肺成纤维细胞增殖的调控 被引量：1

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作者 罗自强 孙秀泓 +2 位作者 秦晓群 黄柏英 张长青 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期330-332,共3页

本研究观察了雌二醇（Ｅ２）对培养的人胚肺成纤维细胞增殖的直接和间接调控影响。结果显示：Ｅ２可降低肺成纤维细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入量；Ｅ２与肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养４ｈ的上清液可使肺成纤维细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入量显著增加... 本研究观察了雌二醇（Ｅ２）对培养的人胚肺成纤维细胞增殖的直接和间接调控影响。结果显示：Ｅ２可降低肺成纤维细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入量；Ｅ２与肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养４ｈ的上清液可使肺成纤维细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入量显著增加；消炎痛预处理不影响Ｅ２的上述作用；Ｅ２与ＡＭ培养１８ｈ可使培养液中内皮素（ＥＴ）的含量显著升高，但培养４ｈ对ＡＭ的ＥＴ分泌的影响不显著。以上结果表明，Ｅ２对肺成纤维细胞的增殖具有直接抑制和通过ＡＭ而间接促进的双向调控作用，其作用与内源性前列腺素无关。Ｅ２间接促进成纤维细胞增殖的机制除与促进ＡＭ的ＥＴ分泌有关外还有其它细胞因子参与。本结果提示。 展开更多

关键词 雌二醇 肺成纤维细胞 内皮素 肺泡巨噬细胞

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miR-29c对二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化抑制作用的研究 被引量：1

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作者 杨杰 张洋 +2 位作者 黄磊 兰亚佳 张勤 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期321-326,共6页

目的探讨miR-29c对二氧化硅(SiO2)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化过程的调控作用。方法取清洁级成年健康雄性SD大鼠1只,分离培养大鼠的肺成纤维细胞,与肺巨噬细胞(NR8383)共培养构建SiO2诱导的肺纤维化体外细胞模型,使用实时... 目的探讨miR-29c对二氧化硅(SiO2)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化过程的调控作用。方法取清洁级成年健康雄性SD大鼠1只,分离培养大鼠的肺成纤维细胞,与肺巨噬细胞(NR8383)共培养构建SiO2诱导的肺纤维化体外细胞模型,使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫印迹(Westernblot)实验检测共培养细胞模型中成纤维细胞miR-29c和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量的改变。构建miR-29c过表达和抑制表达的矽肺体外细胞模型,观察α-SMA基因和蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,SiO2处理12、18h后肺巨噬细胞-肺成纤维细胞共培养体系中肺成纤维细胞miR-29c表达量明显下降,α-SMA表达量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,转染miR-29c过表达或抑制表达病毒后,肺成纤维细胞α-SMA表达量出现相应的下降或升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-29c可能参与SiO2诱导的体外肺成纤维细胞转分化过程,通过抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化从而阻碍SiO2诱导的肺纤维化。 展开更多

关键词 微RNA 肺成纤维细胞 肌成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白

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血小板源性生长因子和转化生长因子-β_1对大鼠肺成纤维细胞整合素α_5β_1表达的影响 被引量：1

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作者 吴浩 许祖德 +2 位作者 张月娥 张锦生 陈琦 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第5期323-326,共4页

目的观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对大鼠肺成纤维细胞整合素（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）α５β１及其配体纤维连接蛋白（ＦＮ）合成的影响。方法采用细胞培养、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、免疫细胞... 目的观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对大鼠肺成纤维细胞整合素（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）α５β１及其配体纤维连接蛋白（ＦＮ）合成的影响。方法采用细胞培养、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、免疫细胞化学方法。结果经ＰＤＧＦ－ＢＢ、ＴＧＦ－β１作用２ｈ，α５、β１、ＦＮｍＲＮＡ的表达即强于对照组，以后继续增强，其间仅于１８或１２ｈ短暂回落，但仍明显强于对照组。免疫细胞化学显示肺成纤维细胞α５β１和ＦＮ蛋白的表达也明显增强。结论ＰＤＧＦ、ＴＧＦ－β１可以促进ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮ的合成增加，其调控机制之一可能是在转录水平上增强ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮｍＲＮＡ的表达。 展开更多

关键词 肺纤维化 PDGF TGF-β 整合素Α5Β1 FN

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罗格列酮对肺成纤维细胞增殖的影响

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作者 史方海 陈忠仁 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期93-97,共5页

目的探讨罗格列酮(RGZ)对肺成纤维HELF细胞增殖的影响,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路在其中的作用。方法HELF细胞培养于DMEM培养液中,实验分为:对照组、TGF-β1组、低剂量RGZ(LD-RGZ)组和高剂量RGZ(HD-RGZ)组。CCK-8检测细... 目的探讨罗格列酮(RGZ)对肺成纤维HELF细胞增殖的影响,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路在其中的作用。方法HELF细胞培养于DMEM培养液中,实验分为:对照组、TGF-β1组、低剂量RGZ(LD-RGZ)组和高剂量RGZ(HD-RGZ)组。CCK-8检测细胞增殖。流式细胞仪检测细胞周期。Western blot检测蛋白表达。结果24 h、48 h和72 h时HD-RGZ组细胞增殖OD450值显著低于LD-RGZ组(P<0.05),LD-RGZ组又显著低于TGF-β1组(P<0.05)。对照组、TGF-β1组、LD-RGZ组和HD-RGZ组G1期细胞分别占细胞周期的(91.23±6.32)%、(70.35±4.14)%、(76.12±4.38)%和(82.35±5.16)%,各组间存在显著差异(P<0.05)。其中,HD-RGZ组G1期细胞比例显著高于LD-RGZ组(P<0.05),LD-RGZ组又显著高于TGF-β1组(P<0.05)。HD-RGZ组Col I、Col III和P-p38MAPK蛋白显著低于LD-RGZ组(P<0.01),LD-RGZ组又显著低于TGF-β1组(P<0.01)。结论罗格列酮抑制p38MAPK通路,进一步抑制肺成纤维细胞增殖以及胶原的合成。 展开更多

关键词 罗格列酮 肺成纤维细胞 p38丝裂原活化蛋白激酶通路 细胞周期

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bFGF反义寡核苷酸对大鼠肺成纤维细胞增殖信号通路的影响

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作者 谭秋月 程真顺 +2 位作者 谭维军 叶燕青 张莉 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2015年第2期175-180,共6页

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸(AODN)对大鼠肺成纤维细胞增殖、转化信号通路的影响。方法:分离成年大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组(未转染肺成纤维细胞);TGF-β1组(未转染肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-... 目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸(AODN)对大鼠肺成纤维细胞增殖、转化信号通路的影响。方法:分离成年大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组(未转染肺成纤维细胞);TGF-β1组(未转染肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+AODN组(转染AODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激);TGF-β1+RODN(正义寡核苷酸)组(转染RODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激)。每组设3复孔,并作细胞爬片,镜下计数肺成纤维细胞数量,绘制生长曲线。MTT比色法测定肺成纤维细胞增殖率。免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。通过ELISA法检测培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量。用RT-PCR法分析肺成纤维细胞Smad3 mRNA、Smad7 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA表达水平。结果:1细胞计数显示:TGF-β1+RODN组各时段成纤维细胞的数目均较对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组明显增多(P<0.05);TGF-β1+AODN组中成纤维细胞增殖数比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。2MTT结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞光密度值明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞光密度值明显比TGF-β1组减低(P<0.05)。3免疫细胞化学染色结果显示:TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞与对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组比较,α-SMA染色的平均光密度值(IOD)明显增加(P<0.05);TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞α-SMA染色的平均光密度值(IOD)比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。4 ELISA法检测结果显示:在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量比TGF-β1组明显减低(P<0.05)。5RT-PCR法检测结果显示:在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞Smad3mRNA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组(P<0.05);TGF-β1+ 展开更多

关键词 bFGF反义寡核苷酸 肺成纤维细胞 增殖 分化 TGF-β1-Smad信号通路

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青石棉处理的肺泡巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞的作用 被引量：4

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作者 詹显全 王治明 +1 位作者 杨青 王绵珍 《中国公共卫生》 CSCD 北大核心 2000年第9期794-796,共3页

为了探讨青石棉对肺损伤的机理 ,用兔肺泡巨噬细胞(AM)和人胚肺成纤维细胞 (HEPF)组成体外模型 ,采用MTT颜色反映法测定青石棉处理兔AM 2 4h后的培养上清液刺激HEPF细胞增殖情况 ,同时用标准石英作为阳性对照 ,二氧化钛作为阴性对照 ,... 为了探讨青石棉对肺损伤的机理 ,用兔肺泡巨噬细胞(AM)和人胚肺成纤维细胞 (HEPF)组成体外模型 ,采用MTT颜色反映法测定青石棉处理兔AM 2 4h后的培养上清液刺激HEPF细胞增殖情况 ,同时用标准石英作为阳性对照 ,二氧化钛作为阴性对照 ,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照。结果发现青石棉能明显刺激HEPF增殖 ,呈剂量 效应关系 (P <0 0 1)。青石棉浓度在 10 0 μg/ml时 ,青石棉组HEPF的净增殖率达 6 0 91% ,是正常对照组的 3 48倍 ,高于阳性对照和阴性对照 10 0 μg/ml青石棉处理兔AM的培养上清液的不同稀释度对HEPF增殖的影响不同 ,随稀释度的加大 ,其促细胞增殖的能力越弱 ,以 1∶2稀释度作用最强 ,明显高于阳性对照和阴性对照 (P <0 0 1)。提示青石棉处理肺泡巨噬细胞的培养上清液中存在有促进肺成纤维细胞增殖的生物活性物质 。 展开更多

关键词 青石棉 肺泡巨噬细胞 人胚肺成纤维细胞

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蛋白激酶C抑制剂对温石棉诱导肺成纤维细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 詹显全 杨青 +1 位作者 王治明 王绵珍 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 2000年第6期346-349,共4页

目的　探讨蛋白激酶C(PKC)信号通路在温石棉诱导的肺泡巨噬细胞因子致人胚肺成纤维细胞 (HEPF)增殖中的作用。方法　采用体外细胞培养技术 ,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)颜色反应法检测温石棉处理兔肺泡巨噬细胞 (AM)的上清液刺激HEPF增殖和... 目的　探讨蛋白激酶C(PKC)信号通路在温石棉诱导的肺泡巨噬细胞因子致人胚肺成纤维细胞 (HEPF)增殖中的作用。方法　采用体外细胞培养技术 ,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)颜色反应法检测温石棉处理兔肺泡巨噬细胞 (AM)的上清液刺激HEPF增殖和PKC抑制剂对其产生的影响 ,同时设空白对照、正常对照 (未加粉尘处理的AM培养上清液 )、阴性对照 (标准TiO2 )和阳性对照 (标准SiO2 )。结果　温石棉处理AM 2 4h后的培养上清液再处理HEPF 48h ,HEPF增殖 ,且与粉尘浓度存在显著的剂量 -效应关系 (r =0 .6 718,P <0 .0 1) ;10 0 μg/ml温石棉染尘组HEPF的净增殖率达40 .5 6 % ,是正常对照组的 2 .6 5倍 ,高于标准SiO2 组和标准TiO2 组。 10 0 μg/ml粉尘处理AM的培养上清液的稀释程度与其促使HEPF增殖的能力成反比趋势 ,均存在显著的剂量 -效应关系 (r =- 0 .45 0 7,P <0 .0 1) ;且以 1∶2稀释度对HEPF增殖的能力最强 ,但不同粉尘刺激HEPF增殖的强度不同 :温石棉 >SiO2 >TiO2 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。PKC抑制剂 (C2 5H2 4 N4 O2 )能使温石棉诱导的HEPF增殖受到抑制 ,呈显著的剂量 -效应关系 (r =0 .90 5 5 ,P <0 .0 1) ,温石棉组受抑制的程度强于各对照组。结论　温石棉处理AM的培养上清液显著刺激HEPF增殖 。 展开更多

关键词 蛋白激酶C 温石棉 肺泡巨噬细胞 人胚肺成纤维细胞 细胞增殖

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